Cintica enzimtica

Estudio cuantitativo del cambio en la concentracin (sustrato o producto) en funcin del tiempo, provocado por una reaccin qumica catalizada por una enzima.

Para estudiar las propiedades catalticas de las enzimas, stas deben ser estudiadas cuando estn actuando.
Para hacer esto, la enzima se mezcla con el o los sustratos bajo condiciones adecuadas de pH y temperatura y se mide la velocidad de desaparicin del sustrato o la velocidad de formacin del producto. La velocidad del cambio es ms importante para aprender el mecanismo de accin de la enzima.

La disminucin en la concentracin del sustrato es una funcin lineal del tiempo.

120 100 [S] remanente (%) 80 60 40 20 0 0 10 20 30 40 50 60 70 Tiem po (m in)

C B A

Velocidad de reaccin
Disminucin de la concentracin de uno de los reactantes en la unidad de tiempo Velocidad = -d[A]/d t

Constante de velocidad

Rapidez de cambio en la concentracin de reactante o producto con el tiempo para una reaccin dada

dx = k F (a, b, c, .....) dt
Donde:

k es la constante de velocidad y

a, b, c, ... representan las concentraciones de los reactantes

Para cualquier reaccin en particular, el valor de k es constante a una temperatura y presin dadas y resulta una medida cuantitativa conveniente de reactividad qumica

Caractersticas de k Es una entidad completamente experimental la cual puede medirse sin que sea necesario conocer el mecanismo de la reaccin.
Es por completo independiente de la estequiometra de la reaccin. No puede obtenerse por simple inspeccin de la ecuacin qumica de la reaccin.

Escribiendo ecuaciones de velocidad Reacciones irreversibles A

k1

dA = k1 [A] dt

dP = k1 [A] dt

dA dP - dt = = k1 [A] dt

La ecuacin muestra que la rapidez de formacin del Producto es proporcional a la concentracin de sustrato.

Reacciones reversibles k1 A P k-1

dA = k1 [A] - k-1 [P] = d P dt dt

- d A = 0,
dt

dP =0 dt

Por tanto

k1 [A] - k-1 [P] = 0

k1 [A] = k-1 [P]

rearreglando

k1 k-1

[P] [A]

= Keq

La ecuacin muestra que la relacin de las dos constantes de velocidad especficas de las reacciones k1 y k-1 pueden ser definidas como una nueva constante, llamada constante de equilibrio.

E + A

k1 k-1

EA

k2

E + P

dE = k1 [E] [A] k-1 [EA] k2 [EA] dt dA = k1 [E] [A] k-1 [EA] dt d EA = k-1 [EA] + k2 [EA] - k1 [E] [A] dt dP = k2 [EA] dt

2A + B

k1 k-1

3P

1 2

dA dt

= k1 [A]2 [B] - k-1 [P]3

dB = k1 [A]2 [B] - k-1 [P]3 dt

1 dP 3 dt

= k1 [A]2 [B] - k-1 [P]3

aA + bB

k1 k-1

pP + qQ

dA = dt

k [A]a [B]b [C]c ..

El orden de la reaccin es la suma de los exponentes a, b, c, ..

Leyes de rapidez de cambio Ley de velocidad

Ecuacin que relaciona la velocidad de reaccin con las concentraciones de reactivos. Generalmente son ecuaciones diferenciales

Orden de reaccin El trmino orden se utiliza en matemticas para la clasificacin de las ecuaciones diferenciales. En cintica estas ecuaciones se clasifican segn el orden de reaccin. Se define como la suma de los exponentes de los trminos de concentracin que aparecen en la forma diferencial de la ley de velocidad.

