UNIVERCIDAD NACIONAL DE SAN MARTIN

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD- OBSTETRICIA

MICROBIOLOGÍA Y
PARASITOLOGÍA MEDICA
INTEGRANTES:
KELLY BACÓN TENAZOA
EVELIN LASERNA GASLAC
MARICEL GARCIA DEL AGUILA
LIZ ISABEL LINAREZ PANDURO
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
 Características Generales
• Es una bacteria anaeróbica
• Forma de bastón
• Gram positiva
• Formadora de esporas
• Productora de una potente neurotoxina.
• Sus esporas son resistentes al calor
• Se conocen 7 tipos de botulismo (A, B, C, D, E,
F y G),
 Características Generales
• Proteolítico
• Digestión de proteína y producción de HS
• No-proteolíticas
• Fermentan manosa
• Son resistentes a las enzimas del tubo digestivo.
• Medio de cultivo:
Caldo Tarozzi.
Agar yema de huevo
 Polvo
Suelo

Lagos y en En
las Aguas HABITAD productos
Envasados
Costeras

Tracto intestinal
de los peces y
mamíferos
Mecanismo de acción TOXINA BOTULÍNICA
 MANIFESTACIONES CLÍNICAS:
Es la más grave y
contiene una potente
Botulismo alimentario: neurotoxina, puede
destruirse por
calentamiento a 80º
C durante 10
minutos.
Ecología de
Crecimiento
 Periodo de incubación: No puede crecer y
De 12 a 36 horas, pero
puede extenderse hasta 8 producir toxina en
días en algunos casos. competencia con otros
microorganismos
MANIFESTACIONES CLÍNICAS:
Los síntomas a menudo aparecen de 12 a
36 horas después de consumir los alimentos
• SÍNTOMAS
contaminados con la toxina. Con esta
infección NO se presenta fiebre.
- Produce parálisis flácida
descendente
- Náuseas, vómitos y diarrea
- Dificultad para respirar
- Dificultad al deglutir y al
hablar

La sintomatología neurológica ha sido descripta

como debilidad o parálisis progresiva, , que
primero afecta los músculos inervados por los
nervios craneales, y luego progresa para
involucrar los músculos del cuello, brazos y
piernas.
 MANIFESTACIONES CLÍNICAS
Botulismo Infantil o del Lactante
Afecta a los niños menores de 1 año de edad, y es causado
por la ingestión de las esporas del C. botulinum que
colonizan y producen la toxina en el tracto intestinal de los
lactantes.
Tratamiento
Medidas de sostén, administración
de purgantes y enemas con el fin
de eliminar la toxina no absorbida
en el intestino.
  Botulismo Infantil o del Lactante

SÍNTOMAS:

• Dificultad respiratoria, lenta

• Estreñimiento
• Párpados caídos o parcialmente cerrados
• Debilidad, pérdida del tono muscular
• Ausencia del reflejo nauseoso en el bebé
• Pérdida de control de la cabeza
• Parálisis que se extiende hacia abajo
• Succión débil
• Llanto débil
• Babeo
 EN EL BOTULISMO DE HERIDA
Ocurre cuando una herida se ha
contaminado con tierra o arena
gruesa incrustada en la piel y
Las manifestaciones
ocurre cuando se introducen
gastrointestinales,
esporas del botulismosinen una
embargo,
herida.ausentes.
están
 BOTULISMO DEL ADULTO DE CAUSA DESCONOCIDA:

Se debe a la colonización intestinal por C. botulinum favorecida

por una patología gastrointestinal, cirugía o tratamiento
antibiótico.
BOTOX
• Su mecanismo consiste en aplicar mediante
una inyección la toxina en un músculo en
dosis muy pequeñas, causando la inactividad
de las contracciones de dicho músculo y
evitando así que aparezcan arrugas.
 Recolección de la muestra:
Se pueden llevar a cabo exámenes de
sangre, heces, vómito, contenido
gástrico (si la ingestión fue reciente) y
Botulismo alimentario
alimentos implicados para confirmar el
botulismo.

Botulismo Infantil o En suero y en las heces en los niños

del lactante

En el Botulismo de Suero, exudado, tejido

debridado, o muestras de
Herida hisopado de las heridas del
paciente
 CLOSTRIDUM TETANI
Clasificación de
Clostridium tetani
Reino: Bacteria
Filo: Firmicutes
Clase: Clostridia
Orden: Clostridiales
Clostridium tetani es una bacteria formada
Familia: Clostridiaceae
por esporas y es anaeróbica, del género
Género: Clostridium
Clostridium. Al igual que otras bacterias del
Especie: C. tetani
género Clostridium, es Gram positiva.
 CLOSTRIDUM TETANI
HABITAT:

C. tetani se encuentra sobre todo en áreas

cálidas y húmedas, especialmente en suelos
tratados estiércol, pero también se puede
encontrar en los intestinos o heces de muchos
animales, como caballos, ovejas y perros.

