CURSO DE ESPECIALIZAO EM HEMATOLOGIA LABORATORIAL

Prof. YOSHIO HASHIMOTO Prof. PAULO HENRIQUE DA SILVA

UFPR

SRIE VERMELHA

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO INTERPRETAO LABORATORIAL ERITROGRAMA ASPECTO PATOLGICO

ASPECTO FISIOLGICO PRODUO CIRCULAO DESTRUIO

SRIE VERMELHA

ASPECTO FISIOLGICO

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

PRODUO

A hematopoiese compreende a proliferao celular, a

diferenciao celular, a maturao funcional e a morte

da clula.

A hematopoiese tem incio no saco vitelnico, perodo denominado de mesoblstico, posteriormente passa por um perodo hepato-esplnico e aps este perodo instala-se definitivamente na medula ssea

No incio da formao dos embries dos vertebrados, o estgio de blstula consiste de duas camadas germinativas, a ectoderme e a endoderme. Atravs de fatores de crescimento e da interao clula a clula, a endoderme induz a ectoderme a formar uma terceira camada germinativa, a mesoderme. A partir dela formam-se as clulas tronco que so clulas indiferenciadas com capacidade de autorenovao e diferenciao.

Morfologicamente a clula tronco pode ser descrita como uma clula arredondada, pequena, agranular e com relao ncleo citoplasma elevada, assemelha-se a um linfcito pequeno ou mdio, apresentando como marcador o CD34+ , CD33- , CD38- , HLA-DR-

As clulas hematopoiticas e os progenitores vasculares migram da mesoderme extraembrionria para formar as ilhotas sanguneas, que iro originar as linhagens hematopoiticas primitiva e definitiva e o sistema vascular.

As ilhotas sanguneas so constitudas de trs camadas: a camada endodrmica, responsvel pelo crescimento das ilhotas sanguneas, as clulas tronco que iro se diferenciar em eritroblastos e posteriormente nas demais linhagens, e , uma camada endotelial que ir revestir as ilhotas sanguneas durante o seu desenvolvimento

A hematopoiese ocorre inicialmente no 15 dia da formao do embrio. As populaes de clulas progenitoras esto presentes no saco vitelnico, mas a diferenciao ocorre primariamente na linhagem eritride. Moncitos e megacaricitos podem ocasionalmente serem identificados nas ilhotas sanguneas. Na medida em que ocorre a formao do sistema vascular as clulas sanguneas entram em circulao

A hematopoiese primitiva caracterizada por eritroblastos de morfologia nica que no expulsam seu ncleo e no so mais encontrados aps o terceiro ms de gestao e no so to dependentes da eritropoietina (EPO) quanto os eritrcitos da hematopoiese definitiva

Estas clulas garantem o transporte de oxignio pela produo das hemoglobinas embrionrias Gower I, Portland e Gower II

Entre a 5 e a 6 semana de gestao estabelecida a hematopoiese heptica, terminando o perodo mesoblstico. Neste perodo estabelecida a hematopoiese definitiva que se diferencia da primitiva porque alm dos eritrcitos forma leuccitos e plaquetas

O fgado torna-se o stio de desenvolvimento das clulas sanguneas e a produo celular heptica continua at a 2 semana aps o nascimento. Durante este perodo os glbulos vermelhos circulam pelos vasos sanguneos carregando no seu interior a hemoglobina fetal (2 cadeias alfa, 2 cadeias gama).

No perodo heptico o bao tambm participa da hematopoiese, comea a ser povoado por clulas hematopoiticas na 12 semana do desenvolvimento permanecendo ativo at a 28 semana.

No incio do 5 ms de gestao comea a formao das cavidades sseas para que os ossos possam se transformar no principal stio produtor de clulas, aps o nascimento, e, aps trs semanas do nascimento a medula ssea torna-se o nico orgo produtor de clulas e esta produo se estende ao longo da vida.

A clula tronco passa a ser encontrada no tecido heptico entre a 5 e a 36 semana de gestao, na medula ssea a partir da 10 semana, no bao aps a 11, no timo, quando j est comprometida com a linhagem linfide, a partir da 10 semana e nos linfonodos, tambm j comprometida com a linhagem linfide, a partir da 12 semana

Todas as clulas sanguneas so derivadas da clula tronco tambm chamada de clula totipotente, porque ela d origem as demais e estabelece um sistema hierrquico de maturao. Pela sua grande capacidade de proliferao e diferenciao povoa os orgos hematopoiticos com tal quantidade de clulas que confere ao tecido hematopoitico ser o maior orgo do organismo humano.
A renovao das clulas extraordinria, para um homem com peso de 70 kg estima-se uma produo celular em torno de um trilho de clulas por dia

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

ANATOMIA DA MEDULA SSEA

PRODUO

ANATOMIA DA MEDULA SSEA

O estroma da medula ssea composto de clulas endoteliais, clulas adventcias, clulas sseas, fibroblastos, adipcitos, macrfagos, linfcitos e pela matriz extracelular.

