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Conceptos
• Antibiograma: son métodos in Vitro que determinan la
susceptibilidad de los microorganismos a una variedad de agentes
antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio específica y
estandarizada.
• Es el mas difundido.
• Prueba la inhibición o resistencia de los microorganismos,
enfrentándolos con los medicamentos que se encuentran
impregnados en pequeños discos.
Medio de cultivo utilizado
Mueller Hinton
• Su reproducibilidad aceptable.
• Baja concentración de
inhibidores, condición crítica para
evaluar sulfonamidas,
trimetoprim y tetraciclina.
• El crecimiento satisfactorio de
patógenos no exigentes.
• Existir ya gran experiencia en
estudios de susceptibilidad.
Factores que influyen en el Agar
pH: El rango de pH va de 7,2 a 7,4.
variación de cationes divalentes:
Ca y Mg: Afectan los halos de inhibición para aminoglucósidos
y tetraciclinas en Pseudomonas aeruginosa.
Profundidad del Agar: La profundidad recomendada de
la capa de agar es de 3 a 5 mm.
Preparación del Inóculo
Se prepara el inóculo con ajuste a la turbidez
McFarland 0,5 que corresponde aun diámetro
de1.5 x10 UFC/ML, directo en caldo de
colonias frescas en agar no selectivo.
Inoculación de la placa
• Con un hisopo
estéril en tres
direcciones
inocule toda la
placa (giros de
60°).
Aplicación de sensidiscos
separación: los
discos deben de
estar separados24
mm (del centro de un
sensidisco al otro
más cercano).
Cantidad: 12
unidades en placas
de 150mm y 5
unidades en placas
se 100mm.
Lectura e interpretación de los resultados
Categorías de interpretaron:
Sensible: El microorganismo
presenta un gran área de inhibición
causada por el fármaco. 95% éxito
Ampicilina ≤ 13 14 - 16 ≥ 17
Amikacina ≤ 14 15 – 16 ≥ 17
Sulfisoxasol ≤ 12 13 - 16 ≥ 17
Gentamicina ≤ 12 13 – 14 ≥ 15
Cloranfenicol ≤ 12 13 - 17 ≥ 18
Ceftriaxona ≤ 12 14 – 20 ≥ 21
Ciprofloxacin
≤ 15 16 - 20 ≥ 21
a
Tetraciclina ≤ 14 15 - 18 ≥ 19
Acido
≤ 13 14 – 18 ≥ 19
Nalidixico
Estrptomicina ≤ 11 12 – 14 ≥ 15
anamicina ≤ 13 14 - 17 ≥ 18
Trimetroprim/
Sulfametoxas ≤ 10 11 – 15 ≥ 16
ol
Otros métodos
• Dilución en Caldo: En el método de dilución en caldo, base de
casi todos los métodos utilizados en la actualidad, se colocan
concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano, generalmente
diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el
desarrollo del microorganismo
• Método de E-test:
Consiste en aplicar sobre un medio de
cultivo, donde se encuentra el
microorganismo a ensayar, tiras plásticas que
llevan incluidas un gradiente de
concentración de un determinado ATB. Luego
se incuba adecuadamente y se observa la
formación de una elipse de inhibición de
crecimiento.
Método Automatizado: