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M EFRAIN MONTES HIJAR BACTERIOLOGIA MEDICA UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MEDICA
Flora normal del tracto respiratorio y digestivo Cocos gram positivos agrupados en cadenas de longitud variable. Catalasa negativa Crecen bien en medios de cultivo habituales Aerobios / Anaerobios facultativos
Agrupacin Staphylococcus
Agrupacin Streptococcus
Clasificacin
Propiedades serolgicas Grupos de Lancefield A-V Patrones de hemlisis Incompleta () Completa () Nula () Propiedades bioqumicas
Gnero Streptococcus
Clasificacin
1.- Hemlisis en medios con sangre -hemolticos: hemlisis total (S.pyogenes, S. agalactiae) -hemoliticos: hemlisis parcial (S.pneumoniae, S. viridans) No hemolticos
Gnero Streptococcus
Antgeno polisacarido de la pared celular o antgeno de grupo Grupos serolgicos de Lancefield Grupo A, B, C, D, F,..V. Grupo A = S. pyogenes Grupo B = S. agalactiae
Gnero Streptococcus
Clasificacin de patgenos
Clasificacin serolgica Microorganismo Patrones de hemlisis
A
B
S. pyogenes
S. agalactiae
C D F, G
--
o no hemlisis ,,
Streptococcus
Catalasa negativos
No mviles No tienen esporas
Streptococcus
Agrupamiento en cadena en medios lquidos Crecimiento y la hemlisis se favorecen con 10% de CO2 a 35C Los cultivos viejos pueden ser Gram (-)
Manifestaciones Clnicas
Streptococcus pyogenes: faringitis, amigdalitis, escarlatina, imptigo, secuelas no supurativas: fiebre reumtica y glomerulonefritis Streptococcus agalactiae: meningitis en neonatos Streptococcus pneumoniae: principal causa de neumona, sinusitis, meningitis y otitis media.
Enterococcus
Cocos
Gram positivos
negativos facultativos
Catalasa
Aerobios
Crecen
Algunos
Enterococcus
Agrupamiento en pares o cadenas Hidrolizan esculina en presencia de sales biliares Capaces de crecer a pH 9,6 Temperatura oscila 10C - 45C
Enterococcus
Enterococcus faecalis: 80 a 90% de aislamientos Enterococccus faecium: mayor incidencia como agente nosocomial y se han detectado cepas multirresistentes a antimicrobianos de uso comn contra G+
Manifestaciones clnicas
Escarlatina
Imptigo
Muestras clnicas
Hisopados farngeos Aspirado pleural Sangre LCR Exudado bronquial Muestra de odo medio Lesiones de piel
Identificacin serolgica
Deteccin Ag de grupo
Pruebas de identificacin
Muestra Aislamiento y tincin de Gram Catalasa Hemlisis Resistencia a bacitracina Resistencia al optoqun Resistencia a SXT Factor CAMP Bilis esculina Crecimiento en CTS 6.5% NaCl
Tincin de Gram
Streptococcus
Enterococcus
Hemlisis
Patrn de hemlisis
Alfa hemlisis (parcial) H2O2 Beta hemlisis (completa) Estreptolisinas O y S Gamma hemlisis
Catalasa
Resistencia a antibiticos
Bacitracina: cualquier halo permite considerar a la bacteria como Streptococcus pyogenes Optoqun: halo de inhibicin de 14mm o ms es presuntivo de Streptococcus pneumoniae. Trimetropn sulfa: Sensibles grupo C, F y G.
Prueba de CAMP
Positiva
Agar Bilis-Esculina Identificacin presuntiva de grupo D y Enterococcus Hidrlisis de esculina: libera glucosa y esculetina
Esculetina en presencia de Fe3+ forma complejo coloracin negra cuando la prueba es positiva
Esquema de clasificacin
Cocos G+ Catalasa + Staphylococcus Streptococcus Enterococcus
Hemlisis
Bacitracina
Optoqun
Bilis esculina
R CAMP
S S.pneumoniae
R Bilis esculina
+ 6.5%NaCl
Streptococcus No hemolticos
Bilis esculina
+ 6.5%NaCl
Grupo Viridans
+ Enterococcus spp.
