ANTIBITICOS

AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION
De los productos microbianos fabricados comercialmente, probablemente lo ms importantes son los antibiticos. Los antibiticos son sustancia qumicas producidas por microorganismos, que matan o inhiben el crecimiento de otros microorganismos. El desarrollo de los antibiticos como agentes para el tratamiento de enfermedades infecciosas, probablemente ha tenido ms impacto en la prctica mdica que ningn otro avance por separado. Los antibiticos son productos del metabolismo secundario. Aunque su rendimiento es relativamente bajo en la mayora de las fermentaciones industriales, debido a su elevada actividad teraputica y consecuentemente a su alto valor econmico, pueden producirse comercialmente por fermentacin microbiana.

AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION
Muchos antibiticos pueden sintetizarse qumicamente, pero debido a la complejidad qumica de los antibiticos y al gran gasto econmico que supone su sntesis, raramente, si es que en algunos casos es posible, la sntesis qumica puede competir con la fermentacin microbiana. Los antibiticos comercialmente tiles estn producidos primordialmente por hongos filamentosos y por bacterias del grupo de los actinomicetos. Existen un cierto nmero de antibiticos qumicamente relacionadaos y por ello se conocen como familias de antibiticos. Por tanto, los antibiticos pueden clasificarse de acuerdo con su estructura qumica. Ver Figura 1. Clasificacin de los antibiticos de acuerdo con su estructura qumica. Se da un ejemplo representativo de cada grupo.

CLASIFICACION DE ANTIBIOTICOS DE ACUERDO A SU ESTRUCTURA QUIMICA

ANTIBIOTICOS

EJEMPLO DE CADA UNO Nojirimicina Estreptomicina Evernimocina Estreptotricina Vancomicina Monomicina

1 .Antibiticos que contienen carbohidratos:

Azcares puros Aminoglcosidos Ortosomicinas N-Glucsidos C- Glucsidos Glucolpidos

2. .Lactonas macrocclicas
Antibiticos macrlidos Antibiticos polinicos Ansamicinas Macrotetrlidos Eritromicina Candidicidina Rifamicina Tetranactina

CLASIFICACION DE ANTIBIOTICOS DE ACUERDO A SU ESTRUCTURA QUIMICA

ANTIBIOTICOS

EJEMPLO DE CADA UNO Tetracicilina Adriamicina Actinorhodina Mitomicina

3. Quinonas y antibiticos relacionados

Tetraciclinas Antraciclinas Naftoquinonas Benzoquinonas

4. Antibiticos, aminocidos y pptidos

Derivados de aminocidos Antibiticos beta-lactmicos Antibiticos peptdicos Cromopptidos Depsipptidos Pptidos formadores de quelatos Cicloserina Penicilina Bacitracina Actinomicinas Valinomicinas Bleomicinas

CLASIFICACION DE ANTIBIOTICOS DE ACUERDO A SU ESTRUCTURA QUIMICA

ANTIBIOTICOS

EJEMPLO DE CADA UNO Polioxinas

5. Antibiticos heterocclicos que contienen nitrgeno

Antibiticos nuclesidos

6.Antibiticos heterocclicos que contienen oxgeno

Antibiticos politer Monensina

7. .Derivados alicclicos
Derivados cicloalcanos Antibiticos esteroides Cicloheximida Acido fusdico

CLASIFICACION DE ANTIBIOTICOS DE ACUERDO A SU ESTRUCTURA QUIMICA

ANTIBIOTICOS

EJEMPLO DE CADA UNO

8. Antibiticos aromticos
Derivados del benceno Cloranfenicol Antibiticos aromticos condensados Griseofulvina Eter aromtico Novobiocina

9. Antibiticos alifticos
Compuestos que contienen fsforo Fosfomicinas

BUSQUEDA DE NUEVOS ANTIBIOTICOS

Los microorganismos que se han examinado para ver su capacidad de producir antibiticos son miembros de unos pocos gneros como: Streptomyces, Penicillium y Bacillus. Muchos investigadores creen que se descubrir un gran nmero de nuevos antibiticos, si se examinan otros grupos de microorganismos.
Las tcnicas de ingeniera gentica permitirn la construccin artificial de nuevos antibiticos y que los modelos por ordenador llegarn a reemplazar a los mtodos tradicionales de rastreo Screening en busca de nuevos frmacos.

