LIPASES

Profa.Mrcia Leite

LIPDIOS
Def.: biomolcula insolvel na gua que possui caractersticas oleosas ou gordurosas (Lehninger). Def.: consiste em um amplo grupo de compostos, em geral, solveis em solventes orgnicos e no solveis em gua (Fennema).
Lipdios so considerados como fonte de energia de reserva (1 g = 9,2 Kcal), constituem inmeros hormnios animais, vitaminas (A,D, E e K). Fazem parte da membrana celular.

Classificao dos Lipdios

Simples formado somente por cidos graxos e um lcool

acilglicerol : c. graxos + 1 lcool de cadeia

curta (glicerol)

ceras: c. graxos + 1 lcool de cadeia longa Lipdios Compostos Lipdio simples + outra molcula (fforo, carboidrato, protena, etc fosfolipdios : lipdio + fsforo glicolipdios : lipdio + glicose

Outros no possuem cido graxo e nem lcool esterides derivado do ciclopentano : estrutura multipla do isopreno terpenides

Classificao Completa dos Lipdios

acilglicerol Simples monoacilglicerol polar diacilglicerol polar

triacilglicerol apolar (leos e gorduras)

ceras apolar

Lipdios
Compostos

fosfolipdios polar
glicolipdios polar/apolar

esterides polar
Outros terpenides polar

Acilglicerol - definio
- lcool de cadeia curta: GLICEROL - cidos graxos: so CIDOS CARBOXLICOS
que contm de 4 a 36 tomos de R C OH Carbono na cadeia principal, no se ramifica (cadeia linear), podem ser saturados (s ligaes simples) ou insaturados (ligao dupla) e que contm nmero pares de Carbono na molcula (maior estabilidade).
O

Acilglicerol - cido graxo saturado

represenN de C Qumico tao () Comum 4:0 4 --- cido butanico --------- butrico ------6:0 6 --- cido hexanico ----- --- caprico ------

Nome da molcula

8 --- cido octanico --------- caprlico -----10 --- cido decanico ----- --- cprico --------

8:0 10:0

12 --- cido dodecanico -- --- lurico --------- 12:0 14 --- cido tetradecanico --- mirstico ------ 14:0
16 --- cido hexadecanico --- palmtico ------ 16:0 18 --- cido octadecanico - --- esterico ------- 18:0 -- cido eicosanico --- --- araquenico --- 20:0 20

Acilglicerol - molcula

Acilglicerol - ligaes de esterificao

Acilglicerol - cido graxo insaturado

N de C 16 18

saturado
- palmtico - esterico ---

represenLocal da insaturado tao () insaturao --16:0 ---

- palmitolico
--- olico

16:1
18:0 18:1

C-9
--C-9

----20

- linolico
- linolnico ---

18:2
20:0

C-9; C-12
--C-14

18:3 C-9;C-12;C-15

- aracnico
---

- aracdnico

20:4 C-5; C-8; C-11;

Acilglicerol

OBS1: cidos graxos de 4 a 10 carbonos so muito volteis e apresentam sabor ruim OBS2: cidos graxos com 14 a 20 carbonos esto em maior quantidade na natureza.

Lipdios saturados
e

lipdios insaturados

TERPENIDES
Possuem na sua estrutura multiplas unidades de isopreno (molcula linear com 5 carbonos). Tambm no possuem cidos graxos e glicerol. Seus representantes so: vitaminas A, E e K, carotenides, fitol.

As lipases
Lipases, triacilglicerol ster hidrolases(EC 3.1.1.3) so esterases que apresentam maior atividade atividade sobre substratos insolveis em gua. Enzimas largamente distribuidas na natureza. Catalisam a hidrlise de leos e gorduras, liberando cidos graxos livres, diacilgliceris, monoacilglicerol e glicerol.

LIPASES
Lipases so enzimas que atuam de diferentes maneiras no substrato lipdio. Lipases atuam na interface leo/gua dos sistemas bifsicos

Lipases pertencem ao grupo das serina hidrolases (E.C.3.1.1.3) Obteno de lipases: tecidos e excrees animais e vegetais, e por microrganismos

As lipases
Papel fundamental no metabolismo de lipdios dos seres vivos: enzimas digestivas, na deposio e mobilizao dos tecidos de reserva energtica no metabolismo intracelular, atuando sobre membranas celulares.

As lipases
Pesquisas sobre lipases: Forma de ao incomum: SOLVEIS EM GUA, apresenta sitio ativo hidrofbico e catalisam reaes com substratos lipoflicos. Regulam o metabolismo celular de lipdeos. Catalisam reao de sntese em baixa atividade de gua.

Caractersticas gerais e modo de ao

Pertencem ao grupo das serinahidrolases(EC 3.1.1.3) Substrato: triglicerdeos, liberando mono e diglicerdeos, glicerol e idos graxos. A maioria das lipases apresenta estrutura -pregueada, separadas por trechos de hlices. A seqncia de peptdio se mantm Gly-xSer-x-Gly.

Caractersticas gerais e modo de ao

A seqncia de peptdio se mantm Gly-xSer-x-Gly.

Caractersticas gerais e modo de ao

Ainda pode apresentar resduos de histidina, de c.asprtico e / ou cido glutmico.

Caractersticas gerais e modo de ao

O sitio ativo da lipase fica localizado dentro de uma cavidade hidrofbica. Lipases so classificadas de acordo com a especificidade em: regiosseletividade, seletividade de substrato e enentiosseletividade.

Caractersticas gerais e modo de ao

Lipases so classificadas de acordo com a especificidade em: Regiosseletividade Reconhece a mesma ligao qumica em diferentes regies do substrato. Lipases no-especficas: hidrolisam ligaes ster nas posies 1(3) e 2(TG) Lipases 1(3)-especficas: hidrolisam apenas steres nas posies 1(3).

Caractersticas gerais e modo de ao

Caractersticas gerais e modo de ao

Regiosseletividade

Ao hidroltica das lipases:

ag1 ag2 ag3 ag1 ag2 ag3 ag1 ag2 ag3
Lipase 1

livre

+ +

sn-1
Lipase 1

sn-3

ag2 ag3 ag1 ag2

livre

+ +

ag-1 ag-3

Lipase 2

ag1
livre

sn-2

ag-2

ag3

Caractersticas gerais e modo de ao

Lipases so classificadas de acordo com a especificidade em: seletividade de substrato. Reconhece um tipo de cido graxo e as hidrolisa. Em relao ao tamanho da cadeia carbnica: curta, mdia(10-14C) ou longa. Em relao ao grau de insaturao dos cido graxos: saturado, mono, di ou poli.

Caractersticas gerais e modo de ao

Lipases so classificadas de acordo com a especificidade em: enantiosseletividade.

Reage com um determinado ismero do substrato.

Caractersticas gerais e modo de ao

enantiosseletividade

ISMEROS CIS e TRANS cidos graxos cis: Radicais adjacentes nas duplas ligaes ficam no mesmo lado.
R1 R2

C=C

cidos graxos trans: Radicais adjacentes nas duplas ligaes ficam em lados opostas.
R1

C=C
R2

cidos Graxos trans e Sade

- Ainda muito questionvel: so absorvidos? h fragilidade nos eritrcitos? inchao nas mitocndrias? alteraes nas membranas celulares? maior incidncia em doenas cardiovasculares? - pr: ingerir mais que 10 g/pessoa/dia inibir o carcionognese? cido linolico conjugado (CLA): inibidor

carcinognese de pele, estmago e mamas.

Caractersticas gerais e modo de ao

Lipases + fosfatases nos gros

Lipases so ativadas na interface gua/leo. Lipases apresentam mltiplas formas e atuam diferentemente conforme o substrato. Triturao/moagem/macerao do tecido contribui para maior atuao das lipases (oxidao) e das fosfatases nos lipdios e fosfolipdios, respectivamente A lipase est mais ativa na camada mais externa do gro.

Maior teor de umidade no gro, maior atividade das lipases.

Caractersticas gerais e modo de ao

Ao das lipases:
1- hidrlise R1COOR2 + H2O 2- esterificao R1COOH + R2OH 3- transesterificao R1COOR2 + R3OH R1COOR2 + R3COOH R1COOR2 + R3COOR4 R1COOR3 + R2OH R1COOR3 + R2COOH R1COOR3 + R2COOR4 R1COOR2 + H2O R1COOH + R2OH

cidos graxos essenciais

Devem possuir duas duplas ligaes, sendo a primeira deve estar no carbono 6 (-6) ou antes (-3)

cidos graxos essenciais produzem efeitos especiais no organismo vivo

cido araquidnico o verdadeiro cido graxo essencial para o organismo humano

cidos graxos essenciais

EPA (cido eicosapentaenico, 20;5) e DHA (cido docosahexaenico, 22:6)

cido linolnico (18:3) o bioprecursor da famlia -3

-3 (EPA e DOCA): ao inibitria (?) da carcinognese de mama, clon, ovrio, pulmo e outros.

Fontes e principais caractersticas

Podem ser encontradas em clulas e secrees de animais, vegetais e microrganismos. Lipases microbianas permitem produo em maior escala, pode ser inibida por acares simples ou glicerol e estimulada por meios que contm cidos graxos livres, leos e gorduras ou polissacardeos. Lipases so importantes na aquisio de energia pelo microrganismo.

Fontes e principais caractersticas

Lipases de origem animal ou microbiana tem aplicao industrial. Lipases microbianas: Origem bacteriana: gnero Pseudomonas e Staphylococcus ( usado em alimentos). Origem fngica: levedura Candida antarctica, lipase inespecfica, estabilidade trmica e boa enantiosseletividade.

Fontes e principais caractersticas

Origem fngica: Lipase produzida por Geotrichum candidum, lipase cis-9-c.graxo, especfica para c.olico. Fungos do gnero Rhizopus, Rhizomucor e Aspergillus so produtores de lipases 1(3)especficas com at 12 carbonos.

Do ponto de vista econmico: lipases microbianas

Vantagens: - Facilidade na extrao/separao; - Produzidas em grandes quantidades; - Melhor controle durante a produo; - Menor tempo para produzir; - Menor espao fsico exigido.

Mucor miehei: fungo que produz muitas lipases comerciais com diferentes atuaes.

Fontes e principais caractersticas

Nos animais as lipases esto relacionadas a digesto de lipdios ingeridos na dieta e a mobilizao dos tecidos adiposos(de reserva). Em vegetais as lipases so mais abundantes em sementes oleaginosas, essenciais para o processo de germinao.

Importncia em alimentos: rancidez hidroltica

Lipases provocam rancidez hidroltica: hidrlise de TG presentes no alimento e liberao de c.graxos volteis de odor desagradvel. Comum em laticnios, por conterem c.graxos de baixo peso molecular. E em vegetais como gros, farinhas e farelos. A inativao trmica evita a rancidez hidroltica.

Importncia em alimentos: rancidez hidroltica

Resultados finais da hidrlise so: Sabor desagradvel acidez Susceptibiliodade dos cido graxos as reaes de oxidao Alterao das propriedades funcionais

Utilizao das Lipases

- catalisam a quebra de ligaes steres de acil glicerois - Atuam em ampla faixa de pH - No requer cofator - Efetua tanto reao hidroltica como de catlise Aplicao: produo de frmacos, cosmticos, detergentes, alimentos, perfumaria, diagnsticos mdicos, aromas, fragrncias, modificaes de gorduras, tratamentos em couros. Ajuda na extrao de leos, limpeza de tripas em abatedouros bovinos, degomagem de leos

steres de cidos graxos so utilizados em uma extensa classe:

ster
Monoacilgliceris, Fosfolipdios, Alquil steres e Edulcorantes steres steres alcois normais e de terpeno steres cidos e alcois graxos poliesteres steres opticamente ativos

Aplicao
Emulsificantes

Indstria Alimentcia,
Farmacutica

e Cosmticas
Aromatizantes Alimentcias e Cosmticas Lubrificantes Pesticidas e frmacos Indstrias em geral Farmacutica e Agrcola

Hidrogenao em Lipdios
Processo de hidrogenao de leos utilizado para produo de margarinas, onde pelo grau de hidrogenao controla-se a textura e estabilidade (oxidao).

Menor quantidade de insaturaes

textura mais slida

menor oxidaes

A hidrogenao induz a produo de trans ismeros

Ponto de Fuso de alguns cidos Graxos

N C 12 cidos graxos 12:0 Ponto fuso ( C) 44,2

16
18 18 18 18 18 18 18

16:0
18:0 9c-18:1 9t-18:1 9c, 12c-18:2 9t, 12t-18:2 9c, 12c, 15c-18:3 9t, 12t, 15t-18:3

62,7
69,6 13,2 44,0 -5,0 28,5 -11,0 29,5

Grau de saturao ou insaturao funo do tipo da semente que originou o leo

> Grau de saturao: leo de babau (ricos em lurico e miristico) e manteiga de cacau (esterico/palmitico) apresentam em estado slido a 20 graus Celsius > Grau de insaturaes: leo de soja, algodo, amendoim (linoleico/oleico) apresentam em estado lquido a 20 graus Celsius

A tica est na essncia de um indivduo, ao indivduo que age sem respeito aos seus pares a vida lhe devolver com juros e correo.

Bom Estudo!