Sunteți pe pagina 1din 19

DIAGNOSTIC DE LABORATOR IN HEPATITE DE ETIOLOGIE VIRALA

ORIENTAREA DIAGNOSTICA IN HEPATITE


1. Tablou clinic 2. Teste biochimice
Markerii necrozei hepatocitare (transaminaze, LDH) Markeri colestaza (FAL, GGT, bilirubina) Markeri ai incapacitatii de sinteza la nivel hepatic (proteine serice, colesterol, trigliceride)

3. Date epidemiologice: cale transmitere, contact infectant, per. incubatie, vaccinuri 4. Diagnostic etiologic = detectia markerilor virali:
antigene virale (Ag) anticorpi antivirali (Ac) acid nucleic viral

Diagnostic V.H.B.

ANTIGENE VHB

Sisteme antigenice VHB


Ag HBs Ag HBc Ag HBe Ac antiHBS Ac antiHBc Ac antiHBe

Semnificatia markerilor de hepatita B


Antigenul HBs, markerul cel mai precoce al infectiei VHB, persista in cursul hepatitei acute si in prima parte a convalescentei. Prezenta sa dupa mai mult de 6 luni indica hepatita cronica persistenta sau activa. Anticorpii anti HBc IgM apar in cursul bolii acute si se transforma apoi in anticorpi anti HBc IgG care persista indefinit in serul pacientilor indicand o infectie trecuta sau prezenta (semnul de trecere prin boala). Cel mai bun marker serologic de infectivitate este considerat antigenul HBe este pozitiv in hepatita acuta B, dar si in hepatita cronica agresiva B. Prezenta anticorpilor anti HBe semnifica infectie VHB in curs de vindecare. Testarea existentei imunitatii impotriva VHB se realizeaza prin detectia anticorpilor antiHBs (marker de vindecare- in prezenta anticorpilor anti HBc IgG pozitivi sau de vaccinare- in absenta anticorpilor anti HBc IgG .

Hepatita B Hepatita acuta Hepatita cronica persistenta Hepatita cronica agresiva


Ciroza hepatica Carcinom hepato-celular ALGORITM

Infectia acuta cu VHB

evolutie spre vindecare


Simptome AgHBe ADN/VHB anti-HBe

anti-HBc totali

AgHBs

anti-HBc IgM

anti-HBs

12 16 20 24 28 32 36

52

100

Saptamini post expunere

Infectia cronica cu VHB


Acute (6 months) HBeAg HBsAg Total antiHBc Chronic (Years) anti-HBe

IgM anti-HBc

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36

52

Years

Weeks after Exposure

Tehnica ELISA sandwich

ELISA de detectie a Ag virale

(godeuri peliculizate cu anticorpi monoclonali specifici (Mab) impotriva Ag ce urmeaza a fi detectat)

1. Incubare ser pacient 1h la 37C 2. Spalare 3. Incubare CONJUGAT (al 2lea Mab specific impotriva Ag ce urmeaza a fi detectat) 60min la 37C 4. Spalare 5. Incubare SUBSTRAT 20 min la t.camerei 6. Solutie de stopare 7. Citire la spectrofotometru => D.O., MN, MP, C.O. SUBSTRAT CONJUGAT =Anti HBs cuplat cu o enzima

Ag HBs Anti HBs

Distribuirea probelor cu pipeta automata

Spalator automat

Spectrofotometru

Diagnostic V.H.D.

Hepatitis D Virus

RNA

Coinfectia HBV - HDV


Symptoms ALT Elevated

Titru
IgM anti-HDV + IgM anti HBc HDV RNA HBsAg

anti-HBs

Total antiHDV

Timp dupa expunere

Suprainfectia HBV - HDV


Jaundice Symptoms ALT anti-HDV + anti HBc IgG

Titre

HDV RNA HBsAg IgM anti-HDV Timp dupa expunere

Diagnostic V.H.A.

EVOLUTIA MARKERI DE INFECTIE VHA

HEPATITA A NU CRONICIZEAZA!!
simptomatologie

ALT IgM Viremie Infectie VHA in MF

IgG

saptamana

10

11

12

13

Diagnostic hepatita acuta A = detectie Ac anti VHA IgM (ELISA de captura)

ELISA de captura
pentru detectia clasei de anticorpi
ETAPE
1. Incubare ser pacient 1h la 37C

Ag marcat enzimatic = conjugat


IgM

2. Spalare 3. Incubare conjugat 30 min la 37C 4. Spalare 5. Incubare substrat 20 min la t. camerei

Anti-IgM

6. Citire la spectrofotometru