REPLICACION,

TRANSCRIPCIÓN Y
TRADUCCIÓN.
HUGO PEÑA PISCOYA
DOCENTE DE LA CÁTEDRA DE BIOLOGÍA
CELULAR Y MOLECULAR - UPAO
REPLICACION DEL DNA
La replicación es el proceso mediante el cual, a Molécula DNA
partir de una molécula de DNA doble hélice, se parental
sintetizan dos moléculas idénticas. Tiene lugar
cada vez que se divide una célula, ya que las dos
células hijas han de tener exactamente, la misma
dotación genética que la progenitora.

CARACTERISTICAS
Cadena hija
• Es Semiconservativa (nueva)
• Es Bidireccional
• Es Semidiscontinua
• Es Asincronica
• Es monofocal en procariotas
y multifocal en eucariotas
• Requiere de Cebadores
Moléculas de
• Ocurre en el período S. DNA hijas
Es Semiconservativa
A partir de la doble hélice de una molécula de DNA se originan dos moléculas
de DNA, ambas compuestas por una cadena original (preexistente) y una
cadena nueva (recién sintetizada).
Es decir, que las dos cadenas de la molécula progenitora se separan y sirven
cada una de molde para la síntesis de una nueva cadena hija complementaria,
siguiendo la regla normal de apareamiento.

Nucleótidos

Molécula parental Ambas cadenas parentales Dos moléculas de DNA

de DNA Sirven como molde hijas idénticas
 Es Bidireccional
Origen de Origen de
replicación replicación
Al abrirse la doble hélice se
forma una estructura
llamada “burbuja de
replicación”, cuyo tamaño
Origen de Cadena parental
aumenta a medida que replicación
avanza la separación de las Cadena hija
dos cadenas de DNA,
evento que se produce en
forma simultánea en los 2
extremos de la burbuja. Burbuja de
Cada burbuja, tiene dos replicación

horquillas de replicación que

a partir de ese punto de
origen común avanzan en
Dos moléculas de DNA hijas
ambas direcciones opuestas
 Es Asimétrica
• La cadena hija que
adopta como molde a la
cadena progenitora que
corre en dirección 3’→5’
se sintetiza en forma
continua, al crecer en
dirección 5’→3’, y se
denomina cadena
adelantada (“leading
strand”).

• La otra cadena hija, cuyo molde es la cadena del DNA progenitora que corre
en dirección 5’→3’ es sintetizada de un modo singular, ya que para poder
crecer en esa dirección debe sintetizarse en dirección opuesta al avance de la
horquilla de replicación. El problema se supera haciendo de que la síntesis
sea discontinua, lo cual significa que la nueva cadena se sintetiza de a
pequeños fragmentos y se le llama cadena retrasada (“lagging strand”).
• La síntesis de la cadena
retrasada se lleva a
cabo en la dirección
opuesta a la del
movimiento de la
horquilla de crecimiento,
a partir de una serie de
iniciadores de RNA
cortos formados por la
primasa en múltiples
sitios de la segunda
cadena molde. Los
segmentos resultantes
de RNA más DNA se
conocen como
fragmentos de Okasaki.
 La Replicación es Multifocal en Eucariotas
• En eucariotas, para poder llevar a cabo la replicación en un tiempo razonable, ha de
ser multifocal, es decir, empezar por muchos puntos a la vez. Se ha comprobado que
en el DNA de células de mamíferos existen cerca de 50 000 a 100 000 replicones.
• En cambio la replicación del DNA bacteriano es monofocal, es decir, existe un sólo
origen de replicación.
 Requiere de Cebadores
• Para empezar la síntesis de
DNA se requiere una cadena
de nucleótidos para agregarle
un nuevo nucleótido. Cada
fragmento de Okazaki se
inicia con un RNA cebador
“primer” (~10 bases de largo).

Ocurre en Fase S del ciclo

celular. La replicación del DNA
ocurre con alta fidelidad dentro de
un período de tiempo determinado
en forma precisa dentro del ciclo
celular.
Síntesis de DNA = replicación
 REQUERIMIENTOS DE LA REPLICACION
EN PROCARIOTAS EN EUCARIOTAS

• DNA Helicasa. • DNA Helicasa.

