Sunteți pe pagina 1din 61

c 

 c cc
O  
 
O 


   
Hematopoieza
(haima=sange, poiesis=formare)

° Hematopoieza are functia de a produce


elementele si celulele din sangele periferic.

° Hematopoieza are rolul de a mentine


homeostazia elementelor sanguine.
Hematopoieza

° Celulele stem pluripotente


° eritropoieza ƛ productia eritrocitelor
° granulocitopoieza (mielopoieza) ƛ
productia granulocitelor
° monocitopoieza
° megacariocitopoieza - trombocitopoieza
° limfopoieza ƛ productia de limfocite
Hematopoieza
° Celule stem pluripotente
° Celule progenitoare (CFU ƛ unitati formatoare de
colonii))
colonii
° Celule precursoare (......bla
......blast,
st, .....cite
.....cite))

° Procese celulare: proliferare, diferentiere,


moarte
° Celule stem pluripotente sunt apte de
autoreinoire si totodata genereaza toate tipurile
de celule sanguine (dupa o serie de procese la
nivelul maduvei osoase)
Celule implicate in hematopoieza
° Organizare

Celule stem
pluripotente

Celule progenitoare

Celule precursoare

Celule diferentiate (mature)


Celulele stem

1. Celulele stem au capacitatea de autoreinnoire

1. Celulele stem formeaza tipuri celulare diferite


si diferentiate ireversibil.

1. Celulele stem pot functional sa reconstituie un


tesut in vivo
Vipuri de celule stem

° O   

° O   
  

° O   

 
Originea celulelor stem

° Celulele stem embrionare (ESCs)


° Deriva din embrion in special din stadiul de blastocit
° Au capacitate de autoregenerare
° Mentin capacitatea de a forma celule stem
pluripotente
° Celule stem (somatice)
° Sunt parte a celulelor tesuturilor specifice a
organismului dupa nastere
° Sunt celule destinate sa se diferentieze
° Exista mai multe tipuri de celule stem adulte
identificate: hematopoietice, mesenchimale, neurale,
hepatice, muschi, etc.
Hemangioblastul
Studiile au demonstrat existenta unor celule la embrion ce au potential
de formare atat a celulelor sanguine cat si a celulelor endoteliale
vasculare.
Celulele au fost numite hemangioblaste si apar din mezodermul
embrionar.
Hematopoieza in stadiile precoce ale embriogenezei

( 
    
  

 
 


  

 
 
     
     
 


 
  
       
Originea celulelor la nivelul tesuturilor hematopoietice

1. Hematopoieza la nivelul sacului vitelin ƛ apare in


saptamana 3-6 de dezvoltare embrionara. Se gasesc
eritrocite nucleate, granulocite si macrofage, nu sunt
observate limfocite.
2. Hematopoieza la nivelul embrionului (ficat si splina)
ƛ apare intre saptamanile 6 - 22 de gestatie. Sunt
prezente eritrocite anucleate, seriile mieloide si
limfocite.
3. Maduva osoasa hematogena ƛ apare din saptamana
20 de gestatie si este prezenta pe toata durata vietii.
Exista toate tipurile de celulele sanguine. Limfocitele
V se dezvolta in timus.
Hematopoieza la nivelul mezodermului sacului vitelin

è      
 

      

  
      
  
 
  

    
    
         
Hematopoieza la nivelul ficatului embrionar

R       


   


            



           
   
 
 

O     


 
   
Maduva osoasa hematogena
Celulele stem vor coloniza canalele medulare ale oaselor lungi si in
cavitatile oaselor spongioase.
Voate seriile celulelor sanguine (exceptie limfocitele V) se vor
diferentia in maduva osoasa hematogena
›ecoltare de maduva osoasa
° Ô            
° O      
° è 
°      
°  
Maduva osoasa hematogena

° Doua tipuri de lame pentru microscopie:


° Sectiuni tisulare: arata toate 
  
(stroma + vase sanguine + adipocite +
cordoane hematopoietice)
° Aspirat -> frotiu: sunt evidentiate celulele din
seriile celulare si progenitorii.
Maduva osoasa hematogena

° O   
   
 

° O  !  
Maduva osoasa hematogena

°     ""    
°       
°       
Maduva osoasa hematogena
° è  maduvei hematogena
-  
(
(colagen tip I si III, fibronectina, laminina si proteoglicani)
-    
 