Algunos Antibiticos Producidos Comercialmente

ANTIBIOTICO

MICROORGANISMO TIPO ESPECTRO DE PRODUCTOR MICROORGANISMO ACCION Bacitracina Bacilus licheniformis Bacteria esporulada Bacteria Gram(+) Cefalosporina Cephalosporium sp. Hongo Amplio espectro Cloranfenicol Sntesis qumica (antes Amplio espectro era producida por Streptomyces venezuelae) ClorotetraciclinaStreptomyces auereofaciens Actinomiceto Amplio espectro Cicloheximida Streptomyces griseus Actinomiceto Levadura patgena Cicloserina Streptomyces orchidaceus Actinomiceto Eritromicina Streptomyces erythreus Actinomiceto Bacteria Gram(+) Estreptomicina Streptomyces griseus Actinomiceto Bacteria Gram(-) Mycobacterium Fumigilina Aspergillus fumigatus Hongo Amebas Griseofulvina Penicillium griseofulvin Hongo Hongos

Algunos Antibiticos Producidos Comercialmente

ANTIBIOTICO

MICROORGANISMO TIPO ESPECTRO DE PRODUCTOR MICROORGANISMO ACCION Bacitracina Bacilus licheniformis Bacteria esporulada Bacteria Gram(+) Cefalosporina Cephalosporium sp. Hongo Amplio espectro Kanamicina Streptomyces kanamycetis Actinomiceto Bacterias Gram(+) Lincomicina Streptomyces lincolnensis Actinomiceto Neomicina Streptomyces fradiae Actinomiceto Amplio espectro Nistatina Streptomyces noursei Actinomiceto Hongos Novobiocina Streptomyces niveus Actinomiceto Bacterias Gram(+) Oleondromicina Streptomyces antibioticus Actinomiceto Estafilococos Oxitetraciclina Streptomyces rimosus Actinomiceto Amplio espectro Penicilina Penicillium chrysogenum Hongo Bacterias Gram(+) Polimixina B Bacillus polymyxa Bacteria esporulada Bacterias Gram(-) Tetraciclina Streptomyces rimosus Actinomiceto Amplio espectro

METODO POR ORDENADOR

Se utiliza este mtodo para el diseo de un medicamento. Se utiliza un ordenador para estudiar los modelos de interaccin entre la diana de un medicamento (por ejemplo: una protena especfica) y una versin modificada de un frmaco conocido. El ordenador puede utilizarse por tanto para escrudar varios frmacos hipotticos, y de hecho, predecir su eficacia. Los compuestos identificados por este camino puede sintetizarse luego mediante modificaciones qumicas o biolgicas de los compuestos existentes y ensayarse para comprobar su efectividad clnica.

METODO DEL RASTREO

Es el principal mtodo por el que fueron descubiertos en el pasado los nuevos antibiticos. En este mtodo se empieza por reunir un gran nmero de cultivos axnicos (puros) de aislamientos de microorganismos posibles productores de antibiticos y luego estos aislamientos se prueban para ver si producen antibitico, observando si producen algn material difusible que sea inhibidor del crecimiento de las bacterias usadas como control. Las bacterias control se seleccionan entre una gran variedad de tipos bacterianos, pero eligiendo que sean representativas de patgenos bacterianos o relacionadas con ellos. El procedimiento clsico para ensayar nuevos aislamientos microbianos es el de siembra en placa, por estra cruzada, utilizado por primera vez por Fleming.

METODO DEL RASTREO

Los aislamientos que presenten evidencia de produccin de antibitico se estudian posteriormente para determinar si los antibiticos que producen son nuevos. Cuando se descubre un productor de un antibitico nuevo, se produce el antibitico en cantidad suficiente para realizar su anlisis estructural y luego se ensaya para determinar su toxicidad y su actividad teraputica en animales infectados..

Aislamiento y seleccin de productores de antibiticos

Mtodo para probar el espectro de actividad antibitica

ETAPAS HACIA LA PRODUCCION COMERCIAL

Un antibitico primero debe ser producido con xito en fermentadores industriales a gran escala. Luego debe desarrollarse mtodos de purificacin eficientes. Debido a que la cantidad de antibitico presente en el lquido de fermentacin son relativamente pequeas, se precisan mtodos de extraccin y purificacin del antibitico muy elaborados. Si el antibitico es soluble en un solvente orgnico que sea miscible con el agua, puede ser relativamente fcil purificar el antibitico, extrayndolo en un pequeo volumen del solvente, concentrando de este modo el antibitico. Si el antibitico no es soluble en un solvente, entonces debe retirarse del medio por adsorcin, por intercambio inico o por precipitacin qumica.

ETAPAS HACIA LA PRODUCCION COMERCIAL

La meta es obtener un producto cristalino de elevada pureza, aunque algunos antibiticos no cristalizan fcilmente y son difciles de purificar. Un problema relacionado es que con frecuencia los cultivos producen otros productos finales, incluidos otros antibiticos, y es esencial acabar este proceso con un producto que sea un nico compuesto qumico. Se puede pedir al qumico que realiza la purificacin que desarrolle mtodos para eliminar los productos colaterales indeseables, pero en algunos casos puede ser necesario que el microbilogo busque cepas que no produzcan estos compuestos qumicos no deseados. Las cepas recin aisladas de la naturaleza, raramente producen el antibitico deseado a una concentracin que permita iniciar inmediatamente la produccin comercial. La meta principal es aislar nuevas Cepas De Alto Rendimiento.

