QUE SON LAS ENZIMAS

• La mayoría de las ENZIMAS (E) son

PROTEINAS

• Las ENZIMAS tienen la capacidad de

AUMENTAR LA VELOCIDAD de las
reacciones, por ello se denominan
CATALIZADORES BIOLOGICOS

• La sustancia sobre las cuales actúan se

denominan SUSTRATO
• Ningún ser vivo puede vivir sin las
ENZIMAS
• La mayoría de las reacciones deben ser
catalizadas para que ocurran en el tiempo
y el momento que la célula lo requiere.
• Las enzimas deben ser sintetizadas
correctamente, con las estructuras
proteicas: primaria, secundaria, terciaria y
cuaternaria si la tuviera
• Cualquier alteración de la síntesis de estas
proteínas puede llevar a una patología
• A veces estas alteraciones puede
solucionarse con cambios en la dieta.
Transformaciones mediadas por enzimas

• Transformación de moléculas complejas

en moléculas simples y viceversa
ENZIMAS
PAN
n (GLUCOSA)
ALMIDON
PAPAS
ENZIMAS
ARROZ
GLUCOGENO (GLUCOSA)n
CARNES ENZIMAS

SOJA PROTEINAS n (AMINOACIDOS)

LECHE
ENZIMAS

NUEVOS AMINOACIDOS,
OTROS COMPUESTOS
NITROGENADOS
PANCETA ENZIMAS
MONO
CHIZITOS GRASAS TRIGLICERIDOS

CHORIZOS ENZIMAS

GLICEROL
TRIGLICERIDOS +3 AC.GRASOS
 REACCION EZIMATICA

E + S ES E + P
Enzima Sustrato Complejo Enzima Producto
ES
 -P
GLUCOSA GLUCOSA-6P
ATP ADP

D-Glucosa

Glucoquinasa
 CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS

• SITIO DE UNION AL SUSTRATO (Sitio Activo)

Uniones no Covalentes: Puente de hidrógeno

Hidrofóbicas
Electrostáticas
• SON ESPECIFICAS

• NECESITAN DE FACTORES ENZIMATICOS:

Inorgánicos (metales) y orgánicos (Coenzimas)
ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS
ALTA Único
ESPECIFICIDAD sustrato

Lactato
Deshidrogenasa (LDH) LACTATO

ESPECIFICIDAD RELATIVA Grupo de

sustratos

Km
Hexoquinasas HEXOSAS diferente
glucosa, manosa y fructosa
 DENOMINACION DE LAS ENZIMAS

• NOMBRE DEL SUSTRATO O DEL PRODUCTO

CON LA TERMINACION ASA:
sacarasa, ureasa, amilasa

• ALGUNAS TIENEN NOMBRES arbitrarios

ptialina salival, pepsina del jugo gástrico

• CADA ENZIMA TIENE UN NOMBRE ASIGNADO

POR LA COMISION INTERNACIONAL DE
ENZIMAS
 Tipos de reacciones catalizadas
por enzimas

• Oxido-reducción
• Rotura y formación de enlaces C-C
• Reorganizaciones internas
• Transferencia de grupos
• Reacciones de condensación
 CLASIFICACION

Clase - subclase - subsubclase - nº de orden

Lactato 1 1 1 27
deshidrogenasa

1-OXIDORREDUCTASAS

Alcohol deshidrogenasa
(EC 1.1.1.1)

2. TRANSFERASAS

Hexoquinasa
(EC 2.7.1.2)
3. HIDROLASAS

Carboxipeptidasa A
(EC 3.4.17.1)

4. LIASAS
Piruvato
descarboxilasa
(EC 4.1.1.1)

5. ISOMERASAS

Fumarasa ó malato
isomerasa
(EC 5.2.1.1)

6. LIGASAS

Piruvato
carboxilasa
(EC 6.4.1.1)
 Ejemplos de Enzimas que requieren iones
metálicos como cofactores
Citocromo oxidasa
Catalasa Fe++ ó Fe+++
Peroxidasa

Anhidrasa carbónica Zn++

Hexoquinasa
Glucosa-6-fosfatasa Mg++
Piruvato quinasa

Piruvato quinasa K+
 Niacina NAD, NADP Ion Hidruro (:H -) PDH GAD

Riboflavina FAD, FMN Electrones SDH

(Vit.B2)

Tiamina PP-tiamina Aldehídos PDH, TC

(Vit. B1)
Grupos Tiolasa
Ac. pantoténico Coenzima A aciloS

Ac. fólico FH4 Grupos Ser-Treon.

monocarbonados Deshidrat.
Piridoxina
(B6) P-piridoxal Grupos aminos GPT

Ac.lipoico Lipoamida e- y grupos acilos PDH

HOLOENZIMA = APOENZIMA + COENZIMA

ENZIMA PROTEÍNA NO PROTEÍNICA

TOTAL TERMOLÁBIL TERMOESTABLE

Transportadores de
grupos funcionales
COENZIMAS

Transportadores
de electrones
 DISTRIBUCION DE LAS ENZIMAS

• COMPARTIMENTALIZACION: Diferentes
localización dentro de la célula.

