Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
5) Bioterorism.
PROBIOTIC = orice microorganism viu adăugat alimentelor, care influenţează benefic organismul gazdă, prin ameliorarea echilibrului microorganismelor din tubul digestiv (Fuller, 1989);
• Raportul din 2002 /Joint
/Joint FAO/WHO Working Group on Drafting Guidelines
for the Evaluation of Probiotics in Food – o noua definitie: “un
“un component microbian viabil ce a demonstrat un efect benefic asupra omului/anim. administrat in doze specifice.
Preparatele probiotice (capsule, granule sau suspensii adăugate în hrană), pot conţine unul sau mai multe tipuri de bacterii:
◦ specii de Lactobacillus (L. bulgaricus, L. acidophilus, L. casei, L. helveticus, L. lactis, L.salivarius, L. plantarum), Bifidobacterium sp., Streptococcus termophilus, Enterococcus sp..
- Mod de acţiune - efect antagonist, prin producerea de subst. antimicrobiene (acizi organici cu efect de scădere a pH-ului, H 2O2, substanţe bacteriocine – like, biosurfactanţi), competiţiei pentru nutrienţi sau pentru situsurile de aderenţă la substratul celular,
care previne colonizarea acestuia cu bacterii patogene.
- Efecte:
◦ 1) stimularea creşterii organismului gazdei (prin îmbunătăţirea conversiei hranei şi protecţie împotriva infecţiilor intestinale → reducerea ratei morbidităţii şi mortalităţii);
◦ 2) stimularea imunităţii (activarea macrofagelor, stimularea sintezei de anticorpi;
◦ 3) atenuarea fenomenului de intoleranţă la lactoză (prin deficit de - galactozidază);
◦ 4) înlocuirea antibioticelor şi aditivilor chimici la animalele de crescătorie (efect indirect);
◦ 5) se consideră că sp.de Lactobacillus ar avea şi un efect anticancerigen (prin supresia nitrat-reductazei şi a formării nitrozaminelor);
◦ 6) efect de bariera antiinfectioasa-efect
efect antagonist bazat pe competitia cu patogenii.
6) Efectul de bariera antiinfectioasa - efect antagonist bazat pe competitia cu patogenii
- L. acidophilus LB (probiotic) determina mascarea sterica (1) si/ sau secreta
compusi activi, impiedicând aderenta bacteriilor pat. la receptorii celulari (1 si 2)
si inhibând cresterea lor; in consecinta, aderenta si invazia (3) substratului
celular de catre bacteriile invazive este diminuata (Coconnier et al., 1993).
- factori solubili – interferenta cu mecanismul QS
(demonstrat efectul de reducere a exprimarii factorilor de virulenta ai bacteriilor patogene) .
Bacteriofagi
◦ manifesta specificitate de gazda;
◦ usor si ieftin obtinuti in laborator, in cantitati mari;
◦ actioneaza rapid si foarte eficient;
◦ lipsiti de efecte secundare adverse;
◦ destinati:
terapiei infectiilor sistemice/ale mucoaselor cu bact.rezistente;
decontaminarii suprafetelor - controlul diseminarii bacteriilor
rezistente in comunitati;
= preparate fagice= enzime litice purificate, numite enzibiotice;
- sunt destinate combaterii in special a bact.patogene Gram poz.:
- Streptococcus pyogenes si Str. pneumoniae;
- Bacillus anthracis,
- stafilococii meticilino-rezistenti - MRSA (methicillin Resistant
Staphylococcus aureus) ;
- enterococii vancomicino-rezistenti – VRE (Vancomycin Resistant
Enterococci);
- biofilmele bacteriene - B-fagul T7, prin tehn. ADN-recombinant -
sinteza de dispersine - enzime cu efect litic asupra matricei
biofilmelor.