PURIFICACIN DE UN ANTIBITICO
Proceso Completo De Extraccin Y Purificacin

A. Proceso completo de extraccin y purificacin. B. Instalacin para la extraccin, mediante un solvente, del antibitico que est en el caldo de cultivo.

ETAPAS HACIA LA PRODUCCION COMERCIAL

LAS TCNICAS DE INGENIERA GENTICA PERMITEN BUSCAR CEPAS DE ALTO RENDIMIENTO. La tcnica de ampliacin de genes, permite situar copias adicionales de un gen dentro de una clula, mediante un vector como un plsmido. Las alteraciones en los procesos reguladores, tambin permiten incrementar los rendimientos. Una dificultad del uso de procedimientos genticos para aumentar el rendimiento de antibitico es que las vas biosintticas para la sntesis de la mayora de los antibiticos implican gran nmero de pasos con muchos genes, y no est claro qu genes habra que alterar en nmero, para as aumentar los rendimientos.

PRODUCCION INDUSTRIAL

Despus que un antibitico ha sido caracterizado estructuralmente Ha resultado con efectividad mdica en los ensayos sobre animales de experimentacin Resulta suficientemente no txico, y finalmente ha pasado los ensayos clnicos (puede durar varios aos) Est listo para ser producido comercialmente y lanzado al mercado.

Para antibiticos como la penicilina, tetraciclina y la estreptomicina, esta carrera de vallas se super hace mucho tiempo, actualmente, son toneladas de estos antibiticos las que se producen para uso mdico y veterinario.

PENICILINAS

ANTIBIOTICOS --LACTAMICOS La penicilina y sus parientes

La estructura bsica de las penicilinas es el cido 6-aminopenicilnico (6-APA) que consta de un anillo de tiazolidina condensado con un anillo -lactmico. El 6-APA lleva en la posicin 6, una cadena lateral que es variable.

Residuo acilo

Anillo -actmico

Anillo de tiazolidona

Acido 6-aminopenicilnico

Sntesis del Peptiglucano

NAG FOSFOENOLPIRUVICO ANAM AMINOACIDO ANAM-TRIPEPTIDOS D-ALANINA D-ALANINA

ANAM-PENTAPEPTIDOS NAG

NAG-ANAM-PENTAPETIDOS/FOSFOLIPIDO

PARED CELULAR BETALACTAMICOS ENLACES CRUZADOS DE LAS CADENAS DE PEPTIDOGLUCANO

NAG: N-Acetil-Glucosamina ANAM: Acido N-AcetilMuramico ALA: Alanina

Sntesis del Peptiglucano

Mecanismo de accin

Provocar la prdida de un inhibidor de enzimas endgenas que hidrolizan murena (autolisinas), y que normalmente participan en el recambio de la pared celular y en la separacin de las bacterias despus de la divisin celular. La falta del inhibidor de las autolisinas provoca un metabolismo desequilibrado que lleva a la lisis bacteriana.

Mecanismo de accin
El efecto ltico de los -lactmicos se debe a dos factores: Al contener las bacterias una pared celular defectuosa y poca rgida el microorganismo estalla por la entrada de agua que se produce como consecuencia de la alta presin osmtica.

Clasificacin de las penicilinas de acuerdo a su espectro de actividad antimicrobiana

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION
1. PENICILINA NATURAL A. Benzilpenicilina Penicilina G Acido lbil Actividad frente a Gram positiva Sensible a beta-lactamasas

RESIDUO N-ACILO

- CH2 - CO -

B. 2-PENTAPENCILINA (PENICILINA F)

CH3- CH2 - CH = CH - CH2 - CO

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION
C. N-AMILPENCILINA (PENICLINA DIHIDRO F) D. N-HEPTILPENICILINA (PENICILINA K)

RESIDUO N-ACILO

CH3- (CH2)4 - CO -

CH3- (CH2)6 - CO -

E. P-HIDROXIBENCILPENICILINA (PENICILINA X)

- CH2 - CO -

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION
2. PENICILINAS BIOSINTETICAS A. Bencilpencilina (Penicilina G) Acido lbil Sensible a la beta-lactamasa Baja actividad contra bacterias Gramnegativas

RESIDUO N-ACILO

- CH2 - COOH
Ac. fenilactico

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION
2. PENICILINAS BIOSINTETICAS B. Fenoximetilpenicilina Penicilina V Resistente a los cidos Las dems propiedades como la penicilina G relativamente inactivo frente a gonococos y Haemophilus

RESIDUO N-ACILO

- O - CH2 - COOH
Ac. fenoxiactico

C.Alimercaptometilpenicilina H2C=CH-CH2-S-CH2-COOH
(Penicilina O) Acido alimercaptoactico