Grupo D
+ 6.5%NaCl
Streptococcus No A, B o D
+ Enterococcus spp.
Grupo D
+ Enterococcus spp.
Grupo D
14 aos
24/04/2011
Bolo de Dexametasona
04/05/2011
Tos Sensacin febril Expectoracin Adinamia 38C Murmullo vesicular asimtrico Crepitaciones : mayor en pulmn derecho Sibilancias
NEUMONA
Cefotaxima y Levofloxacina
Hemograma
Parmetro Resultado Valores normales
4.000 / 10.000
40 70 20 40
Leucocitos
Neutrfilos Linfocitos
1500 cel/mm3
40% 20%
Monocitos
Plaquetas Hemoglobina Hematocrito Bandas
4%
69 000 cel/mm3 8.7 g/dL 27% 24%
2 10
150.000 400.000 14 18 41 51 5 15
Qumica
Parmetro Creatinina Nitrgeno ureico Na K Cl Ca Resultado 2,4 mg/dL 53 mg/dL 127 mEq/L 4.5 mEq/L 104 mEq/L 7.9 mg/dL Valores normales
0,7 1,5 20 40 135 145 3,5 5,0 100 106 8,5 10,5
Gases
Parmetro pH PO2 PCO2 Bicarbonato Resultado 7.43 49 mmHg 33 mmHg 21 mEq/litro Valores normales 7.35 - 7.45 75 - 100 35 - 45 94 - 100 21 - 26
Saturacin O2 79%
Identificacin
Muestra = Sangre
ANLISIS Antibioterapia Muestra clnica Tipo examen Fecha recepcin Fecha finalizacin RESULTADO S recibe Sangre Hemocultivo 04/05/09 06/05/09
5mL
Equipo
-Sistema agitacin -Sensor de CO2 -Lecturas c/10 min
Crecimiento [CO2]
Identificacin
Manitol GRAM Cocos gram (+)
Chocolate
Agar Sangre
Identificacin
VITEK 2 Y PSA
Antibitico Bencilpenicilina Cefotaxima (Meningitis) Cefotaxima (No Meningitis) Ceftriaxona (Meningitis) Ceftriaxona (No Meningitis) Cloranfenicol Eritromicina Levofloxacino Linezoid Moxifloxacino Ofloxacino Tetraciclina Trimetoprima/Sulfametoxazol Vancomicina
Diferencial.
Cultivo
BacT-Alert 3D
Gnero Enterococcus
Incluye varias especies: E. faecalis y E. faecium Flora normal del tracto digestivo Escaso poder patgeno. Sinergia con otras bacterias aerobias y anaerobias (E. coli y B. fragilis) que favorecen la capacidad invasiva. Elevada resistencia antimicrobianos: Causa importante de infecciones hospitalarias (ITU, infecciones de heridas quirrgicas) Infecciones intraabdominales (polimicrobianas)
Enterococcus faecalis
Contenido Clasificacin Caractersticas Generales Fisiologa Pruebas de Identificacin Medio de Cultivo Hbitat Patogenicidad Mecanismos de Resistencia Apndice Bibliografa Pgina 2 3 4 5 6 8 9 10 11 12
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1. Clasificacin
Taxonoma
Familia: Enterococcaceae Gnero: Enterococcus
Especie: faecalis
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2. Caractersticas Generales
Enterococcus
faecalis
es
una
bacteria
3. Fisiologa
Enterococos que tpicamente se disponen en parejas o en cadenas cortas, son anaerobios facultativos y su temperatura ptima de
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4.Pruebas de Identificacin
Prueba Growth in 0.1% methylsene blue milk Ammonia from arginine Reduction of tetrazonlium Reduction of posassium tellurite Tyrosine decarboxylated Acid from L-arabinose Acid from arbutin Acid from melezitose Acid from melibiose Resultado + + + + + +
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5. Medio de Cultivo
Agar S-S (Salmonella Shigella)
Frmula (en gramos por litro)
Pluripeptona Extracto de carne Lactosa Mezcla de sales biliares Citrato de sodio Tiosulfato de sodio Citrato frrico Agar Verde brillante Rojo neutro 5 5 10 8.5 8.5 8.5 1 13.5 0.00033 0.025 pH final: 7.0 0.2 Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar. Calentar a ebullicin durante 2 o 3 minutos. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50C y distribuir unos 20 ml por placa. Secar la superficie del medio unos minutos en la estufa.
