UNIDAD N° 1:

Tema 7: ENZIMAS

Blgo. Ms. Pablo Chuna Mogollón

Profesor Auxilar T.C.
Area Biología
Departamento Académico de Ciencias - UPAO
 TEMA 5. ENZIMAS

 Características generales.
 Cofactor.
 Clasificación.
 Especificidad.
 Sitio catalítico.
 Cinética enzimática.
 Factores que afectan la
actividad enzimática.
 ENZIMAS

 Las enzimas son los catalizadores de las reacciones de los sistemas biológicos.
• Cumplen con las siguientes características:
a) Son termolábiles y su actividad depende en ciertos casos del pH del medio.
b) El reconocimiento de la enzima con el reactivo a procesar (denominado sustrato) es
altamente específico.
c) Tienen gran eficiencia, es decir, transforman un gran número de moléculas de
sustrato por unidad de tiempo.
d) Están sujetas a una gran variedad de controles celulares, genéticos y alostéricos.

Aceleran notablemente la velocidad de

una reacción química y cumplen con
las siguientes características:
1) Son efectivas en pequeñas
cantidades
2) No sufren modificaciones químicas
irreversibles durante la catálisis.
3) Disminuyen la E° de activación.
 NOMENCLATURA DE LAS ENZIMAS
 En muchos casos, el nombre termina en –asa
 El nombre comun para una hidrolasa es derivado del sustrato
 Urea: remueve -a, se reemplaza con -asa = ureasa
 Lactosa: remueve -osa, se reemplaza con -asa = lactasa
 Otras enzimas se nombran por el sustrato y la reacción catalizada
 Lactato deshidrogenasa
 Piruvato descarboxilasa
 Algunos nombres son históricos - no directamente
relacionados al sustrato o tipo de reacción
 Catalasa
 Pepsina
 Quimotripsina
 Tripsina
 CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS

CLASE 1: OXIDORREDUCTASAS (E.C. 1)

Catalizan reacciones de oxido-reducción, y con frecuencia utilizan coenzimas

como el NAD, FAD o lipoato.
- Deshidrogenasas - Oxidasas - Oxigenasas
- Reductasas - Peroxidasas - Hidroxilasas

Alcohol
deshidrogenasa
 CLASE 2: TRANSFERASAS (E.C. 2)

Catalizan la transferencia de un grupo de átomos desde un sustrato a otro.

Los grupso que con más frecuencia son transferidos son grupos: amino, acilo, fosfato, etc.
- Transaminasas - Transmetilasas - Transcarboxilasas - Quinasas

Hexoquinasa
 CLASE 3: HIDROLASAS (E.C. 3)

Cataliza reacciones en la que el sustrato es escindido siendo sus fragmentos

transferidos a los componentes del agua (OH y H).
Implican la rotura hidrolítica de enlaces C-O, C-N, O-P y C-S.
- Carbohidrasas - Esterasas - Fosfatasas - Peptidasas
CLASE 4: LIASAS (E.C. 4)
Catalizan reacciones en la que se eliminan grupos (por ej, H2O, NH3, CO2, para
formar un doble enlace o se añaden a un doble enlaces C-C, C-N y C-O, y con
pérdida de grupos funcionales simultánea a la aparición de dobles enlaces.
- Descarboxilasas - Hidratasas - Desaminasas
- Liasas - Sintasas
CLASE 5: ISOMERASAS (E.C. 5)
Catalizan la interconversión de isómeros de cualquier tipo, ópticos, geométricos o
de posición.
- Epimerasa - Racemasa - Mutasa
CLASE 6: LIGASAS (E.C. 6)

Participan en reacciones en las que se unen dos moléculas a expensas de un

enlace fosfato de alta energía procedente del ATP.
- Tiocinasa - Carboxilasa - Sinetetasa
 NATURALEZA QUIMICA DE LAS ENZIMAS