En su estado vegetativo, C. tetani es sensible al calor y no puede sobrevivir en

presencia de oxígeno. Sin embargo sus esporas son resistentes al calor y algunos
antisépticos.
 CLOSTRIDUM TETANI
formador de esporas, que de manera
ES Gram positivo característica se sitúan en el extremo del
microorganismo confiriéndole el aspecto
de palillo de tambor.
Características

su tamaño está entre 0.3-2 x 1.5-20 Es anaerobio estricto ,

micras MOVIL y catalasa negativo
 CLOSTRIDUM TETANI
PATOGENIA

1er período: ocurre la penetración del Clostridium

tetani en el organismo y la producción de la toxina. La
puerta de entrada está dada por efracciones de la piel,
mucosas y otras veces directamente del músculo.

2do período: corresponde a la diseminación de la toxina,

la cual se difunde por vía nerviosa y humoral.
3er período: corresponde a la fijación de la toxina en el
sistema nervioso central. Esta fijación es estable y lo hace
en la membrana sináptica de la 2da neurona motora de las
astas anteriores medulares y también en los núcleos de los
pares craneales.

La germinación de la espora y el desarrollo a

organismo vegetativo dependerá de:
1-Tejido Necrótico
2- Sales de Ca
3- Infección piógena asociada, Todo esto
establecerá un potencial de óxido reducción baja.
 MANIFESTACIONES CLINICAS