• Proteínas SSB (Single- Strand binding). • Proteínas SSB (Single- Strand binding).
• Topoisomerasas I y II • Topoisomerasas I y II
• RNA primasa. • RNA primasa.
• DNA Polimerasas (DNA Pol) • DNA Polimerasas (DNA Pol)
I, II y III α,β, γ, δ, ε
• Pirofosfatasa. • Pirofosfatasa.
• DNA Ligasa • DNA Ligasa
• DNA molde o “template” • DNA molde o “template”
• Cebadores • Cebadores
• Los 4 desoxirribonucleótidos trifosfato: • Los 4 desoxirribonucleótidos trifosfato:
(dATP, dCTP, dGTP, dTTP) (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
• Mg++ • Mg++
• Abrazadera β • PCNA (Proliferating cell nuclear antigen)
• ORC (origin recognition complex)
• Nucleasa reparadora
 DNA POLIMERASAS (DNA Pol)
• La DNA Polimerasa, agrega un nucleótido al extremo 3’ de la cadena de DNA en
crecimiento y forma un enlace fosfodiéster entre este extremo y el grupo 5’-fosfato de
nucleótido entrante.
• El nucleótido trifosfato entrante provee la energía necesaria para esta reacción por la
hidrólisis de los dos fosfatos terminales (PPi).
• Este pirofosfato es luego hidrolizado a fosfato inorgánico (Pi), lo cual permite que la
reacción de polimerización sea irreversible.
 DNA HELICASAS Y PROTEÍNAS SSB.
– Una helicasa y las proteínas de unión a las monocadenas (SSB) trabajan para
desenrollar y mantener las cadenas de DNA separadas antes del avance de la horquilla
de replicación
– Las helicasas son una clase de enzimas capaces de desplazarse a lo largo del DNA
utilizando la energía de la hidrólisis del ATP, para separar las cadenas.
– Las proteínas SSB mantienen las cadenas separadas
 Topoisomerasas
Las Topoisomerasas tipo I relajan el DNA (hacen desaparecer regiones
superenrolladas) por corte y cierre de una cadena del DNA.
ETAPAS DE LA REPLICACION

INICIACION
Reconocimiento de orígenes de replicación
Separación de hebra
Posicionamiento de maquinaria de
replicación

ELONGACION
Crecimiento bidireccional de la horquilla de
replicación
Replicación semiconservativa,
semidoscontinua, coordinada.

TERMINACION
Reconocimiento de señales de terminación
Desensamble de replisomas
1) INICIACION
• La síntesis del DNA se inicia en regiones especiales llamadas orígenes de replicación.
• Los orígenes de replicación típicamente contienen múltiples secuencias repetidas
cortas. Estos segmentos de DNA singulares son reconocidos por proteínas
multiméricas que se unen al origen y, a su vez, reclutan hacia éste otras enzimas de la
replicación.
• La iniciación de la replicación del
DNA en E. coli, se produce por la
unión de la proteína dnaA al único
origen de replicación (oriC),
seguida por la fijación de la DnaB,
una helicasa que disocia el DNA a
la altura de la horquilla.
• La asociación de la primasa (dnaG)
a este complejo forma un
primosoma. Tras la síntesis del
iniciador la primasa se separa.
2) ALARGAMIENTO DE LAS CADENAS:

Una vez que el origen de replicación se ha formado, el alargamiento para formar la cadena
adelantada progresa sin mayor dificultad.
Una primasa se une a un sitio adyacente a la helicasa en el segmento monocatenario del
molde de la cadena retrasada e inicia la síntesis de otro iniciador de RNA, el mismo que la
polimerasa procede a alargar para formar otro fragmento de Okasaki.
El núcleo polimerásico que sintetiza la cadena adelantada se desplaza, junto con su
abrazadera de subunidad β (estabiliza a la DNA poli), a lo largo de su molde en la
dirección del movimiento de la horquilla, y así alarga la cadena.
Una vez que los cebadores de la
cadena retrasada han sido
elongados por la DNAP III, ellos
son removidos y se rellena dichos
espacios por la DNAP I.
La enzima tiene actividad
polimerasa 5’→3’, 3’→ 5’
exonucleasa (“proofreading”) en
una sola cadena polipeptídica. La
exonucleasa 5’→3’ remueve los
cebadores, mientras que la
polimerasa funciona simultánea-
mente llenando los espacios con
DNA por elongación del extremo 3’
del fragmento de Okasaki
adyacente. El enlace fosfodiéster
final entre los fragmentos es
catalizado por la DNA ligasa
3) TERMINACIÓN
La replicación finaliza cuando una horquilla de replicación se encuentra con el otro lado
del cromosoma circular en el lugar de terminación, la región ter (τ ). La región ter está
formada por un par de secuencias ter de repeticiones invertidas.
Cada secuencia ter evita una progresión posterior de una de las horquillas de replicación
cuando se une una proteína de unión ter (TBP) de 26 KDa.
Las dos moléculas hijas de DNA se separan porque actúa una topoisomerasa de tipo II.

(T1)

(T2)
 LA DNA POLIMERASA HACE UNA LECTURA DE
PRUEBA (PROOFREADING)
Muchos errores de copiado
que se producen durante la
replicación del DNA son
corregidos por la función
de lectura de prueba de la
DNA Polimerasa, que
pueden reconocer bases
erróneas (mal apareadas)
en el extremo 3’ de la
cadena en crecimiento y
luego extraerlas por medio
de una actividad inherente
de exonucleasa 3’ →5’.
 DNA POLIMERASAS EUCARIOTICAS: , , ,  y .

• Las enzimas son similares a aquellas involucradas en la replicación

del DNA bacteriano. La DNA topoisomerasa II está involucrada en
aliviar superenrollamientos positivos en el DNA, mientras que la
helicasa desenrolla las dos cadenas.
• LA DNA Pol- tiene baja procesividad y una primasa asociada y
carece de actividad exonucleasa. Está involucrada en la síntesis de
la cadena retrasada.
• DNA Pol  tiene alta procesividad en presencia de PCNA (tiene
una función homóloga a la subunidad  de Pol III de E. coli ) y no
tiene asociada una primasa, sugiriendo que replica la cadena líder
eucariótica.
• DNA Pol  es encontrada en la mitocondria y replica su DNA.
• DNA Pol  y  tienen buena procesividad y están involucradas en la
reparación del DNA.
• La capacidad para sintetizar largo DNA es conferido a la DNA Pol- por el antígeno
nuclear de células en proliferación (PCNA), de funcion semajante a la abrazadera β.
• El PCNA está formado por 3 subunidades monoméricas que forman un aro que se une
a la polimerasa y no al DNA para impedir desprendimiento de la enzima más no su
deslizamiento.
• Los cebadores son eliminados por una nucleasa reparadora y su lugar lo ocupa una
pieza equivalente de DNA. El proceso culmina al actuar la DNA ligasa.
 ¿QUÉ SON LOS TELÓMEROS?

• Están localizados en los extremos de

los cromosomas
• Sin los telómeros, los cromosomas
son inestables y pueden combinarse
con otros cromosomas para formar
cromosoma dicéntricos o anillos
• Protegen al cromosoma de la
degradación.
• Permiten la replicación completa de
cada cromosoma
• Tienen unas 6-10 kilobases, y
consisten de unas 250 – 1500
repeticiones de una secuencia rica en
G, en los vertebrados es TTAGGG
• Añade unidades sencillas de la
repetición a los extremos de los
telómeros previniendo el acortamiento
de los cromosomas.
• La telomerasa contiene un molde
de ARN que sirve para sintetizar el
ADN.
 TRANSCRIPCION
 Es monocatenaria. Sólo se transcribe una cadena de DNA
 Es selectiva. Sólo se sintetiza RNA a partir de ciertas regiones del DNA.
 Es reiterativa. Una misma región de DNA puede estar siendo transcrita
simultáneamente por varias RNA polimerasas, con lo que se obtienen muchas copias.
 No requiere de cebadores.
 REQUERIMIENTOS DE LA TRANSCRIPCION

EN PROCARIOTAS EN EUCARIOTAS

• RNA Polimerasas (RNA Pol) • RNA Polimerasas (RNA Pol)

