Reacción en cadena de la polimerasa

(PCR) Y la RT-PCR

Por: Andrea Carolina Amín Puello

Javier Andrés Rincón Orozco
Juliana Ramirez Castro
Maria Fernanda Álvarez Bte
Biología celular I
2019-1
 “Utilizó la PCR para
Reacción en cadena de la polimerasa amplificación del gen ß-
Kary Mullis,
hemoglobina
Nobel de humana,
Química y el
(PCR) diagnóstico prenatal de la
en 1993
anemia falciforme.”
Es una técnica de laboratorio que
permite la amplificación in vitro de
un fragmento específico de ADN.

El objetivo de la PCR es producir

suficiente ADN de la región
blanco para que pueda
analizarse; ya que este ADN
amplificado permite secuenciar,
visualizar por electroforesis en gel
o clonar un plásmido para otros
experimentos.
 Reactivos, productos y herramientas para
la PCR

Muestra de ADN ADN polimerasa

PCR Buffer
(Taq Polimerasa)

Cebadores o Primers Desoxiribonucleótidos Termociclador

libres Tubos de
microcentrífuga o
Eppendorf
 Etapas de la PCR
3. Extensión: Se eleva la temperatura
1.Desnaturalización:
(68-72°C) para que Se lala calienta
polimerasa la
2. Alineamiento:
reacción (90-94°C) Disminuye
para romper losla
termoestable
temperatura busque para
(50-65°C) su sustrato
alinear de
los
puentes
cadena de
(ADN hidrógeno
molde y separar
+ cebadores) lay
cebadores
doble cadenacon la molécula
de ADN. blanco.
sintetice la nueva cadena de ADN
utilizando los nucleótidos libres de la
solución.
 Este proceso se repite de unas 30 a 40 veces y al final se
pueden obtener grandes cantidades de ADN amplificado
ya que este tiene un crecimiento exponencial en esta
técnica.
 Adición a la PCR RETROTRANSCRIPCION
convencional
(RT-PCR)
 En RT se emplea a una enzima
llamada retro transcriptasa que
posee la capacidad catalítica de
sintetizar ADN a partir de ARN
produciendo ADN complementario La PCR se transforma
en un método de
 Se toma como molde un ARN amplificación indirecta
mensajero del ARN

 A esta reacción le sigue una PCR

que copia el ADN de cadena
sencilla en moléculas de doble
cadena y luego estás se amplifican
y se producen muchas copias.
 Aplicación de la PCR y RT-PCR
en la medicina y la investigación

Detección Mutaciones Identificación

Muta génesis humana y
cualitativa de un relacionadas al
dirigida ciencias forenses
segmento de ADN. cáncer

Expresión de Identificación Genética de

Detección de de especies e
genes
favoreciendo al
virus ARN o incluso Poblaciones
diagnóstico
ADN bacterias
fenotípico
Recuperado de Youtube
Canal:
Link: https://www.youtube.com/watch?v=TalHTjA5gKU
 Bibliografía
 CanalDivulgación. (2014). CR: Reacción en Cadena de la Polimerasa
(divulgación científica IQOG-CSIC).
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Básicos.
 Castro, J. M., Ramirez, O. G., & Figueroa, B. E. (2013). Los mé´todos
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