Profesor: Călugăreanu Valentin Introducere și generalități despre seroepidemiologie
• Este, fără îndoială, domeniul imunologiei care a suferit unul
dintre cele mai notabile progrese în ultimii 10 sau 15 ani, în fiecare zi se reafirmă sau apar noi teorii asupra imunologiei de bază, iar aceste tehnici sunt aplicate în studiul bolilor umane și animale. ; Cu toate acestea, este necesar să se cunoască și să se profite de acuratețea și rapiditatea testelor din domeniul epidemiologiei, considerând seroepidemiologia ca modalitate de depistare a stărilor de sănătate sau de boală în populații. Seroepidemiologie • Este studiul sau analiza probelor de sânge sau ser dintr-o populație definită care servește la cunoașterea „amprentelor” bolii în investigațiile epidemiologice. • Interfața cititorului cu computerul ne permite să lucrăm cu un număr mai mare de seruri pentru studii seroepidemiologice. Epidemiologia • Este știința care studiază distribuția bolii în populație pe baza timpului, geografiei și atributelor umane, căutând cauza sau efectul prin ipoteze de asociere. Unii autori precum Schwabe definesc epidemiologia ca aspectul medical al ecologiei. Este cunoscut tuturor că prezentarea bolilor depinde de interrelația care există între agent, gazdă și mediu, care determină tipurile, distribuția în timp și spațiu, precum și alte caracteristici specifice bolii. • Această cunoaștere a formelor de prezentare a bolilor în populație ne face să descoperim amploarea problemei și nu doar vârful „icebergului” care este ceea ce observăm în general prin intermediul clinicii. Context istoric al epidemiologiei serologice • Când departamentele de sănătate publică au început să fie create în secolul trecut, evidențele privind nașterile și decesele oamenilor erau păstrate în birourile guvernamentale și în biserici. S-a văzut curând că aceste statistici vitale, bazate pe raportul oficial al evenimentelor care au avut loc în viața oamenilor, au avut valoare medicală; din acel moment au început studii epidemiologice organizate, reprezentate de studiul focarului de holeră la om care a fost prezentat la Londra, Anglia, studiat de John Snow care a definit originea bolii și a dictat măsuri preventive prin analizarea înregistrărilor de cazuri care au fost avute în diferite zone. Munca lui este surprinzătoare, având în vedere că abia după 30 de ani Robert Koch a raportat Vibrio cholerae ca cauză a bolii. De atunci, bolile carantinabile au fost studiate și raportate oficial autorităților, creându-se astfel sistemul de raportare a incidenței morbidității. • În secolul al XIX-lea au fost create servicii veterinare în guvernele diferitelor țări. În SUA și Europa s-a constatat că lipseau statisticile vitale ale animalelor, care pot fi obținute doar din ferme controlate de animale în izolare. Printre principalele probleme care apar este ca animalele sunt sacrificate in scopuri de productie si in acest fel ciclul lor de viata este trunchiat, in general la varste fragede in abatoare. • Sistemul de raportare a morbidității a început într-o manieră ordonată cu munca lui Daniel Elmer Salmon în cadrul Departamentului pentru Industria Animalelor din SUA, pentru eradicarea celor mai importante boli infecțioase ale animalelor, eradicarea pleuropneumoniei contagioase bovine fiind un succes în această țară. În mod similar, sa întâmplat în Europa cu pesta bovină; mai târziu, Bernard Bang din Danemarca a demonstrat valoarea diagnostică a testului tuberculinic la bovine, care a fost utilizat în restul Europei și în SUA pe scară largă pentru efectuarea masivă a testului tuberculinic intradermic pentru cunoașterea prevalenței tuberculozei. Studii similare au fost efectuate pentru alte boli precum, de exemplu, în cazul durinei ecvine care a fost eradicată din SUA. În 1916, când oamenii de știință de la