CULTIVO DE MICROORGANISMOS

 El

cultivo es el proceso de proliferacin de microorganismos al proporcionarles un entorno con condiciones apropiadas. Los microorganismos en proliferacin producen rplicas de si mismos y necesitan los elementos presentes en su conposicin quimica.  Los factores que deben controlarse durante la proliferacin incluyen nutrientes, pH, temperatura, aireacin, concentracin de sales y fuerza ionica del medio.

GENERACION DE ENERGIA
 La sntesis de enlaces anhidro requiere

energa qumica, que es proporcionada por dos enlaces fosfodister contenidos en el trifostato de adenosina (ATP). La energa adicional necesaria para mantenter la composicin citoplsmica relativamente constante durante la proliferacin se deriva de la fuerza motriz protnica, que consiste en energa potencial que puede derivarse del paso de protones a traves de una membrana.

GENERACION DE ENERGIA
 La fuerza motriz protnica es un gradiente

electroqumico con dos componentes: una diferencia en pH y diferencia en la carga.  La energa libre puede utilizarse para el desplazamiento de la clula, para mantener los gradientes inicos o moleculares a travs de la membrana para sintetizar enlaces anhidro en el ATP o para diversos propsitos combinados.

FUENTES DE ENERGIA METABOLICA

 FERMENTACION  RESPIRACION  FOTOSINTESIS

FERMENTACION
 La fermentacin se caracteriza por la fosforilacin del

sustrato, un proceso enzimtico en el cual los enlaces de pirofosfato se donan directamente al trifosfato de adenosina (ATP) por un intermediario metablico fosforilado. El intermediario fosforilado se forma por procesos metabolicos de sustrato susceptibles de fermentacin con la glucosa, lactosa o arginina.  La fermentacin de una molcula de glucosa (C6H12O6) por la va Embden-Meyerhof, produce una ganancia neta de 2 ATP + acido lactico

RESPIRACION

 Es

analoga a los procesos de acoplamiento dependientes de energia para descargar una bateria. La reduccin quimica de un oxidante a traves de una serie especfica de transportadores de electrones en la membrana establece la fuerza motriz protn ica a tras de la membrana bacteriana. El reductor puede ser un compuesto orgnico o inorgnico.

FOTOSINTESIS
 Es similar a la respiracin en el sentido de que la

reduccin de un oxidante a travs de una serie especfica de transportadores de electrones establece una fuerza motriz protnica. La diferencia en los dos procesos consiste en que en la fotosntesis se crean el reductor y el oxidante por medios fotoqumicos por medio de energa luminosa absorbida por lo pigmentos en la membrana; as la fotosntesis continua en tanto exista una fuente de energa luminosa.

METABOLISMO
Es el total de las reacciones qumicas realizadas por la clula, mediante las cuales obtiene energa a partir de los sustratos que la rodean y a su vez es utilizada para sntesis de nuevo protoplasma y para realizar sus diversas actividades. actividades.

METABOLISMO
CATABOLISMO: CATABOLISMO: Proceso de descomposicin de sustratos y conversin en energa utilizable. utilizable. ANABOLISMO: ANABOLISMO: La energa producida se puede usar despus para la sntesis de constituyentes celulares. celulares.

M E T A B O L I S M O

Catabolismo

METABOLISMO
Los carbohidratos son utilizados (metabolizados) Embden-Meyerhofpor la ruta glucoltica de Embden-MeyerhofPentosas. Parnas o bien por la ruta oxidativa de las Pentosas. Ambas tienen la finalidad de producir cido pirvico, el cual puede ser transformado a acetilacetilCoenzima A de tal forma puede entrar al Ciclo de Tricarboxlicos). Krebs (cidos Tricarboxlicos). Esto puede ocurrir en presencia o no de oxgeno. oxgeno.

METABOLISMO

Ruta glucoltica de EmbdenEmbdenMeyerhofMeyerhof-Parnas

METABOLISMO

Fermentacin del piruvato

Ciclo del cido tricarboxlico

METABOLISMO

M E T A B O L I S M O

M E T A B O L I S M O

Sntesis de protenas bacterianas

Condiciones necesarias para el desarrollo microbiano:

 Nutrientes Temperatura Oxgeno  pH  Agua

NUTRIENTES
 DONADORES Y ACEPTORES DE HIDROGENO  FUENTES DE CARBONO  FUENTES DE NITROGENO  MINERALES (AZUFRE, FOSFORO ETC)  OLIGOELEMENTOS  FACTORES DE CRECIMIENTO( AMINOACIDOS,

PURINA, PIRIMIDINAS)  VITAMINAS

Condiciones necesarias para el desarrollo microbiano:

 Nutrientes Substancias que la clula toma del ambiente que estimula su crecimiento y que las utiliza en las reacciones catablicas y anablicas