• Casi todas las enzimas son de

naturaleza proteica
• Algunas enzimas requieren
cofactores para su
funcionamiento.
• Las coenzimas se va a unir a la
enzima bien de forma débil y
temporal o en otros casos de
forma permanente y covalente
(grupo prostético).
Fe²+
Holoenzima = Apoproteína + Cofactor (Coenzima o ión metálico)
Mg²+
Peso ↓ Peso molecular
molecular Mn²+
Termorresistente
Termolábil Moléculas Zn²+
Dializa
orgánicas
No dializa
complejas
CATALISIS ENZIMATICA

• La enzima se une efectivamente al o a los

sustratos, formando un complejo transitorio
(ES), mediante una reacción reversible, cuya
energía de activación es menor que la de la
reacción no catalizada.
• Las modificaciones que puede experimentar la
molécula de la enzima durante dicha unión
son pasajeras, ya que aparece inalterada al
final de la reacción.
El proceso puede representarse con la
ecuación:
E + S  ES  EP  E + P
 SITIO CATALITICO
 El sitio catalítico, centro activo o centro de fijación del sustrato, es una pequeña grieta o
hendidura en una molécula proteica grande, donde se fija el sustrato.
 La estructura terciaria de la enzima está plegada de tal manera que se origina una región
con las dimensiones moleculares idóneas para acomodar un sustrato específico.
 Contiene varias cadenas laterales de aminoácidos que participan activamente en forma
directa para formar o romper enlaces del sustrato
 Los aminoácidos que están
presentes son: serina,
histidina, cisteína, lisina,
aspartato y glutamato
ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS
 Es la capacidad de una enzima de unirse solo a uno, o a muy pocos
sustratos, thereby catalizando solo una unica reacción.
 Compare estas 2 reacciones:
Ureasa es muy específica o tiene
un alto grado de especificidad

La especificidad puede ser:

• Absoluta: enzima reacciona con solo un sustrato
• Grupo: enzima cataliza la reacción de moléculas con el mismo grupo
funcional
• Enlace: enzima cataliza la formacion o ruptura de solo cierto tipo de
enlace
• Estereoquímico: enzima reconoce solo uno de dos enantiómeros
TEORÍAS DE LA ACCIÓN ENZIMÁTICA
MODELO DE LLAVE Y CERRADURA (Emil Fischer)

• El sustrato y la enzima se aco-

plan de forma estereoespecífica,
de la misma manera que una
llave se ajusta a su cerradura.

TEORIA DEL AJUSTE INDUCIDO (Koshland)

• Considera a la enzima como una estruc-

tura dotada de plasticidad y flexibilidad.
• Cuando el sustrato se une a la enzima,
induce cambios conformacionales en la
molécula de ésta, que recién entonces
acomoda los grupos funcionales críticos
para asegurar la ubicación más efectiva.
 FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

1. CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO

Si se mantiene constante la concen-

tración de la enzima y se varia la
concentración de sustrato se obtiene
una curva hiperbólica como la de la
figura.
Al principio un aumento de la
concentración de sustrato produce un
aumento rápido de la velocidad de
reacción, pero si se sigue aumentando la
concentración de sustrato, la velocidad
comienza a disminuir y a muy altas
concentraciones de sustrato se observa
que no cambia la velocidad de reacción,
se dice que los sitios catalíticos de la
enzima se encuentran saturados.

L
2. CONCENTRACIÓN DE LA ENZIMA
La velocidad inicial es proporcional a la concentración de enzima. Esta es la situación
en la mayoría de los casos, donde en los gráficos velocidad versus concentración total
de enzima se obtiene una recta que pasa por el origen
3. EFECTO DE LA TEMPERATURA

Si bien el aumento de la temperatura incrementa la

velocidad de una reacción catalizada por una enzima
esto resulta válido sólo en un intrevalo de T°
estrictamente limitado. Inicialmente, la velocidad de
reacción se incrementa conforme la T° aumenta, debido
al incremento de la energía cinética de las moléculas
reactantes. Finalmente, sin embargo, la E° cinética de la
enzima excede la barrera energética, para la ruptura de
los enlaces débiles, los cuales conservan la estructura
secundaria, terciaria de dicha enzima, provocando la
desnaturalización.

