CONTEO DE LEUCOCITOS

Para evaluar a los leucocitos primero se realiza un conteo mediante métodos electrónicos o con la
pipeta de Thoma como también puede ser con las pipetas automáticas.

Pipeta de Thoma
1 11
0.5
las pipetas se llenan de sangre hasta la marca de 0.5 y el
resto, con la solución de Turk (a base de ácido acético
glacial y violeta de genciana), hasta la marca de 11 para
lograr una dilución de 1:20; se mezcla perfectamente
evitando que se salga líquido.

después de unos minutos, se eliminan tres gotas, y las

siguientes son empleadas para llenar el hemocitómetro.

éste debe tener un cubreobjetos especial y limpio que se

coloca sobre las barras humedecidas con agua.
 Barra de soporte
Muestra

Plataforma de conteo

Cubreobjetos 0.1 mm entre cubre objetos y plataforma

dejar unos minutos en reposo para que sedimenten las
células y luego efectuar la cuenta de manera cómoda,

en caso de tener otras actividades, dejar el

hemocitómetro sobre un papel húmedo y bajo una caja
de Petri para evitar que se deshidrate la muestra.

la plataforma de conteo tiene nueve grandes cuadros

con diferente número de divisiones.
para la cuenta de leucocitos se toman los cuatro extremos, que tienen 16 cuadros pequeños cada uno. 
el conteo se realiza de izquierda a derecha, se debe tener cuidado de no
contar dos veces la misma célula, pues al final se reflejará con una
diferencia enorme de lo que tiene en realidad el animal.

1mm2
el cuadro superior izquierdo a 400 aumentos.
se requiere contar las células que estén sobre la línea
izquierda y la línea superior para incluirlas en ese cuadro.
por el contrario, las células que se encuentren sobre la línea derecha o la
inferior del cuadro no se incluyen en la cuenta  para evitar contarlas dos veces,
cuando se tiene la cuenta final (en la cual no debe haber una
diferencia superior de 25% entre cada cuadro de las esquinas),
se emplea la siguiente fórmula para la obtención de leucocitos:
x109 /l:

Número de células contadas X dilución X distancia entre plataforma y

cubreobjetos
Número de cuadros de 1 mm3 X1000
por ejemplo, si la cuenta es de 60, entonces:

60X20X10
4 x1000

12000
4000

= 3.0 X 109/L
también podemos contar el número de células en los 4
cuadrados grandes y multiplicar por 50 para obtener el
número total de leucocitos por mm3.

por ejemplo si el número de células contadas en los 4

cuadrados grandes es de 234 lo multiplicamos por 50
esto es igual a 11.700/mm3.
TÉCNICA PARA EL RECUENTO
DE LEUCOCITOS
 TÉCNICA PARA EL RECUENTO
DE LEUCOCITOS

posteriormente se prepara la confección

de extendidos o frotis sanguíneos,
1) Una zona muy densa, no sirve para evaluar
los leucocitos, eritrocitos o plaquetas, pues se
encuentran demasiado encimados o contraídos y no
permite su diferenciación.

2) La zona ideal para la evaluación del extendido, es

cuando las células se encuentran bien extendidas sin
deformaciones, como ocurrirá en la zona 3.

3) Una zona muy delgada, se emplea para la búsqueda de

microorganismos en eritrocitos que hayan perdido su
hemoglobina, se verifica que no hayan agregados de
plaquetas, microfilarias o grandes células.
 

Antes  de  iniciar  el  diferencial,  en un frotis teñido  en 

Wright, se debe hacer un reconocimiento panorámico
con 40 X, esto es, el objetivo de 4X y el ocular de 10X
del frotis para detectar microfilarias o agregados de
plaquetas,
también para ver la distribución y seleccionar el
campo para iniciar el diferencial de 100 leucocitos
(neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y
basófilos), observar a 100 x y con aceite de
inmersión.
la dirección en zigzag que debe llevar la evaluación
está relacionada con la repartición de las células en
el extendido, ya que ésta no es equilibrada.
los eritrocitos pequeños y los linfocitos se van a
ubicar en el centro del extendido,

mientras que sobre los bordes se van a encontrar

grandes eritrocitos, granulocitos y algunos linfocitos,

y sobre el borde final del frotis se van a encontrar los

elementos de mayor tamaño (monocitos, agregados de
plaquetas, microfilarias,)