AISLAMIENTO DE E.

coli A PARTIR DE
CARNE DE RES
Daniela Muñoz Aldana
Dayanid Moreno Ramirez
Luis
Sarima Salazar Santos
TAXONOMÍA

Dominio Bacteria
Filo Proteobacteria
Clase Gammaproteobacteria
Orden Enterobacteriales
Familia Enterobacteriaceae
Género Escherichia
Especie E. coli
MICROSCOPÍA

E. Coli es un bacilo Gram-negativo, mide 2 µm de largo por 0,5 µm de

diámetro.

E. coli, tinción de Gram, microscopio E. coli, microscopio electrónico de barrido.

óptico.
ECOLOGÍA
La fuente más frecuente es la carne de
vacuno y los productos cárnicos de vacuno
que hayan sido poco cocinados, así como la
leche cruda sin pasteurizar y los productos
elaborados con ella (queso, nata, etc. Las
frutas y verduras lavadas o regadas con agua
contaminada también pueden ser
transmisoras de la bacteria.
Bacterias como Escherichia coli, que viven
en sangre y fluidos corporales, tienen aW de
alrededor de 0.995.
Viven en un pH de 4 a 9.
Su temperatura óptima es de 2.5°C, más
49.4°C y un porcentaje de sal de 6%
Como son anaerobias facultativas, pueden
vivir con presencia o ausencia de oxígeno.
Por lo que crecen en una gran variedad de
lugares, sus requerimientos nutricionales son
básicos.
PATOGENICIDAD
• E.coli enteropatogena
 Primer mecanismo:
• Adherencia al enterocito.
• Translocación de señales intracelulares.
• Adherencia intima bacteriana.
 Segundo mecanismo:
• Polimerización, se forman largas cadenas de actina que alteran la morfología del citoesqueleto.
• E.coli enterotoxigénica
• Adherencia: factores de colonización (CFs) Los CFs se encargan de la adhesión de las bacterias a receptores
(fibronectina, glicoesfingolípidos y glicoproteínas) de las células epiteliales del intestino delgado, lo que permite su
colonización.
• Toxinas: termo estables( st) y termolábiles (LT-I,LT-II)
• E.coli entero agregativa:
• Adherencia: por medio de fimbrias para formar microcolonias “opilación de ladrillos”.
• Enterotoxinas :una variedad de SPATEs citotóxicos y no citotóxicos.
• Escherichia coli enteroinvasora:las principales características de la patogenicidad están la adhesión epitelial, la
invasión, la supervivencia dentro de los macrófagos y la formación de biopelicula.
FACTORES DE VIRULENCIA
 Escherichia coli enteropatógena:
 bacteria entra en contacto con la célula mediante un flagelo y el pili tipo IV
 La proteína DsbA que forma enlaces disulfuro para darle estabilidad
 sistema de secreción tipo 3
 proteína Tir (receptor)
 Escherichia coli enterotoxigénica
 Para la adherencia de ECET a las células epiteliales, la bacteria expresa la EtpA, exoproteína de adhesión situada al
extremo del flagelo
 enterotoxinas termoestables (ST) y enterotoxinas termolábiles (LT). Existen dos tipos de LT (LT-I y LT-II);poseen dos
subunidades : a yb
 sistema de secreción tipo 2
 proteínas de la membrana externa como Hra-1 (Hra: heat-resistant agglutinin 1)
 Fimbrias
 Escherichia coli enteroinvasora
 Flagelos
 a adhesina FimH localizada en el pili tipo1,
 Fimbrias
 E.coli enteroagregativa
 presenta plásmidos pAA, que codifican varios factores de virulencia, en los que se incluye un regulador AggR
 proteínas de la membrana externa como Hra-1
SINTOMAS O MANIFESTACIONES CLINICAS

Los síntomas de
la enfermedad
incluyen cólicos
Fiebre o vomitos.
y diarrea, que
puede ser
sanguinolenta.

E.
coli productora
de toxina Shiga
La mayoría de los pacientes se
destacan
recuperan en el término de 10
días síntomas como
los calambres
abdominales y
la diarrea.