Temperatura óptima para una Temperatura óptima para

típica enzima humana enzima de termófila
(Bacteria termo-
tolerante)
Actividad

0 20 40 80 100
Temperatura (Cº)
Temperatura óptima para dos enzimas
4. EFECTO DEL PH

Para la mayoría de las enzimas, la actividad

óptima se encuentra entre valores de pH de
6 a 8. Por debajo o por encima de esos
valores, la velocidad de reacción cae más o
menos rápidamente.
Se sabe que los cambios de pH del medio
afectan el estado de ionización de ciertos
grupos funcionales en la molécula de la
enzima y también en la del sustrato.
Por otra parte, los pH extremos provocan
desnaturalización de la molécula enzimática,
con la consiguiente inactivación.
pH óptimo para pepsina pH óptimo para
(enzima del estómago tripsina
ENZIMA pH (enzima
Fosfatasa alcalina 9.5 intestinal)
Actividad

Lipasa pancreática 8.0

Quimotripsina 8.0
Tripsina 7.9
Catalasa 7.6
Carboxipeptidasa 7.5
Amilasa salival 6.8 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Fosfatasa ácida 5.0 pH óptimo para dos enzimas
Pepsina 1.5
 INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
INHIBICIÓN REVERSIBLE: INHIBICION NO COMPETITIVA.

El inhibidor se une a la enzima en un lugar de la molécula diferente del sitio

catalítico, a menudo deformándola de modo que ésta no forme el complejo ES a
su velocidad normal.
- No existe competencia entre el sustrato y el inhibidor.
- El Inhibidor presenta poco parecido estructural o ninguno con el S.
- Ej. Isoleucina que actúa sobre enzima treonina deshidratasa

Vmax diferente
KM igual
INHIBICIÓN REVERSIBLE: INHIBICION COMPETITIVA:
El inhibidor puede combinarse con la enzima libre, de tal modo que compite con el sustrato
normal por unirse al sitio catalítico.
La estructura química de un inhibidor (I), por lo general es semejante a la del sustrato (S).
El inhibidor se combina de manera reversible, con la E para formar un complejo EI.
Una característica de este tipo de inhibición está dada por el hecho de que puede ser
revertida aumentando la concentración de sustrato.
La sulfamida compite con el ácido para amino benzoico (PABA) por la enzima dihidropteroato
sintetasa, lo que porduce como resultado la formación de un producto que contiene sulfanil-
amida, que no puede ser transformado en ácido fólico.
Metotrexato (antileucémico)
 Análogo estructural del tetrahidrofolato.
 Inhibe la dehidrofolato reductasa, una
enzima esencial en la vía de la biosíntesis
de bases nitrogenadas (timidina
monofosfato).
 Se une 1000X mejor que el sustrato
natural.
 Las células leucémicas no se pueden
dividir.
 INHIBICION IRREVERSIBLE

El inhibidor irreversible forma un enlace covalente estable con la

enzima (ej. alquilacion or acilacion de la cadena lateral de un sitio
activo)

Nombre Estructura Fuente Acción Inhibitoria

Cianuro Almendras Se une a iones metálicos de
amargas enzimas de la cadena respiratoria

Sarin Gas nervioso Similar a Diisopropilfluorofosfato

Paratión Insecticida Similar a Diisopropilfluorofosfato

Penicilina Hongo Inhibe enzima que participa en

Penicillium síntesis de la pared celular
bacteriana
INHIBICIÓN IRREVERSIBLE:
 PROENZIMAS

Varias enzimas se sintetizan y almace-

nan en forma de precursores inactivos
denominados proenzimas o zimógenos.
Los zimógenos se convierten en enzimas
activas por la rotura irreversible de uno o
varios enlaces peptídicos.

Zimógeno Activador Enzima

Proelastasa Tripsina Elastasa

Tripsinógeno Tripsina Tripsina
Quimotripsinógeno A Tripsina + quimotripsina Quimotripsina
Pepsinógeno pH ácido + pepsina Pepsina
Procarboxipeptidasa Tripsina Caroboxipeptidasa A,
Carboxipeptidasa B