Plan de trabajo

Aislamiento y purificacin de cafena a partir de hojas de t.

Objetivo:

Aislamiento de la cafena de las hojas de t, mediante la utilizacin de saquitos de t negro.

Metodologia propuesta

Procedimientos.

Procedimientos desarrollados en laboratorio

Solubilizacin de la cafena a partir de saquitos de t

En un vaso de precipitado de 500 ml se colocaron 21 bolsitas de t, se agregaron 420 ml de agua y se dej hervir durante 20 minutos .

TANINOS:

Son solubles en agua caliente.

Extraccion inerte con diclorometano.

Aunque la cafena es soluble en agua, es mucho ms soluble en diclorometano y por eso puede ser extrada con este solvente orgnico, mientras las sales de sodio del cido glico y los taninos permanecen en fase acuosa.

Extraccin inerte
El color caf de la solucin de t se debe a pigmentos flavonoides y clorofilas y a sus respectivos productos de oxidacin. Las clorofilas (punto de fusin 135 C137 C)son solubles en diclorometano, la mayora de las dems sustancias que tiene el t no lo son.

Extraccin inerte

El volumen total se dividi en tres porciones, ya que se trataba de un volumen excesivo para la ampolla de decantacin, y se realizaron las siguientes extracciones con diclorometano: Volumen 1:100 ml /4 extracciones de 5 ml cada una. Volumen 2:100 ml / 4 extracciones de 5 ml cada una. Volumen 3:140 ml /3 extracciones de 10 ml cada una.

Eliminacin del solvente con rotavapor

Con un equipo rotavapor se evapor el diclorometano para concentrar la muestra.

 Baln vaco: 71,500 Baln con muestra:71,5029 Cantidad de cafena impura= 0,0029

Recristalizacin
Cantidad insuficiente de masa para una recristalizacin.Se esperaba obtener a partir de 44,32 gr de t: 1,81 gr de cafena impura Se propuso realizar una Cromatografa en columna y Se realizaron CCD para verificar la pureza de la muestra y para encontrar el solvente adecuado para la cromatografa en columna.

Punto de fusion

Se descart esta tcnica como criterio de pureza por peligroso manejo experimental.

CCD
Diclorometano/metanol 2:8 Diclorometano/metanol 4:6 Tolueno Cloroformo Cloroformo/acetona 8:2 Cloroformo/acetona 9:1

Resultado de las CCD

Anlisis de CCD
Dicloromeno-metanol: Demasiado polares Tolueno: Muy poco polar. Cloroformo: Separacin de la muestra en por lo menos 2 componentes (2manchas),no logr correr ni a la muestra ni al patrn de la lnea de siembra. Cloroformo-acetona (9:1) No logr correr la muestra pero s al patrn de cafena. Cloroformo-Acetona (8:2) 1 mancha, la muestra que qued retenida en la lnea de siembra, el compuesto menos polar corri con el frente del solvente.

Conclusiones
La mancha superior revelada en las placas resultara ser clorofila, ya que el resto de los compuestos se eliminaron durante los procedimientos anteriores. La clorofila debido a su larga y cadena hidrocarbonada es menos polar que la cafena por lo cual tiene menor afinidad por la matriz polar y su Rf result mayor.

Conclusiones
Se decidi no realizar la cromatografa en columna La muestra de cafena impura result tener una importante afinidad por la matriz por lo cual no se encontr ningn solvente ni mezcla de solventes que logre desorberla. Utilizar solventes ms polares a los planteados podra desintegrar la slica.