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Cristina CEVALLOS
M1 - GMC
La méthylation des cytosines dans
l’ADN
Développement des espèces dans les
règnes animal et végétal.
Le développement
embryonnaire
L’inactivation
du X
Mutations qui affectent les ADN-
méthyltransferases.
La réduction de la méthylation entraîne des
Chez Arabidopsis thaliana anormalités du développement et la stérilité
partielle des femelles.
Mutation inattendu
Région 80kb
Réduction du 50% de la méthylation totale de
dim-3 Gène cherché: homologue
l’ADN.
histone méthyltransférases
(Drosophile, S. pombe,
mammifères)
En analysant la
distance
Marquage de la
Groupe IV de Croissement génétique on a
mutation :
liaison avec différentes trouvé que le
Hybridation
génétique souches gène d’intérêt
Southern
se situe entre
trp-4 et leu-2
Identification du cadre de lecture de
dim-5
Codon sérine
WT (TCA La possibilité
TGA) que ces
protéines
soient
Position 216 HMTases été
dim-5 mutant de 318 examinée.
(130AA)
DIM-5 est une protéine avec domaine
SET
S-adénosyl-[methyl-3H]-
Construction d’une
rDIM-5 purifiée à partir L-méthionine comme
protéine de fusion (GST)
de E. coli donneur de groupes
+ DIM-5 ORF
méthyl
Fluorographie et
scintillation pour la
Incubation avec histones Fractionnement par
vérification de
de thymus du veau SDS-PAGE
l’incorporation de
groupes méthyl
• Incorporation significative de
rDIM-5
intacte groupes méthyl étiquetés
aux histones.
• Histone H3 comme
accepteur de quasiment
toute la méthylation.
http://atlasgeneticsoncology.org/Educ/HeterochromID30058FS.html
Est-ce que RIP génère
l’hétérochromatine ?
Les reliques de RIP Dim-5 croissance
Séquences mutées par
peuvent être à la base et irrégulière et stérilité
RIP Concentrées dans
avoir la fonction pour les partielle en croissements
l’ADN centromérique
centromères homozygotes
http://evobio.blog.lemonde.fr/2013/12/08/lautisme-la-genetique-et-lepigenetique/
Méthylation de novo et de
maintenance de l’ADN chez les
eucaryotes
Modifications épigénétiques sont conservées par maintenance de la méthylation
Méthylation se fait de manière symétrique, sinon il faut une DMTase spécifique des sites
hémi-méthylés