Sunteți pe pagina 1din 28

 Cultivarea microorganismelor-multiplicarea in

laborator a microorganismelor sau creşterea


bacteriilor pe medii de cultură în condiţii in vitro

 Mediile de cultura-amestecuri de substante care


asigura cultivarea microorganismelor.(permit
cresterea si multiplicarea bacteriana)

 Cultura microbiana-totalitatea
microorganismelor dintr-un mediu de cultura.
 izolarii in cultura pura a unui tip de
microorganism dintr-un amestec.

 Identificarii microorganismului pe baza


proprietatilor de multiplicare.
 Contin substanţe nutritive (sursa de carbon, donator
si acceptor de hidrogen, minerale, factori de crestere)

 Asigura conditiile optime de desfasurare a


metabolismului bacterian prin:
 - pH corespunzător
 -umiditate corespunzătoare
 -putere ionica
 -presiune osmotica
 -asigura atmosferă corespunzătoare -
aero/anaerobioza)

 Sunt sterile
 Este asigurata de :
 Subsante nutritive -peptone
- infuzii sau extracte
- amestecuri de proteine naturale(
ser, sange defibrinat, lichid de ascita, ou, lapte)
 Agenti de solidificare
 folositi pentru obtinerea mediilor solide pe care se
obtin colonii izolate.
 Ca agenti de solidificare se folosesc Agar-agar un
coloid polizaharidic din alge marine care incalzit la
900 in apa absoarbe apa in volul de 50x volumul lui iar
la 450 se solidifica sub forma unui gel.Se mai foloseste
gelatina.
 Alte componente
 Indicatorii colorimetrici de Ph care evidentiaza
producerea de acizi prin degradarea carbohidratilor(
albastru de bromtimol)
 Agenti selectivi: substante colorante, chimioterapice
care inhiba cresterea unor specii bacteriene(
neomicina, polimixina)permitand dezvoltarea altora.
 Agentii reducatori –se folosesc in mediile pentru
cultivarea anaerobilor( cisteina, tioglicolatul,
pirogalolul)
 Substante pentru teste biochimice( zaharuri,
polialcooli, am. ac., saruri anorganice: Nacl, saruri de
Fe)
 Etape:
 1. Se amesteca ingredientele in ordinea din reteta
 2. Se ajusteaza Ph-ul
 3. Se repartizeaza in eprubete sau in baloane
 4. Se sterilizeaza prin autoclavare
 5. Se controleaza pentru sterilitate , proprietati
nutritive si eficienta selectiva.
 După consistenţă:

 - lichide (repartizate în eprubete)

 - solide (geloza dreaptă, înclinată, în placă)

 - semisolide (în eprubete)


 După conţinutul de substanţe nutritive:
 Medii naturale: conţin substanţe nutritive în forma lor
naturală, fără a fi prelucrate în prealabil : mediul cu
bilă, mediul cu lapte, mediul cu ouă, ser de bou
coagulat

 Medii artificiale:substante chimice


 Dupa compozitie si utilizare
 Medii complexe-cu o compozitie cunoscuta
numai cu aproximatie.
 Medii sintetice: compuse exclusiv din substante
chimice pure(medii chimic definite).Pot fi:
 cu compozitie minimala( saruri, glucoza)
 cu compozitie complexa( contin am.ac., baze
purinice, pirimidinice, vitamine)
 Medii de utilitate generala
1. medii uzuale( simple)
2. medii cu proteine native
 Medii speciale
1. selective
2. de imbogatire
3. pentru anaerobi
4. pentru teste biochimice
 Se prepara relativ simplu din ingredientele de baza.
 se folosesc pentru germeni nepretenţiosi:stafilococi
enterobacterii etc
 1) lichide:-bulion simplu
 -apa peptonata
 2) solide:-geloza simplă( bulion + agar-agar)
 -agar Mc Conkey pt bacili Gram negativi
 -Levin (eozina si albastru de metilen)
 -Muller Hinton pt. antibiograme
 Se folosesc pentru cultivarea unor
microorganisme pretentioase( Streptococi,
Neisseria, Haemophilus)
 La bulionul simplu sau agar se adauga sange
defibrinat de berbec 5%. Amestecul se face la 450,
mediul obtinut numidu-se geloza sange,sau
nutrient agar cu sange.

 Cand amestecul se face la 70-80-0C, se obtine


geloza chocolat ( continutul globular trece in
mediu) folosita la cultivarea speciilor
pretentioase.
 Selective
 Se folosesc la cultivarea bacteriilor din produse
pluricontaminate.

 Contin agenti selectivi care inhiba dezvoltarea


unor specii, favorizand dezvoltarea speciilor
cautate si evidentiindu-le unele caractere
definitorii.
 Mediul Chapman solid –pt. Stafilococ
 Mediul Leifson sau ADCL pt enterobacteriacee(
dezoxicolat de sodiu,lactoza, rosu neutru)
 Mediul Istrate-Meitert -pt. enterobacteriacee(bila de
bou, indicator albastru de bromtimol)
 Mediul Muller Hinton cu antibiotice( vancomicina,
colistin, nistatin)+sange pt. gonococ si meningococ
 Mediul BSA( bila ) ph 8,4-9.pt. vibrion holeric
 Mediul Tinsdale pt. b.difteric
 Mediul Löwenstein-Jensen – pt. cultivarea
micobacteriilor
 Mediul Sabouraud – pt. cultivarea levurilor (Candida)
 Sunt medii lichide care favorizeaza multiplicarea
bacteriilor care ne intereseaza –mai ales cand se
gasesc in cantitate mica-si inhiba flora
nepatogena.
 Exemple de medii de imbogatire:
 Apa peptonata cu ph alcalin ( 8-9) pt. vibrionul
holeric.
 Chapman lichid cu 15% NaCl.
 Selenit acid de sodiu pt. Salmonella.
 OCST( ou,cisteina,ser, telurit de K) pt. difteric.
 Lichide: bulion cu acid thioglicolic
 Semisolide: Veillon
 Solide: Nagler, Willis-Hobbs, geloza-sange
 Permit diferentierea bacteriilor pe baza unor
proprietati metabolice
 TSI (glucoza, lactoza, zaharoza)=triple sugar iron
 MIU ( mobilitate, indol, uree)=mobilitate indol
uree
 Simmons cu citrat=sursa de carbon