TEMA 9.

GENERALIDADES DE ENZIMAS

ENZIMAS: Catalizadores proteínicos que incrementan la rapidez de

una reacción química y que no se consumen durante la reacción que
catalizan.
Las enzimas son necesarias para que las reacciones bioquímicas:

• Se produzcan a una velocidad adecuada para la célula

• Se dirijan hacia rutas útiles y necesarias según necesidades

energéticas y necesidad de producción de distintas sustancias.

• Gran poder catalítico

• Alto grado de especificidad

• Actúan en soluciones acuosas en condiciones determinadas de Tª y

pH

• Su actividad puede regularse

 Medicina Transaminasas

Industria
Química Penicilina

Fermentaciones
Transformación
Quesos
de Alimentos
Vinos

Agricultura Rhyzobium
PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS:
A. SITIOS ACTIVOS:
Es un bolsillo o hendidura tridimensional compuesto por residuos de
aminoácidos de diferentes partes de la molécula que producen un
microambiente específico.

Es relativamente pequeño en comparación con el volumen total de la enzima.

Los sustratos se unen mediante múltiples interacciones débiles. Las

interacciones proveen de la energía necesaria para reducir la energía de
activación.

Proporciona la especificidad a la enzima

 B. EFICIENCIA CATALITICA:

CATÁLISIS POR PROXIMIDAD: para que las moléculas reaccionen, deben acercarse
hasta ubicarse dentro de la distancia formadora de enlace de otra, mientras mas alta sea su
concentración con mayor frecuencia se encontraran una con otra y mayor será el índice de su
reacción.

CATÁLISIS ÁCIDO-BASE
•Reacciones por transformación intermediarios cargados inestables por
captación o cesión de H+
•A pH fisiológico [H+] y [OH-] bajas Baja velocidad
•Enzimas donantes o aceptores de [H+] Aumentan velocidad

CATÁLISIS COVALENTE
Se forman enlaces covalentes transitorios E-S para facilitar la
formación de producto. Ej: Transaminaciones
A-B+X: A-X+B A+X:+B

CATÁLISIS POR IONES METÁLICOS

• Participan de diferentes formas en la catálisis:
• Fijando y orientando adecuadamente al sustrato para que reaccione
• Estabilizando estados de transición de compuestos cargados
• Intervienen en reacciones redox cambiando su propio estado de oxidación
C. ESPECIFICIDAD:

Modelo llave –cerradura

(Fischer 1894)

Modelo del ajuste inducido

(Koshland 1958)
D. COFACTORES: Algunas enzimas se relacionan con un cofactor no proteínico que se
necesita para la actividad enzimática
Contribuyen alineamiento enzima-sustrato
Sitio adicional de enlace
COFACTOR: metales o iones inorgánicos pequeños, Fe, Mg, Mn, Zn, Co

COENZIMA: moléculas orgánicas pequeñas

APOENZIMA + COFACTOR = HOLOENZIMA

 Enfermedades
VITAMINAS FUNCIONES
carenciales
•C (ácido •Coenzima de algunas peptidasas.
ascórbico) Interviene en la síntesis de colágeno
•Escorbuto

•B1 •Coenzima de las descarboxilasas y

(tiamina) de las enzima que transfieren grupos •Beriberi
aldehídos
•Dermatitis y
•B2 •Constituyente de los coenzimas FAD
y FMN
lesiones en las
(riboflavina)
mucosas
•Fatiga y trastornos
•B3 (ácido •Constituyente de la CoA
pantoténico) del sueño
•Constituyente de las coenzimas NAD
•B5 (niacina)
y NADP
•Pelagra

•B6 •Interviene en las reacciones de

•Depresión, anemia
(piridoxina) transferencia de grupos aminos.
•B12 •Coenzima en la transferencia de
•Anemia perniciosa
(cobalamina) grupos metilo.
•Coenzima de las enzimas que
•Biotina transfieren grupos carboxilo, en •Fatiga, dermatitis
metabolismo de aminoácidos.
Coenzimas