I, II y III
• Topoisomerasa I • Topoisomerasa I
• Pirofosfatasa. • Pirofosfatasa.
• DNA molde • DNA molde
• Los 4 ribonucleótidos trifosfato: • Los 4 ribonucleótidos trifosfato:
(ATP, CTP, GTP, UTP) (ATP, CTP, GTP, UTP)
• Mg++ • Mg++, Mn++
• Factores de transcripción: • Factores de transcripcion específicos.
sigma (σ), rho (ρ) Activadores y represores
• Factores de Transcripción basales:
TFIIA, TFIIB, TFIID, TFIIE, TFIIF, TFIIH.
TFIIS, TFIIIS (elongina).
• Poli A polimerasa.
• Espliceosoma
 La RNA Polimerasa dependiente de DNA:
 Localiza en el DNA los centros de iniciación y las señales de
terminación que determinan el final de la transcripción
 Desenrolla un tramo del DNA para producir un molde de DNA de una
sola hebra.
 Selecciona el ribonucleósido trifosfato correcto y cataliza la formación
de un enlace fosfodiéster. La RNA Polimerasa es completamente
progresiva: el transcrito es sintetizado de principio a fin por una sola
molécula de RNA polimerasa.

RNA Polimerasa de E.coli (RNAPol)

Subun. Función

 Se une a secuencias reguladoras

 Forma enlaces fosfodiéster

’ Se une al DNA molde

 Reconoce al promotor e inicia

síntesis
ETAPAS DE LA TRANSCRIPCION RNA polimerasa
EN PROCARIOTAS gen

 Iniciación DNA
promotor
 Elongación Iniciación DNA terminador
 Terminación
 Modificaciones postranscripcionales
RNA

Elongación

Terminación RNA
creciente

RNA
completo

RNA
polimerasa

TRANSCRIPCIÓN DE UN GEN
 1° INICIACION
 El par de bases donde se inicia la transcripción recibe el nombre de sitio de
iniciación de la transcripción, o sitio de inicio. Por convención, el sitio de
iniciación de la transcripción suele llevar el número +1. A los pares de bases
que se extienden en la dirección de la transcripción, (es decir, hacia el extremo
5’ del molde de DNA o corriente abajo) se les asigna números positivos y
aquellos que se extienden en la dirección opuesta (o sea, hacia 3’ o corriente
arriba) se les asigna números negativos.
La subunidad σ de una molécula de DNA
polimerasa se une a una secuencia de
DNA promotora y se forma un complejo
cerrado, en el cual las cadenas de DNA
tienen sus bases apareadas. La
polimerasa separa las cadenas en una
distancia de 10-12 pb alrededor del
sitio de iniciación de la transcripción,
con lo que se forma un complejo abierto.
Después de que se han polimerizado 10
ribonucleótidos, el factor σ se libera y el
núcleo polimerásico continúa la
transcripción de la cadena molde.
 2° ELONGACION
 La fase de elongación de la síntesis de RNA comienza después de la formación del primer
enlace fosfodiéster. Un cambio importante es la pérdida del factor σ.
 La región que contiene la RNA Pol, el DNA y el RNA se denomina burbuja de transcripción.
 El RNA recién sintetizado forma una hélice híbrida con la hebra de DNA molde, se cree que
está hélice RNA-DNA tiene una longitud de ~12pb.
 3° TERMINACION
En la fase de terminación, cesa la formación
de enlaces fosfodiéster, se disocia el híbrido
DNA-RNA, se rebobina la región fundida del
DNA y la RNA Pol se libera del DNA.

Terminación independiente de rho ():