-      
° è 
: 3D retea de fibre de reticulina, in cadrul careia
se gasesc celule reticulare, celule hematopoietice,
macrofage.
Maduva osoasa hematogena
Maduva osoasa hematogena

° ~5,000,000 eritrocite/  L
° ~5 L de sange (persoana de 70 Kg) = 5 x
106  L X 5 x 106
° ~ 25 x 1012 eritrocite in organism
Durata de viata a eritrocitelor = 120 zile
astfel ~2 x 1011 eritrocite/zi
sau
~8,000,000,000 eritrocite/ora
Maduva osoasa hematogena
° ~10,000 leucocite/  L (~1/2 limfocite, ~1/2 PMNs)
° ~5 L de sange (persoana de 70 Kg) = 5 x 106 mL
° ~ 5 x 1010 leucocite in organism (fara cele din MO)

° Viata medie a leucocitelor este variabila


° PMNs ~ 24 ore, limfocite de la zile la ani (celule memorie)
° Estimare ~ 2 X 1010 celule noi/zi

° Ô         


   
    
Studii asupra celulelor stem hematopoietice
° In mod extensiv pe modele murine
° Se pot recolta
° Adult ƛ maduva osoasa, sange periferic
° Peri--natal ƛ sange din cordonul ombilical
Peri

° Veste functionale
° in vitro test clonogenic (formare de colonii)
° in vivo la soareci transplant de celule

° Markeri de suprafata
Folositi pentru caracterizare, cuantificare si izolare
° Positive pentru CD34, c-
c-Kit, Vhy-
Vhy-1, Flk-
Flk-2/Flt-
2/Flt-3, AC133
Sistem de cultura in Methyl Cellulose

° è 
  


   
° è O   è

#
 
°      $%"&'
° è    ('
° è  O$)*'
° R
  
    

  
       
     
°   
  
OR
Cultura in Methylcellulose


 

  Ú   


Controlul hematopoiezei
Factori de crestere si stimulare a coloniilor
° Factori de crestere si stimulare a coloniilor
Colony Stimulating Factors (CSF)
° Se definesc prin capacitatea de a stimula cresterea
coloniilor celulare
° Glicoproteine

° Exista receptori specifici la nivelul celulelor

° Au activitate biologica intensa

° Citokine
° Citokinele au functie pleiotropica
° Pot stimula sau inhiba cresterea celulelor
hematopoietice
Factorii de reglare a hematopoiezei
° Sunt produsi de mai multe tipuri celulare
° Celule endoteliale, fibroblaste, macrofage, limfocite

° Celulele stem exprima in mod simultan receptori


pentru mai multi factori

° Cei mai multi factori sunt activi pe mai multe linii


hematopoietice

° Polifunctionali
° Proliferare, angajare catre o linie celulara, maturare,
afectare a functiilor celulare.
Factori de crestere
§   
          
  
      Ú 
           

     !


    "  !" 
    "  !" 
  # § "  $  !" 

%&     ! ' 


Ú 

%&       $ 


  ((      

   ) *    


 ! *  +
ranulocyte Colony
Colony--ètimulating Ractor
G-CSF
ƥ Principala citokina cu rol hematopoietic asupra
productiei neutrofilelor, diferentiere si activitate
celulara.
ƥ Stimuleaza cresterea celulelor progenitoare
angajate catre linia neutrofilelor
ƥ Stimuleaza maturarea neutrofilelor

° Activeaza functia fagocitara a neutrofilelor


mature
G-CSF scurteaza timpul de maturare a
neutroffilului
neutro

  § " %  


    "

, 
Ú
„ 

( 
Ú


 
Utilizarea clinica a G-
G-CSF
° Larg utilizat pentru tratarea neutropeniei
° Dupa chemoterapie in cancer
° Dupa transplant de maduva osoasa
° Mobilizarea celulelor progenitoare in
sangele periferic

° Neutropenia congenitala
Eritropoietina

° Produsa predominant la nivel renal

° Stimuleaza sinteza de A›Nm si globina

° Accelereaza angajarea celulelor stem


pluripotente catre dezvoltarea seriei
eritroide
Activitate biologica
° è
          
° è           
° +      $
° +            
Utilizarea terapeutica

° In momentul scaderii nivelului eritropoietinei


° Insuficienta renala cronica

° Necesitatea cresterii eritropoiezei


° Pacientii dupa chemoterapie

Mai rar utilizat


° AIDS, dupa proceduri chirurgicale, copii nascuti
prematur, unele afectiuni cronice inflamatorii
Eritropoieza