Departamentul Agriculturii au reușit să dezvolte teste rapide de laborator pentru a efectua un număr mare de mostre de fixare a complementului în aceeași zi. Atunci a luat naștere Seroepidemiologia ca o modalitate de a demonstra valoarea eșantionării de grup pentru supravegherea prevalenței bolilor. • Potrivit lui Paul, JR și White, C. în publicația lor 5 despre epidemiologia serologică (Academic Press, New York), abia în 1930, lucrările de seroepidemiologie au fost efectuate la scară largă în medicina umană, pe baza unor studii efectuate. în medicina veterinară. În prezent, Seroepidemiologia are o mare importanță în supravegherea bolilor și este unul dintre marii „piloni” în programele de medicină preventivă pentru controlul sau eradicarea diferitelor boli care afectează omul și animalele. Măsuri de prevenire și teste de laborator • Printre măsurile importante de medicină preventivă se numără carantina, prelevarea de probe în grup, tratamentul în grup, sacrificarea animalelor, igiena, dezinfecția, controlul și eradicarea, precum și aspecte privind educarea fiecăruia dintre aceste puncte. • Este eșantionarea de grup care servește la depistarea precoce a bolii sau a stării subclinice a bolii în perioada de incubație care servește ca bază epidemiologică pentru stabilirea incidenței și prevalenței diferitelor boli într-o populație de animale. Înțelegerea incidenței ca măsură dinamică a noilor cazuri de animale bolnave care apar într-o perioadă scurtă de timp și ca prevalență statică a numărului de animale bolnave dintr-o populație la un moment dat și, în general, pe o perioadă lungă de timp. Este necesar să ne amintim că o prevalență mai mare decât incidența este raportată în general în bolile cronice, în timp ce opusul apare în bolile acute. • Aceste măsuri de morbiditate, care servesc la stabilirea controlului și eradicării multor boli, sunt strâns legate de rezultatele testelor serologice efectuate pe eșantioane din populații de animale alese aleatoriu și a căror sensibilitate și specificitate din punct de vedere imunologic precum și a acestora. Precizia ne ajută să minimizăm erorile fals negative și pozitive în stabilirea prevalenței bolilor. • Unul dintre marile avantaje în stabilirea epidemiologiei serologice îl reprezintă sistemele de identificare a animalelor în campaniile de eradicare a bolilor sau de control al animalelor sălbatice. • De exemplu, sistemul de identificare pe care Statele Unite îl au în campania sa împotriva brucelozei a permis sepidemiologilor posibilitatea de a obține informațiile necesare și ordonate pentru a efectua alte analize aplicabile probelor de sânge și ser care au fost aruncate anterior.după practicarea testelor Brucella stabilite. de campanie. În prezent, sunt raportate peste 200 de tipuri de teste care pot fi efectuate cu aceste probe și care pot servi la identificarea „amprentelor” bolii și, în același timp, încearcă să explice ce, când, unde și cum. aspecte ale bolii la animale. De asemenea, seroepidemiologia a servit la înțelegerea bolilor neinfecțioase, în principal genetice • Acestea sunt câteva dintre analizele care pot fi efectuate din probe de sânge și ser obținute în campanii epidemiologice și pentru a putea justifica costul cu personalul material și uman care este necesar pentru realizarea acestuia. Consultați, de asemenea, studiile de teren și textele suport. • Teste: Toate testele aplicabile acestor probe de microorganisme sau boli, cum ar fi Bruceloza, Leptospiroza, Tuberculoza, Salmoneloza, Hemofiloza, Micoplasmoza, Febra Q, Anaplasmoza, IBR, BVD, Limbia albastra, Gripa, Paragripa, Stomatita veziculoasa si Toxoplasmoza, printre altele. • Dintre bolile neinfecțioase pot fi depistate: Anemii, deficiențe nutriționale, vitamine, minerale, boli metabolice, enzime serice, contaminanți în sânge, pesticide în păr, genotipul animalelor, cartografierea markerilor genetici, hemoglobine anormale, grupe sanguine. , toxic de obicei. De asemenea, pot fi efectuate teste indirecte ale factorilor de mediu, cum ar fi acțiunea radiațiilor asupra animalelor. Aceste mostre pot fi folosite pentru a constitui o bancă de informații pentru a efectua alte tipuri de studii retrospective ale bolii. Avantajele și limitele seroepidemiologiei • Avantaj 1.Cunoașterea stării de imunitate a efectivului. 