Periodo de incubación:
– Desde la penetración del germen hasta la aparición
de las primeras manifestaciones clínicas.
– Habitualmente entre 5 y 15 días.
– La duración tiene valor pronóstico.
Periodo de invasión:
– Desde la aparición de las primeras contracciones
hasta la extensión máxima de la enfermedad.
– La duración tiene valor pronóstico.
Síntomas iniciales:
– La primera manifestación es el trismo dificultad para
abrir la boca por contracción de los maseteros.
Síntomas del periodo de estado:
– La enfermedad está generalizada con la consciencia normal.
– La tirantez de la cara determina la facies sardónica.
– Puede aparecer insomnio pertinaz.
– Calambres, tensión, tirantez.
– La contractura de los músculos paravertebrales– Convulsiones
clónicas ante cualquier estímulo que pueden provocar apnea y
espasmos glóticos.
fiebre inicialmente moderada e insuficiencia renal aguda con
oliguria.
CLOSTRIDIUM
PERFRINGES
 CARACTERISTICAS
Bacilos grampositivos
Anaerobio formador de esporas
Este microrganismo es uno de los pocos clostridium
inmóviles, y es característico su rápido desarrollo en
los medios de laboratorio
Este microorganismo crece rápidamente en los tejidos
y en los cultivos
La síntesis de unas o más de las <principales toxinas
letales> por clostridium perfringes (toxinas alfa 𝛼 ,
beta 𝛽 , épsilon 𝜀 y iota Ι ) se utilizan para sub
dividir a las cepas en cinco tipo (de A - E)
 EPIDEMIOLOGIA
C. perfringes tipo A habita con frecuencia en el
aparato digestivo del ser humano y de los animales, y
tiene una amplia distribución en la naturaleza,
fundamentalmente en el suelo y en el agua contaminados por
heces. Las esporas se forman en condiciones ambientales
adversas y pueden sobrevivir durante periodos de tiempo
prolongados. Las cepas de tipo B y E no sobreviven en el suelo,
pero pueden colonizar el aparato digestivo de los animales y
algunas veces del ser humano. C perfringes tipo A origina la
mayoría de las infecciones en el ser humano, incluyendo las
infecciones de tejidos blandos, las intoxicaciones alimentarias y
la septicemia primaria. Clostridium perfringes tipo C es el agente
etiológico de una de las infecciones más importantes en el ser
humano, la enteritis necrosante.
 PATOGENIA La toxina 𝜀 , es una
protoxina, se activa por
La toxina 𝛼, la más importante y Las mayores la tripsina y aumenta la
la que producen los cinco tipos de cantidades de toxina permeabilidad vascular
clostridium perfringes, es una 𝛼 se producen por de la pared del tubo
lecitina (fosfolipasa) capaz de clostridium digestivo.
lisar eritrocitos, plaquetas, perfringes tipo A.
leucocitos y células
endometriales esta toxina provoca
La toxina 𝛪, la
una hemolisis masiva junto a un La toxina 𝛽 es la cuarta toxina letal
incremento de la permeabilidad responsable de la
vascular y de la hemorragia (la estasia intestinal, la que se produce
cual se ve potenciada por la destrucción de la por C. perfringes
destrucción de las plaquetas), mucosa con
destrucción tisular y de la
de tipo E, tiene
formación de
hemorragia (la cual se ve lesiones necróticas y una actividad
potenciada por la destrucción de
las plaquetas), destrucción tisular
la evolución de la necrosante y
(como la que se ve en la enteritis aumenta la
mionecrosis), toxicidad hepática y necrosante. permeabilidad
disfunción miocardia (bradicardia,
hipotensión). vascular
La enterotoxina de C. perfringes es sintetizada principalmente por las
cepas A. la toxina es termolábil y sensible a la pronasa. La exposición a
tripsina triplica la actividad tóxica. La enterotoxina se produce durante la
fase de transición desde las células vegetativas hasta las esporas y se
libera junto a las nuevas esporas cuando las células están sometidas a
las fases finales de la formación de estas (esporulación). Las condiciones
alcalinas del intestino delgado estimulan la esporulación. La enterotoxina
liberada se une a los receptores de la membrana con borde en cepillo del
epitelio del intestino delgado en el íleon (fundamentalmente) y en el
yeyuno, pero no en el duodeno. La inserción de la toxina en la membrana
celular modifica su estructura y conlleva una alteración de la
permeabilidad de membrana y la perdida de líquidos e iones.
Por otra parte, la enterotoxina actúa como un superantígeno que estimula
la actividad de los linfocitos T. Los anticuerpos frente a la enterotoxina,
que indica una exposición previa se encuentra con frecuencia en adultos,
peor no confieren protección alguna.
 ENFERMEDADES CLÍNICAS
Infecciones de tejidos blandos
De hecho, la mayoría de
las cepas de C. perfringes
y de otras especies de
clostridium aisladas en
cultivo de las heridas no
tienen significación
clínica. Sin embargo, estos
microorganismo pueden
iniciar pueden iniciar en
tejidos blandos una
celulitis con formación de
gas. Este proceso puede
evolucionar a una miositis
supurativa que se
caracteriza por la
acumulación de pus en los
planos musculares, pero
no hay necrosis muscular
ni síntomas sistémicos.
Los mionecrosis por clostridios es una enfermedad que pone en
peligro la vida. El inicio de la enfermedad, caracterizado por un
intenso dolor, se suele desarrollar a lo largo de la semana siguiente a
la introducción del clostridios en un tejido como consecuencia de un
traumatismo o una intervención quirúrgica. Este inicio se ve pronto
seguido por una extensa necrosis muscular, shock, insuficiencia renal
y muerte, generalmente durante 2 días siguientes al comienzo del
cuadro. El examen macroscópico del musculo muestra tejidos
necróticos desvitalizados. El gas que ve en los tejidos está protegido
por la actividad metabólica de las bacterias que se dividen
rápidamente (de ahí el nombre de gangrena gaseosa). El examen
microscópico pone manifiesto la presencia de un número de bacilos
grampositivos rectangulares en ausencia de células inflamatorias
(debido a la lisis causada por las toxinas sintetizadas por los
clostridios). Las toxinas de los clostridios originan habitualmente
hemolisis y sangrado importantes. En la mayor parte de los casos la
mionecrosis por clostridios). Las toxinas de los clostridios se debe a
la infección por C. perfringes.
 Intoxicaciones alimentarias: las intoxicaciones alimentarias por
clostridios, una intoxicación relativamente frecuente pero que en
muchas ocasiones se pasan por alto, se caracteriza por :
1. Una presentación clínica que incluye espasmos abdominales y diarrea
acuosa pero no cursa con fiebre nauseas ni vómitos
2. Una evolución clínica de duración comprendida entre 24 y 48 horas. La
enfermedad es consecuencia del consumo de productos cárnicos (como
ternera, pollo, pavo) contaminados por un gran número de células (108 a
109 microorganismos) de C. perfringes tipo A que contienen enterotoxina.
El mantenimiento de alimentos contaminados por debajo de los 60°C (la
temperatura óptima corresponde a 46°C) posibilita la germinación de las
esporas que han sobrevivido al proceso de cocinado y su posterior
multiplicación hasta alcanzar unas elevadas concentraciones. La
refrigeración de los alimentos después de su preparación evita la síntesis
de la enterotoxina.

