BIOTECNOLOGÍA

INGENIERÍA
GENÉTICA
 BIOTECNOLOGÍA

Conjunto de técnicas que utilizan las

potencialidades de los organismos vivos o de
compuestos procedentes de ellos (enzimas,
hormonas, antibióticos ….), para la obtención de
productos, bienes y servicios
 Biotecnología

Biotecnología tradicional:
procesos de fermentación
de bacterias y levaduras
desde hace miles de años
Biotecnología moderna: en los últimos
30 años, avances en microbiología,
inmunología e ingeniería genética, con
manipulación selectiva y programada de
material genético

Biotecnología contemporánea
Clonación, nanotecnología,
biomateriales,
APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGÍA
APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGÍA

ROJA - Aplicaciones médicas

VERDE – Aplicaciones agrícolas y

ganaderas

AZUL – Aplicaciones acuáticas y

marinas

BLANCA – Aplicaciones a
procesos industriales
 ORGANISMOS TRANSGÉNICOS

Organismo transgénico: es aquél que ha sufrido la alteración de su material

hereditario (genoma) por la introducción artificial (manipulación genética) de un
gen exógeno, esto es, proveniente de otro organismo completamente diferente.

Se descubrió posteriormente que esta práctica se venía haciendo en la

naturaleza de forma espontánea desde hace millones de años en los
vegetales a través de la bacteria llamada Agrobacterium tumefaciens.
 ORGANISMOS TRANSGÉNICOS

Microorganismos transgénicos

Animales de granja
(

Plantas transgénicas "nueva revolución verde“

Ejemplos : la papa, el tomate y al maíz
 INGENIERÍA GENÉTICA

La Ingeniería Genética
Conjunto de técnicas, nacidas de la Biología molecular, que permiten
manipular el genoma de un ser vivo, introduciendo genes en un organismo
que carece de ellos

Se realiza por

Incluye
Enzimas de restricción
Capaces de cortar el ADN por puntos
concretos
Técnicas biotecnológicas
•Recombinación de ADN
•Secuenciación del ADN
Se obtiene •Reacción en cadena de la polimerasa
•Aplicaciones diversas

ADN Recombinante
Segmento de ADN extraño intercalado
en un ADN receptor
Técnicas de ADN recombinante: la manipulación genética

Entre los años 70 y 80 se desarrollaron

herramientas de la biología molecular y la
ingeniería genética, lo que se conoce
como técnicas del ADN recombinante
Enzimas: Endonucleasas de restricción

Endonucleasas de
Restricción:
Enzimas que pueden cortar el
ADN y lo hacen en secuencias
concretas

Enzimas que las bacterias usan

para destruir ADN que ingresa a
ellas, por ejemplo ADN de virus
bacteriófagos
Enzimas: Endonucleasas de restricción

Se conocen mas de 1200

enzimas de restricción

Eco RI (E. coli) reconoce

secuencias GAATTC y
corta entre G y A
Construcción de ADN recombinante

1 ADN plásmido

2 ADN extraño

3 Corte del plásmido y ADN

extraño con Eco RI
(endonucleasa de restricción)

4 Formación de
extremos cohesivos

5 Formación de ADN
recombinantes

6 Acción de ADN ligasa

que sella los extremos
 Reacción en cadena de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction)

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR), es una

técnica que permite amplificar entre cientos de miles y
millones de veces, en el transcurrir de pocas horas e in
vitro, pequeñas cantidades de ADN.

Es un método alternativo a la clonación muy rápido y

eficaz
Reacción en cadena de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction)
 SECUENCIACIÓN DEL ADN: Método Sanger

•Métodos y técnicas para determinar el orden de los nucleótidos de un

determinado fragmento de ADN
•Utilidad importante en biología básica y aplicada (forense…)
•Precisa gran cantidad del fragmento a determinar (clonación)

Método Sanger o didesoxi:

•Fragmento de ADN (cantidad)
•Cebador en el extremo 3´ (20 bases)
•ADN polimerasa
•Desoxiribonucleótidos (A,T,C,G)
•Didesoxiribonucleótidos marcados
radiactivamente (paran la síntesis)

Cuatro tubos diferentes con:

Polimerasa
dATP, dCTP, dTTP y dGTP
Un solo didesoxi marcado
(ddATP)
Se forman fragmentos de distinto
tamaño terminados en A
 SECUENCIACIÓN DEL ADN

Los fragmentos de ADN obtenidos se separan por tamaños con electroforesis

Cada una de las cuatro muestras se insertan en un carril diferente del gel
Terminada la electroforesis se ponen en contacto con una película fotográfica
 INGENIERÍA GENÉTICA: Agricultura y medio ambiente

•Tradicionalmente se han mejorado los cultivos por selección de ejemplares

•Actualmente se mejoran características con técnicas de ADN recombinante:
-Plantas transgénicas-

El plásmido Ti o T-ADN
de Agrobacterium
contiene genes (onc) que
provocan una mayor
producción de hormonas
de crecimiento con la
formación del tumor o
agalla.

