réalisation d’un examen cytobactériologique des urines.
Réaliser l’examen cytologique des urines.
Prélèvement des urines - MATERIEL :
• 1 flacon stérile pour le recueil des urines.
• On peut avoir recours à d autres matériels en fonction de l’âge, de l’état du malade : -sachet collecteur pédiatrique • -sonde, cathéter ou étui pénien • Dakin. • Compresse stérile. • Collecteur d’urine pour nourrisson. • 1 bon de demande d’examen microbiologique. • Etiquette au nom du patient. - METHODOLOGIE :
• Echantillon : Urine.
• Moment du prélèvement : au cours de la première miction du matin ou urine ayant séjourné au moins 3 heures dans la vessie. • Le prélèvement doit être effectué avant toute antibiothérapie.une fenêtre thérapeutique de 48hà72h est réalisée si le malade est sous antibiotique.
• Pour un contrôle d une infection urinaire traitée, le
prélèvement doit être réalisé 48h après l arrêt du traitement antibiotique
• Conditions : lavage soigneux avec un
antiseptique doux, de la vulve chez la
femme, du méat urinaire et du prépuce
chez l’homme - Mode opératoire :
• Eliminer le premier jet d’urine.
• Recueillir l’urine du milieu du jet dans un pot stérile
(1 à 5 ml).
• Refermer immédiatement le pot.
Cas particuliers : Nourrisson et jeune enfant :
• Réaliser une désinfection soigneuse du méat urinaire puis de toute la région périnéale de dedans en dehors, sans revenir à la zone désinfectée, à répéter 2 fois.
• Placer une poche stérile adhésive (collecteur) et la
retirer dès que le nourrisson aura uriné.
• Ne pas laisser le collecteur plus d’une demi-heure, après ce délai, refaire la désinfection et mettre un nouveau collecteur.
• Après émission d’urine, le collecteur est refermé et
adressé au laboratoire. Patient sondé :
• Clamper la sonde en aval pendant 5 minutes
• Désinfecter la sonde en amont du clamp • Prélever l’urine avec une aiguille montée sur seringue • Transvaser dans un pot stérile
NB : si le prélèvement est effectué lors d’un
changement de sonde , faire le prélèvement sur la nouvelle sonde . - Transfert et conservation :
la personne qui réalise le prélèvement :
• Met sur le pot une étiquette comportant : Nom, prénom du patient , heure et nature du prélèvement.
• Remplit un bon de demande d’examen bactériologique en
précisant : – Le nom et le prénom du patient – L’heure et la date du prélèvement – Les renseignements cliniques – Les traitements antibiotiques – L’analyse précise à effectuer (miction, patient sondé, poche collectrice) • Le coursier ou le personnel du service apporte le pot d’urines au laboratoire, conditionné dans un sachet plastique et accompagné du bon de demande.
• Le transport doit être rapide et ne doit pas dépasser pas 30
minutes après la miction.si le transport nécessite une à deux heures l’urine est placée dans de la glace (de preference) afin d’éviter les faux positifs, car à température ambiante on a une pullulation bactérienne. • L’urine peut être conservée douze à vingt quatre heures à +4°c sans effet sur la bactériurie, néanmoins la leucocyturie en sera altérée. • La conservation est donc à éviter sauf en cas de nécessité. A la réception du prélèvement : • Vérifier :
– La conformité et l’étanchéité du tube.
– L’étiquetage sur le tube. – La correspondance entre le nom sur le bon d’examen microbiologique et celui sur le tube. – Que la fiche de renseignement clinique est correctement remplie. Examen macroscopique des urines:
• Noter l’aspect des urines : urine limpide, trouble,
hématique ou autres aspects… Examen bactériologique :
• La Mise en culture est réalisée avant
l’examen direct pour éviter toute contamination • Examen microscopique : • Cet examen doit être effectué dans les deux heures qui suivent le prélèvement afin de limiter l’altération des éléments cellulaires. • Examen à l’état frais • Examen direct après coloration : coloration de gram CELLULE DE MALASSEZ
• La cellule de Malassez permet de compter le nombre de cellules en suspension dans une solution.
• Il s’agit d’une lame de verre sur laquelle un quadrillage a
été gravé de 25 rectangles contenant eux-mêmes 20 petits carrés.
• Le volume de la cellule étant égal a 1mm3, il suffit alors
de multiplier le résultat par 1000 pour obtenir le nombre de cellules par ml. Numération des leucocytes et des hématies :
• Si le nombre de leucocytes est peu important : compter les
leucocytes présents dans toute la cellule de Malassez Leucocyturie / ml d’urines = N x 1000. N étant le nombre de leucocytes comptés.
• Si le nombre de leucocytes est moyennement important :
compter les leucocytes présents dans une bande (la cellule contient 10 bandes) Leucocyturie / ml d’urines = N x 10 x 1000.
• Si le nombre de leucocytes est très important : compter les
leucocytes présents dans un rectangle (la bande contient 10 rectangles) Leucocyturie / ml d’urines = N x 10 x 10 x1000. NB : La numération des hématies suit les mêmes règles que celle de leucocytes
• Signaler la présence d’une flore bactérienne éventuellement en précisant son importance (+, ++, +++)
• Noter la présence de cristaux, de cylindres et de
cellules épithéliales
• Noter également la présence éventuelle de levures
Leucocytes Hématies Cylindres Levures Cellules épithéliales Interprétation de la cytologie :
• A l’état physiologique : – Leucocyturie <103 leucocytes/ml – Hématies dans les urines < 103 hématies /ml
• En cas d’infection urinaire, le processus inflammatoire se
traduit le plus souvent par la présence de : – 104 leucocytes /ml – 104 hématies /ml – Cellules épithéliales