Transfuziile sangvine i grupele sangvine

1901

Karl Landsteiner Descoper grupele sangvine A, B, O, AB

Descoperirea grupelor sangvine

Karl Landsteiner a descoperit c reacia de cuagulare a sngelui este determinat de o reacie imunologic prin care anticorpii primitorului aglutineaz eritrocitele donatorului. Pentru descoperirea grupelor sangvine, Karl Landsteiner primete Premiul Nobel pentru Medicin n 1930.

Antigene eritrocitare
Exist peste 200 antigene eritrocitare;

Cele mai cunoscute sunt cele din sistemele de grup sangvin ABO i Rh;
Fiecare individ are animite tipuri de antigene n anumite combinaii;

Sistemul de grup sangvin ABO

Tipul de antigene eritricitare determin tipul de grup sangvin: A, B, AB sau O (nici un antigen).

Grupa sangvin ABO

Plasma

Plasma Plasma

Plasma

Determinarea grupei sangvine A

Lam de sticl cu 2 picturi de ser anti-A i i respectiv anti-B; se adaug 2 picturi de snge de la subiectul analizat; n partea stng a lamei serul cu anticorpi anti-A a aglutinat eritrocitele ce conin deci antigenul A; Absena reaciei de aglutinare n partea dreapt a lamei.

Determinarea grupei sangvine

http://www.bh.rmit.edu.au/mls/subjects/abo/resources/genetics1.htm

Transfuzii sangvine

Persoanele cu grupa sangvin O sunt considerai donori universali" iar cei de grup AB primitori universali."

Genetica sistemului ABO

Locusul genic este pe braul lung al cromozomului 9;

Exist 3 alele ce pot genera 6 genotipuri; Alelele pentru antigenele A i B sunt codominante i se exprim dominant fa de alela pt grupa sangvin O;

Sistemul ABO
Genotipuri IA IA IA IB IA i IB IB IB i ii Fenotipuri A AB A B B O

2007 Paul Billiet ODWS

Sistemul de grup sangvin Rh

Rhesus
Maimua Rhesus

3 antigene compun sistemul Rh Cel mai important este antigenul D Persoanele Rh (+) prezint pe hematii antigenul D iar cele Rh(-)nu au acest antigen pe suprafaa hematiei; 85% din populaie este Rh(+); 15% este Rh (-)

Sistemul Rh
Persoanele Rh negative nu au n ser anticorpi anti-D; Antigenul D este codificat de alela dominant D prezent n genotip n stare homozigot (DD) sau heterozigot (Dd); Absena antigenului D la indivizii Rh (-) semnific prezena n genotip doar a alelei recesive d n stare homozigot (dd).

Grupa sangvin Rh pozitiv

Genotip

Tipuri de alele

DD
Dd Rh negativ dd

D
D or d d

Sistemul CDE (Rhesus)

Fiecare antigen este codificat de o gen Include c, C, D, e, E Dar indivizii Rh negativi sunt aceia care nu au pe eritrocite antigenul D 87% din caucazieni sunt Rh pozitivi

Boala hemolitic a n.n. (HDN)

Apare la gravidele Rh (-) cu fei Rh (+) dac a avut loc o expunere la antigenul Rh anterioar acestei sarcini; Prevenit prin administrarea postnatal de anticorpi anti-D care vor distruge eritrocitele ce au ptruns n circulaia matern la natere sau dup avort

Fiziopatologie
Dup prima expunere la antigenul D n cadrul rspunsului imun limfocitele sintetizeaz iniial Ig M, molecule mari ce nu pot traversa placenta. n cazul unei noi expuneri la antigenul D (a doua sarcin) limfocitele B cu memorie recunosc antigenul D i sintetizeaz Ig G care pot traversa

Fiziopatologie
Anticorpii materni traverseaz placenta i distrug eritrocitele fetale Sechestrarea eritrocitelor de ctre macrofage n splina ftului i distrucia lor determin anemie hemolitic.

Incompatibilitatea n sistemul Rh
Dac mama este Rh/gr. O i ftul este Rh+/grupa A, B, sau AB, el este relativ protejat fa de incompatibilitatea din sistemul Rh Anticorpii materni anti-A i anti-B distrug eritrocitele fetale care au patruns n circulatia matern nainte de apariia rspunsului imun anti-D.

Incompatibilitatea n sistemul Rh n sarcin

O msur eficient de prevenire a sensibilizrii n sistemul Rh este administrarea mamei imediat dup natere de anticorpi anti D. Aceti anticorpi administrai mamei distrug eritrocitele fetale care au intrat n circulaia matern naintea dezvoltrii rspunsului imun.

Antigenul Lewis
Antigeni solubili ce se gsesc n plasm i sunt absorbii pe suprafaa eritrocitului.
Absoria antigenului Lewis pe eritrocit

RBC
Antigenul Lewis in plasma

Le genes

Genetica antigenului Lewis

Tipul de antigen Lewis depinde de prezena alelelor dominante H (acelai ca n cazul antigenelor ABO), Se i Le. 3 locusuri implicate ce pot fi ocupate de alele dominante /recesive. Alelele recesive le, h i se n stare homozigot nu se sintetizeaz antigen Lewis Prezena alelei Le sinteza antigen Lea. Toate alelele dominante Le, H i Se sunt necesare pentru a transforma antigenul Lea Leb. Le se H Le(a+b-) Le Se H Le(a-b+) le se H Le(a-b-) le hh se Le(a-b-)

Antigeni minori
Sistemul MNS = antigenii M, N, S, s, U Anticorpii anti-M i anti-N apar n mod natural i nu au semnificaie clinic Anticorpii anti-S, anti-s i anti-U ~ pot declana crize hemolitice

Antigenii MNSs
M & N only differ in their amino acid sequence at positions 1 and 5

M Glycophorin A N

RBC
U S

Glycophorin B

S & s only differ in their amino acid sequence at position 29

COOH end ..

.5, 4, 3, 2, 1 (NH2 end)

Sistemul eritrocitar Kell

Similar cu sistemul Rh 2 antigene majore (din peste 20 existente)
K (Kell), <9% din populaie k (cellano), >90% din populaie

The K i k genes sunt alele codominante situate pe chromosome 7 Antigenul K este foarte imunogenic (locul 2 dup antigenul D) n stimularea sintezei de anticorpi.

Sistemul eritrocitar Kidd

2 antigene
Jka i Jkb (sintetizate de alele codominante respective); alela recesiv Jk Fenotipuri:

Genotip
JkaJka JkaJkb JkbJkb JkJk

Fenotip
Jk(a+b-) Jk(a+b+) Jk(a-b+) Jk(a-b-)

caucazieni (%)
26.3 50.3 23.4 rar

negri (%)
51.1 40.8 8.1 rar

Grupa sangvin Duffy

Alele codominante
Fya i Fyb codific antigenele corespunztoare Fenotipuri: Fenotip Negri(%) Caucazieni (%) 17 49

Fy(a+b-) Fy(a+b+

9 1

Fy(a-b+)
Fy(a-b-)

22
68

34
RAR

Antigenul Duffy i malaria

Majoritatea afro-americanilor sunt Fy(a-b-) Anumii parazii din genul plasmodium ce determin malaria (Plasmodium knowlesi i P. vivax) nu invadeaz eritrocitele Fy (a-b-); Antigenii Fya sau Fyb sunt necesari pentru aderena la membrana eritrocitului; explic frecvena ridicat a fenotipului Fy (a-b-) la populaia de culoare Fenotipul Fy(a-b-) este frecvent Africa Central i de Vest (susine teoria seleciei naturale).

Grupa sangvin Xg
Prezena pe eritrocit a antigenului Xga Transmitere X-linkat, alela Xg fiind recesiv fa de alela dominant Xga 89% din femei i 66% din brbai au antigenul Xga : Xga sau Xg : XgaXga, XgaXg, sau XgXg Examplu: Xg(a+) i Xg(a-) au descendente Xg(a+) i biei Xg(a-); Antigen Xg nu este puternic imunogen (nu determin reacii transfuzionale)

Problem
Nume Grupa Genotopuri Anticorpi n sangvin posibile ser Donori

Dl. G D-na. B

AB+
O-

IAIB +/IAIB +/+

i i -/-

Anti-A, B i eventual anti-D Anti-A i anti-D

Oricine
Doar O-

D-na. J

B-

IB i -/IBIB -/-

B- i O-

Dl. S

A+

IA i +/+ IA IA +/+ IA i +/IA IA +/-

Anti-B

A-, A+, O- i O+

Test
Rspuns
grupa de snge, genotipuri i posibilii donori

grupa: B Genotip: IB i -/sau IBIB -/-

Donori posibili. B- sau O-

Test
Grupa sangvin, genotipuri posibile, donori.

