PARTES DE UN ESPECTROFOTÓMETRO

• Espectrómetro: Asume la primera fase del trabajo. Este se encarga de

producir el rango de longitud de onda indicado. Por medio de un
colimador o lente, transmite un haz recto de luz (fotones) que pasa a
través de un primas (monocromador) que divide la luz en sus
diferentes componentes generando diferentes longitudes de onda.
Por medio del selector se hacen pasar a través de la ranura solo las
longitudes de onda deseadas.
• Fotómetro: Una vez que la luz con el rango de longitud de onda
deseado pasa a través de la solución muestra en la cubeta, el
fotómetro detecta la cantidad de fotones absorbida enviando una
señal a la pantalla digital.
 FUNCIONAMIENTO
El funcionamiento de un espectrofotómetro consiste básicamente en
iluminar la muestra con luz blanca y calcular la cantidad de luz que
refleja dicha muestra en una serie de intervalos de longitudes de onda.
Lo más usual es que los datos se recojan en 31 intervalos de longitudes
de onda (los cortes van de 400 nm, 410 nm, 420 nm… 700 nm). Esto se
consigue haciendo pasar la luz a través de un dispositivo
monocromático que fracciona la luz en distintos intervalos de
longitudes de onda. El instrumento se calibra con una muestra o loseta
blanca cuya reflectancia en cada segmento de longitudes de onda se
conoce en comparación con una superficie de reflexión difusa perfecta.
 TIPOS
Según su haz de luz
• Espectrofotómetro de haz simple: En estos la luz pasa solamente de la muestra al detector, por lo
que se requiere una referencia inicial para estandarizar el equipo y así proceder con el análisis. Son
los más sencillos y económicos.
• Espectrofotómetro de haz dividido: En estos la luz se divide en dos trayectorias: la mayor parte pasa
por el monocromador hacia la muestra y luego al detector, mientras un pequeño porcentaje se desvía
hacia un detector de retroalimentación que se utiliza para corregir variaciones en la energía emitida
por la lámpara. Requieren de una muestra de referencia en cada ensayo para corregir la absorción de
la celda y del solvente.
• Espectrofotómetro de doble haz: En estos la luz pasa a través de dos trayectorias hacia dos
compartimentos de celda distintos cada uno con su propio detector; uno es para la muestra y otro
para la referencia, la cual debe realizarse con el mismo tipo de celda y solvente que los utilizados
para la muestra. Al tener una referencia para cada medición, su fiabilidad es mayor.
TIPOS
• Espectrofotómetro de Absorción Atómica: Trabaja con longitudes de onda en el rango infrarrojo
(700 – 15,000 nm) del espectro de radiación electromagnética.
La espectroscopia de absorción atómica explota el hecho de que las moléculas absorben
frecuencias que son características de su estructura. Es una técnica simple y confiable utilizada
ampliamente en química orgánica e inorgánica, investigación e industria.
También tiene una amplia gama de aplicaciones en análisis forense, criminal o civil, desde
identificar la degradación de polímeros hasta determinar el contenido de alcohol en la sangre de un
conductor.
Su uso ha sido muy exitoso para analizar e identificar pigmentos en pinturas y manuscritos; así
como en la industria de alimentos para determinar la concentración de diversos compuestos en
productos alimenticios.
 TIPOS
Espectrofotómetro UV Visible: Es ampliamente utilizado en la espectrometría ultravioleta- visible, que a su
vez implica la espectroscopia de fotones en la región de radiación ultravioleta-visible .
Se encarga de medir la luz que es pasada a través de una muestra y la compara con la intensidad de la misma
antes de pasar a través de la solución o muestra. La relación I / Io es llamada transmitancia, y se expresa
como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisión:
A = – log (%T)
Trabaja con longitudes de onda en el rango ultravioleta (185 – 400 nm) y rango visible (400 – 700 nm) del
espectro de radiación electromagnética. La mayoría de los espectrofotómetros trabajan en este rango. Se les
llama espectrofotómetros de absorción molecular, puesto que la absorción de luz en este rango excita las
moléculas, promoviendo sus electrones de de un estado basal a un estado excitado, permitiendo identificar
grupos funcionales de moléculas.
Este tipo de espectroscopia sirve principalmente para el análisis de compuestos aromáticos y ácidos
carboxílicos insaturados. El espectrofotómetro ultravioleta-visible se utiliza extensivamente en laboratorios
de química y bioquímica para determinar pequeñas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de
metales en aleaciones o la concentración de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del
cuerpo. También para cálculos colorimétricos usados por fabricantes de tintas, compañías de imprenta y
textileras, entre muchos otros.
 USOS
Un espectrofotómetro tiene distintos usos, entre ellos se tiene para el análisis cuantitativo en diversas
áreas como es el caso de la química, física, biología, bioquímica, materiales e ingeniería química,
aplicaciones clínicas, industriales, etc.
• En bioquímica, por ejemplo, sus usos son para determinar las reacciones enzima-catalizadores.
• En la aplicación clínica, se utiliza para examinar la sangre o los tejidos para el diagnóstico clínico.
• Son ampliamente utilizados en muchas industrias incluyendo semiconductores, láser y fabricación óptica,
impresión y examinación forense, así como en laboratorios para el estudio de las sustancias químicas,
también se utiliza para la medición de la transmitancia o reflectancia de sólidos transparentes u opacos,
como el vidrio pulido, o gases.
• Sin embargo, también puede ser utilizado para medir la difusividad en cualquiera de los intervalos de luz
que generalmente cubren alrededor de los 200 nm – 2,500 nm utilizando calibraciones y controles
diferentes. Dentro de estas gamas de luz, se necesitan calibraciones de la máquina utilizando los
estándares que varían en tipo según la longitud de onda de la determinación fotométrica.
• En definitiva, un espectrofotómetro es capaz de determinar, según el control o calibración, qué
sustancias están presentes en un objetivo y exactamente cuánto, mediante cálculos de longitudes de
onda observadas.
Referencias bibliográficas
• ESPECTROFOTÓMETRO.ONLINE. (2019). ▷ ESPECTROFOTÓMETROS ◁
Definición, partes y Ofertas!. [online] Available at:
https://espectrofotometro.online/ [Accessed 3 May 2019].
• Gusgsm.com. (2001). Cómo funciona un espectrofotómetro de
reflectancia | Imagen Digital. [online] Available at:
http://www.gusgsm.com/como_funciona_un_espectrofotometro_de_r
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