UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA DE QUÍMICA Y FARMACIA
BIOQUÌMICA II
TEMA: QUÈ ES LA SIEMBRA MICROBIOLÒGICA
Y LOS DIFERENTES MÈTODOS EMPLEADOS

ALUMNA:
o CRISTINA VÉLEZ CORTÉZ
GRUPO 1A
QUINTO SEMESTRE
DOCENTE: Q.F MARIANITA RENDÓN 2019-2020 CII
MSc.
 Depositar un inoculo o semilla en un medio de
cultivo adecuado para que se desarrolle. Se
necesita darle las condiciones físicas adecuadas
como son temperatura, tiempo, oxigeno, pH,
dependiendo de lo que requiere el
microorganismos que se desea cultivar.

Principios Generales
1. Practicar la siembra en medios de cultivos previamente
esterilizados y adecuados para la bacteria que se desea
aislar
2. Emplear instrumentos estériles
3. No contaminar ni destruir los microorganismos
4. Depositar los microorganismos asépticamente en los
medios de cultivo
5. Esterilizar los instrumentos empleados, inmediatamente
después de cada operación
ASAS Y AGUJAS
- Se utilizan para pescar transportar y sembrar
el material bacteriológico
- Se esterilizan en el mechero al rojo vivo antes
y después de las siembras bacteriológicas.

Pipeta Pasteur: Es un tubo de vidrio con una

extremidad afilada u cerrada. La otra extremidad
que se encuentra abierta está protegida por una
mota de algodón cardé o hidrófobo.
a) Estado físico del material a sembrar ( sólido o líquido )
b) Estado físico del medio de cultivo ( agar o caldo )
c) Ambiente en el cual crece el microorganismo ( aerobiosis, microaerofilia o anaerobiosis )

TIPOS DE MÉTODOS
DE SIEMBRA

a) Expulsión del aire por ebullición: antes de efectuar la siembra, los

medios líquidos y sólidos se llevan a ebullición en baño María con el
fin de eliminar el aire. Este proceso se denomina “regeneración” de
los medios. Esto evita el reoxigenamiento de los medios líquidos.
MÉTODOS FÍSICOS

b) Reemplazo del aire por gases inertes: este método consiste en la

eliminación del aire, mediante bomba de vacío, del recipiente que
contiene los medios sembrados y su reemplazo por Hidrógeno,
Nitrógeno, CO2, etc.
 B) Sustancia reductoras no tóxicas que se agregan directamente a los
medios de cultivos,por ejemplo Glucosa al 1-2%, Tioglicolato de sodio
0. 1 – 0.2%, Cistina al 0.05% entre otros.

Métodos Químicos
B) Sustancia reductoras no tóxicas que se agregan directamente
a los medios de cultivos,por ejemplo Glucosa al 1-2%, Tioglicolato
de sodio 0. 1 – 0.2%, Cistina al 0.05% entre otros.

Métodos Biológicos a) Tejidos animales que se adicionan a los medios de cultivo,

como por ejemplo: carne picada, cerebro, hígado, etc.
Siembra por inmersión: Se coloca el inóculo en una placa o caja de
Petri y sobre el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido.
Este método se utiliza para microorganismos aerobios.

Siembra en doble capa: Se procede de la misma manera que por

inmersión. Una vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra
de medio necesaria para cubrir la capa anterior (generalmente 10 ml.
aprox.). Este método se utiliza para microorganismos anaerobios
facultativos y microaerofílicos.

Siembra en superficie: Se vierte sobre una placa de Petri el medio de

cultivo fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inóculo.
Con ayuda de una espátula de Drigalsky se extiende el inóculo hasta su
absorción total por el medio de cultivo. Este tipo de siembra se
recomienda para microorganismos aerobios estrictos.
Siembra en estría: se vierte sobre una placa de Petri el
medio de cultivo fundido y se deja solidificar.

Siembra volumétrica: Este método de siembra

consiste en sembrar una muestra liquida cuyo
volumen no puede ser predeterminado, en medio de
cultivo sólidos o líquidos.

Siembra masiva: Cuando se desea realizar una siembra

masiva se puede utilizar la espátula de Driglaski. En este
caso la gota de muestra liquida se esparce con la espátula
por toda la superficie del medio de cultivo sólido
imprimiéndo un movimiento en espiral. La siembra masiva
también se puede realizar con un hisopo grueso embebido
de un cultivo liquido, procediendo a su deslizamiento sobre
toda la superficie de una placa de agar.
Siembra por dilución: El asa o aguja de platino cargados con el material a
sembrar se introduce en el seno de los medios de cultivos líquidos y se agita
moderadamente. El propósito es de producir una dilución bacteriológico en el
medio liquido o caldo.

Siembra por estrías en superficie: Este método de siembra se realiza

sobre la superficie de los medios de cultivos sólidos distribuidos en placas
de “Petry” o en tubos d ensayo solidificados en forma de cuña

Siembra por picadura o punción: El instrumento de siembra a emplear será la

aguja de platino y el medio de cultivo sólido, generalmente, en tubo de ensayo. Las
manipulaciones y la observancia de las precauciones de asepsia, son similares que
cuando se utiliza el asa. La particularidad que tiene este método, es que la aguja (con
el inoculo) debe atravesar perpendicularmente el medio de cultivo.

Siembra en TSI: (Picadura estrías por superfice) Es un medio que contiene glucosa,
sacarosa y lactosa, hierro y un indicador que es el rojo fenol. En este medio
sembraremos por picadura y estrías en superficie, como ya conocemos, para estudiar
los cambios que ocurrirán en superficie y profundidad. A lo largo del canal se
desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en la parte superior o inferior del
tubo, estarán indicando su comportamiento frente a los azucares.
Siembra por inoculación o agitación: Con un asa bacteriológica,
esterilizada, se toma cantidad de inoculo, se introduce en el centro del
medio liquido, agitándose, no tocando la pared del tubo.

Siembra por estría ( en tubos de agar inclinado): Muestra de

material en asa de siembra, deslizar en zigzag, empezar por
superficie mas profunda.

Siembra por picadura: Asa recta, tomar la muestra, sembrar en

agar semisólido, en el tubo de ensayo hasta que la muestra quede
bien impregnada al agar.

Siembra por vertido en placa: Diluciones en varios tubos, pipeta 1cc

de muestra o dilución, agregar tubo de ensayo estéril, se agrega medio
licuado, mantener a 55°C, movimientos rotatorios, solidificar.
BIBLIOGRAFÍA:

UCV. Cultivo de microorganismos 21 de Junio de 2010,Obtenido de :

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema_5_Cultivo.pdf

UTN. Siembra y recuento de microorganismos 21 de Junio de 2010, Obtenido de:

https://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practicoIII.pdf

http://microbiologiauasd.blogspot.com/p/metodos-de-siembra.html

IMÁGENES
https://es.slideshare.net/Altajimenez/medios-de-cultivoymetodosdesiembra
https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/t-cnicas-y-tipos-de-sembrado
https://es.slideshare.net/Altajimenez/medios-de-
cultivoymetodosdesiembrahttps://www.academia.edu/35884057/M%C3%89TODOS_DE_AISLAMIENTO.docx