CUENTA DE LEUCOCITOS

Muestra: Sangre capilar, sangre venosa con EDTA.-

Objetivo: Realizar cuentas de leucocitos.-
Materiales
Microscopio, Hematímetro neubauer mejorado, Pipetas de dilución de glóbulos blancos, Tubo
de goma con boquilla (torniquete), líquido de dilución para cuenta de glóbulos blancos (líquido
de Türk).- Componentes mL
Ácido acético 3
Líquido de Türk: Solución de violeta de genciana 1
Agua destilada 100 csp
Principio o fundamento: La característica fundamental del líquido de Türk es
la de hacer una solución ligeramente ácida, por lo que destruye los eritrocito
no nucleados, los glóbulos rojos nucleados (normoblastos), no son
destruidos por este líquido, por lo tanto cuando los normoblasto se
encuentren en el frotis de sangre periférica hay que realizar una corrección
con la fórmula: Cuenta leucocitos X 100
100 + normoblastos
 Observaciones
Cualquier método de cuentas de células (leucocitos, eritrocitos y plaquetas) incluye
tres fases:
1 Dilución de la sangre
2 Toma de muestra de la suspensión diluida en un volumen determinado
3 Recuento de las células en este volumen.

Empleando el hematímetro de neubauer mejorado, existen numerosas posibilidades

de error en todos los recuentos. Los errores que pueden reducirse al mínimo mediante
una técnica cuidadosa son los debido a la naturaleza de la muestra, fallas técnicas del
operador y empleo de un equipo inadecuado.-
Los errores inherentes a la distribución de las células en el volumen del recuento
pueden reducirse al mínimo contando mayor número de cuadrados

Si la distribución de los glóbulos es satisfactoria, la diferencia entre las cuentas

parciales en cada uno de los cinco cuadrados de la cámara, no debe ser superior de 15
entre el más alto y el más bajo. Si la diferencia es mayor de 15 repetir todo el
procedimiento.- Y a su vez menor de 15 entre cámara y cámara.

En las mejores condiciones de trabajo y la mejor habilidad del Bioanálista se introduce

un error mínimo de 7%
• Técnica o procedimiento:
Antes de iniciar debe tener todo listo: tubo anticoagulante, torniquete,
inyectadora, gasa, algodón, alcohol, las cámaras del hematímetro,
microscopio.-
1. Si es muestra venosa mezcle por lo mínimo 20 veces.
2. Rápidamente aspire sangre exactamente hasta la marca número 0,5
en una pipeta de glóbulos blancos.-
3. Limpie cuidadosamente el exterior de la pipeta con una gasa
procurando no absorber ni tocar la muestra de sangre.-
4. Coloque la pipeta en forma vertical y aspire líquido de dilución
(solución de Türk), cuando la dilución ocupe aproximadamente 90%
del bulbo lentamente coloque la pipeta en forma horizontal y enrase
exactamente en la marca 11 (el tallo de la pipeta debe quedar
cristalino y sin burbujas). Rápidamente coloque la punta del dedo en
la pipeta y retire el torniquete de la pipeta.-
5. Los siguientes pasos son consecutivos (si va a realizar otra parte de
la hematología deje la pipeta de forma horizontal en el mesón).-
6.- Agite la pipeta en el dispositivo por 90 segundos.-
7.- Descarte de la pipeta 4 gotas.
9. Cargue las dos cámaras del hematímetro que está colocado sobre la
superficie oscura del mesón, regulando con el dedo índice la salida de
líquido de la pipeta en un ángulo de 45°. Las cámaras no deben
rebosarse, faltarle líquido, ni tener burbujas. Si esto pasare, lave el
hematímetro seque cuidadosamente, agite nuevamente la pipeta y
enrase nuevamente. En realidad es preferible repetir todo desde el
inicio.-
10.-Monte el hematímetro en el microscopio, enfoque con 10X, espere 2
minutos (recuerde la luz baja).
11. Cuente los leucocitos en los cuatro cuadrados grandes laterales y el
cuadrado grande central.
12.- En cada cuadrado se cuentan los glóbulos blancos que por
supuesto estén dentro del cuadrado, los que tocan cualquiera de las
líneas izquierda y superior, pero no, los que tocan cualquier línea
derecha e inferior
 Cálculos
Si contamos en una cámara 175 leucocitos y Si contamos en la cámaras : A 175 y en la B
enrasamos a la marca 0,5 175 leucocitos y enrasamos a la marca 0,5
Factor dilución: Volumen bulbo/sangre Factor dilución: Volumen bulbo/sangre
aspirada FD= 10/0,5 FD = 20 aspirada FD= 10/0,5 FD = 20

Factor volumen para un cuadrado grande: Factor volumen para un cuadrado grande:
Volumen= L x Lx h V= 1mmx1mmx0,1mm= Volumen= L x Lx h V= 1mm x1 mmx0 ,1mm=
X= 0,1mm3 X= 0,1mm3

Como son 5 cuadrados grandes: Como son 10 cuadrados grandes:

0,1mm3 x 5 = 0,5 mm3 0,1mm3 x 10 = 1 mm3
Corrección del volumen obtenida a la unidad Corrección del volumen obtenida a la unidad
XFv = 1 Fv=1/X Fv = 1/ 0,5 Fv= 2 XFv = 1 Fv=1/X Fv = 1/ 1 Fv= 1

FT= FD x FV FT= 20 x 2 FT= 40 FT= FD x FV FT= 20 x 1 FT= 20

Número de leucocitos/mm3 = FT x leucocitos Número de leucocitos/mm3 = FT x leucocitos

40 x 175 = 7000 20 x 350 = 7000

Cuentas de leucocitos: 7000 Gb/mm3 Cuentas de leucocitos: 7000 Gb/mm3

 Valores de referencia
Adulto: 5000 – 10.000 Gb/mm3

Ver tabla pediátrica guía técnicas básicas pagina 56.

1mm3 = 1 µL 1 L = 106 µL

Términos
Dentro de los valores de referencia
Leucopenia
leucocitosis
 Cuenta de leucocitos

Manual Electrónico
Método Visual directo Por ej. Impedancia.-
Ventaja Muy útil en casos clínicos de Exacto, rápido de bajo error.
leucopenia y leucocitosis

Es económico

Se utiliza como comprobación

de la validez de los métodos
electrónicos
Desventaja Inexacto en relación al método Poco útil en casos clínicos de
electrónico cuando el número leucopenia y leucocitosis
de leucocitos se encuentra en
rangos específicos.-
 Reporte
Cuenta de leucocitos
Método: visual directo
Resultado: ________Gb/mm3
Valores de referencia: 5000-10000 Gb/mm3