CONFERENCIA DE BIOQUÍMICA

IMPORTANCIA MÉDICA DE
LOS RADICALES LIBRES

Dra. Ana Maria Muñoz Jauregui

Noviembre 2007
 OBJETIVOS

Al término de la conferencia, el alumno será capaz de:

 Reforzar los conceptos sobre radicales libres y stress
oxidativo
 Conocer las enfermedades relacionadas con el stress
oxidativo
 Describir el rol de los RL en las enfermedades CV, del
colágeno, tabaquismo, envejecimiento y enf. de
Parkinson y Alzheimer
 Señalar los métodos de evaluación del stress oxidativo
 RADICALES LIBRES
 Son átomos o O- OH
moléculas
inestables
 Altamente reactivas
 Al actuar, se activa
una reacción en Radical Peróxido
Radical Hidroxilo
cadena que podría Anión Superóxido
incluso llevar a la Peróxido de Hidrógeno
muerte de la célula Oxígeno Singlete
 ROS

O2 Oxígeno molecular
HO Radical hidroxilo
O- Radical anión superóxido
HO2 Radical perhidroxilo
H2O2 Peróxido de hidrógeno
O2- Singlete de oxígeno
ROOH Hiperóxido orgánico
 Acción de los radicales libres
Peroxidación de los Oxidación de proteínas
lípidos  Modificación de
 Radical libre ataca a un estructura terciaria
ácido graso insaturado  Cambio de función
 El lípido pierde un e-
 Se modifica la molécula Oxidación de
carbohidratos
 Forma moléculas que
reaccionan con el
carbonilo proteínas
 ESTRÉS OXIDATIVO
 El estrés oxidativo ocurre en
los organismos por:
 excesiva producción de
EROs
 deficiencia de antioxidantes
 mala nutrición
 enfermedad
 otras causas
 Porque pierden el equilibrio
entre radicales libres y
antioxidantes
 ESTRÉS OXIDATIVO
Provocado por:
 el radical superóxido (O2-)
 el peróxido de Hidrógeno (H2O2)
 el radical hidroxilo (HO.)
Principal fuente de EROs:
cadena respiratoria por las 2% e- NADH
forman EROs
transferencias de electrones:
Estrés Oxidativo : Causas

 Aumento de
Radicales Libres
 Disminuye el
sistema de defensa
(antioxidante)
de los antioxidantes
 Antioxidantes enzimáticos
 Superóxido dismutasa (SOD) Existe en 2 formas:
una forma citoplasmática que contiene cobre y zinc y otra
mitocondrial que contiene manganeso

 Catalasa, enzima que contiene hierro

 Glutation peroxidasa, enzima que contiene selenio

 ROL DEL NADPH EN EL METABOLISMO DEL GLUTATION

2x GSH
Forma reducida activa
NADP+
H2 O2

Glutation
Glutation
peroxidasa
reductasa

H2O GS-SG forma

oxidada inactiva NADPH + H
 IMPORTANCIA DEL NADPH EN LOS GLÓBULOS
ROJOS
Un defecto en la enzima o
un aumento de RL produce
aumento de metaHb

NAD+
Hb Fe2+

Citocromo b5
Fármacos
reductasa
o RL

Meta Hb Fe 3+
NADH

cianosis
 Antioxidantes dietéticos

 Vit E: Estabilidad a la membrana celular

 Vit C: Protegen a los lípidos plasmáticos
 Beta caroteno: Protege a los neutrófilos
 Selenio: Neutralizan compuestos de acción
mutagénica o carcinogénica
 Cu, Fe, Zn: parte de las enzimas antes
mencionadas.
 Flavonoides: Estabilizadores de la
membrana
 Alimentos antioxidantes: fuentes

Carotenoides Zanahoria, tomate, naranja,

papaya, lechuga...

Zn, Cu, Se, Mn... Gérmenes de trigo, cangrejo,

ostras, frutos secos, cereales...

Coenzima Q Carne, vísceras, pescado...

Isoflavonas Soya y derivados

Vit C Cítricos, piña, tomate, espinaca...

Vit E Nuez, maíz, vegetales, trigo...