Rspuns

Grupa: AB+ Genotip: IAIB +/-sau IAIB +/+ Oricine poate fi donor (AB+, AB-, O+, O-, B+, B-, A+, A-)

Sistemul genetic al hemoglobinei

tetramer
2 lanuri i 2 lanuri

Grupare hem
1/ per subunitate Transport O2

Fiecare din cele 4 molecule hem conin cte 1 atom feros (Fe2+) n centru care leag cte 1 molecul de O2

Hemoglobina

lan alpha

Lan Beta oxihemoglobina (HbO2) deoxihemoglobina

Grupare hem

Genetica sistemului
-globine -globine

Hemoglobina

Cromozom 11

Chromozom 16

Organizarea genelor ce codific cele 2 tipuri de lanuri globinice pe cromozomi diferii

Clusterul genelor -globinice conine 3 gene functionale, 28 kb pe cz. 16

Clusterul genelor -globinice conine 5 gene funcionale i 2 pseudogene, 50Kb pe cromozomul 11

Fig. 9.20 b

Succesiunea genelor n fiecare cluster se coreleaz cu expresia lor n cursul dezvoltrii

globine - gene active n primele 5 spt., n perioada

embrionar 2 gene : expresie n perioada fetal i adult -gene active n primele 5 spt., n perioada embrionar 2 gene active n perioada fetal i d devin active n primele spt. postnatal

globine

Tipuri de hemoglobine
Perioada embrionar: Hb Gower 1(2 2) Hb Gower 2 (2 2) Hemogl.fetal Hb F 22 (2G2, 2A2) Hemoglobin adult Hb A1(97%) 22 Hemoglobin adult Hb A2(2-3%) 2 d2

Mutaii n genele ce codific hemoglobinele

- 2 tipuri de boli genetice: - talasemii modificri cantitative ale sintezei lanurilor globinice; - hemoglobinopatii- modificri calitative ale sintezei lanurilor globinice - Variante hemoglobinice modificri ale secvenei de aminiacizi peptide cu caliti fizicochimice diferite >400 variante hemoglobinice - 90% sunt cauzate de substituia unui aa cu altul - 60 % din mutaii apar n lanul beta.

Siclemia/ anemia falciform

Afeciune autosomal recesiv cauzat de o mutaie punctiform n gena ce codific lanul beta situat pe 11p 15.5 Polipeptidul conine 146 aa

Siclemia
HB S: acidul glutaminic din poziia 6 este nlocuit cu valina; Transformarea codonului 6 din CTC n CAC (mutaie punctiform)

Hemoglobina C- Lizina in poziia #6

146 aa

146 aa

Siclemia

Deoxihemoglobina

Siclemia
Substituia acidului glutamic creeaz un situs hidrofob n afara lanului globinic care va polimeriza cu regiunea hidrofob a lanului adiacent

Polimerizarea lanurilor creeaz fibre lungi dispuse n axul lung al hematiei membrana se pliaz pe acest coninut rigidform de secer

Siclemia
Afeciune A.R.
n condiiile scderii p.p. a oxigenului din vasele mici, HbS precipit; Hematiile siclizate au membrana rigid i nu mai pot traversa vasele mici aglutinarea hematiilor i distrucia lor anemie hemolitic

Siclemia: fiziopatologie
Polimerizarea HbS apare doar dup cedarea oxigenului; Dup legarea oxigenului HbS depolimerizeaz; Doar dup cteva cicluri de polimerizare /depolimerizare se produce rigidizarea membranei.

Siclemia: fiziopatologie
Rigidizarea eritrocitelor determin obstrucia vaselor mici necroze tisulare Ex: medulara renal splin, oase, articulaii; Heterozogoii pt. HbS: 40% HbS i 60% HbA i sunt asimptomatici; - crize de siclizare doar la altitudini ridicate ( aglutinri n medulara renal hematurie) - relativ rezisteni la infecia cu plasmodium falciparum ce determin malaria frecv. genei pt. HbS n populaiile n care malaria este endemic ( Africa central i de vest, India, Pakistan, etc).

Electroforeza n gel
Metod pentru separarea moleculelor (ADN, proteine, etc.) pe baza proprietilor fizice /chimice: (1) mrime (2) form (3) ncrctur electric.

Electroforeza este utilizat pentru identificarea variantei alelice

Hemoglobina S
Normal mRNA

Normal protein

GUG CAC CUG ACU CCU GAG GAG AAG val his leu thr pro glu glu lys 1 2 3 4 5 6 7 8
Mutation (in DNA)

Mutant mRNA

Mutant protein

GUG CAC CUG ACU CCU GUG GAG AAG val his leu thr pro val glu lys 1 2 3 4 5 6 7 8

Acidul glutamic este un aa ncrcat negativ iar valina este un aa. neutru d.p.d.v al sarcinii electrice

Heterozygote...