Se eliminan de Ti los genes onc y se sustituyen por otros genes que interese
clonar, se habrá obtenido un sistema eficaz para introducir ADN interesante a la
planta, evitando la aparición de la enfermedad
 INGENIERÍA GENÉTICA: Agricultura y medio ambiente

Actualmente se consiguen mejorar diferentes características con técnicas de

ADN recombinante -Plantas transgénicas-

•Resistencia a herbicidas
(mejora vegetal)
•Resistencia al glifosfato herbicida
no selectivo, con gen de E. coli
resistente, clonado e incorporado
•Resistencia a plagas, con toxina de
Bacillus turingiensis
•Resistencia a virus, con proteínas
de la cápsida de dicho virus

FASES:

1. Transferencia
de genes

2. Regeneración
de plantas
completas
 INGENIERÍA GENÉTICA: Agricultura y medio ambiente

•Mejora del producto (alimentos)

•Arroz transgénico –arroz dorado- con
βcaroteno (vit A)

•Plantas farmaceúticas
(biofarmaceútica)
•Producción de proteínas humanas,
vacunas, anticuerpos, mas económicas y
contienen mecanismos de modificación
postraduccional de las proteínas, a
diferencia de las bacterias
 INGENIERÍA GENÉTICA: Agricultura y medio ambiente

•Medio Ambiente:Utilización de organismos genéticamente modificados para eliminar contaminantes

Biorremedación: bacterias modificadas para degradar hidrocarburos

Bioadsorción: Bacterias modificadas que

adsorben en su superficie metales pesados
 INGENIERÍA GENÉTICA: Agricultura y medio ambiente

Fitorremedación: Plantas transgénicas que transforman contaminantes

peligrosos en sustancias inocuas

chopos modificados para acumular metales,

actualmente en condiciones controladas en
invernadero

La fitoestabilización :plantas que inmovilizan los

metales en el suelo por absorción o adsorción en las
raíces. Los contaminantes permanecen retenidos bajo
la superficie del suelo

La fitoextracción : plantas tolerantes capaces de

absorber los metales desde el suelo y acumularlos en su
biomasa aérea. Posteriormente, esta biomasa es
cosechada, incinerada y tratada como residuo peligroso
 INGENIERÍA GENÉTICA y GANADERÍA
•Inserción de genes en óvulos o células madre embrionarias:
Quimeras transgénicas Organismos transgénicos
sólo sobre algunas todas las células
células del embrión modificadas

Células modificadas Células no modificadas Transmisión a la descendencia,

órganos y tejidos para trasplantes

1.Secuencia hibrida de gen de

interés y secuencia promotora
de una proteína de la leche

2. Introducir el transgén en
óvulo fecundado
3.Implantación en la hembra
que lo expresará junto con la
leche

Ejs.: α1-antitripsina, factor VIII,…

 INGENIERÍA GENÉTICA y MEDICINA

APLICACIONES

Obtención de productos
Medicina forense
farmacéuticos
Marcadores
Insulina genéticos
Interferón Huella genética
H. De crecimiento
Factor VIII
Terapia génica
Diagnóstico de Inserción de genes
enfermedades funcionales para corregir
Detección en personas o un defecto genético
fetos enfermedades
hereditarias por técnicas En células germinales
de ADN recombinante
En células somáticas
 Producción de insulina humana
La forma activa de la insulina consta de dos polipéptidos (A y B), que están
codificados por partes separadas de un mismo gen. Estos se pueden obtener
en cultivos bacterianos separados.
Proteína de fusión con subunidad A
Promotor del gen de la insulina

Subunidad A del
gen de la insulina
Transformación Extracción de Separación de
en E. coli las proteínas de los polipéptidos
fusión AyB
Promotor

Formación
Proteína de fusión
de insulina
con subunidad B del
Subunidad B del activa
gen de la insulina
gen de la insulina
CONSTRUCCIÓN DE ADN RECOMBINANTE