ENZIMAS

Enzimas
Son los catalizadores de las reacciones de los sistemas biológicos,
uniéndose a la molécula o metabolito que se va a transformar, el
sustrato.
 Enzimas
Poseen un alto grado de especificidad frente a sus sustratos.
Discriminando fácilmente entre sustratos con estructuras similares.

 La zona de unión al sustrato se llama sitio activo.

 Especificidad enzimática
MODELO DE LLAVE-CERRADURA
MODELO DE ACOPLAMIENTO INDUCIDO
 Enzimas
Funcionan en soluciones acuosas en condiciones muy suaves de
temperatura y pH.
Gracias a la acción de las enzimas se degradan nutrientes, se conserva y
se transforma la energía química y se fabrican las macromoléculas
biológicas a partir de precursores sencillos.
 Enzimas
Con la excepción de un pequeño grupo de moléculas de ARN catalítico todas
las enzimas son proteínas.

La medición de la actividad enzimática en el plasma sanguíneo, eritrocitos o

muestras de tejido, es importante en el diagnóstico de enfermedades.

Las enzimas se han convertido en herramientas prácticas importantes en la

industria química, en el tratamiento de los alimentos y en la agricultura.
 Nomenclatura de las
enzimas
Muchas enzimas se han bautizado añadiendo el sufijo “asa” al nombre
de su sustrato.
UREASA: Cataliza la hidrolisis de urea.
LIPASA: Cataliza la hidrolisis de lípidos.

Otras se han bautizado añadiendo el sufijo “asa” a una palabra o frase

que describe su actividad.
ADN polimerasa: Cataliza la síntesis de ADN.
 Clasificación internacional
de las enzimas
Clasificación de las enzimas según el tipo de reacción catalizada.
 1- Oxidorreductasas
Transferencia de electrones (iones hidruro o átomo de H)
 2- Transferasas
Reacciones de transferencia de grupos
 3- Hidrolasas
Reacciones de hidrolisis
 4- Liasas
Adición de grupos a dobles enlaces, o formación de dobles enlaces por
eliminación de grupos.
 5- Isomerasas
Transferencia de grupos dentro de la molécula dando formas isoméricas
 6- Ligasas
Formación de enlaces C-C, C-S, C-O y C-N mediante reacciones de
condensación acopladas a ruptura de ATP.
 Enzimas

Simples Holoenzimas

Requieren de un
Sólo requieren de componente
aminoácidos para su químico adicional
actividad catalítica. para su actividad
catalítica.
 Holoenzima
Para que estas enzimas actúen como catalizadores es necesario que la
apoenzima se una al cofactor.
Apoenzima o apoproteína: parte proteica de la holoenzima
Cofactor: Parte no proteica de la holoenzima.
- El cofactor puede ser uno o mas iones inorgánicos tales como Fe2+, Mg2+,
Mn2+, Zn2+. O un complejo orgánico denominado Coenzima.
Holoenzima
 Cofactores enzimáticos
Metales y elementos importantes como cofactores enzimáticos.
 Coenzimas
Muchas vitaminas son precursores de coenzimas.
 Inhibidores enzimáticos
Sustancia que puede impedir que la enzima desarrolle su actividad
catalítica, ralentizando o paralizando la actividad enzimática.
Muchos fármacos, antibióticos o conservantes son potentes inhibidores
enzimáticos.

Aspirina (ácido acetilsalicílico) inhibe la enzima que cataliza el primer

paso de la síntesis de prostaglandinas, compuestos que intervienen en
muchos procesos, algunos de los cuales producen dolor.
Inhibidores enzimáticos

Inhibidores

ALOSTÉRICO
ISOSTÉRICOS
S
Inhibidores Alostéricos
Inhibidores Isostéricos
 Inhibidores
Inhibidores reversibles: Establece un equilibrio con la enzima libre, con la
enzima-sustrato, o con ambos. Inhibición transitoria.