Existe uma interao entre os progenitores hematopoiticos e as clulas e protenas do estroma medular, esta interao chamada de microambiente da medula ssea, o qual fundamental para a diferenciao e proliferao celular.

As clulas endoteliais regulam tanto a hematopoiese pela secreo de citocinas como a passagem de clulas do estroma para os sinusides e representam o principal sistema de controle do que entra e sai dos espaos hematopoiticos.

As clulas adventcias tambm chamadas de clulas reticulares produzem fibras reticulares que se estendem pelo compartimento hematopoitico e formam uma rede nas quais as clulas hematopoiticas esto unidas.

Os macrfagos e linfcitos produzem interleucina-3 (IL-3) e participam dos processos de interao clulaclula com os precursores hematopoiticos.

A matriz extracelular (MEC) composta por proteoglicanos, fibronectina, colgeno, laminina entre outras e tem a finalidade de formar um suporte para adeso e locomoo das clulas, na medida em que se diferenciam elas caminham pela MEC em direo aos sinusides.

No estroma os eritroblastos se associam aos macrfagos, clulas endoteliais e fibroblastos. Os macrfagos alm de retirar os eritroblastos defeituosos potencializam os efeitos da eritropoietina sobre eles e juntamente com as outras clulas (endoteliais e fibroblastos) criam um microambiente ideal para a proliferao e diferenciao da linhagem eritride

Nos sinusides da medula ssea so encontrados, em situaes fisiolgicas, pr-eritroblastos (0,6%), eritroblasto basfilo (1,4%), eritroblasto policromatfilo (21,6%) e eritroblastos ortocromticos (2%), esta porcentagem dada em relao ao nmero total de clulas nucleadas da medula ssea tanto brancas como vermelhas.

Os eritroblastos representam 25% das clulas nucleadas da medula ssea.

Na criana 90% dos ossos do esqueleto so produtores de clulas sanguneas. A partir do 4 ano de vida o crescimento da medula ssea excede a necessidade de clulas sanguneas pelo organismo, deste momento em diante, os ossos produtores de clulas (medula ssea vermelha) passam a ser substitudos por um tecido adiposo (medula ssea amarela). No adulto 50% dos ossos so produtores de clulas e no idoso (aps 60 anos) 30% dos ossos produzem clulas sanguneas.

OSSOS COM MEDULA SSEA VERMELHA ADULTOS

IDOSOS

CRIANAS

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

PRODUO
ERITROPOIESE

O termo eritroblasto foi utilizado por Erlich para

designar todas as formas de clulas vermelhas

nucleadas, patolgicas ou no

O PERTB pode ser descrito como uma clula de tamanho variando entre mdio a grande com um ncleo arredondado que ocupa 80% do citoplasma. A cromatina distribui-se homogeneamente em pequenos grumos, apresentando um padro de cromatina condensada se comparada ao mieloblasto ou linfoblasto, com nuclolos evidentes e o citoplasma apresenta basofilia intensa. A quantidade de hemoglobina presente no PERTB pequena

O PERTB se divide e d origem ao eritroblasto basfilo (ERTBB) uma clula bastante semelhante ao PERTB, a diferena que o ERTBB menor, o nuclolo no mais visto a cromatina mais condensada e aumenta a quantidade de hemoglobina

O PERTB por diviso mittica origina o eritroblasto policromatfilo (ERTBP) que recebe este nome pela caracterstica do citoplasma, se o ncleo for retirado o citoplasma de uma hemcia com policromatofilia. O ncleo do ERTBP pequeno a cromatina bastante condensada e heterognea

O ERTBP se divide e forma o eritroblasto ortocromtico (ERTBO) que apresenta o citoplasma igual ao de um eritrcito com grande quantidade de hemoglobina, o ncleo picntico e ser expulso da clula.

O ERTBO no se divide ele matura para a fase de reticulcito (RT)

O tempo de maturao de pr-eritroblasto a eritrcito

de 5 dias, a medula ssea produz em torno de 3 a 8,5 x 109 eritrcitos por kilo de peso por dia e um eritrcito

ao longo de sua vida percorre o equivalente a 250 km

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

PRODUO
ERITROPOIETINA

O nico fator de crescimento extramedular a eritropoietina (EPO) e o principal responsvel pela eritropoiese. Se a EPO no estiver presente os demais fatores no sustentam a eritropoiese, isto pode ser observados em pacientes renais crnicos, os quais pela insuficincia renal no produzem eritrcitos

A EPO um hormnio polipeptdico, glicoprotena, de cadeia nica com 165 aminocidos que contm duas pontes de dissulfeto intramoleculares nas posies (Cis7-161 e Cis29-33), cujo gene est localizado no cromossomo nmero 7

Cerca de 90% da eritropoietina produzida no rim e 10% no tecido heptico. A EPO secretada pelas clulas tubulares ou clulas endoteliais peritubulares do rim, as quais tem seqncias sensveis a concentrao de oxignio e esto envolvidas com a regulao e expresso do gene. Quando essas clulas entram em hipxia geram um sinal de transduo e a EPO produzida, quando as clulas saem da hipxia ela para de ser produzida, a EPO no armazenada ela secretada por estmulo da hipxia.