Por otro lado, el recalentamiento de loa alimentos a 74 °C destruye la

enterotoxina termolábil
Enteritis necrosante: La enteritis
necrosante es un proceso
necrosante agudo infrecuente que
afecta al yeyuno y se caracteriza por
un dolor abdominal agudo, vómitos,
diarrea sanguinolenta, ulcera del
intestino delgado, y perforación de la
pared intestinal. Lo que origina
peritonitis y Shock. la mortalidad de
los pacientes afectados por esta
infección se acerca al 50%. C.
perfringes tipo C produce toxinas 𝛽
es el agente etiológico de esta
entidad. Se asocia al consumo de
carne de cerdo poco hecha
acompañada de batata, la cual
contiene un inhibidor termoresistente
de la tripsina. Este inhibidor protege
a la toxina 𝛽 frente a su inactivación
por la tripsina.
Septicemia : El aislamiento de C.
perfringes o de otras especies de
clostridium de otras especies de
clostridios de los hemocultivos
constituye un motivo de alarma. Sin
embargo, más de la mitad de las
cepas carecen se significación clínica,
representando una bacteria
transitoria, o con más frecuencia, la
contaminación del cultivo por
clostridios que colonizan la piel. El
significado de cada aislamiento se
debe valorar el contexto de otros
hallazgos clínicos. Cuando se aísla C.
perfringes a partir de la sangre de un
sujeto con un infección significativa
(con mionecrosis, enteritis
necrosante) el microrganismo suele
asociarse a una hemolisis masiva
 DIAGNOSTICO
Desde el punto de vista microbiológico, es
muy importante el examen e informe urgente
de la tinción de Gram de las muestras, en el
laboratorio de limita a desempeñar un papel
de confirmación en el diagnóstico de las
infecciones de tejidos blandos por clostridios
debido a que el tratamiento se debe instaurar
inmediatamente. La detección al microscopio
de bacilos grampositivos en la muestra
clínica, generalmente en ausencia de
leucocitos, puede ser un hallazgo muy útil
como consecuencia de la característica
morfología de estos microorganismos.
El cultivo de estas bacterias anaerobias
también resulta relativamente sencillo. C.
perfringens se puede detectar en los medios
de cultivos sencillos tras un periodo de
incubación de 1 día o menos. En
condiciones adecuadas, C. perfringens se
puede dividir cada 8 a 10 minutos, por lo
que su crecimiento en los medios de agar y
en lo caldos de hemocultivo se puede
detectar después de una incubación de solo
una horas.
Se ha desarrollado inmunoanálisis para la
detección de la enterotoxina en las muestras
fecales, aunque habitualmente no se
empleen cultivos ni inmunoanálisis en los
laboratorios clínicos para el diagnóstico de
esta infección.
 TRATAMIENTO

Las infecciones de tejidos blandos asociadas a C. perfringens, como la miositis

supurativa y la mionecrosis, se deben tratar de manera agresiva mediante intervenciones
de desbrindamiento quirurgico y altas dosis de penicilina. }

El tratamiento con antisuero frente a la toxina 𝛼 No ha tenido éxito y no se lleva a cabo

en la actualidad. A pesar de todos los esfuerzos terapeuticos, el pronostico de los
pacientes con enfermedades es desfavorable y su mortalidad comprende entre un 40% y
un 100%. Las enfermedades menos graves y localizadas se pueden tratar con éxito
mediante la administracion de penicilina.

No es necesario el tratamiento antibiótico en la intoxicaciones alimentarias por

clostridios, ya que se trata de un proceso de resolución espontánea (p. ej., la diarrea
elimina las bacterias del tubo digestivo y la microflora intestinal normal vuelve a
establecerse por sí sola).

Por tanto, el cuidado adecuado de las heridas y el uso racional de la profilaxis antibiótica
pueden ser muy importantes en la prevención de la mayor parte de las infecciones.
CLOSTRIDIU
M DEFICCILE
 CARACTERISTICAS