10% de los
pacientes
Tasa de letalidad de 3% al 5%.
pueden
desarrollar SHU.
 Enteropatógena. Enteroinvasora. Enterotoxigénica. Enterohemorrágica.

ECEI

ECET

ECEH
ECEP Clásica.

Diarrea liquida con Diarrea Diarrea liquida Diarrea

moco y vómitos, disenteriforme profusa y nauseas. sanguinolenta
fiebre. (moco y sangre), afebril, síndrome
dolor abdominal y hemolítico
fiebre. urémico(SHU).
DOSIS INFECCIOSA

Para ECVT O157:H7, la dosis infectiva es baja, entre 10 y 700 células

(media < 100 células).

Para E. coli O157:H7, Haas et al. (2000) desarrollaron un modelo

dosis-respuesta que estimó una dosis de 5,9 x 105 células para la
infección del 50% de la población expuesta y el riesgo de consumir
100 células en 2,6 x 10-4

Para E. coli O111 y O55, y utilizando voluntarios humanos, Haas et

al. (1999) desarrollaron otro modelo que estimó una dosis de 2,6 x
106 células para la infección del 50% de la población expuesta y el
riesgo de consumir 100 células en 3,5 x 10-4 .
ALIMENTOS IMPLICADOS

Productos de carne
Salami, salchichas,
picada cruda o Hamburguesas
y demás embutidos
poco cocida y leche poco cocidas
curados.
cruda

El yogur y el queso
La sidra fresca no
elaborado con
pasteurizada
leche cruda
COMPLICACIONES
Síndrome urémico
hemolítico (SUH)
Un tipo de
insuficiencia renal

Anemia Orina menos

hemolítica frecuente

Pérdida del color

rosado de las Sensación de
mejillas y en la cansancio
parte interior de los extremo
párpados inferiores
METODOLOGÍA
PROTOCOLO

Tomar 10 gr de la muestra y homogenizar

con 90ml de agua peptonada al 0.1%

Se realizaron dos diluciones

Técnica de NMP seriadas 10-2 10-3 Técnica de recuento en
placa

Tomar 1 ml de las
Inocular o,1ml de las
diluciones e inocular en
diluciones realizadas en
tubos de ensayo con
agar chromocult
caldo LMX-fluorocult

Incubar a 37 °C por 24
Incubar a 37 °C por 24
horas
horas

Realizar la observación Realizar la observación

de los resultados de los resultados
RESULTADOS
RESULTADOS
RESULTADOS
DISCUSIONES

• Se pudo evidenciar la presencia

de coliformes debido a que estos
se evalúan por la capacidad de
escindir el sustrato Salmon-GAL
presente en el medio gracias a la
enzima β-D-galactosidasa,
produciendo colonias rojas
asalmonadas.
DISCUSIONES

• Se evidenció el crecimiento de E.
coli, ya que estas colonias crecen
con un característico color
violeta y azul, debido a la
combinación de las dos enzimas
que E. coli posee; B-D-
glucoronidasa, la cual causa la
escisión de los sustratos X-
glucorónido, y Salmón-Gal, por
la B-D-galactosidasa. Cuando
hay presencia de E. coli se
escienden los dos sustratos, lo
que da lugar a colonias de color
azul oscuro y violeta, en
oposición de las rojas
asalmonadas de otras colonias de
bacterias coliformes.
DISCUSIONES

la presencia de colonias incoloras

indicó el crecimiento de bacterias
no coliformes.
DISCUSIONES

Un cambio de color del caldo

Fluorocult de amarillo a azul verdoso
indica la presencia de coliformes. En
adición un azul fluorescente bajo
exposición a la luz ultravioleta permite
la rápida detección de E. coli. Como el
medio posee el aminoácido triptófano,
la reacción indol es fácilmente dada
por adición del reactivo de Kovacs. La
formación de un anillo rojo confirma
la presencia de E. coli.
 Formando líderes para la
construcción de un nuevo país en
paz