Todas as clulas comprometidas com a srie vermelha apresentam receptores para a EPO, com exceo dos reticulcitos e eritrcitos, na ausncia de EPO a clula entra em apoptose25. A EPO tem como funes estimular a proliferao de precursores medulares aumentando o nmero de mitoses, estimular a diferenciao dos precursores encurtando o tempo de maturao, estimular a sntese de hemoglobina e aumenta o nmero de reticulcitos no sangue. Em anemias hemolticas o nvel de EPO est aumentado devido a hipxia tecidual, a hipxia se instala porque a produo no consegue suprir a destruio eritrocitria

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

PRODUO
TOMO DE FERRO

O ferro absorvido no trato gastrointestinal principalmente no duodeno, o pH estomacal importante na absoro do ferro, o pH do suco gstrico estabiliza o ferro da dieta e previne a sua precipitao como hidrxido frrico insolvel, pacientes com acloridria ou gastrectomizados no fazem absoro do ferro e podem desenvolver anemia ferropriva

O ferro pode ser absorvido na forma de heme ou na forma livre como on ferroso (Fe2+) todo ferro da dieta deve estar em uma das duas formas para ser absorvido. A superfcie apical do entercito expressa uma protena transmembrana chamada de protena transportadora de metal divalente (DMT1) que absorve o ferro somente na forma ferrosa. Todo ferro no heme que chega ao entercito na forma frrica (Fe3+) reduzido a Fe2+ por uma enzima ferroredutase citocromo b-like27 para posteriormente ser transportado pela DMT1. O ferro na forma de heme absorvido e no entercito degradado pela hemeoxigenase, o ferro livre segue o mesmo caminho que o ferro no heme absorvido. Uma pequena parcela de ferro na forma de heme passa para o plasma e liga-se a hemopexina

MECANISMO DE ABSORO DO FERRO

APICAL

LUZ DO TUBO INTESTINAL

DMT-1 PROTENA TRANSPORTADORA DE METAL FERROREDUTASE CRIPTAS

ENTERCITO PROTENA REGULADORA DE FERRO (IRP)

FERROXIDASE BASOLATERAL TRANSFERRINA FERRITINA PLASMA

A ferroportina uma protena que se expressa na

poro basolateral do entercito e que o passa para o plasma na forma ferrosa, mas o ferro para se ligar a

transferrina (TRF) deve estar na forma Fe3+, a reduo

feita pela hefaestina

MECANISMO DE ABSORO DO FERRO

APICAL

LUZ DO TUBO INTESTINAL

DMT-1 PROTENA TRANSPORTADORA DE METAL FERROREDUTASE CRIPTAS

ENTERCITO PROTENA REGULADORA DE FERRO (IRP)

FERROXIDASE BASOLATERAL TRANSFERRINA FERRITINA PLASMA

A transferrina uma glicoprotena sintetizada pelo cromossomo 3 tendo como principal stio de produo o fgado. A transferrina transporta o ferro para os eritroblastos, os quais tem receptores para ela, para que ele seja utilizado na sntese de hemoglobina. Em situaes fisiolgicas 1/3 da transferrina est ligada ao tomo de ferro, os 2/3 restantes que no esto ligados com o tomo de ferro chamado de capacidade de transporte (ou de ligao) do ferro, a relao em porcentagem de quanto de ferro est ligado a transferrina (1/3 em situaes fisiolgicas) chamado de ndice de saturao.

O ferro que se liga a ferritina (FIT) intracelular no absorvido e sim perdido quando ocorre a morte do entercito (tempo de meia vida entre 3 a 4 dias), esta perda um mecanismo de regulao da absoro do ferro. O ferro pode se ligar a ferritina plasmtica para ser armazenado, esta ligao se d quando o ferro est na forma Fe2+, aps ser internalizado na molcula da ferritina ele oxidado

A ferritina uma protena esfrica constituda pelas sub-unidades H (cadeia pesada) e L (cadeia leve), sintetizada pelo cromossomo 19 em vrias isoformas e cada isoforma caracterstica de um determinado tecido (cardaco, placenta, renal, heptico e bao). A ferritina produzida quando h oferta de ferro por este motivo a concentrao plasmtica de ferritina correlaciona-se com os estoques de ferro. O ferro no estocado na forma de ferritina e sim como hemossiderina que parece ser formado por uma degradao incompleta da ferritina com concentrados de ferro e outros constituintes e difere da ferritina por ter alta concentrao de ferro

