Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Daniel R. Sosa-Gómez
Patógenos de insetos
Bactérias Nematóides
Fungos Insetos
Vírus Ácaros
Protozoários Prion?
Rickéttsias
DRSG
Bioensaio
Método para determinar a atividade
biológica de um material sintético ou
biológico, mediante a resposta de um
organismo ou células vivas.
DRSG
Bioensaios
Aplicações em patologia de
Insetos
Padronizar inseticidas microbianos
Caracterização de raças
Estudos de resistência
Quantificar a atividade em amostras:
Estudos de persistência, efeito de fatores
ambientais (u.v., chuva, exudatos), controle
de qualidade
Monitoramento da suscetibilidade natural
de populações de insetos
DRSG
Bioensaios
Objetivos
Determinar a virulência de um
patógeno
Determinar a presença de um
patógeno (aspecto qualitativo) ou
atividade (quantitativo) através de sua
resposta
Agentes microbianos
Sequência dos tópicos de pesquisa
para desenvolvimento
Descoberta
Potencial de controle (bioensaios)
Especificidade, Biosegurança
Autorização para uso experimental
Formulação
Ensaios em escala reduzida
Patenteamento
Colaboração Indústrias, Instituições
Ensaios em grande escala (Rótulo)
Dados para registro
Registro DRSG
Nomuraea rileyi
vs
Anticarsia gemmatalis (3rd instar)
Isolates TL50(1)
(days)
Nr32 6.7 a
Nr22 6.9 ab
Nr34 6.9 ab
Nr33 7.1 b
(1)
Concentration: 100 conidia/mm 2 DRSG
Nomuraea rileyi
vs.
Anticarsia gemmatalis (3rd instar)
Isolates CL50
2 (1)
(conidia/mm )
Nr32 46 a
Nr22 52 a
Nr34 63 b
In vitro
Cultura de células
DRSG
Bioensaios
Insetos
Livre de doenças
População homogênea
Aproximadamente mesmo estadio, peso e
tamanho
Se possível proveniente de criação de
laboratório
Evitar estresse dos insetos
Estadio com mortalidade “natural” mínima
DRSG
Dieta
Bioensaios
Natural
Quando não se conhece dieta artificial
Dificuldades: contaminação, difícil
padronizar qualidade.
Exemplos: Scarabaeidae (Coleópteros),
Tentredinidae (Himenóptero)
Artificial
Insetos adaptados após 3 a 6 gerações
Dificuldades: ressecamento, contaminação
Exemplos: Noctuidae (Lepidópteros)
DRSG
Bioensaios
Métodos
Número de insetos
Repetições
Número de doses ou concentrações
Condições controladas de UR,
temperatura, fotoperíodo
Testemunha
Mortalidade diaria
DRSG
Bioensaios
Análise
Mortalidade >10% e <90%
Valores corrigidos e acumulados
Programas: SAS, POLO
Interpretação
Dificuldades: inversão da resposta,
mortalidade na testemunha,
contaminação, resposta heterogênea
DRSG
Concentração Letal média: concentração
necessária para matar 50% da população
em ensaio.
DRSG
Enhancement of AcMNPV Infections
with Enhancin from TnGV
Insect Mortality (%) Enhancement
Trichoplusia ni 34 80 135
48 98 104
Helicoverpa zea 22 90 309
67 96 43
Pseudaletia unipuncta 21 45 114
42 68 62
Spodoptera exigua 6 84 1300
12 60 400
DRSG
The Single Particle Theory
Insect Mortality
Number Days after treatment
1 2 3 4 5 6
30 2 5 10 18 20 25
30 5 8 12 19 23 28
Volume Ingested by larvae of 3
Noctuids
H. virescens 8 150
C. includens 9 309
(1)
Mean nanoliters