• SISTEMAS MULTIENZIMATICOS: Enzimas

relacionadas agrupadas formando verdaderos
complejos

• ENZIMAS MULTIFUNCIONALES: Una enzima

que presenta distintos sitios catalíticos
 ACTIVIDAD ENZIMATICA

• Unidades Internacionales
Cantidad de enzima
que cataliza la transformación de 1 umol de S
por 1minuto
katal = 6 x 10 U.I.E.
7
mmol de S transformados
U.I.E. =
min
• Actividad Específica
Actividad enzimática por cada miligramo de U.I.E.
proteína presente en la muestra
Actividad específica =
mgr de proteína

• Actividad Molecular ó Numero de Recambio

Moléculas de S convertibles en Pmmol pordeunidad de
S transformados/min
Actividad molecular =
tiempo y por molécula de enzima Mol de enzima
 ACTIVIDAD ESPECIFICA

A
B

Prot.Tot: ∑ + + + Prot.Tot: ∑ + + Prot.Tot: ∑ +

D
U.I.E. Activ. Enzimática
Actividad
= =
específica
mgr de proteína Prot. totales

Prot.Tot: ∑
CINETICA ENZIMATICA
 Representación de la ecuación de
Michaelis - Menten

Vo

Leonor Michaelis y Maud Menten

[S]
 GRÁFICA DOBLE RECÍPROCA O DE
LINEWEAVER-BURK

Ordenada al origen = 1/Vmáx.

Pendiente= Km/Vmáx

Intersección c/eje x = - 1/Km

 INHIBICION ENZIMATICA

COMPETITIVA
INHIBICION NO COMPETITIVA
REVERSIBLE ACOMPETITIVA

POR ENLACE COVALENTE

DIFP Quimotripsina
INHIBICION Penicilina Transpeptidasa
IRREVERSIBLE
(Análogos del estado de transición)
INHIBIDOR SUICIDA
Alopurinol Xantina oxidasa
 INHIBICION REVERSIBLE

INHIBICION COMPETITIVA

E + S ES E + P E
+ I
I

EI E
Ki =
[E] [I] S
[EI]

    KM ap = Km(1 + [I]/Ki)

 Ejemplo de Inhibidor competitivo

Succinato + FAD + Fumarato + FADH2

Succinato
deshidrogenasa

Succinato
Malonato

Oxaloacetato
 v

Gráfica
de M-M

Km Km ap [S]

1/v

Gráfica
de L-B

1/[S]
-1/Km -1/Kmap
 INHIBICION NO COMPETITIVA

S E
E + S ES E + P E S

+ +
I I
I
I

S E
EI + S ESI E S

I
I
 v

Gráfica
de M-M

Km [S]

1/v

Gráfica
de L-B

Vmax.s/I
Vmáx ap.=
     Km(1 + [I]/Ki) -1/Km
1/[S]
 Características de los diferentes tipos de
inhibición reversible

Tipo de El Inhibidor Efecto Efecto

inhibición se une a s/Vmáx s/Km

Competitiva E Ninguno
Aumenta
Km c/I. = Km s/Inh. (1+ [I]/Ki)

No competitiva E y ES Disminuye Ninguno

Vmáx c/I= Vmáx. s/Inh. / 1 + [I]/ Ki
Acción de inhibidores a distinta
concentración

COMPETITIVA NO COMPETITIVA

Pendiente = Km / Vmáx
 INHIBICION IRREVERSIBLE

. Por unión covalente del inhibidor

- Acetilcolinesterasa Enzima
- Quimotripsina inactivada
Diisopropilfluorfosfato (DFP)
 INHIBICION IRREVERSIBLE

. Inhibidor suicida

Se une al sitio activo de la enzima y ésta cataliza la modificación

del inhibidor a otro compuesto que permanece unido a la enzima.