O ferro uma vez no plasma pode se ligar a ferritina (Fe++) e vai para os depsitos de ferro no organismo (medula ssea, fgado e bao) ou se ligar a transferrina (Fe+++) e vai ser transportado aos eritroblastos para ser utilizado na sntese de hemoglobina. Os eritroblastos expressam na membrana citoplasmtica receptores para o complexo TRF-Fe, a TRF se liga ao receptor e o complexo internalizado por endocitose, o endossomo acidificado e o ferro liberado do complexo e pode ser incorporado ao heme, na mitocndria, pela enzima ferroquelatase.

FERRO LIGADO A TRANSFERRINA

ERITROBLASTO

RECEPTOR DA TRANSFERRINA

LIGAO DO FERRO-TRANSFERRINA AO RECEPTOR DA TRANSFERRINA

ENDOSSOMO

INTERNALIZAO DO RECEPTOR LIGADO AO FERRO

FERRO LIVRE

MITOCNDRIA

FERRITINA

HEMOGLOBINA DMT-1 PROTENA TRANSPORTADORA DE METAL

DEPSITO

MEMBRANA CELULAR DO ERITROBLASTO

Aps o ferro ser internalizado ele est virtualmente em um sistema fechado, a perda de ferro pelo organismo muito pequena ele eliminado atravs da excreo fecal (0,6 mg/24 h), urinria (0,1 mg/24 h), atravs do suor, cabelo e unhas. Durante o ciclo menstrual a mulher pode perder cerca 0,4 mg por dia, a perda de ferro na menstruao fisiolgica e reposta por aumento da absoro. Tem sido descrito em mulheres anemia ferropriva por fluxo menstrual aumentado e muitas vezes ela no se d conta que tem fluxo aumentado porque o volume eliminado em cada perodo o mesmo desde o incio da menstruao.

A principal causa de anemia ferropriva o sangramento gastrointestinal, caracterizado como sangramento crnico, em que a perda sangunea contnua mas de pequeno volume. Os eritrcitos circulam em mdia 120 dias e posteriormente so retirados da circulao pelos macrfagos do sistema mononuclear fagocitrio (SMF), a hemoglobina degradada e o ferro fica disponvel para se ligar a TRF ou FIT, ao ligar-se na TRF vai compor a hemoglobina, mioglobina e enzimas que contm ferro como catalases e peroxidases. Quando ligado a FIT vai ser encaminhado para os depsitos de ferro. Esta circulao do ferro dentro do organismo chamada de ciclo interno do ferro

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

NUTRIENTES VITAMINA B12 E FOLATO

PRODUO

A vitamina B12, cianocobalamina, produzida por microorganismos e encontrada em alimentos como carne, fgado, peixes, ostras, mariscos, rim, ovos, queijos e leite, no encontrada em vegetais e frutas e armazenada no fgado

A absoro da vitamina B12 se d no intestino delgado, especificamente no leo que a poro distal do intestino delgado a partir do estmago. Em contato com as pepsinas do suco gstrico a vitamina B12 liberada dos alimentos e liga-se a uma transcobalamina secretada pelas glndulas salivares, esta ligao desfeita no duodeno quando a secreo pancretica neutraliza o pH cido e a vitamina B12 fica livre para ligar-se ao fator intrnsico (FI). O FI produzido pelas clulas parietais do estmago e liga-se a B12 no leo, as clulas ileais tem receptores para o FI, quando este se liga a clula ileal a B12 absorvida e transportada ao tecido heptico pelas transcobalaminas para ser armazenada.

ABSORO DA VITAMINA B12

R-LIGANTE = TRANSCOBALAMINA

COMPLEXO R-LIGANTE VITAMINA B12

FATOR INTRNSICO

PROTEASES

COMPLEXO FI - B12

PLASMA ABSORO

A dose diria necessria de B12 de 1 a 2 microgramas e a reserva no organismo de cerca de 300 microgramas (mantm-se estvel pela absoro diria de B12) quantidade suficiente para manter nveis plasmticos normais durante vrios anos (em torno de 3 a 6 anos) mesmo frente a dieta insuficiente. A vitamina B12 participa da via metablica de sntese da timina (base nitrogenada que compe o DNA) e da preservao da bainha de mielina, por isto a deficincia da vitamina B12 pode levar a alteraes neurolgicas por desmielinizao difusa da coluna medular posterior e lateral

O cido flico ou folato encontrado em vegetais de folhas verdes, couve-flor, brcolis, couve de bruxelas, cogumelos, frutas, cereais, lacticnios, fgado e rim.

 absorvido no jejuno por absoro direta, a necessidade diria de folato de 200 a 400 microgramas e a reserva de folato est em torno de 10 a 20 microgramas. Quantidades maiores de folato so necessrias durante a gestao, lactao e em patologias com intensa proliferao celular. Frente a dieta insuficiente a reserva de folato esgota-se entre 2 a 4 meses.