 Las regiones transcritas de los moldes
de DNA contienen señales de
terminación (“stops signals”). La más
sencilla es una región palindrómica rica
en GC seguida de una región rica en
AT. El transcrito de RNA de este DNA
palindrómico es autocomplementario.
Por lo tanto sus bases se pueden
emparejar para formar una estructura
secundaria en tallo-asa estable en el
transcrito de RNa.
 Este tallo-asa viene seguida de una
secuencia de cuatro o más residuos U.
El transcrito de RNA finaliza en ellos o
justamente después.
Terminación dependiente de rho ():
Algunos sitios de terminación requieren la participación de un factor adicional rho (), este detecta
señales de terminación adicionales que no son reconocidas por la RNAP sola. Rho es una ATPAsa
que desaloja del sitio activo de la RNA Pol al extremo 3’ de una cadena de RNA en crecimiento.
 TRANSCRIPCION EN EUCARIOTAS
 El núcleo de las células eucariotas contiene 3 tipos de RNA Pol que difieren
en la especificidad del molde, localización y susceptibilidad frente a los
inhibidores. Las RNA Pol eucariotas son similares a las procariotas en lo que
respecta a la catálisis del ataque nucleofílico del 3’OH de la cadena de RNA
en crecimiento, al átomo del fósforo del ribonucleósido trifosfato entrante.
 Cada una de las 3 RNA pol eucariotas es considerablemente más compleja
que la RNA Pol de E. coli. Las tres contienen 2 subunidades grandes y 2
más pequeñas, con homología con las subunidades α2, β y β’ de la RNA Pol
de E. coli, así como también varias subunidades pequeñas adicionales.
 La RNA Pol II suele iniciar la transcripción de los genes en un par de
bases específico o pares de bases alternativos vecinos en un molde de DNA.
El nucleótido 5’ que tiene el cap en un RNAm concuerda con el nucleótido de
la cadena molde en el cual se inicia la transcripción.

Tipo RNA Transcrrito Localización Req. Iónicos Efecto de la -Amanitina

I RNAr 5.8S,18S y 28S Nucleolo Mg2+ Insensible
II RNAm y RNAsn Nucleoplasma Mg2+ Fuertemente inhibida
III RNAt, RNAr 5S Nucleoplasma Mn2+ Inhibida a alta concentración
 El promotor es relativamente corto
• Consiste de la caja TATA (caja de Hogness)
• Importante en determinar el punto preciso de inicio de la transcripción
 El centro promotor por sí mismo produce un bajo nivel de transcripción
• Este es llamdo transcripción basal
 Los elementos regulatorios afectan la unión de la RNA polimerasa al promotor
• Hay dos tipos
• Activadores (Enhancers)
• Estimula la transcripción
• Represores (Silencers)
• Inhiben la transcripción
• Ellos varían su localización pero son encontrados a veces en la región -50 a -100
muchas veces.
1) INICIO DE LA
TRANSCRIPCION
La síntesis de un RNA dado se produce
cuando el gen respectivo, mejor dicho,
sus secuencias reguladoras y el
promotor, se activan por proteínas
especiales, llamadas factores de
transcripción.

Los factores de transcripción específicos

interactuan con el regulador del gen.
Los factores de transcripcion basales son
requeridos por el promotor, pues se unen
a la secuencia TATA para comenzar la
síntesis del RNAm.

EL TFIID se halla integrado por varias

subunidades, una llamada TBP (TATA
binding protein) y las otras TAF (TBP-
associated factors).
El proceso se inicia al unirse el TFIID al
promotor, por medio de la TBP.
Esta unión altera la estructura de la cromatina en el
promotor, que abandona su forma rectilínea y se pliega
hasta formar un ángulo de unos 100º.
El cambio atrae tanto a los restantes factores de
transcripción basales como a la RNA polimerasa II.

La RNA polimerasa II es fosforilada por el TFIIH. A

continuación la DNA polimerasa II fosforilada se
desprende de los factores de transcripción y abre la
doble hélice del ADN en el sector del gen contiguo al
promotor –se forma la burbuja de transcripción-, con lo
cual se inicia la síntesis de RNA.
 Para alargar el ARNm. La RNA
polimerasa II necesita dos
factores adicionales, los factores
de elongación TFSII y TFSIII
(elongina).

 La RNA Polimerasa II agrega a

la molécula de ARN unos 50
nucleótidos por segundo.

