Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
funcţională a celulei
animale
• Nucleul
• Membrana plasmatică
• Mitocondria
• Organite implicate în sinteza şi
transportul macromoleculelor:
– Reticulul endoplasmic
– Aparatul Golgi
• Organite implicate în degradarea
intracelulară a macromoleculelor:
– Lizozomii
• Citoscheletul
NUCLEUL
NUCLEUL
Caracterizare generală
Excepţii:
Nuclei cu aspect lobat Nucleu în formă de
potcoavă
• De regulă nucleul ocupă în Nuclei
celulă o poziţie centrală.
• Excepţie:
Nucleu poziţionat periferic
(ex. în adipocite)
EC eucromatina
Hc heterocromatina
Învelişul nuclear
1 – înveliş nuclear
2 – componenta inelară
externă
3 – componenta
centrală
4 – fibrile convergente
5 – fibrile paralele
• Daltonul – simbol Da – este unitatea
masei atomice egală cu 1/12 din masa
izotopului 12C.
• Această unitate nu face parte din
“Sistemul Internaţional al Unităţilor de
Măsură” dar este folosită uzual în
biochimie pentru exprimarea maselor
moleculare.
Complexul porului nuclear prezintă la microscopul electronic
aspectul unui poligon cu opt laturi organizat în jurul unui canal central
(simetrie octogonală).
Diametrul deschiderii centrale este de circa 9 nm cu posibilitatea de a
se dilata până la 26 nm.
9-26 nm
Imagini de microscopie
electronică şi modele
computerizate ale structurii
complexelor porilor nucleari.
Structura
porului
nuclear
Lumenul
nucleului
Transportul prin porii nucleari
• Fiecare por nuclear poate transporta 500-1000 de molecule per
secundă, în ambele sensuri. Modul în care se realizează
coordonarea acestui trafic bidirecţional al moleculelor, astfel
încât să se evite coliziunile şi colmatarea porilor este încă
neelucidat.
• Întrucât controlează traficul moleculelor între nucleu şi
citoplasmă, porii nucleari joacă un rol fundamental în controlul
funcţiilor celulare.
Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val
Detectarea localizării antigenului T al SV40 (prin tehnica de
imunofluorescenţă).
Proteina (antigenul T) ajunge în nucleu doar în condiţiile în care semnalul
de localizare nucleară este corect (A).
Modificarea semnalului de localizare nucleară nu permite transportul în
nucleu, astfel încât antigenul T rămâne în citoplasmă (B).
Figure was taken from Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, Garland Pub., N.Y. 1994, Fig 12-13.
Vizualizarea importului proteinelor
nucleare sintetizate în citoplasmă,
la nivelul porilor nucleari
Dezorga-
nizarea
laminei
Progeria
(Îmbătrânirea prematură)
• Maladie determinată de
mutaţii ale genei ce
codifică un anumit tip de
lamină nucleară
denumită lamina A.
• Maladie genetică extrem
de rară (1 din 8 milioane
de indivizi), caracterizată
prin apariţia semnelor de
îmbătrânire la vârste
timpurii (îmbătrânire Progeria infantilă
accelerată); Semnele de îmbătrânire
apar de la vârsta de 4 ani.
Hayley Okines
Matricea nucleară
Studiile privind organizarea internă a nucleului au condus
la identificarea unei reţele de natură proteică numită
matrice nucleară, alcătuită din proteine denumite proteine
scaffold (“suport” sau “schelă”).
Filamentele matricei nucleare sunt dispuse într-o reţea
tridimensională ce formează în interiorul nucleului o
structură cu rol analog citoscheletului.
Matricea nucleară reprezintă sediul unor procese
importante ca replicarea ADN şi procesarea
precursorilor mARN (ARN nuclear heterogen - hnARN).
Macromoleculele de ADN se fixează de proteinele scaffold
prin intermediul unor secvenţe polinucleotidice numite
regiuni de ataşare la scaffold (SAR, scaffold associated
regions) sau MAR (matrix-attachment regions).
Deşi rolul secvenţelor SAR nu este foarte bine precizat se
consideră că participă la organizarea cromozomilor şi la
reglarea transcrierii şi replicării ADN.
Matricea şi lamina nucleară
Macromoleculele de ADN se fixează de proteinele scaffold
(care formează un ax de susţinere), prin intermediul
secvenţelor polinucleotidice numite regiuni de ataşare la
scaffold (SAR, MAR).
SAR (MAR)
Cromatina
CROMATINA
• Cromatina reprezintă complexul format de ADN-ul nuclear
cu histone şi proteine cromozomale nehistonice.
• Etimologie: chroma – culoare, lb. greacă.
• Examinarea nucleilor în interfază prin tehnici de microscopie,
relevă aspectul neomogen al cromatinei, fiind evidenţiate
două tipuri distincte: eucromatina (cromatina “adevărată”, de
la eu în limba greacă) şi heterocromatina (cromatina
“diferită”, de la heteros în limba greacă).
• Heterocromatina este o formă de cromatină înalt condensată
şi inactivă din punct de vedere transcripţional
(netranscriptibilă), având o pondere de circa 10% din genom,
în timp ce eucromatina este o formă de cromatină mai puţin
condensată şi activă din punct de vedere transcripţional
(conţine secvenţe de ADN ce sunt transcrise).