BENCILPENICILINAS, SUS FORMAS PARENTERALES DE ACCION PROLONGADA Y SUS FORMAS ABSORBIBLES ORALMENTE

Penicilina G (Benzilpenicilina)

300000U IM

0.9 ug/ml

Penicilina V (fenoximetilpenicilina

500 mg VO

3 ug/ml

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION
3. PENICILINA SEMISINTETICAS A. Propicilina Estable en cidos Sensible a la beta-lactamasa

RESIDUO N-ACILO

-O-CH-COH2C-CH2

B. Metilcilina Acido estable Resistente a beta-lactamasas

OCH3 CO OCH3

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION 3. PENICILINA SEMISINTETICAS
C. Oxacilina Acido estable Resistente a beta-lactamasas D. Ampicilina Espectro de actividad ampliado Especialmente frente a bacterias Gramnegativas Acido estable Sensible a beta-lactamasas

RESIDUO N-ACILO

CH-CONH2

ESTRUCTURA DE ALGUNAS PENICILINAS IMPORTANTES

DESIGNACION 3. PENICILINA SEMISINTETICAS E. Carbenicilina Espectro de actividad ampliado Especialmente frente a Pseudomona aeuriginosa. Acido estable pero ineficaz por va oral. Sensible a beta-lactamasas RESIDUO N-ACILO

CH-COCOOH

PENICILINAS RESISTENTES A LAS PENICILINASAS

Meticilina Nafcicilina
2g IM 20 ug/ml

Isoxazolilpenicilinas:
Oxacilina Dicloxacilina Cloxacilina Floxacilina 500 mg IM 15 ug/ml 1 g VO 5 - 10 ug/ml

3. PENICILINAS DE AMPLIO ESPECTRO (AMINOPENICILINAS) ABSORBIBLES ORALMENTE SEMEJANTE A LA PENICILINA

Ampicilina
500 mg VO 3 ug/ml

Amoxicilina
250 mg VO 4 ug/ml

4. PENICILINAS ANTIPSEUDOMONICAS

Carboxipenicilinas:
Carbenicilina 1g VE 100 ug/ml Ticarcilina 4g VE 300 ug/ml Caxfecilina Carindamicina Sulbenicilina.

Acil Ureido Penicilinas Piperacilina Azlocillina Mezlocillina.

5. PENICILINAS COMBINADAS CON INHIBIDORES -LACTAMICOS.

Ticarcilina + Acido Clavulnico (Timentin). Piperacillina + Tazobactam (Zozyn) Amoxicilina + Acido Clavulnico Ampicilina + Sulbactam

6. PENICILINAS RESISTENTES A LACTAMASAS (DE ENTEROBACTERIAS)

Foramidocilina

Es una 6-foraimodopenicilina

Temocilina

Es derivado de la ticarcilina

RESISTENCIA A LOS ANTIBIOTICOS BETALACTAMICOS

DESTRUCCION ENZIMATICA Las enzimas betalactamasas destruyen el anillo betalactmico de forma que el antibitico no puede unirse a las PBP e interferir con la sntesis de la pared celular. Resistencia estafilococica a penicilina. Resistencia de Enterobacteriaceae y P. aeruriginosa a varias penicilinas, cefalosporinas y aztreonam.

RESISTENCIA A LOS ANTIBIOTICOS BETALACTAMICOS

BLANCO ALTERADO Cambios mutacionales en las PBP originales o adquisicin de diferentes PBP que no se unen a betalactmicos con afinidad suficiente como para inhibir la sntesis de la pared celular.
Resistencia estafilococica a meticilina y otros betalactmicos disponibles.

Resistencia de Streptococcus pneumoniae y S. Viridans a penicilina y cefalosporinas.

RESISTENCIA A LOS ANTIBIOTICOS BETALACTAMICOS

CAPTACION DISMINUIDA Cambios en el nmero o las caractersticas de los canales de porinas (a travs de los que los betalactmicos atraviesan la membrana externa para alcanzar la PBP de las bacterias gramnegativas) de forma que la captacin de betalactmicos disminuye en grado sustancial. Resistencia de P. aeruginosa al imipinem.

MICROORGANISMOS GRAMPOSITIVOS

RESISTENCIA MEDIADA POR LA PRODUCCIN DE BETALACTAMASAS Y LA ALTERACIN DE LOS BLANCOS DE PBP.