 En los geens que codifican el

ARNm aúno no se ha
identificado la ecuencia de
nucleótidos responsable de la
terminación de la transcripción.
 MODIFICACIONES
POSTRANSCRIPCIONALES

Intron 1 Intron 2 Intron 3 Intron 4 Intron 5

Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Exon 5 Exon 6
Transcripción
(a) Transcrito primario

RNA splicing
Eliminación de intrones

(b) RNA editado

Procesamiento
Cap Cola poli A
(c) RNA maduro
Traducción

(d) Proteína
Agregado del capuchón (cap) en el extremo 5’
Una enzima específica incorpora una guanosina trifosfato (GTP) al extremo 5’ del transcripto.
La enzima metiltransferasa toma dos grupos metilo de la S-adenosilmetionina- y los trransfiere al ARNm:
uno a la guanania del cap – se forma así la 7-metilguanosina- y el otroal nucleótido del RNAm.
Agregado de la cola de poli-A en el extremo 3’

 Al extremo 3’ del RNAm se le agrega una secuencia de ~250 adeninas – llamadas poliA.
 Antes que la RNA polimerasa II alcance la secuencia de terminación del gen, varios factores
específicos reconocen en el transcripto primario una secuencia llamada señal de poliadenilación
formada por los nucleótidos AAUAAA.
 Los factores CPSF (cleavage and polyadenylation sepcificity factor), CSTF (cleavage stimulation factors),
CFI y CFII (cleavage factor). Uno de ellos corta el ARNm unos 20 nucleótidos después de la señal de
poliadenilación y el transcripto primario se separa del ADN.
Corte y Empalme “Splicing”
Los agentes responsables de los cortes y empalmes en el ARNm son las ribonucleoproteínas pequeñas
nucleares (RNAsn= small nuclear RNA), que poseen ARN rico en uridinas.
Las RNApn que participan son las llamadas U1, U2, U4, U5 y U6, las cuales concurren al sector del
transcripto primario que va a ser procesado y forman un complejo macromolecular denominado
espliceosoma (por splicing, empalme)
 CODIGO GENETICO
 Se llama código genético al conjunto de correlaciones entre cada triplete de
bases del RNAm (codón) y el correspondiente aminoácido de la proteína.

CARACTERISTICAS DEL CODIGO GENETICO:

a. El código genético es casi universal. En todos los organismos estudiados
(eucariotas, procariotas y virus) se observa la misma correspondencia entre
tripletes y aminoácidos. Existe variaciones en el código genético para la
síntesis de proteínas en mitocondrias.
b. El código genético es degenerado. Como hay 61 tripletes que codifican los
20 aminoácidos, muchos aminoácidos tienen más de un codón. Los
diferentes codones para un aminoácido dado se denominan codones
sinónimos.
c. El código genético no es ambiguo: cada triplete codifica un solo aminoácido
d. El código incluye un codón de “arranque” (iniciador) AUG, que especifica
metionina; y tres codones –UAA, UAG y UGA- que no especifican
aminoácidos, sino que constituyen señales de “stop” o fin de traducción
(terminador) en el extremo de las cadenas de RNAm.
e. Los tripletes se encuentran yuxtapuestos en el RNAm.
 CODIGO GENETICO
Segunda base

U C A G

U UUU Fenil- UCU UAU UGU U

Tirosina Cisteina
UUC alanina UCC UAC UGC C
Serina
UCA Codon stop
A
UUA UAA Codon stop UGA
Leucina UCG G
UUG UAG codon stop UGG Triftópfano

CCU CGU
C CUU CAU Histidina U
primera base

CUC CCC CAC CGC C

Tercera base
Leucina Prolina Arginina
CUA CCA CAA CGA A
Glutamina G
CUG CCG CAG CGG
AUU ACU AAU AGU U
AUC Isoleucina Asparragina AGC Serina C
A ACC AAC
Treonina
AUA ACA AGA A
AAA G
AUG Metionina ACG Lisina AGG Arginina
AAG
codon inicio
GUU GCU GAU ácido GGU U
G GUC GCC GAC aspártico GGC C
Valina Alanina Glicina
GUA GCA GAA GGA A
ácido G
GUG GCG GAG GGG
Glutámico
 TRADUCCION
a. Es Unidireccional. En la biosíntesis de proteínas el RNAm se traduce del extremo 5’ al 3’.
b. Es Reiterativa. Un mismo RNAm, puede estar siendo traducido por varios ribosomas.
c. Es Selectiva. No todo el RNAm se traduce; se descartan los extremos inicial y final.
d. Requiere un intérprete o adaptador: esta molécula es el RNA de transferencia (RNAt)
 REQUERIMIENTOS DE LA TRANSCRIPCION

