Técnicas de análisis

microbiológico del
agua
Acosta Ovando Clarissa Fabiola 2153060927
De La Fuente Vázquez Michelle 2152043397
Noguerón Olmos Karen Mireya 2152031360
Marin Gonzalez Patricia 2142034493
 Agua

● El agua potable, definida como “adecuada para el

consumo humano y para todo uso doméstico
habitual, incluida la higiene personal”, es libre de
microorganismos causantes de enfermedades.
● En algunos países, el agua potable es clasificada
como alimento.
● El agua potable debe contener microorganismos
patógenos sólo en un número tan bajo que el
riesgo de contraer infecciones transmitidas por el
agua esté por debajo de un límite aceptable. (OMS)
 Agua en la industria
farmacéutica

Limpieza de
áreas

Lavado de equipos

Materia prima para la

fabricación de medicamentos
Agua potable: debe cumplir con
los requisitos de versión
vigente de la NOM-127-
SSAA1-1994.Salud Ambiental.
Agua para consumo humano.
Límites permisibles de calidad y
tratamientos a que debe
someterse el agua para su
potabilización.
 ¿Para qué se hacen los
análisis de agua?
● Evaluar la calidad de las aguas
● Detectar la presencia de microorganismos
en las aguas para usos especiales como las
utilizadas en la industria farmacéuticas
● Precisar la presencia de metabolitos
microbianos
 Factores que afectan el
crecimiento microbiano.

Intrínsecos Extrínsecos

● Nutrientes ● Humedad
● pH ● Temperatura
● Temperatura almacenamien
● Presión to
osmótica ● Atmósfera
 Bioindicadores

Múltiples metodologías para detectar contaminación

microbiana:

● Elevado costo
● Largos tiempos de análisis
● Dificultad para aislar microorganismos
Organismos que tienen comportamiento similar
a microorganismos patógenos y cuya presencia
determina la existencia de parásitos y permiten
comparar sus reacciones a cambios en
diferentes factores.
 Características.

Disminuir costos
Mayor eficiencia en el tratamiento y control del agua
Mayor control de las enfermedades asociadas
No deben estar presentes en el agua contaminada
Mayor presencia que la de patógenos
Sobrevivir más tiempo en el agua
Igual o mayor resistentes a factores externos
No hay un indicador ideal
 Indicadores biológicos
más utilizados.

● Bacterias de la flora saprófita intestinal

(Bacteroides fragilis, bacterias mesófilas,
coliformes totales, y fecales, Escherichia
coli y estreptococos fecales)
 Factores que aumentan
los microorganismos
Directa o indirectamente

● Urbanización no controlada.
● Crecimiento industrial.
● Pobreza.
● Ocupación de regiones
deshabitadas.
● Disposición inadecuada de excretas.
● Actividades agropecuarias.
● Disposición inadecuada de aguas
residuales.
 Enfermedades
transmitidas por el agua.
Las enfermedades transmitidas por el agua son de distribución
mundial, causantes de epidemias tanto en países desarrollados
como en vía de desarrollo. Son una de las principales razones de los
4 mil millones de casos de diarrea, que causan anualmente 1,6
millones de muertes en el mundo.

● Anemia
● Diarrea
● Hepatitis
● Malaria
● Envenenamiento por plomo
● Cólera
● Sarna
● Ceguera
 El análisis microbiológico del agua se puede
llevar a cabo por diversos métodos:

Siembra en profundidad
Siembra por extensión
Método del número más probable
Filtración
Biología molecular (como PCR)
 Coliformes y calidad del agua

-Indicador muy utilizado para detectar contaminación microbiana del

agua

- Su presencia en el agua indica una probable contaminación fecal

Bacterias coliformes:
-Bacterias Gram(-)aerobias o anaerobias facultativas
-Con forma de bastones que no formas esporas
-Fermentan la lactosa y forman un gas dentro de las 48 h de colocadas
en caldo de lactosa a 35°C
-Coliforme fecal predominante: E coli(no apta para su consumo humano)
 Métodos para determinar bacterias
coliformes en agua

Método de filtración por membrana

-Equipo de filtración(esterilizado)
-Colocar la membrana filtrante 100mL de agua Medio selectivo para
estéril(retención de bacterias) bacterias Gram(-) que
consumen lactosa:eosina
azul de metileno(EMB)

EMB también es diferencial:

Muy fermentativas: E
coli(forman colonias con
centros mas obscuros)
Poco fermentativas:Proteus
 Método del sustrato cromogénico

-Cromogénico Los medios de cultivo contienen nutrientes

indicadores que,hidrolizados por las enzimas específicas, provocando un
cambio de color en el medio.
-Coliformes totales y simultáneamente E.coli de forma específica.
-Se basa en las actividades enzimáticas especificas :
 Método Colilert-Presencia/Ausencia de
Coliformes y E.coli

Emite floorescencia
cuando es iluminado por
la luz UV a 365 nm

-Prueba de enzima-sustrato(reactivos
-Agregar el blíster al frasco (estéril y
específicos
trasparente) con 100 mL de agua
-Presencia o ausencia de coliformes
-Homogenización de la muestra.
y E.coli.
-Incubacion:35°C,24 horas.
-No es necesario hacer
confirmaciones posteriores.
 Límites
microbiológicos.
● Agua purificada (<100 UFC/mL)
Agua para inyectables (<10 UFC/mL)
Agua altamente purificada (<10
UFC/mL)
 Tratamiento del agua.
Cámara
Agua Cribad Sedimentaci de mezcla
cruda o ón del
floculante

Canales de Cámara
Clarificado
sedimentaci de
r
ón floculació
n

Cloració Almacenamien
n to
 Recolección de muestras para las
pruebas microbiológicas
-NO menos importante: Realizar con precaución para evitar todas las
fuentes de contaminación posible
Técnica: de muestreo: varia según la naturaleza del agua a analizar

Volumen de la muestra: Estará en función de la técnica microbiológica a analizar

Por ejemplo: método de membrana filtrante y método Colilert(100mL)

Utilizar frascos de vidrio de boca ancha esterilizados o bolsas de plástico

desechables estériles de capacidad suficiente.
 Rotulación

. :Almacenamiento :una vez tomada la muestra debe remitirse cuanto antes al laboratorio. Es
conveniente realizar el análisis el mismo día(podrá demorarse hasta 24 h,cuando haya sido
conservada en refrigeración.
-
 Procedimiento de recolección de
muestra de agua de un grifo
1 2 1) Lavarse las manos adecuadamente o usar
guantes de latex.
- 2) Sanitizar la boquilla del grifo con alcohol al 70%
(grifo cerrado) .
3 4
3) Dejar correr el agua durante 1 o 2 minutos

4) Recolectar la muestra sin tocar la boquilla del

5 6 grifo.

5) Muestra(3/4 de la capacidad del frasco)

6) Todos lo movimientos se realizaran sin

-. 7 8 interrupciones, evitando corrientes de aire.
7 y 8) Rotular el frasco

9 y 10) Colocar la muestra en una caja de

9 10 poliestireno para posteriormente enviarla al
laboratorio.

-
 Bibliografía
● Ríos-Tobón, S., Agudelo-Cadavio, R. & Gutiérrez-Builes, L. (2017, Febrero). Patógenos e indicadores
microbiológicos de calidad del agua para consumo humano. Facultad Nacional de Salud Pública, 35, pp.236-247.