 Enf. Cardiovasculares

El Cáncer

Stress Oxidativo Envejecimiento

Degeneración Macular

Radicales
Libres
  El aporte calórico excesivo
y el sedentarismo causan
aumento intracelular de la
glucosa y de los ácidos
grasos libres. Esto aumenta
la acetilcoenzima A que se
transforma en citrato que
entra al ciclo del ácido
cítrico y conduce a una
sobreproducción de NADH.
El exceso de NADH
mitocondrial aumenta la
producción de radicales
libres y produce estrés
oxidativo. A su vez el estrés
oxidativo induce la
disfunción endotelial,
aumenta la resistencia a la
insulina y afecta la
secreción de insulina por
lesión de las células beta.
La alteración de la
secreción de insulina
produce disminución de la
tolerancia a la glucosa y
diabetes. Estos dos
fenómenos constituyen un
mecanismo de
retroalimentación que
aumenta la formación de
radicales libres. La
enfermedad cardiovascular
es el resultado de la
disfunción enotelial y de las
alteraciones combinadas
del síndrome metabólico.

ATG: alteración de tolerancia a la glucosa. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2004

Enfermedades relacionadas
 Cataratas
 Enfermedad de Parkinson
 Enfermedades auto inmunes
 Artritis
 Diabetes
 Aterosclerosis
 Enfermedades cardiovasculares
 Hipertensión arterial
 Enfermedades de la piel.
 Suele ser claro y transparente ,
cuando se anubla u opaca

Opacidad del cristalino

Las Cataratas
Se presentan en el nacimiento
(catarata congénita)

Asociadas al envejecimiento
Desarrollo lento y sin dolor
Las Cataratas Perdida de la visión
gradual
en los adultos Problemas:
ver de noche
Sensible al resplandor
 Enfermedad de Parkinson

Enf. Neurológica

•Temblor
•Alteraciones en la
coordinación de los Rigidez muscular
movimientos

Dificultad al andar
 También...... • Arrugas
• Piel flácida
 Estrés oxidativo • Manchas de
la piel

CADA CELULA DE ENVEJECIMIENTO

NUESTRO CUERPO
DE LA PIEL
 Glutation Peroxidasa

Actividad de la Superoxido dismutasa

Enfermedad de
Parkinson Productos derivados de la
peroxidación lipídica (p. ej.,
malonildialdehído.

Glutatión reducido en la
SN

Alteración de la a-cetoglutarato
dehidrogenasa mitocondrial
 RADICALES LIBRES Y
ATEROGENESIS
 El endotelio juega un papel preponderante en el
inicio y las complicaciones de esta enfermedad y en
donde la peroxidación lipídica de las lipoproteínas
de baja densidad (LDL) es la causa
desencadenante.
 Los productos principales de la peroxidación
lipídica, los hidroperóxidos lipídicos, sufren fisión en
presencia de los metales de transición, causando la
formación de radicales peroxilo y alcoxilo, así como
de aldehidos que son citotóxicos.
 El hierro está involucrado en las etapas precoces
de la aterosclerosis y su depósito en el endotelio y
en la media está estrechamente asociada con la
progresión de la aterosclerosis.
Papel de endotelio en los procesos
inflamatorios. Las células
circulantes como neutrófilos y
monocitos necesitan ser
reconocidas por las moléculas de
adhesión endotelial para penetrar
en los diferentes tejidos. La
expresión de tales compuestos es
inhibida por el óxido nítrico, lo que
le confiere propiedades
antiinflamatorias insospechadas
Teoría oxidativa de la ateroesclerosis
 SISTEMA NERVIOSO CENTRAL
Y RADICALES LIBRES

 La gran vulnerabilidad del sistema nervioso central,

ya que el cerebro es un tejido muy rico en lípidos
poli-insaturados,
 Contiene poca cantidad de superóxido dismutasa, de
catalasa y de peroxidasa.
 Además el cerebro y la medula tienen
concentraciones muy altas de hierro, facilitando la
reacción de Fenton
 El cerebro además es muy sensible a la reperfusión
evento en el cual se liberan una serie de radicales
libres y de aminoácidos excitatorios
 RADICALES LIBRES Y
ENFERMEDADES DEL COLAGENO

 Los polimorfonucleares activados (mediante

complejos inmunes, activación del complemento,
endotoxinas, cristales etc.), liberan radicales libres
 Se activa la vía del ácido araquidónico -liberando
prostanoides: leucotrienos, tromboxano A2,
prostaciclina
 Produciendo además mieloperoxidasa la cual en
presencia de cloro forma cloraminas y ácido
hipocloroso, otro radical libre muy potente, siendo
responsable en gran parte de los efectos a
distancia de la artritis reumatoide
 TABAQUISMO Y RADICALES
LIBRES