EN PROCARIOTAS EN EUCARIOTAS

• Ribosomas • Ribosoma
• RNAm • RNAm
• RNAt • RNAt
• Aminoacil RNAt sintetasa • Aminoacil RNAt sintetasa
• IF1, IF2, IF3 • eIF2, eIF3, eIF4, eIF5
• Peptidil transferasa, EFTu, EFTs • EF1α, EF2
• RF • eRF1, eRF3
• Aminoácidos • Aminoácidos
• RNAt - formil metionina • RNAt(i)-metionina
• GTP • GTP
• ATP • ATP
• Codon de inicio: AUG • Codon de inicio: AUG
• Codones de terminación: UAA, UAG, • Codones de terminación:
UGA UAA, UAG, UGA
• Señales de iniciación: • Señales de iniciación:
secuencia Shine-Delgarno secuencia Kozak
 Ribosoma
• La eficiencia de la traducción
se incrementa mucho por la
unión del RNam y los
aminoacil-RNAt al ribosoma.
• Este organelo dirige la
elongación de un polipéptido a
una velocidad de 5
aminoácidos agregados por
segundo.
• Estas estructuras complejas
se desplazan físicamente a lo
largo de la molécula del
RNAm y catalizan la unión de
los aminoácidos para formar
las cadena proteicas. También
fijan los RNAt y distintas
moléculas accesorias, para la
síntesis de proteínas
 RNAs Inicio del mensaje genético
Fin

Los 3 tipos de moléculas de RNA llevan

a cabo funciones diferentes pero
cooperativas en la síntesis de proteínas.
Cap Cola
El RNA mensajero (RNAm) transporta la
RNAm
información genética desde el DNA, bajo
la forma de una serie de “palabras” en
código de tres bases, cada una de las
cuales especifica un aminoácido en
partciualr
El RNA de transferencia (RNAt) es la
clave para descifrar las palabras del
código del RNAm. Cada tipo de
aminoácido tiene su propio tipo de RNAt,
al que se une para ser transportado hasta
el extremo creciente de una cadena
polipeptídica.
El RNA ribosómico (RNAr) se asocia con
proteínas para formar ribosomas..
 ETAPAS DE LA TRADUCCION Cada aminoácido se une
a su propio RNAt con la
ayuda de una enzima
1) Activación de los aminoácidos específica y ATP.
2) Iniciación
3) Elongación
4) Terminación
Iniciación de síntesis
5) Modificaciones postraduccionales del polipéptido.

El RNAm, primer RNAt,

y las subunidades
ribosomales se unen.

.
Elongación
Los sucesivos RNAt agre-
gas sus aa a la cadena
polipeptídica cuando el
RNAm se mueve através
del ribosoma, un codón a
la vez.