2.Cunoașterea calitativă și cantitativă a bolilor în funcție de tipul de anticorp prezent. 3.Identificarea incidenței și prevalenței bolilor (morbiditatea). 4.Clasamentul celor mai importante boli din zonă. 5.Este folosit pentru stabilirea schemelor de vaccinare. 6.Administrarea corectă a vaccinului, procentul de animale vaccinate și procentul de animale competente imunologic pot fi studiate eficient. 7.Categoriile de animale din efectiv pot fi detectate ca: cazuri tipice, cazuri atipice, infecție latentă, purtător sănătos, animale imune neinfectate și animale sensibile neinfectate. 8.Pe baza acestor studii s-a stabilit că pentru a produce o bună imunitate în efectiv, este necesară vaccinarea a 70 până la 80% din animale pentru a conferi o bună protecție. 9.Este folosit pentru a prezice probleme ecologice (de mediu). 10. Depistarea precoce a bolilor, starea subclinica, perioada de incubație. 11. Permite cunoașterea stărilor de sănătate sau boli ale animalelor după sex, rasă, vârstă, funcție zootehnică, stare fiziologică, zonă geografică etc. 12. Evaluarea programelor de medicină preventivă în general. 13. Efectuarea de studii prospective și retrospective ale bolii. 14. Detectarea unor modificări antigenice la microorganismele studiate. 15. Determinarea infecțiilor recente sau anterioare. 16. Identificarea posibilelor nișe de infecție. 17. Se folosește pentru studierea modificărilor care apar în boli în funcție de timp și care pot fi: de lungă durată (decenii), ciclice (1 până la 5 ani), sezoniere (luni) și de scurtă durată (ore). 18. În general, este utilizat pentru stabilirea programelor de supraveghere epidemiologică. • Cerințe Cerințele pe care trebuie să le îndeplinească testele utilizate în seroepidemiologie sunt: 1.Ele trebuie să fie ieftine. 2.Fii simplu. 3.Fii sensibil și specific. 4.Ele trebuie să fie repetabile. 5.Acestea trebuie realizate cu material viabil din laborator sau zona de lucru. 6.Acestea trebuie să fie de înaltă securitate pentru a evita problemele de sănătate publică. • Limitări În limitele seroepidemiologiei sunt: 1.Eșecuri în tehnicile aplicate. 2.Erorile personale ale tehnicienilor. 3.Existența anticorpilor de scurtă durată (se pierde sensibilitatea). 4.Uneori, nivelurile de anticorpi nu reflectă starea de protecție. 5.Are probleme cu animalele aflate în stare latentă de boală sau alergii. 6.Trebuie făcută o standardizare a testelor. Evaluarea Testelor de Diagnostic • Unul dintre cele mai importante aspecte în stabilirea campaniilor seroepidemiologice este siguranța testelor de diagnosticare, cu alte cuvinte, evaluarea testelor. Se referă la faptul că în evaluarea testelor sunt luate în considerare patru aspecte importante, care sunt: sensibilitatea, specificitatea, acuratețea (fidelitatea) și precizia. Sensibilitate • Sensibilitatea este capacitatea testului de a detecta animalele bolnave. Specificitatea este caracteristica depistarii animalelor nebolnate. O defecțiune a sensibilității sau scăderea acesteia produce o creștere a numărului de fals negative. Un eșec în specificitate produce o creștere a valorilor false pozitive. Aceste măsuri sunt invers proporționale și pot fi exprimate în probabilități sau proporții. Prevalența și prevalența aparentă pot fi, de asemenea, cunoscute. • De multe ori se încearcă compararea rezultatelor a două teste; aceasta