Relaţiile dintre microorganisme şi
macroorganism (gazdă)
Relaţii între speciile de microorganisme
- neutre ;
- beneficiale: comensalism, protocooperare, sinergism, sintrofie, mutualism, simbioza ;
- antagoniste: competiţie, amensalism sau antibioza, predatorism şi parazitism ;
- relaţiile se pot manifesta atât între speciile microbiene din mediul natural, cât şi
între speciile colonizatoare (autohtone sau alohtone) ale organismului animal/uman;
-pentru starea de sănătate/boală a gazdei – f.importante -
-relaţiile microbiotei cu organismul gazdei,
+ rel. sinergice dintre microorganime care se sprijină în producerea unui
efect pozitiv/negativ asupra gazdei
rel. de competiţie - de ex. microorganismele ce compun microbiota normală
aflate în raporturi numerice echilibrate sau microorganismele probiotice care competiţionează
cu speciile patogene, cu efect profilactic/ curativ al u nor infecţii.
* agenţii patogeni cel mai bine adaptaţi pentru a supravieţui sunt cei care provoacă infecţii
uşoare, cu un număr mare de îmbolnăviri subclinice şi cei care determină o imunitate slabă,
de scurtă durată.
2) Virulenţa
= capacitatea unei tulpini date a unui microorganism patogen, aflată într-o
anumită fază de creştere, de a se localiza, de a coloniza, de a se multiplica
şi, eventual, de a invada celulele şi ţesuturile organismului-gazdă şi de a
produce toxine, determinând o stare patologică la o anumită gazdă, atunci
când este introdus în organismul acesteia în condiţii bine definite.
– Ex.: Bacillus anthracis, ag. patogen al antraxului – are efect letal prin
capacitatea mare de multiplicare şi formarea de trombusuri ce astupă
capilarele
• → fenomene de hipoxie, ischemie şi necroză tisulară
• + producerea de toxine.
• - anumite specii şi tulpini bacteriene sintetizează factori de virulenta, cu ajutorul cărora inactivează factorii
microbicizi ai gazdei , numiti defensine:
– catalaza, superoxiddismutaza - din fagocite;
– proteinele sistemului complement ce determină aşa-numitul efect bactericid al serului, la care bacteriile Gram pozitive
sunt natural rezistente, sensibile fiind cele Gram negative, în general;
Defensine = proteine cationice cu g.m. mica (bogate in arginina), cu 18-45
AA, ce contin la vert. 6– 8 resturi de cisteina conservate; prez. la vertebrate si
nevert. (+ plante);
- peptide cu rol in apararea gazdei fata de bacterii, fungi, virusuri +/-
anvelopa;
- celule ale S.I. contin aceste peptide care participa la uciderea bacteriilor
endocitate (de ex. de PMNN si majorit. celulelor epiteliale).
Majoritatea defensinelor functioneaza prin legarea de membrana celulelor
microbiene si odata inglobate se produc defecte ale membranei (similare
porilor), care permit pierderea ionilor esentiali si a nutrientilor.
3) Factori care interferă cu răspunsul imun –
– M.O. patogene pot supravieţui în organismul-gazdă prin mecanisme care reduc eficienţa răspunsului
imun sau îl anulează; de ex.:
• Alterarea functiei Ac-lor - proteina A stafilococică şi proteina G streptococică din structura P.C. al
acestor bacterii leagă moleculele de Ig (la nivelul Fc), cu efect de învelire a celulelor bacteriene in Ac, dar
într-o manieră diferită, astfel că inhibă opsonizarea, fagocitoza opsonică, activarea SC pe c. clasica.
Factori care interfera cu rasp. imun
• - ex.: Str.pneumoniae,
• Haemophilus influenzae,
• Neisseria meningitidis, N. gonorrhoeae
- în replică, organismul gazdă produce Ac anti-IgA proteaze (din cls. IgA şi IgG).