Terminación

El ribosoma reconoce un
codon stop. El polipéptido
es terminado y liberado.
 1º ACTIVACION DE LOS AMINOACIDOS
• La fijación del aminoácido adecuado al RNAt, es catalizado por una RNAt aminoacil
sintetasa. Estas enzimas acoplantes unen el aminoácido en el extremo 3’ terminal del
RNAt, mediante una reacción de dos pasos que requiere ATP:
Aminoácido + ATP + RNAt Aminoacil-RNAt + AMP + 2 Pi
 2° INICIACION
• Para comenzar el montaje de un complejo bacteriano de traducción
tienen lugar interacciones secuenciales entre proteínas específicas,
denominadas factores de iniciación (IF), y la subunidad ribosómica
menor (30S).
• Luego se une el complejo preiniciación resultante y el RNAt-fMetiMet
con el RNAm en un sitio específico, que suele estar ubicado muy
cerca del codón de iniciación AUG. Esta unión es asistida por IF1 e
IF3 produce el complejo de iniciación 30S.
• En la mayoría de las bacterias la subunidad ribosómica menor
identifica los codones de inicio mediante interacciones entre el RNAr
menor (16S) y una secuencia de 8 nucleótidos en el RNAm
denominada secuencia de Shine-Delgarno.
• El montaje de un complejo de iniciación 70S completo se logra por la
unión de la subunidad ribosómica mayor, un paso dependiente de
energía que se obtiene por hidrólisis de GTP unido a IF2; en este
proceso se elimina IF1, IF2-GDP y Pi.
• En el complejo, el RNAt iniciador cargado se ubica en el sitio P sobre
el ribosoma.
 3° ELONGACION
• El complejo ribosómico bacteriano 70S está entonces listo para comenzar la
tarea de agregar paso a paso aminoácidos mediante la traducción
enmarcada del RNAm.
• Se requiere de factores de elongación (EF), para realizar el proceso.
• Los pasos clave de la elongación son la entrada de cada RNAt-aminoacil
consecutivo, la formación del enlace peptídico y el desplazamiento o
translocación del ribosoma, respecto del RNAm.
• El segundo RNAt-aminoacil ingresa en el ribosoma como un complejo
ternario asociado con un EF-Tu-GTP y se une al sitio A sobre el ribosoma.
• Con el RNAt-Met de inicio en el sitio P y el segundo RNAt-aminoacil fijado
en el sitio A, el grupo amino del segundo aminoácido reacciona con la
metionina sobre el RNAt de inicio, para formar un enlace petídico. Esta paso
es catalizado por la peptidiltransferasa.
• Por último, el ribosoma se desplaza a lo largo del RNAm por una distancia
equivalente a un codón, con el agregado de cada aminoácido. Este paso de
translocación es catalizado por la EFG-GTP. Después de la unión peptídica
el RNAt-Meti, ya sin la metionina activada, se desplaza hacia un sitio de
salida sobre el ribosoma y pronto es descartado.
• Al mismo tiempo, otro complejo ternario portador del próximo aminoácido
que se debe agregar, ingresa en el ribosoma y el ciclo continúa.
Peter J. Russell, iGenetics: Copyright © Pearson Education, Inc., publishing as Benjamin Cummings.
 3° ETAPA: TERMINACION
• La fase final de la síntesis proteica, requiere señales moleculares muy
específicas que deciden el destino del complejo RNAm-ribosoma-peptidil
RNAt.
• Existen dos factores de terminación (liberación) específicos en bacterias; los
factores RF1 y RF2, cuyas formas se cree son similares a las de los RNAt
(“mimetismo molecular”) actúan por reconocimiento de los mismos codones
de detención. RF1 reconoce UAG
y RF2 reconoce UGA; ambos factores
reconocen UAA.
• El tercer factor de liberación RF3,
favorece la escisión del peptidil
RNAt, con liberación de la cadena
proteica completa..
• Factores de liberación adicionales
favorecen la disociación del ribosoma,
con liberación de las subunidades, el
RNAm y el RNAt para otra ronda de
síntesis proteica.
Acción de drogas antimicrobianas sobre la síntesis proteica

Polipéptido
naciente
Sitio de Tunel
síntesis Polipéptido naciente
proteica Cloranfenicol
Se une a subunidad 50S, e inhibe
la formación del enlace peptídico

Sitio de síntesis proteica

Esquema tridimensional de la síntesis

de proteínas en procariotas, mostrando Eritromicina
las subunidades 30S y 50S. Se une a subunidad 50S, y previene
movimiento de translocación
RNA
mensajero

Ribosoma
Procariótico 70 S Tetraciclinas

Estreptomicina TRADUCCION Interfiere con la unión del RNat al

complejo RNAm-ribosoma
Cambia la forma de la subunidad
30S, causando que eI codón sea
leido incorrectamente Dirección de movimiento del ribosoma

En el diagrama la flechas negras indican los diferentes puntos en los cuales el cloranfenicol, eritromicina,
tetraciclina y estreptomicina ajercen su efecto.
 MODIFICACIONES POSTRADUCCIONALES
• Modificación N-terminal o C-terminal
– Remoción de N-formilmetionina
– N-acetilacion (50% de proteínas eucarióticas)
• Procesamiento N-terminal y C-terminal
– Maduración, procesamiento proteolítico
• Modificación de aminoácidos individuales
– Fosforilación, Glucosilación, Metilación, Farnesilación