Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs es la vía común final de

la oxidación de los ácidos tricarboxílicos,
provenientes de carbohidratos, ácidos
grasos y proteínas, para producir
equivalentes reductores (NADH+H+ y
FADH2) que son la fuente de energía de la
cadena respiratoria.

Sir Hans Adolf Krebs 1900-1981

Premio Nobel Fisiología o Medicina
1953.
Bioquímico más importante del
siglo XX.
Ciclo de Krebs
Ciclo de la urea
Reacciones del ciclo de Krebs
 Mitocondria y ciclo de Krebs
La mitocondria posee su propio DNA del cual se sintetizan varias
enzimas que participan en el ciclo de Krebs para oxidar el acetato
(acetil-CoA) en CO2 y H2O y producir equivalentes reductores
(NADH+H+ y FADH2) en la matriz mitocondrial. El NADH2 y FADH2 son
oxidados para producir protones (H+), que van al espacio
intermembrana para aumentar su concentración, generar de esta
manera la fuerza protón motriz mediante la cadena respiratoria y que
finalmente permite la síntesis de ATP, a través, de la fosforilación
oxidativa.
Rendimiento energético de un 1 mol de glucosa

Balance energético de 1 mol de glucosa

Ganancia: 10 NADH2 x 3ATP = 30 ATP

2 FADH2 x 2 ATP= 4 ATP
Reacción exergónica 4 ATP
Total 38 ATP
 Funciones del ciclo de Krebs
 El ciclo de Krebs permite conservar la energía procedente de la
oxidación de acetil-CoA, mediante la transferencia de electrones
desde los intermediarios del ciclo al NAD+ y FAD+.
 Permite oxidar los ácidos grasos, aminoácidos y carbohidratos en
forma de CO2 y aportar energía para la reducción de NAD+ y FAD+.
 Genera energía mediante fosforilación a nivel de sustrato (durante
un ciclo se produce un mol de GTP).
 Genera energía en forma de calor (G=-13 Kcal por ciclo).
 Es una ruta central a la cual se acoplan varias rutas metabólicas:
ciclo de la urea, -oxidación de ácidos grasos, glucólisis aerobia,
cetogenólisis y varias rutas anapleróticas.
 El hígado en el ciclo de Krebs es importante en la oxidación de
ácidos grasos para generar energía y a su vez para producir
intermediarios gluconeogénicos durante el ayuno.
 En el músculo aporta gran cantidad de energía durante la actividad
física.
Cadena respiratoria o Cadena
transportadora de electrones
 Cadena respiratoria
La cadena respiratoria o cadena
transportadora de electrones, es un
mecanismo de transferencia de
electrones entre complejos
multiproteicos (I, II, III y IV) de la
membrana interna mitocondrial hasta
llegar a un aceptor final de electrones
(el O2 que se reduce a H2O). Los
electrones son suministrados de la
oxidación de las coenzimas NADH+H+
y FADH2, que liberan energía suficiente
para establecer un gradiente
electroquímico de protones (H+) entre
la membrana interna mitocondrial y la
matriz de la mitocondria. Este
gradiente electroquímico es usado para
sintetizar ATP mediante un mecanismo
denominado fosforilación oxidativa.
 Mitocondria: Respiración celular
La respiración aerobia o respiración celular (cadena transportadora de
electrones) tiene lugar en las mitocondrias de los eucariotas y, supone
la transferencia de electrones desde las biomoléculas hasta el oxígeno,
proceso que está implicado en la producción de energía de la célula.
La mitocondria dentro de una célula es semejante a una pila en un
radio. La mitocondria suministra la energía suficiente para que una
célula pueda funcionar.
 Cadena transportadora de electrones
El NADH + H+ y el FADH2 se oxidan a NAD+ y FAD+, a través, de la
cadena transportadora de electrones, generando la fuerza protón
motriz, de donde se obtiene la energía para la síntesis de ATP, a partir
de ADP + Pi mediante fosforilación oxidativa. El aceptor final de los
electrones de la cadena transportadora es el O2, que finalmente se
transforma en agua.
 Complejos de la cadena de transporte de
electrones
Los electrones generados por la oxidación de NADH + H + y FADH2,
son transferidos a la cadena de transporte de electrones, conformada
por cuatro grandes complejos enzimáticos (complejos I a IV), que
usan la energía obtenida de la oxidación del NADH + H + y FADH2
para el bombeo de protones en contra del gradiente de
concentración.
 Complejos de la cadena de transporte de
electrones

