Enzimas

Inmovilizadas.
PRESENTADO POR: ANDRES A.
SANTIAGO H.
FRANCISCO M.
INTRODUCCIÓN

 La inmovilización de una enzima es un proceso mediante el cual

esta se logra confinar en una cierta región del espacio para así dar
lugar a una forma soluble y lograr retener su actividad catalítica,
con el cual se puede llegar a hacer uso repetidamente de la
enzima. En algunos casos esta actividad puede llegar a ser
restringida un cien por ciento.
Ventajas y Desventajas del Proceso
Inmovilizador
 Ventajas:
1. Aumento de estabilidad de la enzima.
2. Disminuye costo del proceso, al poder ser reutiliza el
derivado.
3. Posibilidad del diseño de un reactor enzimático, de fácil manejo. Ya
que permiten el uso de cargas elevadas de enzima, logrando así una
actividad durante un tiempo mas largo.
 Desventajas:
1. Se altera la conformación de la enzima.
2. Presencia se perdida en la actividad enzimática durante la
inmovilización
3. Un Biocatalizador es mucho mas caro que una enzima nativa
Métodos de la inmovilización de
enzimas por retención física
1. Atrapamiento: Se retiene la enzima en un medio de matriz solida
porosa, la cual se constituye por un polímero que puede ser,
colágeno, alginato, carraginaato o resinas de poliuretano. Se
pone en suspensión la enzima en una solución del monómero.
Para la polimerización se expone la enzima a un cambio de
temperatura o con la adición de un reactivo químico. Este
atrapamiento se puede dar en gel o fibra.
2. Inclusión en Membranas: dividida en dos tipos Micro
encapsulación y Reactores de Membrana.
Métodos de la inmovilización de
enzimas por retención Química
 El cual esta constituido por dos métodos principales los cuales son
Unión a Soportes y Reticulado en el cual se encuentran, Adsorción
Iónica/Unión covalente y Reticulado Puro/Co-Reticulado
respectivamente.
ADSORCIÓN IÓNICA

 En este tipo de inmovilización la enzima se une a un soporte por

medio de interacciones iónicas, fuerzas de Vander Waals y
puentes de hidrogeno, Los principales factores que influyen en la
adsorción son:
 pH.
 Fuerza iónica.
 Diámetro del poro.
 Presencia de Iones.
UNIÓN COVALENTE
 Este método de encapsulamiento consiste en la activación
de grupos químicos del soporte para que reacciones con los
nucleofilos de las proteínas, los aminoácidos mas utilizados
para este proceso son la lisina, la cisteína, la tirosina y la
histidina, y en menor medida se encuentran la metionina, el
triptófano, la arginina y el acido aspártico y glutámico, los
demás aminoácidos debido a su carácter hidrófobo no
pueden intervenir en la unión covalente.
 RETICULADO
 También denominado como entrecruzado o Cross-linking,
consiste en el uso de reactivos bifuncionales que pueden
emplear, dialdehidos, diisocianatos, entre otros, el resultado de
este procedimiento son enzimas con enlaces intermoleculares
irreversibles capaces de soportar condiciones extremas de pH y
temperatura.
 El Co-reticulado permite eliminar las perdidas de actividad
enzimática debido a efectos difusionales, mediante el
cruzamiento de la enzima con una proteína sin actividad
enzimática.
 Existen técnicas mixtas de inmovilización que consisten en
inmovilizar la enzima por adsorción y luego añadir el reactivo
bifuncional.
EFECTOS DE INMOVILIZACION

 El encapsulamiento altera significativamente el comportamiento de

la enzima, se producen cambios en su estabilidad, la actividad
enzimática se ve afectada por efectos de tipo difusional, estérico y
del microentorno.
1. Efectos en la estabilidad enzimática.
2. Efectos en la actividad enzimática.
ELECCIÓN DEL METODO DE
INMOVILIZACIÓN
 APLICACIONES
 Las aplicaciones de las enzimas inmovilizadas se pueden clasificar
en tres grupos:
 Aplicaciones analíticas. (Biosensores)
 Aplicaciones medicas. (Tratamientos con enzimas inmovilizadas.)
 Aplicaciones industriales. (Farmacéutica, alimentaria, tratamiento
de residuos.)
BIBLIOGRAFIA

 Inmovilización de enzimas, Fundamentos, métodos y aplicaciones.

Dr. Miguel Arroyo, Departamento de Bioquímica y Biología
Molecular, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad de Madrid.