Valine: aa.neutru

+
Acid glutamic: aa ncrcat negativ

Hb S/C Hb A/ C Hb A/S Sickle cell anemia Hb S Hb S Hb A/S

HbA

+
migration

Tipuri speciale de hemoglobinopatii

Hb Lepore: fuziunea a 2 gene d i d talasemia (crossing-over inegal ntre gene non-omoloage)

Hb Constant Spring (transformarea codonului stop ntr-un codon cu sens i continuarea transcripiei pn la urmtorul codon stop) lanurile sunt mai lungi cu 31 aminoacizi

Talasemii
Anomalii cantitative ale sintezei lanurilor globinice
Afectarea raportului dintre cantitatea de lanuri alpha i beta globinice; Anemie hipocrom/microcitar

Genetica talasemiilor
Alpha Tal: Deleii gene alpha : 1- 4 gene Beta Tal: Diferite tipuri de mutaii punctiforme Sunt afeciuni A.R. n care heterozigoii sunt minim/mediu afectai

Alpha ( ) talasemii
Scderea sintezei lanurilor alpha.

Prevalen crescut n Africa, Orientul mijlociu, India, rile din bazinul mediteranian.

Tipuri de talasemie
talasemie: 4 forme n funcie de severitatea scderii sintezei lanurilor n urma deleiilor genice i implicit a prezentrii clinice; -talasemie: 3 forme n funcie de severitatea clinic: major, intermediar i minor

Fig. 11.9

Clasificare & Terminologie

Alpha Talasemii
Status normal Purttor sntos Anemie minor Anemie cu Hb H Hb Barts /hydrops fetalis / - / -/- --/ --/- --/--

Talasemii

Fig. 9.21 (b.1)

Cazuri speciale n talasemie

Hb Barts & hydrops fetalis
Hb Barts este un tetramer 4 Asociat cu absena sintezei lanurilor (--/--) Letal Hb Barts este capabil de siclizare

Heterogeneitate n -Talasemie
-talasemie ~200 mutaii o = nu se sintetizeaz lanuri globinice + = sinteza lanurilor globinice este sczut n funcie de severitatea afeciunii: Talasemie major Talasemie forma intermediar Talasemie minor

Incidena talasemiei pe glob

n anumite regiuni 2-18% din populaie sunt purttori; Include bazinul Mrii Mediterane, Orientul Mijlociu, Subcontinentul Indian, Orientul ndeprtat. Migraiile populaionale au condus la diseminarea genei... -Tal este relativ frecvent i n Europa, America i Australia. In 2002: ~ 240 milione de purttori sntoi pe glob ~ 200,000 n.n. pe an cu -Tal major (Cao et al, 2002).

Mutaii n regiunea reglatorie a genei poate cauza talasemie

Mutaii n regiunea promotorului (secvena TATA box) pot scdea drastic transcripia genei i cauza talasemie

-Talasemia minor
Apare la heterozigoi; dac ambii genitori sunt heterozigoi 50% din descendeni vor avea talasemie minor i 25% talasemie major (homozigoi pentru mutaia genic). Clinic normali Pot avea o form uoar sau medie de anemie.

-Talasemia- forma intermediar

Scderea sintezei lanurilor determin o anemie moderat sau sever; Cele mai frecvente complicaii: deformri osoase i hepatosplenomegalie

Talasemia major (anemia Cooley)

Lipsa lanurilor determin o anemie sever, letal n absena tratamentului; Transfuziile repetate determin o suprancrcare cu Fe ce se depune n diferite organe (insuficien hepatic, renal etc) tratament:chelatori de Fe

-Talasemia i malaria
Heterozigoii sunt relativ protejai mpotriva formelor severe de malarie (infecie cu plasmodium falciparum); Efectul este asociat cu reduceea multiplicrii parazitului n eritrocite; este determinat de creterea cantitii de HbF ce este relativ rezistent la digestia de ctre hemoglobinazele parazitului.

Semne i simptome
Talasemia major (anemia Cooley): tegumente palide i retardul creterii n primul an de via datorit anemiei severe. ulterior deformri osoase (hiperplazia seriei eritrocitare) i hepatosplenomegalie

Blood picture of a thalassemia major patient

Source: Cooleys Anemia Foundation