As clulas no organismo humano tem vrias funes, devem proliferar, diferenciar e exercer funes especficas nos tecidos em que residem. A proliferao tem a finalidade de repor clulas perdidas em um determinado tecido ou manter o conjunto de clulas em nmero constante. A diferenciao tem o sentido de transformar a clula tronco em clulas especializadas. As duas primeiras funes esto relacionadas com a diviso celular, especificamente a mitose. Para que ocorra a mitose essencial que a clula duplique o seu contedo cromossmico e para fazer a duplicao ela necessita de bases nitrogenadas, entre elas a timina. A sntese da timina depende da vitamina B12 e do cido flico, sem B12 e folato no h diviso celular e a conseqncia hematolgica a anemia megaloblstica.

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

A MOLCULA DA HEMOGLOBINA

PRODUO

A hemoglobina uma molcula protica de estrutura quaternria que transporta o oxignio para os tecidos e est contida no interior dos eritrcitos. A molcula consiste de quatro cadeias de globina (duas do tipo alfa e duas do tipo beta) e ligadas a globina 4 grupamentos heme, no grupamento heme (anel pirrlico) que se liga o tomo de ferro, ao qual se liga o oxignio. A palavra hemoglobina deriva da associao do grupamento heme com a globina. A globina formada pelo processo de sntese de protenas, o anel pirrlico (protoporfirina) pela via metablica de via de formao do heme e o tomo de ferro absorvido via intestinal a partir da dieta.

Os genes que codificam as cadeias do tipo alfa esto localizados no brao curto do cromossomo 16 e as cadeias polipeptdicas sintetizadas contm 141 aminiocidos. Fazendo uma leitura do cromossomo na direo 5 para 3 o primeiro gene encontrado o zeta () seguido de um pseudo zeta () e pseudo alfa-1(-1), estes genes (pseudo zeta e pseudo alfa-1) no codificam uma protena estrutural provvel que sejam genes reguladores. Na continuidade da leitura encontram-se os genes alfa-2 e alfa-1. Os genes produtores de protena estrutural para as cadeias do tipo alfa so: zeta, alfa-2 e alfa1.

Os genes que codificam as cadeias do tipo beta esto localizados no brao curto do cromossomo 11, a cadeia beta possui 146 aminocidos, a cadeia delta difere da beta em 10 aminocidos e a delta em 39. Percorrendo-se o cromossomo 11 no sentido 5 para 3 o primeiro gene encontrado o gene epsilon () seguido dos genes gama (), os quais codificam duas formas proticas finais uma rica em glicina (G) e outra rica em alanina (A). A proporo entre as cadeias G e A na vida fetal de 70 e 30% respectivamente e aps o nascimento de 40 e 60% respectivamente36. Posteriormente tem-se o gene pseudo beta () e os genes delta () e beta (). Para a produo normal de cadeias do tipo beta necessita-se de 2 genes epsilon, 2 genes gama, 2 genes delta e 2 genes beta

GENES QUE FORMAM A CADEIA ALFA

GENES QUE FORMAM A CADEIA BETA

As cadeias de globina se associam sempre aos pares, duas cadeias do tipo alfa e duas cadeias do tipo beta fazendo uma relao de produo de 1:1 para que no sobre ou falte qualquer tipo de cadeia. Na fase de embrio formam-se as hemoglobinas embrionrias: Gower I, Portland e Gower II. A Gower I formada por duas cadeias do tipo alfa (zeta 2) e duas cadeias do tipo beta (epsilon 2), a Gower II formada por duas cadeias do tipo alfa (alfa 2) e duas cadeias do tipo beta (epsilon 2), a hemoglobina Portland formada por duas cadeias do tipo alfa (zeta 2) e duas cadeias do tipo beta (gama 2)
GOWER I ZETA2 EPSILON2 2 2 GOWER II ALFA2 EPSILON2 2 2 PORTLAND ZETA2 GAMA2 2 2

Na fase fetal forma-se um nico tipo de hemoglobina, a hemoglobina fetal, a qual formada por duas cadeias do tipo alfa (alfa 2) e duas cadeias do tipo beta (gama 2). Ao nascimento a hemoglobina fetal perfaz cerca de 70% da hemoglobina total. A concentrao da hemoglobina fetal diminui aproximadamente em 3% a cada semana aps o nascimento e aos 6 meses de vida a concentrao menor que 2 a 3%