MICROORGANISMOS GRAMNEGATIVOS

RESISTENCIA MEDIADA POR LA DISMINUCIN DE LA CAPTACIN A TRAVES DE LAS PORINAS. POR LA PRODUCCIN DE BETALACTAMASAS ALTERACIN DE LOS BLANCOS

REACCIONES ADVERSAS DE LA PENICILINA

Reaccin de hipersensibilidad o alrgicas Trastornos gastrointestinales Aumento reversible de transaminasas Trastornos hematolgicos Hipopotasemia: Nefritis Intersticial Encefalopata

ESTRUCTURAS BSICAS DE LOS ANTIBITICOS BETA-LACTMICOS QUE SE ENCUENTRAN DE FORMA NATURAL Y PRINCIPALES ORGANISMOS QUE LOS PRODUCEN.
ESTRUCTURA ANTIBITICOS BASICA Penema Pencilinas ESPECIE PRODUCTORA
Penicillium chrysogenum Aspergillus nidulans Cephalosporium acremonium Streptomyces clavuligerus

ANTIBIOTICOS --LACTAMICOS

Si la fermentacin de la penicilina se realiza sin la adicin de precursores de la cadena lateral, se producen las PENICILINAS NATURALES tales como la bencil penicilina (Penicilina G). La fermentacin puede estar mejor controlada si se aade al caldo de un precursor de la cadena lateral, de manera que as slo se produzca la penicilina deseada. El producto formado bajo estas condiciones se conoce como una PENCILINA BIOSINTENTICA.

ANTIBIOTICOS --LACTAMICOS

Para producir penicilinas ms tiles, con actividad frente a bacterias Gram negativas, suele utilizarse una fermentacin combinada con un procedimiento qumico, lo cual conduce a la produccin de PENICILINAS SEMISINTETICAS. La benzil penicilina producida microbiolgicamente se rompe, bien qumicamente o enzimticamente, para tener cido 6-APA y ste ltimo modificado por la adicin de una cadena lateral. Las penicilinas semisintticas poseen muchas ventajas clnicas importantes en cuanto a su espectro de actividad, por ejemplo: la ampicilina, puede tomarse por va oral y por tanto no requiere una inyeccin. Por estas razones, las penicilinas semisintticas constituyen hoy el grueso del mercado de la penicilina.

PRODUCCION INDUSTRIAL DE PENICILINAS

La fermentacin normal conduce a las pencilinas naturales, Si durante la fermentacin se aaden precursores especficos,

METODOS PARA LA PRODUCCION DE PENICILINA

METODO DE SUPERFICIE
METODO DE FERMENTACION SUMERGIDA

FASES DE FABRICACION
Fermentacin

Separacin del micelio del caldo fermentado y extraccin de la penicilina por medio de disolventes. Purificacin con disolventes y formacin de la sal sodica de la penicilina. Ensayos de control, almacenamiento y venta.

MTODOS DE PRODUCCIN PARA ANTIBITICOS -LACTMICOS

La penicilina G se produce utilizando un proceso de fermentacin sumergida en fermentadores de 40,000 a 200,000 litros. La produccin de penicilina es un proceso altamente aerbico y es necesaria una eficiente aireacin. La penicilina es un metabolito secundario tpico. Durante la fase de crecimiento (trofase) se produce muy poca penicilina, pero una vez que casi se ha agotado la fuente de carbono (idiofase), empieza la fase de produccin de penicilina. Alimentndola con varios componentes del medio de cultivo, la fase de produccin puede alargarse durante varios das.

LA FORMACIN DE PENCILINA POR EL HONGO PENICILLIUM CHRYSOGENUM

Concentracin de Azcar o de Penicilina, o nmero de clulas

Se muestra la separacin entre la fase de crecimiento (trofase) y la fase de produccin (idiofase). La mayora del producto se produce despus de que el crecimiento ha entrado en la fase estacionaria.

MTODOS DE PRODUCCIN PARA ANTIBITICOS -LACTMICOS

La penicilina, producida por el Penicillium chrysogenum, un hongo que puede cultivarse en fermentadores con agitacin, constituye un ejemplo magnfico de fermentaciones en la que se aplica el ajuste cuidadoso de la composicin del medio para lograr producciones mximas. La produccin rpida de clulas, que puede ocurrir cuando se utilizan niveles elevados de glucosa como fuente de carbono, no conduce a las producciones mximas de antibitico. El aporte del disacrido lactosa, lentamente hidrolizado, junto con una disponibilidad de nitrgeno limitada, estimulan una mayor acumulacin de penicilina una vez que el crecimiento se ha detenido. El mismo resultado puede lograrse utilizando un alimentacin continua pero lenta de glucosa.

