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CITODIAGNOSTICO
El citodiagnstico, tambin llamado examen citolgico o simplemente citologa, es el diagnstico morfolgico basado en los caracteres microscpicos de clulas y componentes extracelulares, desprendidos de los rganos espontneamente u obtenidos por procedimientos que, en
CITODIAGNSTICO
1) Colaboracin en el diagnstico y tipificacin de neoplasias malignas 2) Diagnstico especfico de algunas lesiones benignas, por ejemplo: tumores benignos, hiperplasias, etc 3) Eleccin de pacientes que deben ser estudiados ms profundamente en grupos de alto riesgo para un tipo especfico de cncer. 4) En hematologa, examen
Para muestras de mucosa crvicovaginal, por raspado con esptula de madera, se utiliza la coloracin de Papanicolaou
PAPANICOLAOU
El Mtodo de Tincin segn Papanicolaou es de gran nobleza y ha tolerado infinidad de variaciones resultantes en productos de buena calidad, aptos para la observacin microscpica minuciosa que requiere la citologa. Es un mtodo de coloracin muy refinado, cientficamente probado
1. Alcohol etlico 96 15 Seg. 2. Alcohol etlico 70 15 Seg. 3. Alcohol etlico 50 15 Seg. 4. Agua Destilada 15 Seg. 5. Hematoxilina de Harris 6 Min. 6. Agua destilada 10 inmersiones. 7. Sol cido clorhdrico 0,5% 1 - 2 inmersiones rpidas. 8. Agua destilada 15 Seg. 9. Sol Amonaco 1,5% en ol 70 La extensin vira al azul. 10. Alcohol etlico 50 15 Seg. 11. Alcohol etlico 70 15 Seg. 12. Alcohol etlico 96 15 Seg. 13. O G 6 (orange) 2 Min. 14. Alcohol etlico 96 10 inmersiones. 15. Alcohol etlico 96 10 inmersiones.
COLORANTES
Hematoxilina de Harris Es un colorante nuclear; tie la membrana nuclear y la cromatina de color azul oscuro a rojizo purpreo y el nuclolo de color rojo, rosado o naranja. Con otras soluciones de Hematoxilina se puede obtener resultados similares. Se obtiene buenos resultados cuando se ajustan bien los tiempos de coloracin. La ventaja de la Hematoxilina de Harris es que resulta fcil de preparar y
ORANGE G (OG6)
El Orange G y la solucin EA (eosina amarillenta) se utilizan para teir los citoplasmas. Ambas son soluciones alcohlicas y el alcohol hace ms transparentes a los citoplasmas. Tien por saturacin. Solucin madre Es una solucin alcohlica al 95% para el colorante Orange G. El Orange G se presenta en polvo y no se diluye inicialmente en alcohol. Se prepara primero una solucin acuosa y luego se diluye.
EA 36 SOLUCIN ACUOSA Verde claro S T 2% amarillento Marrn Bismarck y al 10% Almacenar en lugar fro y oscuro 24 a 48 horas. PARA PREPARAR SOLUCIN EA 36: Solucin reserva Verde claro S T al 0,1% 450ml Solucin reserva marrn Bismarck al 0,5% 100ml Solucin de Eosina al 0,5% 450ml
PROCESAMIENTO DE LIQUIDOS
LIQUIDO CEFALORAQUIDEO 1. Procesar en el laboratorio inmediatamente, de lo contrario, almacenarlo a temperatura ambiente (mximo 24 h). 2. Centrifugar todas las muestras >1 ml (1500 g / 15 min) y realizar los siguientes pasos en cabina de flujo laminar. 3. Dejar 1 ml de LCR junto con el sedimento y depositar el resto de sobrenadante en otro tubo estril (para una posterior deteccin de antgenos).
