Carlos Ivn Camargo, Harold R. Arias Cardona, Jos A. Amaya Pinzn, Wilson A.

Crdenas Contreras

La Filariasis Linftica Humana

Es la mayor enfermedad parasitaria en pases tropicales y sub-tropicales. Especialmente elefantiasis causada por el nematodo Brugia malayi, afecta a 120 millones de personas en todo el mundo y est reconocida como la segunda principal causa de discapacidad permanente y de larga duracin. Aparte de la incapacidad fsica, tambin supone un grave problema psicosocial. Los expertos resaltan que la lucha contra la Filariasis, es tambin una lucha contra la pobreza y la discriminacin social a la que va ligada.

La Filariasis Linftica Humana

Est causada por un parsito, el gusano de la filaria, parsito adulto con forma de filamento (Wuchereria bancrofti, B. malayi o B. timori), que vive casi exclusivamente en los seres humanos. Dicho parsito se aloja en el sistema linftico, en la red de nudos y vasos que mantienen el balance de flujo entre los tejidos y la sangre. Algunos estudios han indicado que los gatos domsticos serviran como husped natural (reservorio) de B. malayi. El 4.3 % de gatos domsticos (positiva para microfilarias), en zonas endmicas al sur de Tailandia

Brugia malayi

Se transmite a travs de mosquitos (vector). El parsito tiene periodicidad nocturna. Horas pico de microfilaremia entre 12 PM y 2 AM. Esto corresponde con las horas pico de picadas del mosquito vector. Los parsitos adultos viven 5 aos o ms y las hembras fertilizadas liberan microfilarias superior a 10.000 por da.

La Filariasis Linftica Humana

ANATOMA PATOLGICA: Los gusanos adultos que viven en los vasos y ganglios linfticos, producen dilatacin linftica y engrosamiento de las paredes vasculares. La infiltracin por clulas plasmticas, eosinfilos y macrfagos de los vasos infectados y las reas vecinas, as como la proliferacin del tejido conjuntivo y del endotelio, producen tortuosidad de los vasos linfticos y lesin o incompetencia de las vlvulas linfticas ( se compromete la funcin linftica).

La Filariasis Linftica Humana

MANIFESTACIONES CLNICAS: La mayora de los pacientes permanecen asintomticos durante aos. Las manifestaciones consisten en microfilaremia asintomtica (o subclnica), hidrocele, linfangiadenitis aguda [caracterizada por fiebre alta, inflamacin linftica (linfangitis y linfadenitis) y edema local transitorio.], y enfermedad linftica crnica.

TRATAMIENTO: La Dietilcarbamazina (DEC, 6 mg/kg al da durante 12 das), que posee propiedades tanto macro como microfilaricidas (tratamiento ms adecuado para los pacientes con filariosis linftica aguda). Un tratamiento alternativo es Albendazol (400 mg cada 12 h por 21 das), menor eficacia macrofilaricida que la de DEC. La Ivermectina es usado como un frmaco antiparasitario de amplio espectro contra nematodos y artrpodos en animales y humanos. La ivermectina tambin posee una potente actividad microfilaricida contra Wuchereria bancrofti y B. malayi en humanos

IVERMECTINA

La ivermectina es una lactona macrocclica y un producto de la fermentacin de un actinomiceto, especficamente es obtenida del hongo Streptomices avermitilis. Tiene uso amplio en Medicina Veterinaria (eficaz contra la mayora de los caros y piojos; es tambin un nematocida de amplio espectro). La ivermectina paraliza a los parsitos potenciando la accin de un neurotransmisor inhibitorio, el cido gamma aminobutrico (GABA), sustancia que contribuye a regular la transmisin desde las neuronas motoras a las clulas musculares de los endo y ectoparsitos sensibles.

ANIMALES EXPERIMENTALES
HEMBRAS

MACHOS

Mali (05) 2 aos 2.6 kilos

Dum (01) 1.5 aos 2.8 kilos

Jenny (06) 3 aos 3.15 kilos

Moki (02) 3,30 aos 3,30 kilos

Tam (07) 2.5 aos 2.55 kilos

Num (03) 1.5 aos 2.7 kilos

Tua lek (08) 1.5 aos 2.8 kilos

Platoo (04) 2.5 aos 3.10 kilos

CONDICIONES DEL EXPERIMENTO

Cuatro gatos machos y cuatro gatos hembras, Felis catus. Rango de peso: 2,5 3,1 kg. Temperatura controlada 2520C Humedad relativa de 505%. Ciclos de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad. Los animales se aclimataron tres semanas antes del experimento.