Adenosine Triphosphate (ATP)

Coenzyme A (CoA)

Nicotinamide Adenine Nicotinamide Adenine

Dinucleotide (NAD+) Dinucleotide Phosphate
(NADP+) Flavin Adenine Dinucleotide
(FAD)
E. REGULACION: La actividad enzimática puede ser regulada; esto es, las
enzimas se activan o se inhiben, de modo que la tasa de formación del producto
en particular satisface las necesidades de la célula

F. LOCALIZACION DENTRO DE LA CELULA: Organelas especificas

dentro de la célula. Esta distribución en compartimientos sirve para aislar al
sustrato o al producto de la reacción de otras reacciones competitivas
 CLASIFICACION DE ENZIMAS:
No. Clase Tipo de reacción que Ejemplo
catalizan

Deshidrogenasas
1 Oxidorreductasas De óxido reducción Peroxidasa
(transferencia de e-) Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas

Reducción: ganancia de electrones (hidrógeno o pérdida de oxígeno)

Oxidación: pérdida de electrones (hidrógeno o ganancia de oxígeno).

La Oxidación y la Reducción son reacciones acopladas (REDOX)

 1. OXIDO-REDUCTASAS
( REACCIONES DE OXIDO-REDUCCIÓN).

Si una molécula se reduce, tiene que haber otra que se oxide

No. Clase Tipo de reacción que Ejemplo
catalizan
Deshidrogenasas
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-) Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas

2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas

Transaminasas
 2. TRANSFERASAS
(TRANSFERENCIA DE GRUPOS FUNCIONALES)

•Grupos aldehídos
Succinato Deshidrogenasa
•Grupos acilos
Citocromo c oxidasa.
•Grupos glucosilos
•Grupos fosfatos (kinasas)
No Clase Tipo de reacción que Ejemplo
. catalizan
Deshidrogenasas
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de Peroxidasa Oxidasas
e-) Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas

Hidrólisis, con Pirofosfatasa

3 Hidrolasas transferencia de grupos Tripsina
funcionales del agua Aldolasa
 3. HIDROLASAS
(REACCIONES DE HIDRÓLISIS)

Transforman polímeros en monómeros.

Actúan sobre:
•Enlace éster
•Enlace glucosídico
•Enlace peptídico
•Enlace C-N
No Clase Tipo de reacción que Ejemplo
. catalizan
Deshidrogenasas
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-) Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
3 Hidrolasas Hidrólisis, con transferencia de grupos Pirofosfatasa
funcionales del agua Tripsina
Aldolasa

4 Liasas Lisis de un substrato, (Sintasas)

generando un doble enlace, o
Adición de un substrato a un Descarboxilasa
doble enlace de un 2o. pirúvica
substrato
4. LIASAS
(ADICIÓN A LOS DOBLES ENLACES)

•Entre C y C
•Entre C y O
•Entre C y N
No. Clase Tipo de reacción que Ejemplo
catalizan
Deshidrogenasas
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-) Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
3 Hidrolasas Hidrólisis, con transferencia de grupos Pirofosfatasa
funcionales del agua Tripsina
Aldolasa
4 Liasas Lisis de un substrato, generando un (Sintasas)
doble enlace, o Descarboxilasa pirúvica
Adición de un substrato a un doble
enlace de un 2o. substrato
(Sintasa)

5 Isomerasas Transferencia de grupos en Mutasas

el interior de las moléculas Epimerasas
para dar formas isómeras Racemasas
5. ISOMERASAS
(REACCIONES DE ISOMERIZACIÓN)
No. Clase Tipo de reacción que Ejemplo
catalizan
Deshidrogenasas
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e- Peroxidasa Oxidasas
) Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
3 Hidrolasas Hidrólisis, con transferencia de grupos Pirofosfatasa
funcionales del agua Tripsina
Aldolasa
4 Liasas Lisis de un substrato, generando un (Sintasas)
doble enlace, o Descarboxilasa pirúvica
Adición de un substrato a un doble
enlace de un 2o. substrato
(Sintasa)
5 Isomerasas Transferencia de grupos en el Mutasas
interior de las moléculas para Epimerasas
dar formas isómeras Racemasas
6 Ligasas Formación de enlaces C-C,
C-S, C-O y C-N. Mediante Sintetasas
reacciones de condensación,
acopladas a la ruptura del
ATP
6. LIGASAS
(FORMACIÓN DE ENLACES, CON APORTE DE ATP)