 Complejo I: También llamado NADH-ubiquinona oxidoreductasa o

NADH deshidrogenasa, que transporta electrones del NADH a la
ubiquinona.
 Complejo II: Es la succinato deshidrogenasa, única enzima del
ciclo de Krebs unida a membrana, que pasa los electrones del
FADH2 a la ubiquinona.

 Complejo III: También llamado citocromo bc1 o complejo

ubiquinona-citocromo c oxidoreductasa, que acopla la transferencia
de electrones desde la ubiquinona al citocromo c.
 Complejo IV: También llamado citocromo c oxidasa, es la ultima
etapa de la cadena de transporte electrónico de la respiración y
conduce a los electrones desde el citocromo c hasta el ultimo
aceptor de los electrones, el oxígeno, que se reduce a agua.
 Complejos de la cadena de transporte de
electrones
 Los electrones del NADH + H+ se transfieren a través, de los
complejos I, III y IV hasta el oxígeno.

 Los electrones del FADH2 son transferidos a través, de los

complejos II, III y IV hasta el oxígeno.

 El NADH + H+ crea un mayor gradiente electroquímico que el

FADH2, al utilizar el complejo I y no el complejo II (que no
transfiere protones al espacio intermembrana).
Complejos de la cadena de transporte de
electrones
n = 12
H+/vuelta

12 H+ = 3 ATP ó 10 H+ = 3 ATP ??
 Complejos de la cadena de transporte de
electrones

pH = 7

pH = 8

http://www.bmb.leeds.ac.uk/teaching/icu3/lecture/20/
 Similitud de la cadena respiratoria
Los electrones del NADH + H+ de los complejos I, III y IV de la cadena
respiratoria transportan protones en contra del gradiente de
concentración hacia el espacio intermembrana (haciendo similitud a una
bomba eléctrica de agua). Los protones regresan a favor del gradiente,
suministrando energía a la ATP sintasa para la síntesis de ATP (haciendo
similitud a un motor eléctrico que aprovecha la caída de agua para
generar energía).
 Fosforilación oxidativa
La fosforilación oxidativa es un mecanismo de síntesis de ATP a partir
de ADP + Pi en la mitocondria, catalizado por la enzima ATP sintasa (o
complejo V).
En otras palabras, la ATP sintasa aprovecha la fuerza protón-motriz
para sintetizar ATP a partir de ADP + Pi .
Fosforilación oxidativa: Teoría quimiosmótica
de Mitchell
Peter Mitchell propuso en 1961 el mecanismo conocido como “Teoría
quimiosmótica de acoplamiento” que infiere que la síntesis de ATP
está acoplada al transporte de electrones mitocondrial.
Mitchell vio una similitud con el proceso de ósmosis (difusión de
agua a través de una membrana) y por esto fue denominado
quimiósmosis.

= 0.75

Peter Dennis Mitchell 1920 – 1992

Premio Nobel de Química 1978
Teoría quimiosmótica
Fosforilación oxidativa: Teoría quimiosmótica
de Mitchell
La teoría quimiosmótica de acoplamiento de Mitchell se basa en que:

Los complejos transportadores de electrones logran pasar protones

al espacio intermembrana en contra del gradiente, creando así un
gradiente eléctrico y un gradiente de protones a través de la
membrana interna. A este gradiente electroquímico se le denomina
fuerza protón-motriz.
El potencial electroquímico de este gradiente de protones (H +) o
fuerza protón-motriz lo aprovecha la ATP sintasa (complejo V) para
sintetizar ATP.
 ATP sintasa: Complejo V:
La ATP sintasa es una de las estructuras más complejas de la
membrana mitocondrial: contiene dos subestructuras principales
(F0 y F1), cada una con una función determinada.