MTODOS DE PRODUCCIN PARA ANTIBITICOS -LACTMICOS

Si se necesita una penicilina concreta, se aade al medio el precursor especfico. Por ejemplo, el cido fenilactico se aade para potenciar al mximo la produccin de bencilpenicilina, que tiene una cadena lateral bencilo. Este proceso direccional se utiliza para lograr una produccin mxima de los compuestos deseados. El pH del medio se mantiene alrededor de la neutralidad mediante la adicin de lcalis, que aseguran la estabilidad mxima de la penicilina recin sintetizada. Despus de 6 0 7 das la incubacin se ha completado. El caldo se separa del micelio fngico Luego el caldo filtrado se extrae el antibitico con acetato de amilo o de butilo. Se procesa mediante adsorcin, precipitacin y cristalizacin para producir penicilina altamente purificada. Uno de los componentes principales del medio de produccin de penicilina es el licor de maceracin del maiz(contienen la fuente de nitrgeno as como factores de crecimiento). La fuente de carbono es generalmente la lactosa.

CINTICA DE LA FERMENTACIN DE LA PENICILINA CON PENICILLIUM CHRYSOGENUM

Observese que la produccin de penicilina tiene lugar cuando las clulas estn entrando en la fase estacionaria y la mayor parte del carbono y del nitrgeno se han agotado. Reponer nutrientes hace que se mantenga alta la produccin de penicilina.

Biomasa (g/l) carbohidratos, sales de amonio, penicilina (g/l x 10)

EL ACIDO CLAVULANICO
El cido clavulnico es de especial intres porque aunque por s mismo no es muy activo como antibitico, inhibe la actividad de las -lactamasas. Estas enzimas son producidas por ciertas bacterias y funcionan destruyendo los antibiticos -lactmicos, hacindolos infectivos para el tratamiento de las enfermedades. Por ello, cuando se usa en combinacin con penicilinas y cefalosporinas sensibles a las -lactamasas, el cido clavulnico hace que aumente notablemente la actividad de estos antibiticos.

CEFALOSPORINAS

LAS CEFALOSPORINAS
Son antibiticos -lactmicos que se contienen una dihidrotizina en lugar de un sistema de anillo de tiazolidona. Las cefalosporinas se descubrieron por primera vez como productos del hongo Cephalosporium acremonium, pero otros muchos hongos producen tambin antibiticos con este sistema de anillo. Adems se produce un gran nmero de cefalosporinas semisintticas. Las cefalosporinas son valiosas clnicamente, no slo a causa de su baja toxicidad, sino tambin porque son antibiticos de amplio espectro. El intenso rastreo en busca de nuevos antibiticos -lactmicos ha conducido al desarrollo de compuestos cuyas estructuras son diferentes tanto de las penicilinas como de las cefalosporinas. Dentro de esta categora estn la nocardicina, el cido clavulnico y la tienamicina.

Estructuras bsicas de los antibiticos beta-lactmicos que se encuentran de forma natural y principales organismos que los producen.
ESTRUCTURA ANTIBIOTICOS BASICA 1. CEFEMA Cefalosporinas ESPECIES PRODUCTORAS Cephalosporium acremonium Nocardia lactamdurans Streptomyces clavuligerus

Estructuras bsicas de los antibiticos beta-lactmicos que se encuentran de forma natural y principales organismos que los producen.
ESTRUCTURA ANTIBIOTICOS BASICA 2. CLAVAMA Ac. clavulanicos ESPECIES PRODUCTORAS Streptomyces clavuligerus

Estructuras bsicas de los antibiticos beta-lactmicos que se encuentran de forma natural y principales organismos que los producen.
ESTRUCTURA ANTIBIOTICOS BASICA 3. CARBAPEMADA ESPECIES PRODUCTORAS

Tienamicinas Streptomyces clavuligerus Ac. olivanicos Streptomyces olivaceus Epitenamicinas Streptomyces clavuligerus

Estructuras bsicas de los antibiticos beta-lactmicos que se encuentran de forma natural y principales organismos que los producen.
ESTRUCTURA ANTIBIOTICOS BASICA 4. MONOLACTAMA Nocardicinas ESPECIES PRODUCTORAS Nocardia uniformis subsp. Tsuyamanesis

Estructuras bsicas de los antibiticos beta-lactmicos que se encuentran de forma natural y principales organismos que los producen.
ESTRUCTURA ANTIBIOTICOS BASICA 4. MONOLACTAMA Monobactamas ESPECIES PRODUCTORAS Gluconbobacter sp. Chromobacterium violaceum Agrobacterium radiobacter Pseudomonas acidophila Pseudomona mesoacidophila Flexibacter sp. Acetobacter sp.

AMINOGLUCOSIDOS

ESTRUCTURA QUIMICA Y PROPIEDADES GENERALES

Qumica Estn formados por una base nitrogenada unida a aminoazcares. Destacan: Esreptomicina. Neomicina. Gentamicina. Tobramicina. Amikamicina.
Propiedades generales comunes Tienen carcter bsico. Tienen efecto bactericida. Necesidad de la presencia de O2 en el medio para entrar en la clula. Farmacocinticas: no se aborben intestinalmente (admin. por va parenteral). Se eliminan por filtracin glomerular. Riesgo de Nefrotoxicidad (Gentam.) y Ototoxicidad (Estrept.).