nu stabileşte decât o relaţie de sensibilitate şi specificitate relativă. Aceste comparații pot fi făcute doar dacă aceste două valori sunt cunoscute într-un test standard și dacă sunt aproape de 100%. • Evaluarea rezultatelor Seroepidemiologiei permite profesionistului să cunoască rezultatele preliminare și să aplice epidemiologia analitică. • Seroprevalența generală împotriva a șapte agenți infecțioși ai bovinelor (B VD, IBR, Leptospira hardjo, Mycobacterium paratuberculosis, Pasteurella multocida și Pasteurella (Mannheimia) haemolytica . • Acest lucru necesită stratificarea rezultatelor după vârstă, pentru a ști în ce strat se găsesc majoritatea animalelor pozitive. Seroprevalența animalelor stratificate după vârstă de sus în jos (viței, animale în curs de dezvoltare și animale în producție), ne permite să avem un control al calității rezultatelor pe baza reactivilor. • Evaluarea testelor diagnostice ne permite să cunoaștem populațiile negative, suspecte și pozitive, iar pe baza acesteia se stabilește punctul de limită (animale pozitive și negative). Barajas et. al., au conceput programe cu grafice tridimensionale pentru a monitoriza seroprevalența bolilor pe sezonul anului și starea reproductivă a vacii folosind testul ELISA. Diareea virală bovină este prezentată cu activitate de seroprevalență și Brucella abortus fără modificări notabile ale seroprevalenței. Folosind mai mult de un test • Uneori utilizarea unui test nu este adecvată pentru a satisface nevoile unui program de eșantionare, motiv pentru care se folosesc alte teste. • O metodă de utilizare a două teste este efectuarea unui prim test și efectuarea din nou a cazurilor pozitive cu un al doilea test, de exemplu, în cazul brucelozei în care este utilizat mai întâi un test mai sensibil, cum ar fi Bengalul Roșu, iar apoi în cazurile pozitive este utilizat. repetat cu un test de fixare a complementului mai specific. Există două moduri de a interpreta rezultatele: • Interpretare paralelă: Sunt pozitive la oricare dintre teste, acest lucru crește sensibilitatea. Interpretare serială: Pentru a fi pozitiv, trebuie prezentat la ambele teste, aceasta crește specificitatea. • Precizia testelor se măsoară pe baza abaterii standard, adică variabilitatea care există în măsurători, cu cât variabilitatea este mai mică, cu atât testul va fi mai precis. Statistici utilizate pentru evaluarea procesului • Unele tipuri de teste statistice aplicate testelor serologice sunt: Chi square, Yaudens index, care este o măsură discriminatorie a puterii. Testul McNemar. Este folosit pentru proporții corelate. Testul Kappa, pentru a arăta dacă testele detectează aceleași animale. • În Mexic, au fost efectuate diferite studii de către Barajas și colab., privind seroepidemiologia la tropice și zonele muntoase care au servit la formarea unei bănci de seruri și în principal la cunoașterea seroprevalenței bolilor la rumegătoare. De asemenea, acest lucru a generat publicarea mai multor texte care servesc drept referință în programele de medicină preventivă, cunoașterea bolilor bacteriene, fungice și virale care vor permite profesionistului și studentului să cunoască studiile efectuate în Mexic. • Putem concluziona având în vedere că Seroepidemiologia își propune să studieze sau să analizeze probe de ser dintr-o populație definită care servește la cunoașterea „amprentelor” bolii în cadrul investigațiilor epidemiologice. Se descriu antecedentele istorice ale epidemiologiei serologice, avantajele și limitele acesteia, precum și tehnicile de evaluare a testelor serologice pentru a cunoaște sensibilitatea și specificitatea acestora și pentru a putea astfel stabili, prin frecvențele de prezentare, incidența și prevalența bolilor, și puterea să implementeze programele de vaccinare adecvate în regiune. Mulțumesc pentru atenție!!!