•Entre C y O
•Entre C y S
•Entre C y N
•Entre C y C
Inhibidores
Reactivos químicos específicos que pueden inhibir
a la mayor parte de las enzimas.

Irreversibles
INHIBIDORES

Reversibles

• Inhibición permanente
• Unión irreversible por medio de enlaces covalentes.
• Modificaciones químicas de los gps. catalíticos.
• Modificada la enzima, está siempre inhibida.

Para distinguirlo de los reversible se someten a diálisis y si no

se separan enzima e inhibidor, éste es permanente.
Inhibidor Irreversible
Fluorofosfato de
diisopropilo (DFP)

Acetilcolina

Acetato + Colina
 Inhibidor Reversible
• La unión del inhibidor y la enzima es reversible.
• Al quitar el inhibidor del medio, se recupera la actividad.

Hay 3 tipos:
Competitiva
No Competitiva
Acompetitiva (Alostérica)
Inhibición Competitiva

Vmax igual
KM diferente
Inhibición No Competitiva

Vmax diferente
KM igual
 Cinéticas de Inhibición

1
V
No competitivo
Vmax diferente
KM igual
Competitivo
Vmax igual
KM diferente

0 1/[S]
Inhibición Acompetitiva
LACTATO DESHIDROGENASA
Hígado, Corazón
Inmunoblotting LDH-1
Uso de sustratos específicos LDH1/LDH2 = 0.85 Normal >1 Enfermo
 ASPECTOS CLÍNICOS DE LA ENZIMOLOGÍA

1. Determinación de actividades enzimáticas para

el diagnostico clínico
Mejor conocimiento molecular metabolismo
Desarrollo de métodos de análisis enzimáticas

2. Herramientas analíticas
Purificación de enzimas

3. Terapia enzimática
Industria Biotecnológica

4. Inhibidores enzimáticos (Fármacos)

Conocimiento estructural y funcional
 DETERMINACIÓN DE ACTIVIDADES ENZIMÁTICAS PARA EL
DIAGNOSTICO CLÍNICO

a) La enzima debe estar presente en fluido biológico

b) La enzima debe ser fácil de ensayar y automatizar la medida

c) Los valores de actividad entre individuos sanos y enfermos

deben ser significativos y debe haber buena correlación con los
valores patológicos.

d) La enzima debe ser estable

Tipos de fluidos: Suero (Más común) y Orina

LCF, Pleura, Sinovial, etc
 SUERO

1.ENZIMAS ESPECÍFICAS

Enzimas su función radica en el plasma

Ej Enzimas de la coagulación, activación del complemento, metabolismo
de lipoproteínas, etc

2. ENZIMAS NO ESPECÍFICAS

Enzimas que son secretadas por los tejidos.

Ej. Amilasas, lipasas, fosfatasas, etc.

Enzimas intracelulares.
Daño Tisular
Creatin quinasa 50.000 veces daño en el musculo.
Proliferación Celular (Neoplasia)
Aclaramiento renal deficiente
ENZIMOLOGIA CLÍNICA DEL INFARTO DE MIOCARDIO
Pruebas enzimáticas :
1. Evidencia de la producción de un infarto
2. Seguimiento del progreso y la recuperación tras cirugía

CREATINA QUINASA
ASPARTATO AMINOTRANSFERASA
LACTATO DESHIDROGENASA

Creatina Quinasa mas específica

LDH se puede diferenciar por electroforesis