HEMOGLOBINA FETAL ALFA2 GAMA2 2 2

Na fase adulta que em termos de hemoglobina configura o psnascimento tem-se trs tipos de hemoglobina: A1, A2 e fetal. A hemoglobina A1 constituda de duas cadeias do tipo alfa (alfa 2) e duas cadeias do tipo beta (beta 2) e a hemoglobina A2 constituda de duas cadeias do tipo alfa (alfa 2) e duas cadeias do tipo beta (delta 2)

HB A1 ALFA2 BETA2 2 2 HB A2 ALFA2 DELTA2 2 2 HB F ALFA2 GAMA2 2 2

A partir da fase fetal a cadeia alfa se faz presente em todos os tipos de hemoglobina, a cadeia beta s se far presente na fase adulta quando forma a hemoglobina A1. Quando ocorre ausncia ou dficit na produo de cadeia alfa as manifestaes clnicas esto presentes desde a fase embrionria. Quando h ausncia ou deficincia de produo de cadeia beta as manifestaes clnicas so observadas aps o nascimento. Na fase adulta a hemoglobina predominante a hemoglobina A1 (97%) e as hemoglobinas F e A2 correspondem a 3% da hemoglobina total.

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

VIA METABOLICA DA SNTESE DO HEME

PRODUO

A palavra hemoglobina deriva da associao do grupo heme com a globina e ela tem a funo a funo de fazer o transporte molecular do oxignio dos pulmes aos tecidos, transportar o CO2 dos tecidos para os pulmes e fazer o tamponamento sanguneo com a finalidade de prevenir mudanas no pH (efeito Bohr). Sua estrutura molecular consiste de quatro cadeias de globina e quatro grupos heme (protoporfirina) ao qual est ligado o tomo de ferro, na forma ferrosa, e no tomo de ferro que se liga o oxignio

MOLCULA DA HEMOGLOBINA

O grupo heme alm de compor a estrutura da hemoglobina compe a estrutura das hemeprotenas: mioglobina, citocromos, catalases e peroxidases. A biossntese do heme inicia na mitocndria a partir da condensao da succinil coenzima A (CoA) com a glicina, formando o cido 5-delta aminolevulnico. A CoA derivada do ciclo do cido ctrico e a enzima responsvel pela catalizao da condensao da CoA com a glicina a delta aminolevulinato sintetase (ALA-sintetase). Esta reao enzimtica requer um cofator que o piridoxal-5-fosfato. Existem duas formas de ALAsintetase uma especfica para os eritrcitos e outra que est presente nos demais tecidos, a enzima eritrocitria sintetizada no cromossomo X e a outra no cromossomo 3

A condensao de duas molculas de cido 5-delta aminolevulnico por ao da enzima delta aminolevulinato dehidratase (ALA-dehidratase), a qual retira duas molculas de gua, d origem ao porfobilinognio, uma molcula monopirrlica precursora do heme, clorofila e da cobalamina, a ALA-dehidratase inibida por metais pesados como o chumbo e o porfobilinognio uma molcula quimicamente instvel e reativa, em questo de horas, quando exposta ao ar e a luz, desenvolve uma colorao vermelho alarranjada. A formao do porfobilinognio ocorre no citoplasma e no mais na mitocndria, a via metablica de formao do heme continua no citoplasma at a formao do coproporfirinognio III

A enzima porfobilinognio deaminase catalisa a condensao de 4 molculas de porfobilinognio e forma um composto tetrapirrlico linear, pela retirada de 4 grupamentos amino, o hidroximetilbilano (HMB). A uroporfirinognio III sintetase pela retirada de gua forma o uroporfirinognio III, precursor de todos os anis tetrapirrlicos funcionais

A enzima uroporfirinognio III descarboxilase retira 4 grupos carboxlicos do uroporfirinognio III e forma o coproporfirinognio III. A coproporfirinognio III oxidase, agora no interior da mitocndria, remove grupos carboxilas e hidrognios e forma grupos vinil, originando a molcula do protoporfirinognio III. A protoprofirinognio III oxidase catalisa a remoo de 6 tomos de hidrognio e forma a protoporfirina IX e a ferro quelatase retira dois tomos de hidrognio e incorpora o ferro, na forma ferrosa, na protoporfirina IX formando a forma final do grupamento heme.