El ALOPURINOL es un inhibidor suicida que actúa sobre la

enzima xantina oxidasa (degradación de purinas).
Se forma el oxopurinol el cual queda unido a la enzima.
Factores que afectan la actividad enzimática

• pH

• Temperatura

• Concentración de Enzima

• Concentración de Sustrato
 EFECTO DE LA CONCENTRACION DE
SUSTRATO SOBRE LA VELOCIDAD INICIAL
Efecto de la concentración de
enzima sobre la actividad

[E]
Concentración saturante de
sustrato, pH y temp. constantes
 Influencia del pH sobre la
actividad enzimática

Actividad
enzimática

pH
Ejemplos de enzimas con
diferentes pH óptimo
 Influencia de la Temperatura sobre la
actividad enzimática

r
tem de d po
ura
pe la
a
vid

rat
ti
Actividad ac T. óptima tura
era
enzimática te mp ca
de rovo ación
p z
t urali
es na
d

T(ºC)
 ISOENZIMAS

 Diferentes formas moleculares de una

misma enzima.

 Son sintetizadas por genes diferentes

 Tienen diferente composición aminoacídica

por lo que pueden separarse por electroforesis.

Catalizan la misma reacción, actuando sobre

el mismo sustrato para dar el mismo producto
Dos isoenzimas presentan en general
diferentes valores de Km y Vmáx.

 Se encuentran ubicadas en diferentes

compartimentos de la célula ó en diferentes
tejidos.

 Son utilizadas en clínica para determinar

el origen del tejido dañado
 Lactato deshidrogenasa (LDH)

Presenta 5 isoenzimas con distinta

composición en cuanto a sus subunidades
y c/u es específica de un tejido.

H4 H3M H2M2 HM3 M4

M > Músculo
H > Corazón
Ejemplo de isoenzima: Glucoquinasa y
hexoquinasa
Actividad
enzimática

Glucoquinasa

Hexoquinasa

Km. hexq Km. glucq [glucosa mmol/l

 REGULACION DE LAS REACCIONES
CATALIZADAS POR ENZIMAS

REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

ENZIMAS ALOSTERICAS REGULACION COVALENTE

REGULACION POR REGULACION

PROTEINAS POR PROTEOLISIS

REGULACION DE LA SINTESIS
ENZIMAS INDUCIBLES
DE LAS ENZIMAS
 ENZIMAS ALOSTERICAS

Enzima Enzima Enzima Enzima

1 2 3 4

Enzima 1 ENZIMA ALOSTERICA

MODULADORES POSITIVOS MODULADORES NEGATIVOS

Bifurcación de una vía metabolica
 PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS
ALOSTERICAS
• Poseen un sitio de unión a un metabolito regulador (sitio
alostérico)

• La unión del metabolito a la enzima es de carácter

reversible y no covalente.

• En general poseen dos o mas sitios reguladores.

• La mayoría posee dos o mas cadenas polipeptídicas o

subunidades.

• En general tienen un comportamiento cinético sigmoideo

CINETICA DE UNA ENZIMA ALOSTERICA
Curva Sigmoidea
Regulación de la actividad de la Aspartato
transcarbamilasa (ATCasa)

Aspartato (mM)
 EJEMPLOS DE ENZIMAS
ALOSTERICAS
• Hexoquinasa, Fosfofructoquinasa y Piruvato
Quinasa Vía glicolítica

• AcetilCoA carboxilasa Biosíntesis de lípidos

• Aspartato Transcarbamilasa Biosíntesis de nucleó

tidos pirimidínicos
• Glutamato Deshidrogenasa Degradación de
aminoácidos
• Citrato sintasa, isocitrato y a-cetoglutarato
deshidrogenasas Ciclo de
Krebs
REGULACION POR MODIFICACION
COVALENTE

HO-CH2 CH2- HO

(Cadena lateral de Ser)

Fosforilasa b
(menos activa)
Fosforilasa 2 Pi Fosforilasa
ATP
quinasa fosfatasa
ADP 2 H2O

P -O-CH2 CH2- O- P

Fosforilasa a
 REGULACION POR PROTEOLISIS
• Por eliminación de una cadena peptídica, enzimas
inactivas se convierten en enzimas activas y
viceversa.
ZIMOGENOS

• Las enzimas digestivas: pepsinógeno y

quimotripsinógeno se convierten en las enzimas
activas pepsina y tripsina.

• Suele ocurrir una activación secuencial

produciéndose una cascada de activaciones. Ej.
Coagulación sanguínea.
 REGULACION POR PROTEINAS
• Modifican la actividad de enzimas
involucradas en el metabolismo celular.
Por ej. Indirectamente activando o
inhibiendo la actividad de la glutamina
sintetasa.

• RNA polimerasa: Asn, Gln, Glu, Lys y Arg

forman enlaces hidrógenos con las bases
del DNA