Caractersticas:
Atravesar las barreras celulares Ser utilizado por enzimas celulares Proveer energa Proveer subunidades de las macromolculas

 Nutrientes

Clasificacin nutricional de los microorganismos

Fototrofos Quimiotrofos:

Hipotrficos

Requerimientos de nutrientes de los microorganismos

Agua Fuente de Carbono Fuente de Nitrgeno Iones (Oligoelementos) Algunos requieren Vitaminas Cofactores de crecimiento Algunos Lpidos

Requerimientos de nutrientes de los microorganismos

MACRONUTRIENTES Fuente de Carbono Fuente de Nitrgeno Macroelementos MICRONUTRIENTES Oligoelementos Factores de crecimiento Cr, Co, Mn, Ni, Se, W, V, Zn Vitaminas, Aminocidos, Aminocidos, Purinas y pirimidinas Inorgnico y orgnico N2 inorgnico, N2 orgnico P, S, K, Mg, Ca, Na, Fe

CULTIVO DE MICROORGANISMOS
Medio de Cultivo: Cultivo: Medio que proporcione substancias nutritivas para los microorganismos y que les permita desarrollarse, puede ser considerado como tal. tal. Se pueden clasificar en: en: Naturales: Naturales: Estn constituidos por substancias naturales tales como papa, leche, huevo, sangre, etc. etc.

Artificiales: Artificiales: Si esta elaborado con substancias de sinttico. composicin qumica conocida se le llama sinttico. Si esta elaborado con substancias de composicin qumica desconocida y cuyos componentes no pueden ser analizados se le llama no sinttico

MEDIO DE CULTIVO
 EL

AGAR ES UN POLISACARIDO EXTRAIDO DE ALGAS MARINAS QUE SON SINGULARES PARA EL CULTIVO MICROBIANO POR SU RESISTENCIA A LA ACCION MICROBIANA Y PORQUE SE DISUELVEN A 100 GRADOS PERO NO FORMAN PLACAS DE GEL HASTA QUE SE ENCUENTRAN POR DEBAJO DE LOS 45 GRADOS

Condiciones necesarias para el desarrollo microbiano:

Temperatura Los patgenos humanos generalmente se reproducen a temperaturas similares a las del cuerpo (37 C). L a gran mayoria se desarrollan a 30 grados. grados. Clasificacin de las bacterias con base en su temperatura ptima de crecimiento: crecimiento: Psicrfilas (15 a 20C) 15 20 Mesfilas (30 a 37C) 30 37 Termfilas (50 a 60C) 50 60

Condiciones necesarias para el desarrollo microbiano:

pH La mayora de los microorganismos crecen en pH cercanos a la neutralidad, entre 5 y 9, cosa que no excluye que existan microorganismos que puedan soportar pH extremos y se desarrollen. desarrollen. Segn el rango de pH del medio en el cual se desarrollan pueden dividirse en: en: pH externo Acidfilos Neutrfilos Alcalfilos 1.0 - 5.0 5.5 a 8.5 9.0 - 11 pH interno 6.5 7.5 9.5

La mayora de las bacterias crecen a un pH ptimo de 6.5 a 7.5

Condiciones necesarias para el desarrollo microbiano:

Condiciones necesarias para el desarrollo microbiano: Oxgeno

REPRODUCCION DE EUCARIOTES

REPLICACIN VIRAL

Reproduccin Procariotes

CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO CURVA DE JACOB-MONOD JACOB(SISTEMA CERRADO)

Fase de Latencia: Es la fase de adaptacin al medio, Latencia: existe aumento de la masa celular pero no hay aumento en el nmero de clulas. (adaptacin, lag, metablica) clulas. Fase de Crecimiento Exponencial: Es la fase donde se Exponencial: produce un incremento exponencial del nmero de microorganismos. microorganismos.(logartmica, log) Fase Estacionaria: Es la fase a la que se llega cuando se Estacionaria: ha agotado la fuente de energa. energa. Fase de Muerte: Es la fase que se caracteriza por una Muerte: disminucin exponencial del nmero de microorganismos. microorganismos. (declinacin)

Cuenta Viable

Cuentas viables: slo

para clulas vivas capaces de reproducirse

Tcnica de estra en placa

Tcnica de vaciado en placa

Cuentas viables: slo para clulas vivas capaces de reproducirse

El crecimiento implica el aumento de los microorganismos capaces de formar colonias debido a que slo se tiene en cuenta el nmero de microorganismos viables, esto es capaces de crecer indefinidamente. Las determinaciones que se utilizan son:

Recuento de colonias

colonias Unidades Formadoras de Colonias

Clulas totales (vivas y muertas) Determinacin de peso hmedo Determinacin de peso seco Determinacin de nitrgeno total Determinacin qumica de un cido nucleico
Medida de masa bacteriana (vivas y muertas)

Turbidimetra Espectrofotometra

QUIMIOSTATO (SISTEMA ABIERTO)