Leyes tpicas de velocidad

Ley de velocidad dx/dt = k (a x) 0 = k dx/dt = k (a x) dx/dt = k (a x) 2 dx/dt = k (a x) (b x) dx/dt = k (a x) (b x) 2 Orden 0 1 2 2 3

Ley de velocidad de orden cero

Este proceso se caracteriza por la rpidez de desaparicin del sustrato (o rapidez de formacin del producto) de forma independiente de la concentracin del sustrato

A
dA dP k = = dt dt

k
A A0

P
t t0

- d A =k d t

- ([A] [A0]) = k t k t0 y

Donde

t0 = 0 k t0 = 0

[A0] [A] = k t = [P]

k t = [P]

Proceso de primer orden

30

20 [P] M 10

m = k (M seg-1)

0 0 5 10 15 20 25 T ie m p o (s e g )

Proceso de primer orden Se caracteriza por una rapidez de formacin de producto dependiente de la concentracin de sustrato. A

dA dP = k [A] = dt dt

d A/[A] k =d t
A0

t0

Proceso de primer orden -(ln [A] ln [A0] = k t k t0 t0 = 0

k t = 2.3 log [A0] ln = [A] [A]

2.3 log [A0] [A] [P] =kt

[A0]

Proceso de primer orden

4 2.3 log [Ai]/[A] 3 2 1 0 0 3 6 9 Tiem po (sec) 12 15 18

m = k (seg-1)

Proceso de segundo orden A+B

dB dA = d P = k [A] [B] =dt dt dt

Experimentalmente se pueden distinguir tres tipos de reacciones de segundo orden

Proceso de segundo orden Tipo I

A

dA = k [A]2 dt

d [A]
A0

= k

d t
t0

1 -

1 + 1 [A] [A0]

)=

k t - k t0 = k t
[P] [A0] ( [A0] [P])

Cuando t0 = 0

[A0] - [A] [A] [A0]

=kt=

Proceso de segundo orden Tipo I

4 3 2 1 0 0 3 6 9 12 15 18 T ie m p o (s e c)
m=k

[Ai] - [A]/[A] [Ai]

Tiempo de vida media El tiempo de vida Media, t de la reaccin puede ser calculado usando la relacin [A] = [A0] t = 1 k [A0]

La vida media de una reaccin de segundo orden (tipo I) depende de la concentracin inicial de sustrato, mientras que la vida media de una reaccin de primer orden no.
Esto proporciona un mtodo experimental sencillo para distinguir entre ambos.

Proceso de segundo orden Tipo II Dentro de este tipo, estn aquellas reacciones donde Las concentraciones iniciales de los sustratos A y B no son iguales pero si muy similares. En trminos prcticos es cuando la relacin de [B]/[A] > 1 < 20. La velocidad de reaccin es de primer orden con respecto a cada uno de los sustratos.

Tipo II

dA = k [A] [B] = k [A] ( [B0] [A0] + [A] dt

d A/ { [A]
A0

([B0] [A0] + [A])} = k d t

t0

2.3 [B0] [A0]

log

[A0] [B] [B0] [A]

=kt

Tipo II Dado que la [B] = [B0] [P] y la [A] = [A0] [P] La ecuacin se puede escribir en trminos de concentraciones iniciales de productos y sustratos.
2.3 [B0] [A0]

log

[A0] ([B0] [P] [B0] ([A0] [P]

=kt

Tipo II
6 5 2.3/[Bi] [Ai] log X 4 3 2 1 0 0 5 10 15 Tiempo (seg) 20 25 30

m=k

X=

[A0] ([B0] [P] [B0] ([A0] [P]

Tipo III Es aquella reaccin en la cual [B0] /[A0] es > 20 en trminos prcticos la concentracin de B permanece constante a travs del tiempo de reaccin, por lo tanto la reaccin es de primer orden con respecto a A y los datos se analizan de acuerdo a la ecuacin descrita anteriormente. 2.3 log [A0] [A] [P] =kt

Molecularidad versus orden de reaccin

La molecularidad refleja el nmero de especies de sustrato involucradas en la ecuacin estequiomtrica, mientras que el orden es la dependencia de la concentracin de dichas especies, determinada experimentalmente.

Rapidez de las reacciones catalizadas por enzimas La velocidad de la reaccin siempre depender de la concentracin de enzima