Pattern-ul factorilor de virulenta
• - proteinele membranei externe din P.C. al bacteriilor Gram negative, pe langa rolul structural,
îndeplinesc şi alte funcţii (= proteină poate avea mai multe funcţii);
• - rolul lor în virulenţă se realizează în principal pe trei căi:
– 1) participarea la procesul de încorporare a fierului - siderofori - …;
– 2) mediatori de aderenţă la celulele sensibile;
– 3) mediatori de invazie, numiţi invazine – care determină endocitarea bacteriilor de către
celula gazdă (cu ajutorul filamentelor de actină, suportul mecanic al vălurilor membranare);
◦ invazia constituie un mecanism principal de virulenţă la speciile patogene Salmonella typhi, Shigella
dysenteriae, bacterii care după invazie se multiplica masiv intracelular şi lizează celula-gazdă;
- la bacteriile condiţionat –patogene, invazia este un factor secundar de virulenţă (tulpini patogene de E.
coli, Citrobacter sp. etc.; invazia nu este urmată de multiplicarea bacteriilor, fiind doar un mijloc de
persistenţă al acestora; determină inf.cronice, recidivante.
• - peptidoglicanul (mureina), constituentul major al P.C. la bacteriile Gram pozitive (80 – 90 % din
g.usc. a peretelui) , pe langa rolul structural, este implicat si in patologie;
• - efect artritogen - fragmente mici de P.C. (g.m. 5,3 x 106 Da) → artrite acute;
• - fragmentele mari → artrite cronice cu debut tardiv;
• - alte efecte: pirogen, somnogen, mitogen, inflamator
• - LP şi acizii teichoici – Ag-le ce activează sistemul complement, au efect mitogen, imunogen, de
activare a funcţiei macrofagelor (efect inflamator).
Rolul cationilor Fe3+ în virulenţă
Multiplicarea bacteriilor patogene în ţesuturile organismului gazdă – condiţionată de
prezenţa obligatorie a Fe feric, într-o formă accesibilă metabolismului lor;
Fe - necesar pentru anumite r. enzimatice esenţiale pentru creştere;
- un component cheie al catenei de transport al electronilor în membrana celulară
(de respiraţie celulară);
- în compoziţia SOD- la bact. Gram negative aerobe / aer. facultativ anaer.
- SOD = enz. necesare în respiraţia aerobă pentru inactivarea ionului superoxid, intermediar al
reducerii O2, înalt reactiv şi potenţial nociv; =mecanism de protecţie faţă de sist. microbicide
dep. de O2 din fagocite.
*Alte bacterii, mai puţin virulente - nu produc siderofori, dar pot internaliza aceste complexe şi
captaFe.
Toxinogeneza
= capacitatea unor microorganisme patogene de a produce in cursul metabolismului una
sau mai multe substante toxice.
-Toxina = o subst. care poate provoca efecte patologice/alterarea starii fiziologice normale a organism.
(Clostridium botulinum) !
Pentru ca efectul toxic sa se produca, toxinele trebuie sa fie eliberate din celule si sa fie
solubile in umorile organismului ;
- dupa sinteza in celulele bacteriene :
- pot fi eliberate din celule in mediul extracelular - exotoxine (Prot.)
-ramân in celulele bacteriene, fiind eliminate dupa autoliza- endotoxine (LPS, LP)
Proprietatea EXOTOXINE ENDOTOXINE
Sursa Anumite specii ale bacteriilor Peretele celular al majoritatii
Gram poz. si Gram neg. bacteriilor Gram negative
Secretate de celule Da Nu
Structura chimica Polipeptide Lipopolizaharide
Localizarea Plasmide sau bacteriofagi Cromosomul bacterian
genelor
Toxicitate Mare (doza letala este de Redusa (doza letala este de ordinul a
ordinul a 1µg) sute de µg)
Efecte clinice Diferite efecte Febra, stare de soc
Modul de actiune Diferite moduri: Prin intermediul TNF si IL-1
ADP-ribozilare, proteaze, lecitinaza (tox.
form. de pori), superAg
Antigenitate Induc titruri mari de Ac, Slab antigenice
numiti antitoxine
Vaccinuri Pot fi transformate in toxoizi Nu pot fi transformate in toxoizi si
(anatoxine), folositi ca nu exista alte vaccinuri disponibile
vaccinuri
Termostabilitate Distruse rapid la 60ºC (cu Stabile la 100ºC, timp de 1h
exceptia enterotoxinei staf.)