Fueron alimentados con grnulos de comida para animales y agua segn su apetito. Los animales recibieron la vacuna contra la rabia. Fueron purgados con una dosis simple de Albendazol. Los investigadores se cercioraron de que los animales estuvieran libres de microfilaremia.

DESPUES DE LA ADMINISTRACIN DEL FRMACO: Los animales se observaron durante todo el experimento buscando efectos adversos como comportamiento anormal, ataxia, letargo, debilidad y temblores.

CONTROL DE LOS ANIMALES SANOS:

Para este control se tuvieron en cuenta exmenes fsicos y de laboratorio:
Carga parasitaria. Hemograma completo. Pruevas de qumica sanguneas: SGOT(Serum glutamic oxaloacetic transaminase), SGPT (Serum glutamic pyruvic transaminase) , Fosfatasa Alcalina, BUN (Blood Urea Nitrogen) y Creatinina.

Sangre 50 L

Tincin de Giemsa (Microscopa ptica) Portaobjetos de vidrio lmpio.

2.2. ADMINISTRACIN DEL FRMACO Y MUESTREO SANGUNEO.

Las muestras de sangre (3 mL) fueron extradas de la vena yugular externa a las 1, 12 y 24 horas ; 2, 3, 4, 5, 7, 9, 11, 15, 20, 25 y 30 das despus de la administracin del frmaco.
las muestras se dejaron coagular a temperatura ambiente durante 60 min, y centrifugadas a 3000 g por 20 minutos para separar el suero que fue guardado a -700C hasta ser analizadas.

Inyeccin subcutanea

0,2 mg/kg de peso

2.3.1.Qumica de extraccin y derivatizacin:

Montigny et al. (1990).
30 ng, abamectina Acetonitrilo - Agua (1) Vortex

2.3. PROCESOS ANALITICOS:

(80:20 v/v)
(2) 2000 g, 15 min

Sobrenadante

1 mL Suero

Precipitacin de protenas

Sobrenadante

Sep-Pak C18
ACONDICIONADO CON:

Lavado con 2 mL de H2O MeOH (3:1 V/V). 2. Elucin con 1mL MeOH. 3. se concentr a sequedad bajo vaco a 45-50 C.
1.

2 mL de MeOH y 2mL de H2O Desionizada.

Material seco.

Material seco.
Derivatizacin

150 L solucin de anhdrido trifluoroactico en acetonitrilo (1:2 v / v).

30 segundos de reaccin

Alicuota de 100 L del sobrenadante

100 L N-metilimidazol en acetonitrilo (1:1 v/v)

Columna de HPLC

2.3.2.Cromatografa:

Waters 2475 Multi detector de fluorescencia

El mtodo utilizado fue el de Lifschitz et al. (1999) con ligeras modificaciones. Fase reversa HPLC Columna Nova Pak C18, 4 m, 3.9 x 150 mm, Waters, MA, USA. Elucin con acetonitrilometanol-agua (60:35:5 v/v/v). caudal de 1,5 mL/min.

ANALITO: detector de fluorescencia a una longitud de onda de excitacin de 365 nm y una longitud de onda de emisin de 475 nm.

Anlisis Farmacocintico
Modelo mono- compartimental Evaluado por WinNonlinTM Parmetros evaluados: Cmax Tmax t1/2 ab t1/2 eli ABC Kab Keli Volumen de Distribucin Depuracin Total

TIEMPO(ds) 0 0,04 C exp 0 1,58 Ln C exp Ln C^ ^C C^-C exp C residual

0,45742485

2,982684

19,7407297

18,1607297

2,89926156

0,5
1 2 3 4 5 7 9 11

13,31
16,13 14,36 11,62 9,18 7,4 5,14 3,79 2,15

2,58851563
2,78068089 2,66444656 2,45272775 2,2170272 2,00148 1,63705308 1,33236602 0,76546784 2,78068089 2,66444656 2,45272775 2,2170272 2,00148 1,63705308 1,33236602 0,76546784

2,89395
2,7975 2,6046 2,4117 2,2188 2,0259 1,6401 1,2543 0,8685

18,0645237
16,4035865 13,5258139 11,152905 9,1962887 7,58293251 5,15568505 3,50538375 2,38333317

4,75452373
0,2735865 -0,83418611 -0,46709502 0,0162887 0,18293251 0,01568505 -0,28461625 0,23333317