A via metablica de sntese do heme controlada pela enzima ALA-sintetase, nveis de heme elevados inibem a sntese da enzima e baixos nveis induzem a formao. A ALA-sintetase aps ser sintetizada nos polirribossomos est presente no citoplasma, transportada para a membrana interna da mitocdria e modificada, a forma citoplasmtica provavelmente um precursor da forma mitocondrial (forma ativa da enzima na via metablica do heme). O heme tambm regula a sntese das cadeias de globina. Em torno de 85% do heme sintetizado na medula ssea e o restante no fgado

BIOSSNTESE DO HEME

BIOSSNTESE DO HEME

GRUPAMENTO HEME

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

CIRCULAO
VIA GLICOLTICA

VIA EMBDEN MEYERHOF

GLICLISE ANAERBICA

GLICLISE AERBICA

PIRUVATO E LACTATO

SHUNT DAS PENTOSES

LUEBERING RAPOPORT

A degradao da glicose feita pela via de Embden Meyerhof ou gliclise anaerbica, a glicose degradada a piruvato e lactato, esta via degrada 90% da glicose que entra no eritrcito produzindo ATP, NADH e 2,3-difosfoglicerato (2,3DPG). O lactato e o piruvato so retirados do eritrcito e metabolizados pelo organismo.O ATP importante na manuteno da bomba de ctions, o NADH mantm a hemoglobina na forma oxidada e o 2,3DPG regula a avidez da hemoglobina pelo oxignio. O 2,3DPG formado na via de Embeden Meyerhof mas no desvio de Luebering-Rapoport.

A via da pentose monofosfato ou shunt das pentoses, uma via derivada da via de Embden Meyerhof a partir da glicose-6-fosfato, uma gliclise aerbica que degrada entre 5 a 10% da glicose e produz como produto principal o NADPH, cofator na reduo da glutationa oxidada. O NADPH o principal agente protetor contra ataques oxidativos que a clula sofre e o principal estmulo para a utilizao da glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PD).

A glicose-6-fosfato produzida na via glicoltica de Embden Meyerhof entra para o shunt das pentoses onde convertida a 6-fosfogliconato pela G-6-PD nesta converso gerado NADPH a partir do NADP, o NADPH reduzido a NADP pela enzima glutationa redutase com isto a glutationa oxidada (GSSG) reduzida a GSH (glutationa reduzida), a enzima glutationa peroxidase oxida o GSH fazendo com que o perxido de hidrognio (H2O2) seja transformado em gua. A funo da GSH e por conseguinte da G-6PD transformar o H2O2 formado espontaneamente ou por ao de medicamentos em gua e com isto evitar o estresse oxidativo

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

MEMBRANA ERITROCITRIA

CIRCULAO

MEMBRANA ERITROCITRIA PROTENAS

PROTENAS INTEGRAIS

PROTENAS PERIFRICAS

ESTO NA MEMBRANA

ESTO NO CITOESQUELETO

As protenas da membrana eritrocitria podem ser divididas em protenas integrais (esto na membrana eritrocitria) e perifricas7(compem o citoesqueleto), classificadas como integrais esto as protenas de banda 3 e as glicoforinas. A espectrina, anquirina, protena 4.1., protena 4.2, p55, actina e aducina so classificadas como perifricas

A protena de banda 3 uma glicoprotena transmembrana que tem a finalidade de regular o contedo inico, a deformabilidade celular e provavelmente a senescncia celular. Ainda apresenta stios de ligao para outras protenas da membrana, entre elas a anquirina, protena 4.1 e 4.2 e est associada com glicoprotenas do sistema Rh. O seu domnio extracelular so antgenos de vrios grupos sanguneos, entre eles os grupos Diego e Wright

As glicoforinas so glicoprotenas ricas em cido silico (constituem mais de 60% da carga negativa do eritrcito) e esto presentes em quatro formas distintas A, B, C e D, modulam as interaes entre os eritrcitos e do eritrcito com a clula endotelial. A glicoforina C interage com a protena 4.1 e com a p55 tendo um papel importante na deformabilidade e forma celular

A espectrina a protena mais abundante do citoesqueleto e a estrutura bsica da molcula formada pelos heterodmeros e os quais se associam para formar tetrmeros. Os tetrmeros se associam e formam uma rede multimolecular capaz de manter a forma e a capacidade de deformao da clula. A espectrina se liga a actina e a protena 4.1 e tem as funes de regular a mobilidade das protenas integrais, manter a forma celular e dar um suporte estrutural para a membrana lipoproteica

A anquirina tem a funo de manter a estabilidade da membrana. A protena 4.1 uma fosfoprotena que a finalidade de fazer a ligao da espectrina-actina ao domnio intracelular da protena de banda 3 e ao domnio intracelular da glicoforina C/p55. A protena 4.2 pertence a famlia das protenas transglutaminases e sua principal funo estabilizar a associao espectrina-actina-anquirina com a protena de banda 3. A p55 uma fosfoprotena que se une a protena 4.1

Estas protenas se associam em dois tipos de interaes: as verticais e as horizontais.