Boli tipice Tetanos, botulism, difterie etc. Meningococemie, infectii cu bacili
Gram negativi
Exotoxine: structura chimica
si mecanism de actiune
= Molecule mici, putine legaturi disulfidice,
rigiditate scazuta → favorizeaza transferul
prin invelisurile celulare
Dupa sinteza - molecula de toxina este transferata prin peretele
celular (prin reteaua mureinica a bacteriilor Gram pozitive, iar in
cazul bacteriilor Gram negative si prin membrana externa);
Etape: Activarea
Internalizarea toxin-receptorului
Traversarea prin mb., in citosol
Actiune asupra tintei celulare – exista 4
activitati enzimatice ale proteinelor toxice
care actioneaza intracelular
Endotoxine: structura chimica si mecanism de actiune
• LPS – fixare la o proteina din plasma:
• Complexul → receptorul CD11/CD18 si pe
un receptor nespecific de pe suprafata
M-fagelor ;
•complexul LPS-LBP – capabil sa lege molecula
CD14 prezenta pe M-fage, neutrofile si plachete.
•Efecte:
•Plachetele elibereaza mediatorii:
prostaglandin E2, tromboxan A2, si PAF
(factorul de activare a plachetelor)
•mediatorii → agregarea plachetelor, si
fenomene de coagulare si tromboza
• M-fagele si PMNN activate elibereaza
radicali de oxigen, si oxid nitric → cauzeaza
relaxarea muschilor netezi.
T. carbunoasa Bacillus anthracis Factorul letal (LF)- proteaza dep.de Zn++ , induce eliberare de
citokine
T. pertussis Bordetella pertussis Adenilat ciclaza - actioneaza local – creste niv. de AMPc intracelular
in fagocite, det. formare de pori (canale de ioni) in membrane
(hemoliza)
T. holerica Vibrio cholerae ADP ribozilare a proteinelor G, stimuleaza niveluri crescute de cAMP
in celulele tractului gastro-intestinal ; secretie de apa si electroliti
T. ST E. coli Escherichia coli ETEC Stimuleaza guanilat ciclaza, det. secretie de apa si electroliti in
epiteliul intestinal
T. perfringens Clostridium perfringens Adenilat ciclaza – cauzeaza niveluri crescute de cAMP intracelular in
celule epiteliale
T. tetanica Clostridium tetani Proteaza dep. de Zn++ ; inhiba neurotransmitatorul din sinapse
inhibitorii (glicina) → paralizie spastica
T. difterica Corynebacterium diphtheriae ADP ribozilare a factorului de elongatie 2 (EF2) → inhibarea sintezei
proteice
T. stafilococice Staphylococcus aureus Masiva activare a sist. imunitar, inclusiv limfocite si M-fage →
emesis
- TSST-1 Staphylococcus aureus Act. asupra sist. vascular cauzand inflamatie, febra si soc; superAg
Efecte:
Induc o stimulare nespecifica a unei proportii mari din totalul de limfocite T ale
gazdei (8 -40% depinzand de tipul de toxina);
Limfocitele T → eliberare masiva de citokine – Il-2 si Il-1 →varietate de
consecinte patologice: febra, greata, slabiciune, diaree si soc sistemic;
Pot activa alte celule, cum ar fi mastocitele;
Clonele limfocitelor T amplificate de superAg, ulterior mor (apoptoza)- frecvent,
fie devin inactive dupa stimulare → imunodepresie
Factori de virulenta - efecte
- Aderenţa unui număr relativ mic de microorganisme
patogene la celulele sensibile ale gazdei ;
- Creşterea şi multiplicarea în organismul gazdei
+ Rezistenta la mecanismele de apărare antiinfecţioasă
ale gazdei ► stabilirea unui focar infecţios
► colonizarea situsului (ex.muc.resp., intest., urinară,
genitală)
sau a întregului organism
►invazie
Cu cât este mai virulent (infecţios, aderent, agresiv, +/-
toxigen), cu atât un M.O. patogen rezistă mai bine la
mecanismele de apărare ale gazdei, pe care o
colonizează.
