Obținerea Natamicinei prin procedeu

biotehnologic
Scurta prezentare biochimica a produsului
 Natamicina/E235/pimaricina a fost descoperită în 1950 de catre
Struyck care a descris-o:”Un antibiotic cristalin nou, care a fost
izolată din pasta de fermentație a unei culturi de Streptomyces
natalensis.

 Aceasta poate fi recuperată prin urmatoarele procedee extracție,

filtrare și uscare.

 Pudra uscată este suficient de stabilă pentru a fi depozitată ani de zile

fără a-și pierde activitatea substanțial. Este sigură pentru consumatori,
eficientă în concentrații mici și nu are efecte negative asupra calității
produselor.

 Natamicina, este o polienă utilizată pentru antibiotice, cu formula

C33H47NO13 produsă în culturile anumitor familii Streptomyces ca: S.
Natalensis, S. Chattanoogensis și S. Lydicus.
 Proprietati fizice, chimice, formula
 Natamicina apartine grupului de poliene macrolide antimicotice.
Aceasta grupare este caracterizată de un macrociclu cu inel lactonic
cu un număr de legături duble conjugate carbon-carbon. Masa
moleculară a natamicinei este 665,75g/mol.
• Natamicina este o pudră cristalină albă, fără miros. Este ușor solubilă în apă,
metanol, acid diluat, acid acetic și insolubilă în majoritatea solvenților organici.
Este relativ stabilă când este uscată și este capabilă să reziste la temperaturi înalte
(100 ͦC).

• Aceasta este descompusă la lumina ultraviolet, cu pierderea structurii de tetraenă,

așadar este mai bine să fie păstrată la întuneric.

• Iradierea Gamma descompune natamicina. Este dezactivată de clor, peroxizi,

antioxidanți, sulfați.
• Natamicina dizolvată este mult mai susceptibilă la inactivare.
• Natamicina este solubilă 20-50 mg/L în apă, solubilă în acid acetic glacial,
metilpirolidonă, dimetil formamidă, dimetil sulfoxid, glicerină și propilen glicol.
Prezintă o insolubilitate în alcooli cu număr mare de atomi de carbon, eteri,
esteri, hidrocarburi aromatice sau alifatice, hidrocarburi clorurate, cetone, dioxan,
ciclohexanol și varii uleiuri.
• Mycosamina este produsul principal obținut prin hidroliza natamicinei
Utilizari in Industria Alimentara
 Natamicina a fost folosita pe parcursul a mai multor decenii in industria
alimentara pentru a suprima dezvoltarea fungilor pe suprafata
branzeturilor si a mezelurilor.
 Natamicina are o toxicitate scazuta asupra mamiferelor. Pe parcursul a 7
zile de administrare orala a unor doze de pana la 500 mg/zi nu a fost
observata absortia sa la nivelul tractului intestinal uman.
 Natamicina si / sau sorbatii sunt singurele antifungice aprobate in cele
mai multe tari pentru tratarea alimentelor precum branza si carnatii
uscati . Comparativ cu natamicina , sunt necesare concentratii relativ
mari de sorbat pentru a preveni cresterea fungilor si a unor forme de
deteriorare ce au dezvoltat rezinstenta fata de acest acid. Mai mult de
atat, sorbatul difuzeaza de la suprafata spre interiorul produsului ,
rezultand o eficienta redusa. Utilizarea sorbatului poate afecta de
asemenea si gustul si culoarea produsului. (Stark, 2007)
 Natamicina este folosită în industria alimentară ca un obstacol
pentru fungice creștere în produse lactate, carne și alte alimente
în care aceasta rămâne pe suprafața produsului și nu penetrează
greu produs, care îl diferențiază de alți conservanți. Pentru
tratamentul de suprafață al brânzei, natamicina este de obicei
aplicată ca o acoperire și ca agent de înmuiere sau pulverizare sau
poate fi adăugată la soluție salină ca tratament alternativ. Aplicație
de succes de natamicină este pe aproape fiecare tip de brânză. A
fost găsit eficiente în conservarea brânzeturilor moi, fără efecte
dăunătoare coacere. Galatiri (brânză tradițională grecească),
când tratați cu natamicină și nisină, nu numai că au inhibat
creșterea matrițelor și a drojdiei, dar și îmbunătățirea duratei de
depozitare și caracteristicile produsului (> 28 de zile) în
comparație cu proba de control (14-15 zile).
Modalitate de obtinere
 Natamicina este obtinuta din Streptomyces natalensis.
Productia de natamicina se realizeaza la scara industriala
produsa prin fermentație aerobica a Streptomyces Natalensis.
Fermentatia se realizeaza pe parcursul a mai multor zile .
Deoarece marea parte a Natamicinei este legata de miceliu,
fie este izolata din intreaga masa de extractie , fie prin
extracția miceliului cu ajutorul alcoolilor inferiori.
Medii
 Speciile de Streptomyces sunt supuse unor medii predeterminate,
medii care sunt destinate a îmbunătății producerea de natamicina.
 Un mediu apos propice pentru inocul contine: o proteina ca sursa
de azot în concentrații de 2-6 g/L, în mod normal concentrația
este 8 g/L și o sursa de carbon metabolizanta care este suficientă
pentru a nu avea o deprivare de sursa de carbon, de obicei 5-30
g/L, a mediului.
 Un mediu apos propice folosit în timpul fermentației pentru a
induce producerea de natamicina contine: în jur de 80-250 g/L
sursa de carbon metabolizantă și o proteina ce conține azot .
Această sursă trebuie sa conțina o proteina care nu este pentru
mucegaiuri și una care este pentru mucegaiuri.
 Fermentatia se realizeaza pe parcursul a mai multor zile .
Deoarece marea parte a natamicinei este legata de miceliu,
fie este izolata din intreaga masa de extractie , fie prin
extracția miceliului cu ajutorul alcoolilor inferiori.