PRODUCCION DE AMINOGLUCOSIDOS

La estreptomicina es un metabolito secundario producido por Streptomyces griseus, para el que los cambios en las condiciones ambientales y en la disponibilidad del sustrato tambin influyen en la acumulacin del producto final. En ese proceso se utiliza un medio basado en semillas de soja con glucosa como fuente de carbono. Por lo tanto, la fuente de nitrgeno se encuentra en forma combinada (harina de soja), lo que limita el crecimiento. Los niveles de antibitico en el cultivo comienzan a aumentar tras el crecimiento en condiciones de limitacin controlada de nitrgeno.

PRODUCCIN DE ESTREPTOMICINA POR STREPTOMYCES GRISEUS.

La produccin de estreptomicina por la bacteria Streptomyces griseus es un proceso extremadamente complejo. Sin embargo, una de las ms interesantes caractersticas de al sntesis de estreptomicina es su regulacin. Las tres partes de la molcula de la estreptomicina se sintetizan por vas bioqumicas separadas y las subunidades se juntan al final. El intermediario final de la va, la estreptomicina P, es biolgicamente inactiva pero se vuelve activa despus de la eliminacin del fosfato.

BIOSNTESIS DE LA ESTREPTOMICINA

Las tres vas que conducen a los precursores de la estreptomicina: Estreptidina, Estreptosa y N-metilglucosamina

BIOSNTESIS DE ESTREPTOMICINA
Las tres vas que conducen a los precursores de la estreptomicina: Estreptidina, Estreptosa y N-metilglucosamina.

BIOSNTESIS DE ESTREPTOMICINA

La estreptomicina se sintetiza como un tpico metabolito secundario. Un aspecto de la regulacin implica la produccin de un inductor llamado Factor A. El factor A no est qumicamente relacionado con la estreptomicina, sino que est implicado en el metabolismo de los hidratos de carbono.
Estructura del Factor A de Streptomyces griseus

Las enzimas clave de la sntesis de estreptomicina no se sintetizan hasta que hay una cierta concentracin del Factor A, lo que explica cmo podra funcionar esta sustancia como desencadenante del metabolismo secundario.

BIOSNTESIS DE ESTREPTOMICINA

Durante la fase de crecimiento, el Factor A es excretado y gradualmente se va acumulando en el medio. Sin embargo, hasta que la concentracin del Factor A no alcanza un valor crtico, no se induce la sntesis de las enzimas clave de la biosntesis de la estreptomicina. El factor A no es en s mismo un precursor de la 447 estreptomicina, como muestra su estructura y el hecho de que la Adicin de muy pequeas cantidades de Factor A puro, 1 ug, a cultivos de un mutante Factor A negativo, puede conducir a la produccin de ms de 1g de estreptomicina. Aunque otros procesos reguladores son importantes en la biosntesis de la estreptomicina, el Factor A es un importante rasgo caracterstico del control.

MECANISMO DE ACCION

Inhiben la sntesis proteica actuando sobre la unidad 30s de los ribosomas. A pesar de actuar sobre la sntesis proteica, por lo que se tendera a clasificar como bacteriostticos, su efecto es tan potente y de forma irreversible en la subunidad 30S, que son considerados como bactericidas.

RESISTENCIA

Produccin de enzimas inactivantes, en plsmidos. 13 enzimas. Ej.: fosfotransferasas, acetilasas y adenilasas. Disminucin de la entrada del antibitico. Alteracin de las protenas ribosmicas diana.

ESPECTRO ANTIBACTERIANO E INDICACIONES

Espectro Antibacteriano Bacilos Gram- aerobios. Sinergismo con penicilinas. Ej.: ampicilina + gentamicina. Estreptomicina Vs. Mycobacterium tuberculosis. Indicaciones Sepsis de origen desconocido, urinario (Gentamicina), biliar o intestinal. Fiebre en pacientes neutropnicos (Pseudomonas). Infecciones por Pseudomona aeruginosa (Tobramicina). Infecciones severas donde ya han fracasado otros antibiticos. (Amikacina).

Efectos Adversos

Nefrotoxicidad: elevacin de la creatinina y la urea. Es reversible. Conveniente controlar la dosis del medicamente. El ms nefrotxico: Gentamicina. Ototoxicidad: alteran neuronas sensitivas de las ramas coclear y/o vestibular del VIII par craneal. Generalmente reversible. El ms ototxico: Estreptomicina.

