ASFARVIRIDAE

African Swine Fever And Related Viruses

Prof. Aurico Sousa Fonseca

Cátedra de Microbiología e Inmunología FCV-UCV
ASFIVIRUS
• Enfermedad exclusiva del ganado porcino
• Muy contagiosa
• Curso febril
• Evolución muy variable
• Lesiones cutáneas, ganglionares y
viscerales de tipo congestivo y
necrótico/hemorrágico
• Descrita como entidad distinta de la peste
porcina clasica por Montgmery en Kenia
1921
– Transmisión por Ornithodoros
desde suidos salvajes africanos
– Ineficiencia de la
inmunización pasiva
en los cerdos afectados
 Epidemiología de la
Peste porcina Africana:
1957-1979.

Países que han sufrido distintos

brotes de Peste Porcina Africana
desde 1997 a 2002.
Países y año de erradicación en
color verde: Botswana (1999) ,
Portugal (1999), Kenya (2002) y
Namibia (1998). Según
información de la OIE.
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Taxonomía y Clasificación
• Comité Internacional de taxonomía vírica (1999)
– Reclasificado al estar huérfano desde 1984
• Iridoviridae: Aspectos morfológicos y estructurales
• Poxviridae: Estructura y estrategias de expresión de su genoma
• Nexo evolutivo entre ambas familias: únicos desoxivirus con replicación
citoplasmática
– Familia: Asfarviridae
• Generó: Asfivirus
• Especie: Virus de la Peste Porcina Africana
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• Desoxivirus de simetría icosaédrica
(¿cúbica?), con ADN lineal bicatenario y
varias capas de lipoproteínas de
envoltura
– • Especie: Virus de la Peste Porcina Africana
• Cinco grupos por análisis RFLP (Restriction
Fragment Length Polymorphism) por
configuración de dos regiones de alta
variabilidad del genoma
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• Sensibles a:
– Radiaciones «X» y
«Gamma»
– Disolventes orgánicos
– Sales biliares
– Desinfectantes
fenólicos
– Temperaturas
superiores a 60 °C
> a 60 °C
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• Resistentes a: 20 °C
– Formol (6 días al 1%) 4 °C
– NaOH (1 día al 2%) 1%
– pH de 4 a 13
– Temperaturas de 4 a 20 °C
(años)
– Putrefacción, desecación y la
curación en productos
cárnicos no cocidos.
– En jamones curados en seco
(serrano e ibérico) resiste
140 días y en lomos 120 días
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• Viriones extracelulares poseen
envoltura de 200-215 nm de
diámetro adquirida de la
membrana citoplasmática
celular al liberarse por gemación
– Proteínas víricas de superficie P12,
p17, p22, p24, p54, j18L, j5R y
EP402R
• Cápside icosaédrica formada por P72
P12
1892 y 2172 capsómeros P17
prismáticos hexagonales huecos P22
de 13nm de altura, compuesta P24
P54
por p72, con p30 intercalada j18L
– Regula penetración a través de la j5R
membrana celular p30 EP402R
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• Dicha cápside envuelve varias capas
lipídicas concéntricas, derivadas del P14
retículo endoplásmico , que cubren la P15
cubierta del nucleoide, de unos 100 P34
P35
nm P37
– La cubierta esta compuesta por p150
proteínas estructurales p14, p15, p34,
p35, p37 y p150
• Nucleoide electrodenso, formado por
ADN con sus histonas
• Se han reconocido 54 proteínas
estructurales y funcionales
– Enzimas necesarias para la transcripción
del ARNm temprano
– Virus sólo depende de la maquinaria del
núcleo celular para iniciar la replicación
del ADN vírico
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Estructura y organización
del Genoma en el nucleoide
• ADNds lineal de 170-190 kbp
asociados a las histonas p10 y p14.5
• Cerrada covalentemente en ambos
extremos por secuencias terminales
tipo horquilla de 37 bases (A y T
imperfectamente apareadas)
invertidos y complementarios entre si
• Extremos variables en tamaño y
secuencia con regiones variables,
sujetas a frecuente delecciones y
adiciones con 5 familias multigénicas
– Depende la mayor parte de la
variabilidad genética del Asfivirus
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Estructura y organización del Genoma en
el nucleoide
– Grueso del genoma en posición central,
muy estable y longitud constante
125kpb
– Abundantes repeticiones internas (IR –
internal repeats)
• Cortas (10-50 pb) y largas (200 pb)
– 151 marcos de lectura abierta (ORF-
Open Reading Frames)
• 11 codifican proteínas o poliproteínas
estructurales
• 37 codifican enzimas implicadas en
transcripción, replicación y procesamiento
de las proteínas estructurales
– Escisión proteolítica, glucosilación,
miristilación, fosforilación y ubiquitinación
• Otras codifican proteínas funcionales
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Estructura y organización del Genoma en el nucleoide
– Otras codifican proteínas funcionales
• Genes EP402R: moduladoras de la respuesta inmunitaria
del hospedador
– Determinan hemadsorción, fenómeno que aísla a las celulas
infectadas de los linfocitos t citotóxicos
• A238L: regula las reacciones inflamatorias mediadas por
citocinas
• EP153R: regula capacidad de adherencia de las células
infectadas
• DP71L: Factor de neurovirulencia
• A179L Y A224L: Inhiben la apoptosis de las células
infectadas
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• Replicación
– Células Diana: monocitos y
macrófagos porcinos
– En infección natural puede
multiplicarse en:
• Células endoteliales,
• Epiteliales de los túbulos
renales,
• Hepatocitos
• Megacariocitos de la médula
ósea y
• Polimorfonucleares
– Nunca infecta linfocitos,
pero puede inducir su
apoptosis masiva en lo
órganos linfoides
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Replicación

