Clasificación

Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir

según cómo esté dispuesta la fase estacionaria:
 Cromatografía plana. La FE se fija sobre una placa plana
o a los intersticios de un papel y la FM se desplaza a
través de la fase estacionaria por capilaridad o por
gravedad.. Las principales técnicas son:
◦ Cromatografía en papel
◦ Cromatografía en capa fina
 Cromatografía en columna. la FE se introduce en una
columna estrecha a través de la cual pasa la FM por
efecto de la gravedad o de una presión aplicada.Según el
fluido empleado como fase móvil se distinguen:
◦ Cromatografía de líquidos
◦ Cromatografía de gases
◦ Cromatografía de fluidos supercríticos
Según el procedimiento de
separación
ENSANCHAMIENTO DE BANDA Y EFICACIA DE UNA
COLUMNA CROMATOGRÁFICA

La eficacia de la separación de los componentes de una

mezcla en una columna cromatográfica guarda una
estrecha relación con la forma y la separación de los
picos cromatográficos que se reflejan en
el cromatograma.
Teoría de los platos teoricos
Considera que una columna cromatográfica está constituida por una
serie de capas estrechas, discretas pero contiguas, denominadas platos
teóricos, en los cuales se establece el equilibrio de distribución de
cada soluto entre la fase móvil y la fase estacionaria.

Podemos definir, entonces, plato teórico como la longitud de una

columna en la que el soluto experimenta un equilibrio completo entre
las dos fase. El número de platos teóricos N de una columna de
longutid L será:

Cuantos más platos teóricos formen una columna, mayor será su

eficacia (o lo que es lo mismo, cuanto menor sea la altura de plato
mayor será la eficacia).
Teoría cinética de la cromatografía
Difusión en remolino o difusión de Eddy: A menor velocidad de flujo, la mayoría
de las partículas prueban muchos caminos, llegando en promedio muy próximas al valor
medio, no originando ensanchamiento de banda
Difusión longitudinal: Migración de las moléculas o iones desde la zona más
concentrada hacia las mas diluidas. A menor flujo de la fase móvil incrementa el
ensanchamiento, debido a que el analito tiene más tiempo para realizar difusión
Resistencia a la transferencia de masa entre la fase móvil y la fase
estacionaria.
Estos tres factores se relacionan con la altura de plato
mediante la ecuación de van Deemter:
  Aplicaciones
Cromatografía de exclusión molecular
 La cromatografía de exclusión molecular (Size
Exclusión Chromatography, SEC) es el nombre
general para los procesos de separación de
biomoléculas de acuerdo a su tamaño cuando una
solución fluye a través de una cama empacada con
un medio poroso
Cromatografía de intercambio iónico
 La cromatografía de intercambio iónico (Ion
Exchange Chromatography, IEC) separa las
moléculas en base a su carga ionica neta.
 Cromatografía de fase reversa
 La cromatografía de fase reversa
(Reversed Phase Chromatography, RPC)
es una técnica de purificación capaz de
separar componentes con características
muy similares, como proteínas que
difieren en solo un aminoacido e
isomeros conformacionales de péptidos