Eucromatina –
corespunde zonelor clare
Heterocromatina –
corespunde zonelor întunecate
Heterocromatina
Lys Arg
ADN
Structura nucleozomală
(Fibra de cromatină de 11 nm)
• Structura nucleozomală reprezintă primul nivel de
compactare al cromatinei.
• Organizarea sub formă de nucleozomi este rezultatul
asocierii ADN cu histonele nucleozomale:
H2A, H2B, H3 şi H4
• În imaginile de microscopie
electronică nucleozomii apar
sub forma unor particule
discoidale de 11 nm, ce
dau cromatinei aspectul
unui “şirag de mărgele”.
Nucleozomul
• Nucleozomul conţine un miez proteic format din 8 molecule
de histone (octamer de histone) de forma unui cilindru turtit
cu diametrul de 11 nm şi înălţimea de 5 nm, înconjurat de
1,65 ori de ADN-ul dublu catenar (răsucirii de 1,65 ori în jurul
miezului de histone îi corespunde o secvenţă polinucleotidică
de 146 (147) perechi de nucleotide).
• Miezul de proteine al nucleozomului (octamerul de
histone) are câte două copii ale histonelor
nucleozomale H2A, H2B, H3 şi H4.
• Histona H1 nu face parte din structura nucleozomului.
• Nucleozomul nu conţine proteine nehistonice.
Structura nucleozomului
• Particulele nucleozomale succesive sunt separate prin
secvenţe de ADN spaţiator scurt ce poartă numele de
ADN de legătură sau ADN linker, a căror lungime
poate să varieze între 18 şi 80 perechi de nucleotide
(valoarea medie este de circa 50 perechi de nucleotide).
CROMOZOMII
• În momentul intrării celulei în mitoză cromatina se
condensează sub formă de cromozomi, structuri
vizibile la microscopul optic.
• Această condensare puternică este necesară pentru a
permite mişcarea cromozomilor de-a lungul fusului
mitotic, fără ca macromoleculele de ADN să se
încolăcească sau să se rupă în timpul distribuţiei în
celulele fiice.
CROMOZOMII
• Cromozomii sunt formaţi din ADN şi proteine, în proporţii
aproximativ egale.
• Componenta proteică este un amestec heterogen de
proteine, dintre care pot fi menţionate histonele,
proteinele scaffold, şi o serie de enzime implicate în
replicarea ADN şi în transcriere, respectiv ADN- şi ARN-
polimerazele.
• După ieşirea din mitoză, cromozomii individuali se
decondensează ocupând anumite zone bine delimitate
în interiorul nucleului interfazic numite teritorii
cromozomiale.
• Fiecare cromozom este format dintr-o moleculă liniară
de ADN (fiecare moleculă este alcătuită din milioane de
nucleotide; un cromozom de lungime medie are ~ 5 cm
de ADN).
• Un cromozom operează ca o unitate structurală
distinctă, astfel încât o copie a fiecărui cromozom să fie
transmisă fiecăreia dintre celulele fiice.
Teritorii cromozomiale
• După ieşirea din mitoză,
cromozomii individuali se
decondensează ocupând
anumite zone bine
delimitate în interiorul
nucleului interfazic numite
teritorii cromozomiale.
Cromozomii
În momentul în care începe
diviziunea celulară fiecare
cromozom este alcătuit din două
unităţi longitudinale numite
cromatide.
p - braţul scurt
Centromer
q - braţul lung
Cromatide “surori”
Structura cromozomilor
• Un cromozom funcţional prezintă 3 tipuri de
secvenţe specializate de ADN:
– Origine a replicării – reprezintă
secvenţele nucleotidice de unde începe
replicarea ADN.
– Centromer (constricţie primară)
-reprezintă regiunea specializată a
cromozomului ce asigură adeziunea
celor două cromatide, ancorarea şi
deplasarea cromozomilor de-a lungul
fibrelor fusului de diviziune şi segregarea
corectă a cromatidelor în timpul diviziunii
celulare. În timpul diviziunii mitotice la
nivelul centromerului se formează
tranzitoriu o structură proteică complexă
numită kinetocor (generează forța
necesară deplasării cromozomilor).
– Telomere – secvenţe de la capetele
cromozomului ce conferă stabilitate
cromozomilor şi împiedică fuziunea lor.
Kinetocorul
Nucleol
NUCLEOLUL
• Nucleolul este o formaţiune intranucleară decelabilă în interfază
(vizibilă la microscopul optic).
• Nucleolul este sediul producerii subunităţilor ribozomale.
• Nucleul celulelor somatice umane conţine în mod obişnuit câte
un nucleol pentru fiecare set de cromozomi, astfel că majoritatea
celulelor umane somatice (diploide) prezintă doi nucleoli.
• Nucleolul nu este delimitat de membrane, ci este organizat în
aria regiunilor cromozomale ce conţin gene codificatoare pentru
ARN-urile ribozomale.
Morfologia nucleolului
• Din punct de vedere morfologic în nucleol au fost
evidenţiate trei regiuni distincte:
– centrul fibrilar
– zona fibrilară densă
– zona granulară
• Genele pentru rARN sunt localizate şi transcrise în
centrul fibrilar şi în zona fibrilară densă.
• Prelucrarea rARN şi asamblarea cu proteinele
ribozomale este iniţiată în zona fibrilară densă şi
continuă în zona granulară unde se formează
subunităţile ribozomale, gata de a fi exportate în
citoplasmă.