 Tulpina de S. Natalensis a fost inițial activata timp de 4 zile

într-un mediu apos.Sporii germinați au fost cultivați timp de
10 zile într-un mediu de cultură cu agar. pH-ul mediului a
fost ajustat la 7 înainte de sterilizare. Dupăaincubare la 30⁰C
pentru 10 zile, sporii aparuți au fost colectați într-o soluție
de glicerol 50%. Suspensia celulară a fost depozitată în
criotuburi de 2 ml la -80◦C intr-un congelator ca banca
principală de celule. Viabilitatea celulor a fost verificată
periodic pentru a asigura stabilitatea celulei în timpul
stocării.
 Concluzii
 Avantajle natamicinei sunt : lunga istorie de utilizare în condiții de siguranță, timpul de lucru prelungit și
activitatea relativ ridicată la pH scăzut, neutru și ridicat (Stark, 2007). Mai mult decât atât, este stabilă
chimic și nu are nici o culoare, miros, gust, sau orice efecte negative asupra calității produsului alimentar.

 Datorită solubilității scazute în apa , natamicina va fi in principal prezentă în stare solidă, sub forma de
cristale. Pe parcursul dizolvarii lente , natamicina devine activa si difuzeaza pe intreaga suprafata,
compensand cantitatea de natamicina pierduta prin interactiunea cu celulele fungice, prin hidroliza,
inactivare prin oxidare sau lumina. Aceasta eliberare lenta a natamicinei , ii garanteaza o activitate
prelungita in timp. Natamicina este foarte eficienta la concentratii mici (Delves-Broughton et al., 2005;
Stark, 2007).

 Natamicina a demonstrat efecte inhibitoare împotriva patogenilor microbieni.

 Ținând cont de faptul ca natamicina este foarte puțin absorbită de organism se consideră sigură datorită
rezultatelor obținute în cadrul analizelor pe termen lung.

 Natamicina are un statut GRAS și lung istoric de utilizare în condiții de siguranță în prevenirea creșterii
fungice pe suprafața diferitelor alimente. Este un agent puternic antimicotic folosit pentru a depăși
problema de deteriorare a fungilor, care scade durata de conservare a alimentelor. Prin urmare, poate
oferi o ocazie extraordinară pentru avansarea domeniului conservării și siguranței alimentelor.
Bibliografie
 .Van Leeuwen, M. R. ,Golovina, E. and Dijksterhuis, J. (2009). The polyene antibiotics
 nystatin and filipin disrupt the plasma membrane; whereas natamycin inhibits
 endocytosis in germinating conidia of Penicillium discolor. J. Appl. Microbiol. 106:
 1908-1918.
 2. Antimicrobials in food .Third Edition .Taylor and Francis Group
 3. Stark J, 2004. Permitted preservatives - natamycin. In Robinson RK, Batt, CA and
Patel P (eds.). Encyclopaedia of Food Microbiology, Academic Press, New York, pp.
1776-1781.
 4. Thomas LV and Delves-Broughton J, 2003. Natamycin. In: Encyclopedia of Food
Sciences and Nutrition. Eds. B Caballero, L Trugo and P Finglas, pp. 4109-4115. Elsevier
Science Ltd.
 5. Biochemical studies on the Natamycin antibiotic produced by Streptomyces lydicus:
fermentation, extraction and biological activities H.M. Atta a,*, A.S. El-Sayed b, M.A.
El-Desoukey b, M. Hassan c, M. El-Gazar d . King Saud University
 Journal of Saudi Chemical Society.