Denominado en un primer momento

como Bacillus difficilis por la
dificultad para ser aislado en medios de
cultivo, no fue descrito como agente
infeccioso hasta finales de los 70 del
siglo pasado cuando se comprobó que
ciertas variantes producían unas
toxinas (toxinas A y B) con capacidad
patógena en humanos.
C. difficile forma parte de la microflora intestinal normal en un pequeño número de
individuo sanos y algunos pacientes hospitalizados. La enfermedad se desarrolla en los
individuos que reciben antibióticos debido a que los fármacos alteran la microflora
entérica normal, permitiendo el crecimiento excesivo de estos microorganismos
relativamente resistentes, o haciendo al paciente más vulnerable a la adquisición
exógena de C. difficile. La enfermedad se desarrolla cuando el microorganismo prolifera
en el colon y sintetiza sus toxinas
C. difficile sintetiza dos toxinas, una enterotoxina (toxina A) y una citotoxina (toxina B).
La enterotoxina es quimiotáctica para los neutrófilos, con infiltración de
polimorfonucleares en el íleon, lo que da lugar a la liberación de citosinas. Asimismo, la
toxina A ejerce un efecto citopático que altera la unión intercelular estrecha, incrementa
la permeabilidad de la pared intestinal, y una ulterior diarrea. La citotoxina provoca la
despolimerización de la actina, con posterior destrucción del citoesqueleto celular tanto
en condiciones in vivo como vitro. A pesar de que ambas toxinas parecen interaccionar
de manera sinérgica en la patogenia de la enfermedad. Por otra parte, la producción de
una o ambas toxinas no parece bastar para provocar enfermedad

Las proteínas de la capa superficial (SLP) bacterianas desempeñan una destacada

función en la unión del patógeno al epitelio intestinal, la cual posibilita la producción
localizada de toxinas y ulterior daño tisular.
 DIAGNOSTICO
Se confirma mediante la demostración de la presencia
de la enterotoxina o la citotoxina en una muestra fecal
procedente de un paciente con síntomas clínicos
compatibles con esta entidad. El aislamiento del
microorganismo en los coprocultivos confirma la
colonización, pero no la enfermedad. La enterotoxina y
la citotoxina se detectan por medio de diversos
inmunoanálisis comercializados. La sensibilidad y la
especificidad de estos análisis es muy variable, por lo
que se debe tratar de seleccionar la prueba más
adecuada, y la obtención de resultados negativos no
excluye el diagnóstico.
MEDIO DE CULTIVO

Procedimiento de análisis Tan pronto como se recibe la muestra en el laboratorio, inocularla en una placa de BD
Clostridium Difficile Agar with 7% Sheep Blood y extender la muestra para aislamiento. Dado que algunos organismos
anaerobios facultativos presentan el potencial de producir reacciones similares a C. difficile, se recomienda incluir una
placa de agar sangre incubada en atmósfera aerobia con el fin de confirmar que el aislado es un anaerobio obligado.
Los medios anaerobios deben reducirse antes de la inoculación colocándolos en condiciones anaerobias durante 6 – 24
h antes de su utilización.

Incubar de inmediato en condiciones anaerobias a 35 – 37 ºC durante al menos 48 h. Independientemente del sistema

anaerobio utilizado, es importante incluir un indicador de anaerobiosis tal como el indicador anaerobio desechable BD
GasPak.

Resultados Después de 48 – 72 h de incubación, Clostridium difficile aparecerá en forma de colonias de color gris-
blanco, con un aspecto de vidrio molido y un borde ligeramente filamentoso, pero sin señales de beta-hemólisis. Los
cultivos que han crecido bien presentan un olor característico “similar al establo. Examinar el crecimiento con una luz
ultravioleta de onda larga para observar la fluorescencia verdosa, lo que se debe realizar dentro de una hora de haber
retirado la muestra de la atmósfera anaerobia. Después de la exposición al aire, las colonias pueden volverse no viables
rápidamente, lo que por lo general viene acompañado de una pérdida de fluorescencia. Se requieren más pruebas para
confirmar la identificación de los aislados7-13.
Interpretación de los resultados Dado que la presencia de Clostridium difficile en el cultivo sin detectar toxina A ni B
del organismo no indica colitis asociada a antibióticos ni colitis seudomembranosa, se deben realizar pruebas
inmunológicas adecuadas a partir de la muestra fecal. Asimismo, se deben interpretar los resultados junto con las
observaciones clínicas
 TRATAMIENTO

La retirada de los Una segunda tanda de tratamiento con el mismo

antibiótico suele ser de utilidad, aunque están bien
antibióticos implicados descritas las recaídas múltiples en algunos pacientes.
(p. ej., ampicilina, Es difícil prevenir la enfermedad, porque el
clindamicina, microorganismo es frecuente en los hospitales,
fluoroquinolonas) suele fundamentalmente en la zonas adyacentes a los
pacientes infectados (como camas, aseos). Las
ser suficientes para esporas de C. difficile son difíciles de eliminar, a no ser
mejorar la enfermedad que se apliquen medidas estrictas de limpieza y
leve. Sin embargo, es mantenimiento; por tantos, el microorganismo puede
contaminar el ambiente durante muchos meses y
necesario el puede constituir el principal origen de los brotes
tratamiento específico
con metronidazol o
nosocomiales de la enfermedad por C. difficile .
vancomicina para el
control de la diarrea o
la colitis graves.
GRACIAS