REACTIILE ANTIGEN-ANTICORP pII

Reac ia de aglutinare
DEFINITIE
Agregarea antigenelor corpusculare naturale sau fixate artificial pe suprafa a unor particule (bacterii, hematii, latex)/aglutinogene prin Ac specifici completi/aglutinine

Reactia de aglutinare
  

Ac reac ioneaz numai cu determinantul Ag specific Ac specifici sunt comple i, cel pu in bivalen i Ac pot fi: - aglutinan i - neaglutinan i (blocan i sau incomple i) - care aglutineaz numai la rece (+4C)

Aglutinarea

Mecanism: sc derea for elor de respingere electrostatice dintre particule i aparitia unor pun i de leg tur prin intermediul Ac

Aglutinarea
Factori determinanti:  Valen a Ac (Ac din clasa IgM sunt mult mai aglutinan i dect cei care apar in clasei IgG)  Densitatea determinan ilor antigenici de la suprafa a particulei  For a ionic a mediului n care are loc reac ia

Reactia de aglutinare


 

Are sensibilitatea mai mare dect reac ia de precipitare (Ag este o particul i nu o molecul solubil ) Excesul de Ag nu inhib reac ia Concentra iile mari de Ac pot inhiba reac ia (fenomenul de prozon ) Raportul ntre Ag-Ac este tot n favoarea Ac (ca i la precipitare)

Clasificarea reac iilor de aglutinare

Aglutinare activ sau directa, n care particula figurat (Ag corpuscular) este el nsu i purt tor de determinante antigenice specifice (hematii, leucocite, trombocite,spermatozoizi, bacterii) Aglutinare pasiv sau indirect , n care particula serve te doar de suport pentru un determinant antigenic solubil fixat artificial pe suprafa a sa (hematii, particule de latex sau microcristale de colesterol)

Aglutinarea direct activa

Poate fi: - Calitativa - Cantitativa Utilizare: ex. determinarea grupelor sanguine, seroidentificarea Ag bacteriene sau depistarea i titrarea Ac din serul pacientilor (ex.bruceloza) Sensibilitatea poate fi crescut prin: - tratarea celulelor cu enzime - executarea reac iei n mediul cu vscozitate crescut

Reac ia de aglutinare direct calitativa

(4+)

(-)

LAMA

(-)

(4+)

Reac ia de aglutinare direct calitativa

(4+) TUBURI

(-)

R. aglutinare directa cantitativa

(3+) METODA DILUTIILOR SUCCESIVE

TITRUL AGLUTINANT AL SERULUI

Aglutinarea indirect pasiv

Particula serve te doar ca suport pentru un determinant antigenic solubil fixat artificial pe suprafa a sa Sunt utilizate ca suport  hematii formolate, tanate  particule de latex  microcristale de colesterol  protein A stafilococ  Poate fi: - Calitativa - Cantitativa Sensibilitate mai inalta fata de aglutinarea directa Citire mai usoara

Hemaglutinarea indirecta (pasiva) RHAI/RHAP

Fixarea pe hematii: - Ag.polizaharidice: scurta incubatie - Ag.proteice: hematii tanate, formolate

TUBURI

Hemaglutinarea indirecta (pasiva)

RHAI/RHAP

GODEURI

Hemaglutinarea indirecta (pasiva) RHAI/RHAP

Treponema pallidum haemagglutination assay (TPHA)


3+

2+

1+

Tehnica se bazeaza pe o reactie de hemaglutinare pasiva pentru evidentierea anticorpilor specifici anti-treponemici Principiu: hematii de cocos sensibilizate cu antigene treponemice se pun in contact cu serurul pacientului; daca serul contine anticorpi specifici, acestia determina aglutinarea hematiilor

4+

Hemaglutinarea indirecta (pasiva) RHAI/RHAP

TPHA / MHA-TP (microhaemagglutination assay for antibody to Treponema pallidum )

Reac ia de latex-aglutinare
Ac sau Ag sunt fixa i pe particule de latex Reac ia se efectueaz pe: lame de sticla slid-uri cartonate Utilizare: - Identificare Ag.din prelevate patologice - Serodiagnosticul unor infectii

Reac ia de latex-aglutinare

NEREACTIV

REACTIV

Reac ia de latex-aglutinare

POZITIV / REACTIV

Reac ia de Co-aglutinare
 

Anumite tulpini de Staphylococcus aureus (tulpina Cowan, ATCC 12498) prezint un con inut ridicat de protein A de suprafa Proteina A din peretele celular al stafilococului aureu se leag de fragmentul Fc al moleculei de imunoglobulin , l snd liber fragmentul Fab pentru legarea antigenului Aglutinarea vizibil a stafilococilor reprezint un test pozitiv care indic leg tura antigen-anticorp Reac ia de coaglutinare este utilizat n detectarea antigenelor diferitelor grupuri de steptococi, Neisseria meningitidis i Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae

Reac ia de Co-aglutinare

TESTUL COOMBS

Tehnica Coombs direct (test antiglobulinic direct)

La un nou-n scut: prezen a Ac materni anti-Rh fixa i pe hematii (dac mama este Rh-) Tehnica: La aceste hematii suspecte se adaug un ser anti-Ig uman Metoda: hemaglutinare pe lama

TESTUL COOMBS

Testul Coombs indirect (detecteaz anticorpii circulanti antieritrocitari) Tehnica: - serul pacintului se pune n contact cu eritrocitele unui donator Rh+ - se adauga antiglobulina umana (poli/monospecific) Metoda: hemaglutinare pe lama

Reac ia de inhibare a aglutin rii

Reac ia de aglutinare a particulelor nc rcate cu Ag solubil este inhibat n cazul n care Ac reac ioneaz n prealabil cu Ag omolog (Ex.Testul inhib rii hemaglutin rii virale HAI)

Reac ia de inhibare a aglutin rii

Reac ia de inhibare a hemaglutin rii