La porción F0, es una proteína submembranal insoluble en agua y

que contiene un canal transmembrana para los protones.
La porción F1 es una proteína periférica de membrana, soluble en
agua, que participa directamente en la síntesis de ATP a partir de
ADP + Pi.
 Rendimiento energético y fosforilación
oxidativa
La reoxidación de una molécula de NADH + H+ da lugar a la síntesis
de aproximadamente 2.5 moléculas de ATP, mientras que la
reoxidación de una molécula de FADH2 a aproximadamente 1.5
moléculas de ATP.
La energía liberada por la oxidación de NADH + H+ y FADH2 aporta:

NADH + H+  NAD+ + 2e- + 2H+ G = -53 Kcal/mol

FADH2  FAD+ + 2e- + 2H+ G = -41 Kcal/mol

Con la energía liberada de dicha oxidación, se bombean:

NADH+H+  bombeo de 10 H+
FADH2  bombeo de 6 H+

La ATP sintasa requiere el paso de 4H+ a favor del gradiente para

sintetizar un mol ATP, por lo tanto:

1 NADH + H+  10/4 = 2.5 ATP  3 ATP

1 FADH2  6/4 = 1.5 ATP  2 ATP
 Balance neto para un mol de glucosa usando
la lanzadera malato-aspartato
La lanzadera malato-aspartato transfiere los electrons del NADH + H+
citosólico a una molécula de NADH + H+ mitocondrial.

Para 1 mol de glucosa

Forma 1:

10 mol NADH + H+ x 2.5 ATP= 25 mol ATP

2 mol FADH2 x 1.5 ATP = 3 mol ATP
4 mol ATP (a nivel sustrato)= 4 mol ATP
______________________________________
Neto= 32 mol ATP

Forma 2:

10 mol NADH + H+ x 3 ATP= 30 mol ATP

2 mol FADH2 x 2 ATP= 4 mol ATP
4 mol ATP (a nivel sustrato)= 4 mol ATP
______________________________________
Neto= 38 mol ATP
 Enfermedades mitocondriales
Las enfermedades mitocondriales son desordenes resultantes de la
deficiencia de una o mas proteínas localizadas en las mitocondrias e
involucradas en el metabolismo.
El DNA mitocondrial (DNAmt) humano, posee 16569 pb y codifica 13
proteínas que participan en la producción de energía celular y
fosforilación oxidativa:

7 del complejo I
1 del complejo III
3 del complejo IV
2 del complejo V
 Enfermedades mitocondriales
La genética de las mutaciones en el DNAmt están definidas por la
herencia materna, una alta frecuencia de mutaciones en el DNAmt y
acumulación de mutaciones somáticas con la edad. El DNAmt tiene una
frecuencia de mutación 10 a 17 veces mayor que el DNA nuclear por lo
que pueden presentarse miopatías mitocondriales a diferentes edades.

El patrón de herencia materna, refleja la transmisión exclusiva del

DNAmt de la madre a sus hijos. El óvulo contiene unas 300.000
moléculas de DNAmt en las mitocondrias.
 Enfermedades mitocondriales: síndrome
de Leigh
El síndrome de Leigh se origina por un trastorno nuclear o
mitocondrial (autosómica recesiva, ligada al cromosoma X o herencia
materna). Afecta diversos órganos y se caracteriza por crisis
convulsivas, retraso psicomotor, atrofia óptica, hipotonía, debilidad,
letargia, vómitos, movimientos anormales (ataxia, temblor),
irritabilidad, pérdida de visión y anormalidades respiratorias

http://www.analesdepediatria.org/es/sindrome-leigh-con-deficit-los/articulo/13071315/
 Enfermedades mitocondriales

Ptosis ocular (caída del párpado

superior) – Oftalmoplejia
Paciente con enfermedad
de Leigh

Paciente con el síndrome

Kearns-Sayre

http://www.bcmj.org/articles/mitochondrial-disease-clinical-manifestations-overview