Inhibidores irreversibles: Modifica químicamente a la enzima. Se enlazan

permanentemente a la enzima, por lo que la inhibición en completa.
 Inhibidores
Inhibidores reversibles

1- Competitivos

2- No competitivos

3- Anticompetitivos
 Inhibidores
Inhibidores reversibles
1- Competitivos: inhibidor se une al sitio activo de la enzima, impidiendo
la unión al sustrato.
 Inhibidores
Inhibidores reversibles
1- Competitivos:
 Inhibidores
Inhibidores reversibles
2- No competitivos: El inhibidor se une a la enzima independientemente
de que lo haga o no el sustrato. Es decir, no impide la unión al sustrato
pero si impide la unión catalítica.
 Inhibidores
Inhibidores reversibles
3- anticompetitivos: El inhibidor se une únicamente la complejo enzima-
sustrato una vez formado, impidiendo la acción catalítica.
 Inhibidores
Inhibidores irreversibles
CINÉTICA
ENZIMÁTICA
 Reacción enzimática

E:enzima
S:sustrato
P: producto
ES: complejo enzima-sustrato
EP: complejo enzima-producto
 Cinética enzimática
La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas
por enzimas.

Información directa del mecanismo de la reacción catalítica y de la

especificad de la enzima.

Mide afinidad de enzimas por sustratos e inhibidores.

 Cinética enzimática
Los factores que afectan la actividad enzimática son:
1. Concentración de enzima
2. Concentración de sustrato
3. pH
4. Temperatura
 Diagrama de coordenadas
de una reacción química.
Energía libre de Gibbs: Energía necesaria para producir trabajo a
temperatura y presión constante.
La energía libre o entalpía libre de Gibbs se emplea en química para
explicar si una reacción sucederá de manera espontánea o no.
 Diagrama de coordenadas
de una reacción química.
Descripción gráfica del cambio energético de la reacción.
 Diagrama de coordenadas
de una reacción química.
Cuando las moléculas de los reactivos se aproximan, experimentan una
deformación y dan lugar a un estado intermedio transitorio, denominado
Estado de Transición. Dicho Estado de Transición es de muy alta energía y
muy corta duración.
 Diagrama de coordenadas
de una reacción química.
La diferencia entre los niveles de energía del estado basal y del estado de
transición se denomina Energía de activación.
La Energía de Activación se relaciona directamente con la velocidad de
una reacción química. Cuanto más pequeña sea le energía de activación,
más rápida será la reacción química (mayor velocidad de reacción).
 Velocidad de una reacción
Las velocidades de reacción pueden aumentarse añadiendo un catalizador.
La catálisis aumenta las velocidades de reacción disminuyendo las
energías de activación.
Los aumentos de velocidad conseguidos por las enzimas son de 7 a 14
ordenes de magnitud.
 Velocidad de una reacción
La velocidad puede determinarse midiendo la aparición de los productos o
la desaparición de los reactivos.

La velocidad (v) de una reacción viene determinada por la concentración

del sustrato (o sustratos) y por una constante de velocidad (k).
 Velocidad de una reacción
En una reacción de primer orden la velocidad de formación de los
productos es directamente proporcional a la concentración del sustrato.

Una reacción de segundo orden es aquella en la que la velocidad de

formación del producto depende de la concentración de dos sustratos.
(como en una reacción de condensación).
 Velocidad de una reacción
A medida que la reacción transcurre, la velocidad de acumulación del
producto va disminuyendo porque se va consumiendo el sustrato de la
reacción.
La velocidad inicial de la reacción (v0) es igual a la pendiente de la curva de
avance a tiempo cero.
 Efecto de la [S] sobre la
velocidad
Cuando [S] es pequeña, la velocidad de la
reacción es directamente proporcional a la [S].
A mayores concentraciones de sustrato, la
velocidad aumenta a incrementos cada vez
menores en respuesta de [S].
Finalmente se alcanza un punto más allá del
cual se dan incrementos pequeñísimos de
velocidad con el incremento de [S]. Esta
meseta se denomina la velocidad máxima.
 MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN
En 1913, Leonor Michaelis y Maud Menten
desarrollaron esta teoría y propusieron una
ecuación de velocidad que explica el
comportamiento cinético de los enzimas.
 MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN
Reacciones catalizadas enzimáticamente ocurren en dos etapas: En la
primera etapa se forma el complejo enzima-sustrato y en la segunda, el
complejo enzima-sustrato da lugar a la formación del producto,
liberando la enzima libre.
 MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN
k1, k2 y k3 : constantes cinéticas individuales de cada proceso
“constantes de velocidad”. Según esto, podemos afirmar que:
v1 = k1 [E] [S]
v2 = k2 [ES]
v3 = k3 [ES]
 MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN
Se puede diferenciar entre enzima libre (E) y enzima unido a sustrato
(ES), de forma que la concentración total de enzima, [ET], (que es
constante a lo largo de la reacción) es:
[ET] = [E] + [ES]
Como [E] = [ET] - [ES], resulta que:

v1= k1[S] [ET] - k1 [S] [ES]

MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN
Km= (k2+k3)/k1 (km= constante de Michaelis-Menten)

Ecuación de Michaelis-Menten
MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN
Cuando la velocidad de la
reacción= ½ Velocidad máxima,
Km=[S]

Es decir Km es la concentración
de sustrato a la cual la velocidad
de la reacción es la mitad de la
velocidad máxima.
 Km= constante de Michaelis-
Menten
Refleja la afinidad de la enzima por el sustrato.
Km es característico de cada enzima y sustrato
Significado de una Km pequeña: un  valor  numérico  pequeño  de Km refleja 
una alta afinidad de la enzima por su substrato porque a una baja concentración 
del mismo, la enzima a desarrollado ya la mitad de la velocidad máxima.
 
 
Significado de una Km grande: el  valor  numérico  grande  de Km refleja 
una baja afinidad de  la  enzima  por  su  substrato  porque  a  una  concentración 
elevada del mismo, la enzima desarrolla la mitad de la velocidad máxima .
Km= constante de Michaelis-
Menten
 Ejercicio
Las velocidades de reacción a varias concentraciones de sustrato para una
reacción catalizada por una enzima hipotética son:

-¿Cuál es la velocidad máxima para esta reacción?

-¿Por qué la velocidad permanece constante a una [S] mayor a 5x10-4 M?
 Ejercicio
Las velocidades de reacción a varias concentraciones de sustrato para una
reacción catalizada por una enzima hipotética son:

-¿Cuál es el Km de la enzima?
-Calcular la velocidad de la reacción para [S]=1x10-6 y [S]=1x10-1
 Ejercicio
Las velocidades de reacción a varias concentraciones de sustrato para una
reacción catalizada por una enzima hipotética son:

-Calcular la concentración de producto formado en los cinco primeros

minutos de reacción, utilizando 10mL de una disolución de sustrato 5x10-3M
 Ecuación de Lineweaver-
Burk
Esta ecuación es una transformación de la ecuación de Michaelis-Menten
 Ecuación de Lineweaver-
Burk
La representación 1/v frente a 1/s permite determinar a partir de medidas
experimentales parámetros básicos de la cinética enzimática como la
constante de Michaelis-menten y la velocidad máxima de reacción
 Ejercicio
Se midió la cinética de una enzima como función de la concentración de
sustrato, calcular la velocidad máxima y el Km de la reacción.
[S] V
(moles/litro) (umol/minuto)
3 10,4
5 14,5
10 22,5
30 33,8
90 40,5
 Ejercicio
Se midió la cinética de una enzima como función de la concentración de
sustrato, calcular la velocidad máxima y el Km de la reacción.
[S] V 1/[S] 1/V
(moles/litro) (umol/minuto) (moles/litro) (umol/minuto)
3 10,4 0.333 0,0962
5 14,5 0,2 0,069
10 22,5 0,1 0,0444
30 33,8 0,0333 0,0296
90 40,5 0,0111 0,0247
 Ejercicio
Se midió la cinética de una enzima como función de la concentración de
sustrato, calcular la velocidad máxima y el Km de la reacción.

1/[S] 1/V
(moles/litro) (umol/minuto)
0.333 0,0962
0,2 0,069
0,1 0,0444
0,0333 0,0296
0,0111 0,0247
Inhibidor competitivo
Inhibidor no competitivo