MICROSCOPIE

ELECTRONICA

1
 putereacea mai mare de rezoluţie
a unui microscop optic = 0,2μ

2
 Principiul M.E.
 1924 De Broglie - comportarea
dualistă unda - corpuscul a
particulelor încărcate electric .

D = λ / N x sinα

 Λ =h /M * v
3
4
Microscopul electronic de
transmisie
 tunul electronic este
sursa electronilor de
inalta energie, lentile
electromagnetice,
 camera in care se
introduce preparatul
 lentila proiector
 ecranul fluorescent pe
care se formeaza
imaginea.
5
Principiul MET
 Electroniicare străbat preparatul sunt
deviaţi în funcţie de grosimea şi
densitatea preparatului
 structurile mai dense vor produce un
grad mai mare de dispersie a
electronilor – zone electronodense,
mai întunecate
 structurile mai subţiri vor permite o
trecere mai uşoară a electronilor –
zone electronoclare 6
Interactiunea electroni-
preparat

7
Caracteristicile M.E.
 Puterea de mărire
 Puterea de rezolutie

 Putereamaxima de marire utila

este de aproximativ 1 milion de ori.
8
Caracteristicile M.E.
 Puterea de rezoluţie
 Teoretic, puterea maxima de
rezolutie
=1- 2 Å.
1 Å= 10-10 m
 Practic , puterea de rezolutie este
de 1/ 10 din grosimea sectiunii
examinate ~ 60 Å. 9
Caracteristicile M.E.
 Numaipentru preparatul
microscopic permanent!

 Imaginea
finala este
MONOCROMA

 zone electronodense si
10
electronoclare
11
ETAPE
 Recoltare  Incluzie
 Fixare  Sectionare
 Deshidratare  Diferentierea
 Clarificare structurilor prin
 Impregnare
contrastare
 Montare pe
grila
12
Criterii pentru aprecierea unei
imagini corecte
 Absenţa spaţiilor astructurate
 Continuitatea membranelor
 Aspectul particular al unor organite
 Aspectul general este acelaşi de fiecare
dată, indiferent de fixatorul sau metoda
folosită

13
MICROSCOAPE ELECTRONICE
 Microscopul electronic cu baleiaj sau
scanning.
 imagini tridimensionale ale suprafetelor
celulelor, tesuturilor sau chiar a organelor
 acelaşi principiu al interacţiunii cu un
fascicul de electroni
 importanţi pentru obţinerea imaginii sunt
electronii “reflectaţi” pe suprafaţa
preparatului

14
MICROSCOPIE DE BALEIAJ

15
 Ingheţare - fracturare
 Permite vizualizarea suprafeţelor
rezultate prin clivajul anumitor structuri
(ex: clivajul membranei celulare)
 se realizează un mulaj metalic sau de
carbon

16
Ingheţare - fracturare

17