Rezistenţa (persistenta)- în gazdă este influenţată şi de capacitatea unor structuri de suprafaţă
ale patogenilor din categoria adezinelor, de a suferi fenomenul variaţiei antigenice ►
ineficienţa răspunsului imun specific al gazdei faţă de noile variante antigenice, apărute ca efect
al presiunii imunologice a gazdei.
Tipuri de infecţii în funcţie de gradul de extindere:
• 1) infecţii localizate – reacţiile de apărare ale gazdei sunt încă eficiente;
• 2) infecţii generalizate- reacţiile de apărare sunt mai putin eficiente si nu se pot opune agentului infecţios
(care în mod normal ar putea fi localizat).
• 1) Infecţia locală/de focar - produsă de ag. patogeni care rămân la poarta de intrare în organism, difuzând
pe cale sanguină sau nervoasă doar produşii toxici secretaţi - infecţia de focar este însoţită de o
reacţie inflamatorie locală minimă şi de manifestări la distanţă, determinate de produşi toxici, enzimatici
eliberaţi la nivelul focarului;
• 2) Infecţiile generalizate sau invazive - după o perioadă de multiplicare la poarta de intrare, agenţii
patogeni diseminează în organism, prin:
• contiguitate : cei cu multiplicare intracelulară (virusuri, rickettsii, chlamidii);
• continuitate : infecţii cavitare- infecţii respiratorii, care avansează spre trasee înguste şi determină
bronşite, spre ţesutul pulmonar- pneumonii, spre pleura- pleurite; ~ infecţii genitale si urinare;
• cale limfatică- agenţii patogeni sunt preluaţi de la suprafaţa tegumentului şi mucoaselor de către cel.
dendritice, trec in limfă şi ajung în ganglionii limfatici;
– Daca sunt ag. inf. sunt numerosi, ganglionii nu-i pot reţine eficient, astfel că aceştia trec în sânge, determinând de ex.
bacteriemie (bacteriile sunt inca în număr mic), consecutivă infecţiilor uşoare, extracţiilor dentare, intervenţiilor
chirurgicale; în sânge bacteriile nu se multiplică (cu excepţia Yersinia sp., B. anthracis), dar pot provoca infecţii
regionale (+/-extinse) sau infecţii generalizate;
– dintr-o infecţie regională, pe cale circulatorie, pot apărea localizări secundare unice sau multiple (miliare), evoluând
spre o infecţie generalizată sau septicemie;
– infecţiile septicemice - se caracteriz. printr-un număr mare de bacterii în sânge, datorită descărcării masive dintr-o
infecţie regională sau focar şi în aceste condiţii poate avea loc şi multiplicarea lor in sânge;
– uneori septicemia este însoţită de toxemie.
Alte manifestări clinice ale patologiei infecţioase
• Intoxicaţia
– botulism alimentar (incidenţă mică) – datorat consumului de alimente contaminate cu spori ai
agentului patogen (Clostridium botulinum), incapabil să colonizeze gazda; în cursul germinării
şi multiplicării în alimente (în general conserve sterilizate incorect), bacteriile sintetizează
toxina botulinică, care va pătrunde în organism odată cu alimentele contaminate;