UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE PATOLOGIA MEDICA
HISTOQUÍMICA

Estudiante: María Yajures 26.391.622

 Ácido-Alcohol Resistencia
Es la propiedad física de algunas bacterias a la resistencia a la decoloración de la
fucsina básica (rojo) la cual penetra en la célula por acción del fenol y el calor.

Las bacterias ácido-alcohol resistentes no pueden ser clasificados según la tinción

de Gram, la cual es la técnica más común en la microbiología contemporánea, sin
embargo puede ser teñido con algunas tinciones concentradas combinadas con calor.

Una vez teñida tiene la capacidad de resistir la decoloración de una combinación de

alcohol-ácido, el cual es el decolorante más común en los protocolos de tinción de
bacterias, de donde viene el nombre Alcohol-ácido resistente.

Bacilos ácido-alcohol resistentes que forman

estructuras en «nido de pájaro»
Bacterias Ácido-Alcohol Resistentes
BAAR poseen una pared celular con las siguientes características:

• Resistencia a la coloración por el alcohol clorhídrico usado en la tinción Ziehl-Neesel.

• La cantidad de ácidos micólicos en esta relación con la +ácido-alcohol resistencia.

El número de géneros de bacterias ácido-alcohol resistentes es muy limitado:

• Mycobacterium Tuberculosis
 Mycobacterium • Mycobacterium Leprae
• Micobacterias atípicas

 Nocardia
 Mycobacterium
• Son bacilos finos, largos e inmóviles.

• Son resistentes a la decoloración debido a la alta

concentración de ácido micólico en la pared celular.

• Por este motivo no se les puede catalogar dentro de la clasificación de Gram.

• Son teñidas adecuadamente con el método de Ziehl-Neelsen.

• Son bacterias aerobias estrictas.

• Su cultivo es muy varible.

• Dentro de este género existen las especies M. Tuberculosis y M. Leprae.

 Mycobacterium
Tuberculosis
Características generales:

• También conocido como bacilo de Koch.

• Son sensibles al calor, la luz solar y la luz UV. Son resistentes al frío y la desecación.

• Poseen una multiplicación lenta (16 a 20 horas)

• Reservorio natural: hombre.

• No produce exotoxinas, endotoxinas o enzimas que puedan causar efectos negativos.

• Tinciones: Ziehl-Neelsen o la fluorescente de auramina. Y como decolorante Alcohol

Clorhídrico.
 Mycobacterium
Leprae
Características generales:

• También conocido como bacilo de Hansen.

• Se tiñe individualmente formando masas compactas rodeadas de una membrana

limitadora (globis).

• Su temperatura óptima de crecimiento es de 30 °C.

• Es un parásito obligado que se multiplica dentro de los macrófagos, en especial en

los histocitos y en las células de Schawnn. Tiene especial afinidad por los nervios.

• Tinciones: Ziehl-Neelsen.
 Micobacterias
Atípicas
Son especies de micobacterias distintas de las que producen
tuberculosis o lepra. Algunas son saprófitas (M. Gordonae, M.
Terrae) y otras tienen poder patógeno para el hombre
pudiendo producir enfermedades denominadas
micobacteriosis. Se pueden clasificar en:
 Grupos de crecimiento lento:

• Grupo I (fotocromógenas): Sus colonias producen pigmento al ser expuestas a la luz.

• Grupo II (escotocromógenas): Sus colonias son pigmentadas tanto en la luz como en

la oscuridad.

• Grupo III (no cromógenas): Las colonias no son pigmentadas.

 Grupos de crecimiento rápido:

• Grupo IV, V y VI (de crecimiento rápido): Crecen entre tres y cinco días. Pueden ser
fotocromógenas (IV), escotocromógenas (V), o no cromógenas.

Las principales micobacterias atípicas potencialmente patógenas para el hombre son:

• M. Kansasii • M. Malmoense
• M. Marinum • M. Fortuitum
• M. Scrofulaceum • M. Chelonae
• M. Szulgai
• M. Xenopi
• M. Ulcerans
• M. Avium intracellulare
 Nocardia
Características generales:

• No forman parte de la microbiota habitual humana ni

animal.

• Son resistentes a la lisozima.

• En muestras clínicas o cultivos primarios: son bacilos ramificados de 0,5 a 1 µm,

con subramificaciones en ángulo recto. Son debilmente Gram + y parcialmente
ácido-alcohol resistentes.

• En subcultivos: van perdiendo sus afinidades tintoriales y su morfología inicial,

fragmentándose en formas cocobacilares.

• Las distintas especies de nocardia son bacterias patogénicas de baja virulencia;

por lo cual son solo clínicamente significantes como infecciones oportunistas en
sujetos de sistema inmune débil. Tales como niños y ancianos.
 Coloración de Ziehl-Neelsen
• Coloración con Fucsina

Se utilizaron las siguientes, a temperatura ambiente:

Fucsina Básica Tiempos

Fenicada al 1 % 10’, 15’, 20’, 30’
Fenicada al 4% 10’, 15’, 20’, 30’

•Decoloración

HCl al 1 % en alcohol de 95% 45’’, 1’, 2’, y 5’

H2SO4 al 5% en alcohol de 95% 1’, 2’, 5’ y 10’
H2SO4 al 5% en H2O destilada 2’, 3’ y 4’
Coloración de Ziehl-Neelsen
• Contraste de Fondo
Tiempos
Azul de metileno al 0,5 y 1% 1’ y 2’
Verde claro al 1% 1’ y 2’
Hematoxilina de Harris 1’ y 2’

Resultados

1. La fucsina fenicada al 1 % durante 20' da resultados satisfactorios. Se

debe almacenar en frasco ámbar hermético; debe prepararse cada mes;
debe filtrarse antes de usarse pues la evaporación del alcohol en que se
disuelve, produce con frecuencia precipitados. La coloración no se debe
hacer en jarras de Copplin porque el desprendimiento de los bacilos, que
siempre ocurre, puede contaminar otras preparaciones, especialmente
cuando se mezclan con biopsias de enfermedad de Hansen lepromatosa.
Resultados

2. La decoloración con ácido sulfúrico al 5% en agua destilada produce los

mejores resultados. La decoloración con H2SO4 al 5% en alcohol de 95°
es útil pero disminuye notoriamente la cantidad de BAAR demostrados,
especialmente en los casos de lepra. El alcohol ácido-clorhídrico es un
decolorante más drástico que exige una precisión mayor en la
decoloración. En tuberculosis hepática, las dos primeras formas de
decoloración nos permitieron ver muy bien los bacilos en los granulomas
y en las células de Kupffer, mientras que con el alcohol-HCL se
disminuyó considerablemente la demostración de los bacilos fagocitados
por aquellas células.

3. El excelente contraste dado por la hematoxilina de Harris y en menor

grado por el azul de metileno; permite observar núcleos, infiltrados,
granulomas y demás componentes del tejido estudiado. Se puede decir
con certeza donde está localizado el bacilo, por ejemplo en macrófagos,
polimorfonucleares, nervios, pelos, endotelio y otros sitios, mientras que
con el verde claro como coloración de fondo, sólo es posible decir si se
demostraron o no bacilos.