6. Inocular el resto del sedimento en 2 tubos de SDA. 7. Incubar un tubo a 35 C y otro a temperatura ambiente (30 das). 8. Si se sospecha meningitis por C. neoformans, realizar la deteccin de Ag criptoccico en el sobrenadante 9. Vigilar los cultivos cada 48 h. 10.Si se detectase crecimiento
RECUENTO DE CLULAS
Se realiza sin incluir el lquido. Nmero normal de linfocitos en un adulto: 0 a 5 por l. En los nios, vara segn la edad, disminuyendo al aumentar sta; el nmero es ms elevado durante el primer ao de vida. El recuento del nmero de leucocitos debe realizarse de forma paralela a la determinacin de las protenas en el LCR. No se recomiendan los contadores
RECUENTO DIFERENCIAL
Se ha descrito numerosos mtodos para concentrar las clulas, entre ellos: los de centrifugacin, sedimentacin y filtracin. La centrifugacin tiene la ventaja de que es un mtodo de rutina de laboratorio y no precisa equipos especiales. Hay que tener en cuenta que la centrifugacin siempre produce, por efecto mecnico, un dao celular. Las clulas que estn en el centro del frotis suelen ser ms pequeas, con menos citoplasma y ncleo ms denso, que las que se sitan en zonas perifricas.
FRMULA
Se realiza sobre un frotis teido mediante tcnicas de rutina. Valores normales Linfocitos: 60%. Monocitos: 30%. Polimorfonucleares: 2%.
5. Dispensar una gota del sedimento resuspendido sobre un portaobjetos para su examen microscpico directo: KOH, blanco de calcofor 6. Inocular el resto del sedimento en 2 tubos de SDA. 7. I n c u b a r u n t u b o a 3 5 C y o t r o a temperatura ambiente (30 das). 8. Vigilar los cultivos cada 48 h.
ESPUTO
Procesado de la muestra: Hacer la identificacin y registro Examen macroscpico: cantidad, aspecto: consistencia, color, olor, Adjetivos para descripcin: con burbujas/ amarillos con mal olor/ mucosos/ purulentos/ hemoptoicos/ blanquecinos/ gelatinoso/ mucopurulentos/ Extensin Fijacin Tincin
ANATOMIA PATOLOGICA
La anatoma patolgica es la especialidad mdica que se encarga del estudio de las lesiones y alteraciones celulares de los tejidos y rganos, de sus consecuencias estructurales y funcionales, y por tanto de su repercusin en el organismo. Su moderno
5. Realizar varias improntas de la muestra sobre un portaobjetos para su examen microscpico directo: blanco de calcoflor, KOH, tincin de plata metenamina 6. Inocular la muestra troceada en dos tubos de SDA, sumergiendo ligeramente la misma en la superficie del agar. 7. Incubar un tubo a 35 C y otro a temperatura ambiente (30 das).
PASOS
Obtencin del tejido Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas: Biopsia Autopsia Fijacin En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem. Unos de los fijadores mas usado es el Formol al 10% (Formaldehido) formol Inclusin Se debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador, luego se deshidrata y se pasa por un lquido intermediario que es miscible con
Tallado Previo al corte, se debe tallar el bloque para el obtener secciones adecuadas en el micrtomo. El micrtomo es un instrumento que permite obtener cortes muy delgados de muestra (5m).micrtomo Corte Los cortes se obtienen seriados, uno tras otro, obteniendo una cinta. Luego se echan a un bao de flotacin para que se estiren y se rescatan con un portaobjetos, que luego se calienta para evaporar el agua y que los cortes queden adheridos. Tincin Las placas se tien con la tcnica de
LOS OBJETIVOS DEL EXAMEN MICROSCPICO SON: Describir exactamente el tipo de material remitido para el estudio, por eso la pieza se pesa, mide, describe lesiones que contiene, morfologa, aspecto, coloracin y en casos de piezas quirrgicas, sus relaciones con estructuras vecinas. Seleccionar las reas donde se har el estudio microscpico, a
LA FIJACIN.
Los principios generales: No existe un mtodo universal de fijacin, por lo que un agente fijador para un tejido no tiene porque ser adecuado para otro. No todos los fijadores conservan indefinidamente el tejido, porque fijacin no equivale a conservacin tisular. Un defecto en la fijacin nunca