TETRACICLINAS

Tetraciclinas Clorotetraciclina Demeclociclina Doxiciclina Limeciclina Metaciclina Minociclina Oxitetraciclina Rolitetraciclina Tetraciclina

MECANISMO DE ACCION

Las tetraciclinas, que son bacteriostticas, se unen reversiblemente a la subunidad 30S. Las tetraciclinas inhiben la sntesis de protenas al evitar que el aminoacil-ARNt entre en las zonas aceptoras del ribosoma. Es accin no es selectivamente txica para los procariotas. Las tetraciclinas inhiben la sntesis de protenas sin clulas que contienen ribosomas humanos. La accin selectiva de las tetraciclinas se basa en que las bacterias la captan mucho ms que las clulas humanas.

INDICACIONES

Los antibiticos de tetraciclina se usan para tratar ciertas infecciones como la clamidia, como tambin para el tratamiento de largo plazo del acn. Quelantes de cationes divalentes (calcio, magnesio, hierro, etc.) Actan fundamentalmente como bacteriostticos a las dosis habituales, aunque resultan bactericidas para algunos estreptococos. Provocan una inhibicin de la sntesis protica en el ribosoma de la bacteria.

PRODUCCIN DE TETRACICLINAS

La biosntesis de una tetraciclina implica un gran nmero de pasos enzimticos. En el caso de la clorotetraciclina pueden estar implicados hasta 72 productos intermediarios, la mayora de los cuales se conocen de forma muy general. Los estudios sobre gentica de Streptomyces aureofaciens, el productor de la clorotetraciclina, han mostrado que estn implicados ms de 300 genes. La regulacin de la biosntesis de este antibitico es muy compleja. Se conocen unas cuantas seales reguladoras y los esquemas de produccin estn bien establecidos.

PRODUCCIN DE TETRACICLINAS

La glucosa como el fosfato producen represin de la sntesis de clorotetraciclina. La represin por fosfatos es especialmente importante y por ello, el medio que se utiliza para la produccin comercial, contiene bajas concentraciones de fosfato. Se usa licor de maceracin de maz, para la produccin a gran escala de clorotetraciclina y que se evita el uso de glucosa; La produccin de clorotetraciclina se realiza de forma tpica, con sacarosa como fuente de carbono. Se evita la glucosa porque causa represin catablica de la produccin del antibitico.

ESQUEMA DE LA PRODUCCIN DE CLOROTETRACICLINA CON STREPTOMYCES AUEROFACIENS

MACROLIDOS

ANTIBIOTICOS MACROLIDOS

Los antibiticos macrlidos contienen grandes anillos lactona conectados a fragmentos de azcares. Se conoce variacin tanto en el anillo macrlido como en la porcin azcar porque hay varios antibiticos macrlidos. El antibitico macrlido mejor conocido es la ERITROMICINA, pero otros macrlidos incluyen la OLEONDOMICINA, la ESPIRAMICINA y la TILOSINA.

ANTIBIOTICOS MACROLIDOS

La complejidad de los antibiticos macrlidos es evidente a partir de su estructura. Se conocen ms de 25 etapas enzimticas nicas que intervienen en la biosntesis de la eritromicina. La regulacin de la bosntesis se efecta de varias formas. Se sabe que la inhibicin por glucosa y fosfato, y que el eritronlido B, uno de los productos intermedios en la biosntesis de la eritromicina, inhibe su propia produccin. Tambin se sabe que ocurre una inhibicin del producto final por la eritromicina misma, sobre ciertas enzimas clave.

La eritromicina, un agente bacteriosttico, se une reversiblemente a la subunidad 50S ribosmica. La eritromicina se une al 23S ARNr en la subunidad 50S del ribosoma y bloquea el paso de la traslocacin en la sntesis de protenica, lo que evita la liberacin del ARNt despus de la foramcin del enlace peptdico.

MACROLIDOS MECANISMO DE ACION

INDICACIONES

La eritromicina se utiliza clnicamente, en lugar de la penicilina, en pacientes alrgicos a la penicilina u otros antibiticos beta-lactmicos. La eritromicina ha sido particularmente valiosa en el tratamiento de la legionelosis, por su sensibilidad del agente causal, la bacteria Legionella pneumophila, a ese antibitico.

Aislamiento y seleccin de productores de antibiticos

Utilizando medios selectivos para Streptomyces e identificacin de los productores de antibitico usando un organismo indicador. Se observa que la mayora de colonias son de Streptomyces y algunas estn producindo antibiticos, como indican las zonas de inhibicin del crecimiento del organismo indicador (Staphylocococcus aureus) en torno a algunas colonias.

Mtodo para probar el espectro de actividad antibitica

El productor (una especie de Sreptomyces) se sembr por estra a travs de un tercio de la placa y se incub la placa. Despus de obtenido un buen crecimiento, las bacterias de prueba se sembraron por estra perpendicularmente al Streptomyces y se incub nuevamente la placa. La incapacidad de varios organismos para crecer cerca de la masa de crecimiento del Streptomyces ha producido un antibitico activo contra estas bacterias, Los organismos de prueba de izquierda a derecha son: E. coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Mycobacterium smegmatis.