El tabaquismo tiene dos fases: una gaseosa y otra de alquitrán

 La fase gaseosa es eminentemente oxidante. La interacción
del óxido nítrico más el isopreno da origen a la formación de
radicales libres. Estos actúan sobre la metionina
produciéndose un efecto de inactivación del inhibidor de la A 1
antitripsina con el consiguiente daño pulmonar cuyo resultado
es el enfisema
 La fase de alquitrán es eminentemente reductora, en donde la
semiquinona del tabaquismo interactúa con el oxígeno, dando
origen a la aparición de radicales libres, especialmente radical
hidroxilo en grandes cantidades, ocasionando de esta manera
daño directo al DNA con las consiguientes posibilidades de
degenerar en cáncer
 INSUFICIENCIA CARDIACA Y
RADICALES LIBRES

En la ICC hay aumento de prostaglandinas, y la formación de

prostaglandinas genera radicales libres
 En la ICC hay una hiperproducción de norepinefrina circulante
y local, y su auto-oxidación genera radicales libres.
 Recientemente se ha demostrado que en la ICC avanzada
(Clase funcional III-IV), hay una activación de la NO synthasa
inducible. Esta enzima (No Ca++ ni ATP dependiente) genera
cantidades muy importantes de Oxido Nítrico (de valores
normales de nanomoles a picomoles), ejerciendo un efecto
inotrópico negativo y una vasodilatación irreversible
 Efecto vascular:
Relajación dependiente del endotelio

 El óxido nítrico Estimulo

Ej. Acetilcolina o shear stress)
endotelial (NO)
posee efectos
vasoprotector y Vasodilatacion/
anti regulacion del
ateroesclerótico ecNOS
flujo sanguíneo
Oxido
nitrico

NO: Efecto vascular en función normal

 La enfermedad de Alzheimer

 El cerebro en la enfermedad de Alzheimer (EA) sufre un estrés oxidativo

significativo, y se sabe que el péptido beta amiloide, principal
componente de las placas seniles, causa estrés oxidativo in vitro
 Las concentraciones altas de péptido amiloide y el alelo 4 de la
apolipoproteína E son factores de riesgo de enfermedad de Alzheimer.
Además se ha relacionado a la lipoproteína E con aumento del riesgo de
aterosclerosis y de la formación de placa amiloide
 Los iones metálicos, especialmente el zinc, el cobre y el hierro, son
también importantes en la oligomerización y toxicidad del beta amiloide
 Se demostró que las estatinas tienen efectos favorables sobre la
EA;,una estatina hidrofílica, que no atraviesa bien la barrera
hematoencefálica (pravastatina) es tan eficaz como una estatina que la
atraviesa rápidamente (lovastatina)
 Se deba probablemente a que la disminución de la hipercolesterolemia
podría reducir la concentración de hierro en el cerebro, la acumulación
de beta amiloide y la capacidad del hierro de las placas para catalizar el
daño oxidativo.
 Acción de las estatinas
Los inhibidores de la HMG-CoA reductasa (estatinas) reducen
significativamente el accidente cerebrovascular (ACV) isquémico en pacientes
con vasculopatía comprobada. Además de prevenir el ACV, se comunicó que
las estatinas tienen efecto sobre la evolución de un ACV instalado. El efecto
favorable de las estatinas sobre el ACV se podría ejercer de varias maneras:
1- Las estatinas podrían aumentar la óxido nítrico sintasa endotelial cerebral

2- Podrían tener acciones antinflamatorias, disminuyendo la expresión de las

moléculas proinflamatorias

3- Pueden aumentar la plasticidad cerebral por aumento del crecimiento

endotelial vascular, proliferación de células endógenas y neurogénesis

4- Inhiben la síntesis del colesterol cerebral después de una lesión neuronal y

reducen así los productos de oxidación tóxica del colesterol.
 Estrés Oxidativo: Métodos de evaluación

 BIOMOLÉCULAS MÉTODOS

Lípidos Quimioluminiscencia
MDA(malondialdehído)
Dienos conjugados
Peróxidos
Pentano, etano
Proteínas Compuestos carbonilos
Grupos sulfhidrilos
Fragmentación de proteínas
Actividad de enzimas
Grupo aminos libres
ADN Base modificada
EL CONTROL DEL STRESS OXIDATIVO ES
FUNDAMENTAL EN LA PREVENCIÓN DE
LAS ENFERMEDADES CRONICAS