Instrucciones
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5. Medio de Cultivo
Siembra: Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo. Recomendaciones, se aconseja
(B02-114-05).
Incubacin:
Presentacin
Durante24-48 horas a 35-37 C, en aerobiosis. x 100g :Cdigo: B02-138-05 X 500g :Cdigo: B02-138-06
Resultados
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6. Hbitat
7. Patogenicidad
The ability of E. faecalis isolates to cause serious infections has been linked to the intrinsic ruggedness of the bacterium, which
8. Mecanismos de Resistencia
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Neisseria
Familia Neisseriaceae Gram Diplococos Aerobios estrictos Saprfitas o patgenas de la especie humana y animales. Oxidasa y catalasa positivos
Las neiserias saprfitas son poco exigentes, fciles de cultivar en medios comunes y crecen entre 22 y 35 C. N. meningitidis y N. gonorrhoeae son muy exigentes, dificiles de cultivar y solo crecen entre 35 y 37 C
Diplococos en granos de caf Afecta a vas respiratorias superiores y causa meningitis epidmica (sobre todo en nios con alta tasa de mortalidad). Factores de virulencia:
La cpsula que le confiere gran resistencia Protenas de membrana con accin muy txica. Fimbrias para adherirse al epitelio que invade
La cpsula presenta un polisacrido con distintas propiedades antignicas que permiten clasificar al menigococo en serogrupos (las cepas ms patgenos pertenecen a los serogrupos A, B, y C). Los serogrupos ms frecuentes en Espaa son el B y el C
Comienza con rinofaringitis leve que evoluciona a ms severa y posible bronquitis. Puede pasar a sangre y de all a piel dando petequias, fiebres altas y artralgias. Puede pasar a lquido cefalorraqudeo y meninges (meningitis): Fiebres muy altas, cefala, rigidez de nuca, vmitos, diarreas, etc. que pueden acabar en muerte si no se trata rpidamente. El examen de lquido cefalorraqudeo es turbio, purulento y con abundantes meningococos.
Diplococos con afinidad por las mucosas urogenitales. Produce la Gonorrea de transmisin por contacto sexual. Factores de virulencia:
Protenas de membrana con diferentes caractersticas antignicas. Fimbrias (adherencia y dificultad para ser fagocitadas) Endotoxina que inactiva anticuerpos prximos.
A las pocas horas los gonococos se adhieren a las mucosas mediante las fimbrias Penetran a tejidos subepiteliales, se multiplican y liberan endotoxinas con efecto sobre uretra, cuello uterino, ano, etc. con destruccin de clulas epiteliales, formacin de procesos supurativos purulentos, dolor a la miccin por uretritis, afectando tambin a cuello de tero y vaginitis en mujeres. Sobre el 50% son asintomticos cronificacin (al no ser tratado).
TOMA DE MUESTRAS:
Sedimento Frotis para tinciones (gram, tinta china, etc.) Sobrenadante: Tcnicas inmunolgicas para detectar Polisacridos capsulares y protenas.
Siembra en Agar sangre, agar chocolate, etc. Puede realizarse tambin un hemocultivo.
Pruebas bioqumicas: Catalasa (+) Oxidasa (+) O/F con glucosa y maltosa (oxidativo) Reduccin de NO3 a NO2 (-) Estudios serolgicos del LCR o del Suero.
TOMA DE MUESTRA:
En el laboratorio a primera hora antes de la primera miccin (si es posible) De uretra, recto y cuello de tero.
EXAMEN DIRECTO: Frotis y tincin de gram. CULTIVO: en medios enriquecidos (agar sangre, agar chocolate, Thayer Martin modificado, NYC medium) Incubar a 35 37 C, humedad al 70 % y 5 10 % de CO2. Pruebas bioqumicas: O/F, oxidasa, catalasa, etc. Pruebas serolgicas (ELISA).
PUNCIN LUMBAR
2/3 Neutrfilos
Glucosa
Pleocitosis
Liquido Claro
LCR
Protenas
1/3 100mg/dL
Presin Ligeramente
Gracias