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Proteínas

1. Catálisis enzimática: aumentan las velocidades de reacción al menos un

millón de veces.

2. Trasporte y almacenamiento: Hemoglobina y mioglobina

3. Movimiento: Flagelos, cilias, sarcómero.

4. Soporte mecánico: Colágeno

5. Protección inmune: Anticuerpos

6. Generación y transmisión del impulso nervioso.

7. Control del crecimiento y diferenciación


Aminoácidos
Las unidades estructurales básicas de las proteínas

Los aa en disolución, a pH
neutro, son
predominantemente iones
dipolares, en vez de
moléculas no ionicas
Aminoácidos

Solamente los aa L constituyen a


las proteínas.

Cadenas R: tamaño, forma. Carga,


capacidad de enlaces de
Hidrogeno y reactividad química
Aminoácidos
Cadenas laterales alifáticas: Son Hidrofóbicas
Aminoácidos
Cadenas laterales alifáticas

Cadena lateral es de naturaleza alifática pero difiere en que


si cadena lateral esta unida tanto al N como al C alfa. Se
sitúa con frecuencia en los codos de las cadenas proteicas
dobladas, no tiene aversión a aqueda expuesta al agua.
Aminoácidos
Cadenas laterales aromáticas: Phe y Trp son muy hidrofóbicos.
Aminoácidos
Cadenas alifáticas con Azufre: Cis es enormemente reactivo, puede formar
enlaces de disulfuros.
Enlaces disulfuros

Acrosoma es rico en cisteínas


(puentes disulfúricos)
Aminoácidos
Cadenas alifáticas con grupos OH
Aminoácidos
Cadenas alifáticas básicas: Hidrofilícos y tienen carga Positiva a pH neutro.
Aminoácidos
Cadenas alifáticas acidas: Hidrofilícos y tienen carga Negativa a pH neutro.
Aminoácidos
Proteínas de membranas

1. Proteínas integrales de membranas


2. Proteínas de membranas ancladas a lípidos
3. Proteínas periféricas de membranas
Enlace peptídico
Niveles de organización
Estructura primaria se refiere a la secuencia de aa
Niveles de organización
Estructura secundaria esta relacionada con el ordenamiento espacial de los
residuos de aa.
Niveles de organización
Estructura terciaria esta relacionada con la disposición tridimensional de todos
los residuos aa.
Niveles de organización
Niveles de organización
Estructura cuaternaria hace referencia a proteínas que tienen mas de una
cadena polipeptídica.
Proteína

La función deriva de la estructura tridimensional y la estructura tridimensional


esta establecida por la secuencia de aa.

1. Cambios en las propiedades hidrodinámicas de la proteína: aumenta la


viscosidad y disminuye el coeficiente de difusión.
2. Disminución de su solubilidad, ya que los residuos hidrofóbicos del interior
aparecen en la superficie
3. Pérdida de las propiedades biológicas
Desnaturalización
1. La polaridad del disolvente: etanol o acetona disminuye el grado de
hidratación de los grupos iónicos superficiales de la molécula proteica,
provocando la agregación y precipitación. Los disolventes orgánicos
interaccionan con el interior hidrofóbico de las proteínas y desorganizan la
estructura terciaria, provocando su desnaturalización y precipitación.

2. Aumento de la fuerza iónica del medio (por adición de sulfato amónico, urea o
hidrocloruro de guanidinio, por ejemplo) también provoca una disminución en el
grado de hidratación de los grupos iónicos superficiales de la proteína, ya que
estos solutos (1) compiten por el agua y (2) rompen los puentes de hidrógeno o
las interacciones electrostáticas, de forma que las moléculas proteicas se
agregan y precipitan. 
Desnaturalización
3. Temperatura aumenta la energía cinética de las moléculas con lo que se
desorganiza la envoltura acuosa de las proteínas, y se desnaturalizan.
Asimismo, un aumento de la temperatura destruye las interacciones débiles y
desorganiza la estructura de la proteína, de forma que el interior hidrofóbico
interacciona con el medio acuoso y se produce la agregación y precipitación de
la proteína desnaturalizada.
Métodos de estudios
1. Electroforesis: Una molécula con carga neta se desplaza en un campo
eléctrico

Carga electica
Tamaño
Forma

V = Ez/ƒ; Ez es la fuerza eléctrica y ƒ es la fricción entre la molécula y el


medio

Mayor carga eléctrica, mayor movilidad.


Menor tamaño o peso molecular, mayor movilidad
Métodos de estudios
Condiciones desnaturalizante: SDS (Dodecilsulfato de sodio), Mercaptoetanol o
ditiotreitol
Westerblot
Westerblot
Westerblot
Westerblot
Métodos de estudios
Isoelectroenfoque: todas las proteínas tienen un ph característico en el cual su
carga neta es cero (punto isoeléctrico).
Métodos de estudios
Gel Bidimensional: Isolectroenfoque + SDS-PAGE
Métodos de estudios
2. ELISA ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas
Métodos de estudios
Ensayo por inmunocromatografía
LABORATORIO QUIMICO
TEST PRESUNTIVOS VS CONFIRMATORIO

TEST PRESUNTIVOS:
 Se usa a menudo como indicador sobre la presencia de fluidos corporales
(Sangre, Semen, etc)
 Son simples, baratos, fácil de usar, no degradan las muestras estudios de ADN.
 Inespecíficos . Falso positivo