As VERTICAIS ocorrem entre a espectrina, protena 4.2, as glicoforinas e anquirina, so interaes protena-protena e protena-lipdeo e so responsveis pela estabilizao da membrana de lipdeos, evitando que haja a perda dos mesmos. As interaes HORIZONTAIS ocorrem entre a espectrina, protena 4.1 e actina

O eritrcito uma clula que passa por capilares muito menores que o seu tamanho, tanto no sangue como em orgos como o bao, para que ele possa circular em capilares, arterolas e vnulas ele tem que ter a capacidade de se deformar (maleabilidade) o que concorre para esta propriedade fundamental do eritrcito a sua forma bicncava, a viscosidade citoplasmtica determinada pelo contedo de hemoglobina e a elasticidade e viscosidade da membrana citoplasmtica determinada pelas protenas e fosfolipdeos da membrana e pelas protenas do citoesqueleto

SRIE VERMELHA ASPECTO FISIOLGICO

DESTRUIO ERITROCITRIA

A vida mdia do eritrcito est em torno de 100 a 140, durante este perodo de vida calcula-se que o eritrcito percorra uma distncia de 480 Km. Como o eritrcito no pode fazer sntese de protenas, ele perde o ncleo durante a maturao, um dos motivos para ter esta vida mdia o consumo das enzimas eritrocitrias que fazem a degradao da glicose na via de Embden Meyerhof.

Os eritrcitos senescentes tambm apresentam mudanas no balano de clcio, aumentam a concentrao de clcio intracelular, diminu o potssio intracelular, a clula desidrata, ocorre aumento da densidade e viscosidade celular e h diminuio da capacidade de deformabilidade. Ocorre tambm uma diminuio na carga negativa (reduo da quantidade de cido silico na membrana) do eritrcito (potencial zeta) o que facilita a interao do eritrcito com os macrfagos com conseqente aumento da fagocitose.

A diminuio da concentrao de G-6-PD faz com que aumente a quantidade de radicais livres com conseqente dano a membrana eritrocitria, ao citoesqueleto e a hemoglobina.

O eritrcito senescente pode ser retirado da corrente sangunea de modo intravascular ou extravascular. A primeira forma de destruio eritrocitria ocorre no interior dos vasos sanguneos e responde por 10% da hemlise fisiolgica, na segunda forma a hemlise ocorre no bao e responde por 90% da hemlise fisiolgica

A hemlise extravascular ocorre no sistema mononuclear fagocitrio, o qual composto pelo bao, fgado, linfonodos e medula ssea. A destruio se d porque os macrfagos localizados nestes orgos fagocitam o eritrcito senescente retirado-o da circulao. Aps a fagocitose (agora o eritrcito est no interior do macrfago esplnico) quando a membrana celular se rompe a hemoglobina liberada e degradada em globina e heme.

A globina vai ser decomposta em aminocidos, os quais vo compor o pool de aminocidos do organismo. O ferro retirado do heme une-se a transferrina e transportado para a medula ssea para ser reaproveitado na sntese de hemoglobina. O anel pirrlico, atravs da ao da heme oxigenase, produz o monxido de carbono, eliminado atravs dos pulmes, e o composto biliverdina, o qual reduzido a bilirrubina e passa ao plasma como bilirrubina indireta, no conjugada.

A bilirrubina indireta une-se a albumina e o complexo (bilirrubina indireta-albumina) internalizado no no hepatcito, dissocia-se da albumina e transformada em bilirrubina direta (diglicuronato de bilirrubina ) por conjugao com o cido glicurnico em presena da enzima glicuronil transferase. A bilirrubina direta excretada na bile e eliminada como urobilinognio fecal. Parte do urobilinognio reabsorvido pela circulao enteroheptica e eliminado via renal como urobilinognio urinrio. O achado laboratorial caracterstico de hemlise extravascular o aumento da bilirrubina indireta

A hemlise intravascular caracteriza-se pela liberao da hemoglobina no plasma (hemoglobinemia) e envolve a ao dos componentes do complemento. A hemoglobina livre pode ser oxidada a metahemoglobina a qual vai ser degradada em globina e heme. A globina compor o pool de aminocidos. O heme une-se a hemopexina e transportado ao hepatcito. No tecido heptico o ferro une-se a transferrina e ser transportado para a medula ssea e reaproveitado na sntese de hemoglobina. O anel pirrlico sofrer conjugao formando o diglicuronato de bilirrubina e eliminado como urobilinognio fecal.

A hemoglobina que no foi oxidada ir combina-se com a haptoglobina e transportada ao tecido heptico para ser eliminada. Quando a capacidade de ligao da haptoglobina com a hemoglobina excedida, a hemoglobina livre presente no plasma filtrada pelo rim e ser evidenciada na urina como hemoglobinria. A hemoglobina na urina pode ser oxidada a metahemoglobina e detecta-se metahemoglobinria. Os achados laboratoriais caractersticos de hemlise intravascular so hemoglobinria, metahemoglobinria e hemossidenria e no plasma aumento da hemoglobina plasmtica