° Celulele implicate in acest proces:


proeritroblast -> eritroblast bazofil ->
eritroblast policromatofil ->eritroblast
ortocromatofil (acidofil) -> reticulocite ->
eritrocite
° Aspecte generale :
1. Voate celulele blast au nucleu
2. Celulele nu au granulatii citoplasmatice
Eritropoieza

° Ô     - 20-
20-25  m, celula mare, nucleu
rotund, cromatina laxa dantelata, nucleoli
prezenti, citoplasma bazofila cu o zona mai
deschisa perinuclear.
° -- 16-
Ñ     16-18  m, nucleu rotund
cu heterocromatina, citoplasma intens bazofila
(numar mare de poliribozomi).
Eritropoieza

° Ñ    
 : 9 -12  m, nucleu
rotund heterocromatic, citoplasma albastru/roz
deschis datorita inceperii acumularii de hemoglobina
° Ñ     
 (a (a
 8 - 9  m,
nucleu foarte mic si intens colorat, citoplasma
acidofila.
°  ƛ contine numar redus de poliribozomi
› 
ce se coloreaza cu albastru de cresyl briliant
° Ñ  

Granulocitopoieza
° Celulele implicate in acest proces:

    
  
  


    
 
    
 
 
  
° Aspecte generale:
1. Celulele Ơblastơ au nucleoli, celulele Ơciteơ
nu au nucleoli, cu exceptia promielocitelor
2. Scaderea volumului celular pe parcursul
diferentierii, exceptie la promielocit
3. Prezenta de granule azurofile si granule
specifice in functie de stadiul maturarii
Granulocitopoieza

°    - 15
15--20  m, nucleu rotund cu
1 -4 nucleoli, citoplasma bazofila si  
  
 
° Ô 
  - 20
20--25  m, nucleu ce
poate contine nucleoli; citoplasma
abundenta si bazofila cu     
Granulocitopoieza
°   ƛ trei tipuri celulare, nucleul rotund
se condenseaza si este mai intens colorat decat
la promielocit, citoplasma mai putin bazofila si
prezinta     ::
1.   e
 e- 15-
15-20  m, 
 
    
2. , -- 20-
20-25  m,   

 ""  
 
3.   -
- 13-
13-15  m,    cu
cu
dimensune de 0,5  m)     

  

Granulocitopoieza

°  
  ƛ ƛ nucleu reniform,
citoplasma asemanatoare mielocitelor
°    
   
   nucleu in forma de U sau S,
citoplasma acidofila
°    
  
  

nucleu complet segmentat
Mieloblast si promielocit
Promielocite, mielocite si metamielocite
Originea trombocitelor
° Megacarioblaste, megacariocite, megacariocite
adulte formatoare de trombocite
°     ƛ
ƛ 15-
15-50 µm, nucleu mare
oval sau reniform, prezenta nucleolilor,
citoplasma bazofila.
°    ƛ
ƛ 35-
35-150 µm, nucleu lobulat
neregulat, cromatina macrogranulara , nu se
observa nucleoli, citoplasma acidofila sau
bazofila.
°     ƛ
ƛ dimensiune pana la
150 µm, nucleu lobulat si la nivelul citoplasmei
acidofile se formeaza invaginatii ale membranei
plasmatice.
Megacariocite la nivelul maduvei osoase
Monocitopoieza

°   ƛ caracteristici morfologice


asemanatoare mieloblastului
° Ô 
 - 10- 10-20  m, nucleu (ce prezinta o
mica indentatie) unde cromatina este dantelata
si nucleoli prezenti , citoplasma bazofila.
°    12
12-- 15 
15 m, nucleu cu o dimensiune
de 50
50%
% din suprafata celulei, citoplasma cu
granule azurofile.
Limfopoieza

° Y
  - 10-10-18  m, nucleu eucromatic cu
1-2 nucleoli,citoplasma bazofila. Unele limfocite
din maduva osoasa se diferentiaza in limfocite B,
alte limfocite din maduva osoasa migreaza in
timus unde se diferentiaza in limfocite V.
° Limfocitele B si V migreaza catre organele
limfoide secundare.
° Y