1,55909653
-1,29613743 -------4,11728394 -1,69863797 -4,15504693 -----1,45528793

15
20 25

1,02
0,39 0,18

0,01980263
-0,94160854 -1,71479843

0,01980263
-0,94160854 -1,71479843

0,0969
-0,8676 -1,8321

1,10175019
0,41995824 0,16007705

0,08175019
0,02995824 -0,01992295

-2,50408711
-3,50795085 -------

4 3 2 1 0 -10 0 10 20 30

Abs-Elim Eliminacion Absorcion

Ln C

-1
-2 -3

Tiempo

Parmetro Tmax (dias) Cmax (ng/mL) K ab (dia-1) T50%ab(dias) K eli(dias-1)

Valor -reportado 1.22+-0.49 16.75 -+ 4.04 2.62+-1.86 0.27-+0.25 0.27-+0.14

Valor -Calculo 1.03 16,13 2.91 0.238 0.193

T50% eli (dias) Vd/F (L/kg)

Cl/F(L/kg/da ) ABC (ng*da/mL)

2.53-+2.24 9.81-+5.41
2.21-+0.69 98.31-+30.52

3.59

ANLISI S
Otros estudios utilizaron anlisis con modelos no compartimentales y tambin bicompartimentales. Se escogi el modelo monocompartimental porque:

No aparece la fase de distribucin en el perfil plasmtico Por el criterio de informacin de Akaike

Farmacocintica de la ivermectina en diferentes animales

Especie Dosis (mg/kg) (Ruta de administracin.; Nmero de animales) Parmetros farmacocinticos Cmax
(ng/mL)

Tmax (das)

Kab (dia-1)

Ke (dia-1)

T1/2 ab (das)

T1/2 el (das)

ABC0 (ng.dia/mL)

ABMC0 TRM0 (ng.dia2/mL (das) )

Cl/F (L/das)

Vd/F (L/dia)

Referencia

Cerdo

0.30 (SC.;5)

28.4

1.1

1.5

(3)Scott &Mckellar, 1992

(4)Toutain et al., 1997 (5)Lifschitz et al., 1999 Lifschitz et al., 1999 Lifschitz et al., 1999

Bovino Bovino Cerdo Bovino Oveja

0.20 (SC.; 20) 0.20 (SC.; 7) 0.20 (SC.;8) 0.20 (SC.;8) 0.20 (SC.;6)

31.7 2.5 19.98.8 33.34.1 40.52.7 11.96.9

4.00. 3 4.01. 4 2.80. 4 2.00. 5 1.70. 6

1.30.5

0.30.2

2.00.2 1.50.9 0.70.5

4.30.3 5.93.4 3.50.5 6.30.8 2.81.9

361.017.0 206.041.3 165.021.6 244.020.1 64.028.3

995.0108. 0 1530.024 4.0 -

9.00.5 9.53.9 6.30.6 6.10.5 5.22.8

216.084. 7

851.1627 (6)Cerkvenik .7 et al., 2002

Oveja

0.20 (SC.;6)

24.16.6

2.70. 5

0.80.6

5.61.2

207.546.5

8.60.7

8.82.6

(7)Echeverria et al., 2002

Oveja
Yaks Gato

0.20 (SC.;6)
0.20 (SC.;4) 0.20 (SC.,8)

41.216. 2
48.914. 4 16.754. 04 49.699. 23

0.90. 2
0.70. 1 1.220 .49 2.070 .32

0.30.2 2.621.8 6 1.8960. 62

0.30.2 0.27

0.20.2
0.30.1 0.270. 25 9.743. 70

5.51.4
4.81.4 2.532.24

179.990.6
146.225.3 98.3130.5 2 249.281.7

6.71.8
3.61.2 4,580,9

2.210.69

6.51.7
9.875.41

Echeverria et al., 2002

Dupuy et al., 2003 S.Chittrakarn et al. 2009 Eraslan et al 2010 (11)

Perro

0.20 (SC.,7)

0.2160. 12

6.711.8

Presenta una velocidad absorcin y un volumen de distribucin ALTO respecto a otros animales que recibieron la misma dosis por la misma va de administracin.

DIFERENCIAS ENTRE ANIMALES EN: peso corporal, depsitos, Mono-gstricos y multi-gstricos.

nica variable irrelevante es el genero.

RECOMENDACIONES
Frente al estudio es difcil comparar con otros animales pero es la nica opcin al no haber mas estudios en gatos, se hace necesario mas investigaciones en gatos.