Sunteți pe pagina 1din 31

 Identificarea bacteriilor se face dupa :

 comportamentul metabolic
 natura produsilor rezultati din reactiile
chimice
Teste rezultate din metabolismul
energetic bacterian
 Precizarea tipului de respiratie
 Se insamanteaza cultura in geloza Veillon in
tuburi Weinberg:
 bacteriile aerobe se dezvolta doar la suprafata
 bacteriile anaerobe se dezvolta doar in
profunzime
 bacteriile aerob-anaerob facultative se dezv.
pe toata coloana de mediu
 Proba oxidarii si fermentarii
 Evidentiaza degradarea unui substrat pe cale
oxidativa, fermentativa sau ambele cai.
 Se foloseste geloza semimoale cu glucoza +
indicator de ph –albastru de bromtimol a
carui culoare vireaza in galben in urma
degradarii glucozei, care duce la formarea de
acizi.
 Degradarea oxidativa se evidentiaza la
suprafata( B Piocianic),
 Oxidativ-fermentativa in toata coloana
( enterobacteriile)
 Fermentativa doar in profunzime
( clostridiile)
 Cercetarea catalazei
 Este o enzima care scindeaza apa oxigenata in O2+
H2O si este prezenta la bacteriile cu metabolism
oxidativ.
 Emulsionarea culturii in apa oxigenata este
urmata de degajarea oxigenului sub forma de bule
 Test + la Stafilococ
 Test negativ la Streptococ
 Reducerea nitratilor in nitriti
 Aparitia nitratilor in mediu se evidentiaza in apa
peptonata care contine Nitrat de K 0,1% si
adaugarea de ac. sulfanilic si αnaftil amina in ac.
acetic.
 R + = culoare rosie
 R- = culoare neschimbata
 Testul oxidazelor
 Identifica meningococii, gonococii, prin
acoperirea culturii cu sol de dimetil-
parafenilen-diamina 1% care in 30” devine
purpurie, mov.
Teste rezultand din tipurile
fermentative
 Testul rosu-metil
 Evidentiaza fermentarea cu scaderea ph-ului
sub 5.
 La cultura bacteriana in apa peptonata se adauga
cateva picaturi de sol de rosu-fenol:
 R + culoare rosie ( toate enterobacteriaceele cu
exceptia Klebssielei)
 R- culoarea vireaza in galben
 Testul Voges- Proskauer
 Evidentiaza fermentarea acetoinica a glucozei
 Aparitia culorii rosii la interfata dintre cultura
bacteriana in sol alcalina si sol. de α-naftol
 test pozitiv la Klebsiella
 Testul β-galactozidazei
 Evidentiaza degradarea lactozei prin
β-galactozidaza
 Se foloseste ortonitrofenilgalactozid(ONPG)si
testul este pozitiv la bacteriile care descompun
tardiv lactoza din cauza unui deficit de galactozid
permeaza, dar degradeaza promt ONPG.
 Test pozitiv vireaza culoarea in galben.
 Fermentarea carbohidratilor
 Se evidentiaza in apa peptonata la care se adauga
un carbohidrat( glucooza, lactoza, maltoza,
manitol, in prop. de 1% si un indicator de ph.
 Fermentarea carbohdratilor determina acidifierea
mediului cu virarea culorii corespunzator zonei
acide.
Teste rezultate din fermentarea
compusilor azotati
Testul indolului
 Bacteriile care au triptofanaza scindeaza
triptofanul in indol, ac. piruvic si amoniac.
 Se pune in evidenta cu reactiv Ehrlich sau Kovacs
sau cu benzi de hartie imbibate cu paradimetil-
amino-benzaldehida si consta in aparitia unei
culori rosii.
 Degradarea aminoacizilor: arginina, lizina,
ornitina
 Se cerceteaza in apa peptonata cu aminoacizi si un
indicator de ph.
 In urma degradarii am,ac se produc substante
alcaline care vireaza culoarea indicatorului de
ph.(R+ culoare violet, R- cul. galbena)
Producerea de hidrogen sulfurat
 Evidentiaza descompunerea aminoacizilor cu
sulf sub actiunea cisteindesulfidrazei.
 producere de compusi negri in prezenta ionilor de
Fe sau Pb.
 R+ innegrirea mediului-Salmonella
 R- fara modificari-E.Coli
 Evidentierea L si D fenilalanindezaminazei
 Aceste enzime scindeaza fenilalanina cu formare
de ac. fenilpiruvic care cu clorura ferica da culoare
verde.
 R+ la Proteus
 R- la E. coli
 Ureaza
 Este o enzima care descompune ureea in amoniac
si dioxid de carbon
 Microorganismul se cultiva intr-un mediu care
contine uree si indicator de ph
 R+ culoare rosie virata in zona alcalina
 Ex. R+ la Proteus, Yersinia.
Teste rezultand din necesitati
nutritive minimale
Folosirea citratului ca unica sursa de carbon -pe
mediul Simmons
 R+ la Salmonella
 R- la E. coli
 Bacreriile care cresc pe mediul Simmons folosesc
citratul si vireaza culoarea mediului in albastru.
Dezvoltarea pe mediu cu acetat

 E. Coli foloseste acetatul ca unica sursa de carbon


si se dezvolta pe medii care contin acetat de Na.
 Degradarea fermentativa a lactozei din mediile
selectiv diferentiale pentru enterobacterii
permite diferentierea lor in :
 lactozo pozitive-E.coli,Klebsiella
 lactozo negative-
Salmonella,Shigella,Yersinia,Proteus
 catalaza,
 carbohidraza,
 gelatinaza,
 lecitinaza,
 nitrat reductaza,
 oxidaza,
 Termonucleaza etc.
 Sensibilitatea la diferite
temperaturi
 Toleranta la un anumit
PH
 Sensibilitatea la optochin
 testul sensibilitatii la
bacitracina
 Testul bilolizei-
pneumococii capsulati
care sunt legati in
prezenta bilei
 Testul coagulazei la
stafilococi-cei coagulazo +
produc o enzima care
activeaza coagularea
plasmatica etc.
Testele biochimice API se folosec pentru
identificarea biochimica a germenilor.
Galeria este constituita din microtuburi care
contin diverse substante sub forma deshidratata.
Testele sunt inoculate cu o suspensie bacteriana,
realizata din cultura studiata.
Reactiile produse in timpul perioadei de incubare
se traduc prin viraje de culoare spontane sau
obtinute prin adaugarea de reactivi suplimentari.