TEST CONFIRMATORIOS:
 Test serológicos por la utilización de reacciones antígenos-anticuerpos.
 Son caros pero específicos. Elevada sensibilidad
 No confirman la obtención de un perfil genético.
SANGRE O TEJIDO HEMATOLOGICO
La sangre se la puede considerar un tejido conectivos fluido constituido por células y plasma
sanguíneo. Adulto promedio tiene alrededor de 5 litros de sangre total.
En la sangre circulante, los eritrocitos representan unos 5 millones por µl, las plaquetas unas
300.000 por µl y los leucocitos unos 7000 por µl.
TEST PRESUNTIVOS DE MANCHAS
SANGUINEAS
Son muy sensibles (Trazas de sangre a dil. 1:200.000)
VERDADEROS NEGATIVOS
Carecen de especificidad FALSOS POSITIVOS
Se basan en detectar la presencia de la hemoglobina
presente en los glóbulos rojos.
TEST PRESUNTIVOS DE MANCHAS
SANGUINEAS
Se basan en la presencia en la sangre de peroxidasas que
descomponen un peróxido (H2O2), desprendiendo oxigeno
que oxida a un indicador que cambia de color.

SANGRE + H2O2 H 2O + 0 + INDICADOR = COLOR

Test de Adler: BENCIDINA (AZUL)


Test de Kastle-Meyer: FENOLFTALEÍNA (ROJO)
Luminol: 3-AMINOFTALIDRAZIDA
LUMINOL
LUMINOL
TEST DE MANCHAS SANGUINEAS

Reacciones Antígeno-Anticuerpo. Hemoglobina o glicoforina


A
TEST DE MANCHAS SANGUINEAS

Reacciones Antígeno-Anticuerpo. Hemoglobina o glicoforina


A
Ensayos inmunocromatografía
HEM-CHECK-1 que se usa para detectar materia fecal
oculta

¿CONFIRMATORIO?
SEMEN O LIQUIDO ESPERMATICO

El Código Penal Argentino, en el Titulo III del Libro segundo,


protege penalmente la integridad (o libertad) sexual del ser
humano, es decir, el derecho que toda persona humana tiene (por
el solo hecho de serlo) de mantener relaciones y contactos
sexuales sólo con quien desee, y a no tenerlas con quien no desee.
A su vez, este derecho es una manifestación de la libertad
individual de la persona humana, consagrada en la Constitución
Nacional (Art. 1, 14, 17, 18, 19, y concordantes) y en los Tratados
de Derechos Humanos que tienen jerarquía constitucional (Art. 75
Inc. 22 Const. Nac.).
SEMEN O LIQUIDO ESPERMATICO
El volumen promedio en una eyaculación es de 2 a 4 mililitros tras un
periodo de abstinencia de 3 días, con una concentración de
espermatozoides que varía de 50 a 250 x 106/ml.
Los individuos que presentan azoospermia no producen
espermatozoides.
El esperma total emitido es un líquido de consistencia cremosa, de
color opalino, a veces levemente amarillento por las flavinas
provenientes de la vesícula seminal y de olor característico. El pH del
semen es de alrededor de 7,2 - 7,8.
Menos del 10% del semen eyaculado total corresponden a los
espermatozoides.
APARATO REPRODUCTOR MASCULINO

1.Fracción pre-eyaculatoria: Glándulas de Cowper


2.Fracción previa: Próstata
3.Fracción principal: Espermatozoides
4.Fracción terminal: Vesícula Seminal
SEMEN: MATERIAL A TRABAJAR

COITO:
 CAVIDAD VAGINAL: 14 A 80 HS
 CAVIDAD RECTAL: 24 HS
 CAVIDAD BUCAL: 8 HS

MANCHAS
 PIEL: PEGAMENTO o RASTRO DE CARACOL, LABIOS MAYORES,
CARA INTERNA DE LOS MUSLOS, PELOS DEL PUBIS
 TEJIDOS: ALMIDONADO o CARTAS GEOGRAFICAS, ROPA
INTERIOR, ZAPATILLAS DE LA VICTIMA
SEMEN
TEST PRESUNTIVOS:
 Fosfatasa acida prostática
 P30 o Antígeno Prostático Especifico, es una enzima proteolítica con efecto
sobre el esperma coagulado, cuya función fisiológica es la de mantener fluido el
eyaculado.
 Luz ultravioleta, flavinas da una fluorescencia blanco-amarillenta, a diferencia
de la orina que da una fluorescencia celeste.
TEST CONFIRMATORIO EN SEMEN

Visualización de los espermatozoides. Deshidratación, adherencia al tejido,


uniformidad, azoospermico.
SEMEN
SALIVA
CARACTERISTICAS:
 Es un líquido transparente, pH neutro
 Se producen entre 1 y 1.5 litros de saliva diarios.
 Es producida por las glándulas: parótida y submaxilar (80 al 90%); la sublingual
(10%)
 Importancia forense: Mordidas o Escupitazos.; Abuso sexual: sexo oral;
Evaluar estupefacientes: cocaína y anfetaminas
 Contiene miles de células epiteliales nucleadas. Muestras indubitadas

ANALISIS:
TEST PRESUNTIVOS:
 Amilasa: Positivo con saliva animal y presenta interferencia con otros fluidos
corporales: orina y flujo vaginal.
TEST CONFIRMATORIOS:
 Prueba inmunológicas: es especifica para la saliva humana.
Test químicos

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