Replicación citoplasmática
Virión p12
Endocitosis

Receptores para p12 p30 Transcripción

Transcripción Tardía
temprana
Grandes complejos
secuenciales
(Concatémeros) de
100 moléculas de ADN
Poliproteínas estructurales
ADN polimerasa, Timidina
Enzimas relacionadas con
cinasa, Ribonucleótido
su procesamiento
reductasa y ADN ligasa

Liberación
por gemación
Factorías de virus en
Agregados Retículo endoplásmico
paracristalinos de próximo al núcleo
viriones maduros
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• Cultivo
– Espectro restringido
de sustratos celulares
– Infecta solo monocitos, macrófagos,
células endoteliales y parte de los
polimorfonucleares de histocultivos
de origen porcino.
– Adaptación a sistemas celulares de
otros orígenes no es fácil y puede
requerir pases ciegos
• Líneas estables de origen porcino como
PK15 y de primates, como Vero, CV y
MS (de riñón de mono)
– Produce un claro efecto citopático
• Células presentan condensación
cromatínica y cariorrexis, con aparición
de cuerpos de inclusión
intracitoplasmáticos, y finalmente lisis.
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• Estructura y variabilidad antigénica
– Muy compleja y determina varios
serotipos con comunidad antigénica
parcial
• 1 antígeno precipitante
• 1 antígeno hemadsorbente (no estructural,
sino inducido en la células infectadas)
• 5 antígenos fijadores de Complemento
– Intensamente antigénico y
desencadenante de altos niveles de
anticuerpos circulantes duraderos
pero no son protectores
• No son eficaces ni para la prevención en
cerdos indemnes, ni para la curación de
los ya infectados
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• Estructura y variabilidad antigénica
– Composición proteica compleja, con solo algunos antígenos
son realmente potentes e inducen anticuerpos útiles para el
diagnóstico
• Proteínas de la superficie P24 p54
• Proteínas de la cápside p72 y p30
– EP402R (antígeno hemadsorbente)
• Grupo A: cepas Lisboa 57, Funchal 65, Katanga 67…)
• Grupo B: cepas Lisboa 60, Madrid 60, Angola 72…)
• Grupo C: cepas Mozambique 64…)
– Proteínas que envuelven el nucleoide son intensamente
antigénicas
• P14, p15, p34, p35, p37 y p150
– Clara homogeneidad antigénica entre los aislamientos
euroamericanos mientras que los africanos son mucho más
heterogéneos
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• Hospedadores del virus
– Estrecho espectro de hospedadores
• Miembros de la familia Suidae
– Salvajes africanos: Géneros
Phacochoerus, Potamochoerus e
Hylochoerus
» No causa enfermedad, infección
inaparente y estado de portador
– Cerdo y jabalí europeo (Sus scrofa)
» Hospedadores completamente
sensibles a la enfermedad,
Portadores de por vida
• Distribución linfohemática y sistémica
de las células hospedadoras, con
largos periodos de permanencia del
virus en sangre y todos los órganos
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• Hospedadores del virus
– Estrecho espectro de hospedadores
• Garrapatas Argasidae del género
Ornithodoros
– Vectores biológicos en la naturaleza, y
reservorios muy duraderos, dado su
proverbial longevidad, resistencia
ambiental y transmisión sexual,
transovárica y transestadial
» O. moubata y O. savignyi en África
» O. erraticus en sur de europa
» O. coriaceus en América
• Piojo del cerdo (Haematopinus suis) y
otros hematófagos
– Vectores mecánicos de corta duración
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• Hospedadores del virus
– Transmisión a nuevo hospedadores
por artrópodos hematófagos
– Eliminación con excreciones y
secreciones
– Muy eficaz el contagio directo
– Contagio indirecto eficaz debido a la
resistencia ambiental del virus
• Vías inhalatoria, parenteral o
digestiva
– Alimentos o fómites contaminados con
sangre o excretas
– Desperdicios de cocina que contengan
restos de carne de cerdo infectado
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• Poder Patógeno del virus
– Depende de tres factores:
1. Efecto citopático directo
– Notable en células sanguíneas y del
sistema retículo endotelial :
Vasculopatías y coagulopatías
2. Apoptosis selectiva de linfocitos
T de los órganos linfoides
– Lesiones necróticas y linfopenia
persistente
3. Ineficacia de los anticuerpos,
aunque se producen en
cantidades masivas
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• Poder Patógeno del virus
– Clínicamente se caracteriza por:
• Cuadro febril agudo (hasta 42 °C)
• Eritema cutáneo
• Disnea
• Vómitos
• Diarrea alterna con estreñimiento
• Ataxia del tercio posterior
• Mortal en 6-8 días en el 90% de los casos
• Lesiones de infarto hemorrágico de los
órganos linfoides
– Ganglios de carbón, esplenomegalia con
hematoma
• Neumonía
• Petequias en corteza
renal
• Lesiones hemorrágicas
viscerales generalizadas
ASFIVIRUS

Diagnostico y prevención
• Clínica:
Signos y cambios patológicos
• Espécimen:
Sangre y suero, bazo, riñon, pulmón,
gánglios linfáticos (amígdalas y
nódulos)
• IF e ELISA
• Diagnostico definitivo:
ELISA
• No hay vacuna.