GLUCONEOGENEZA

Necesitatea meninerii unei concentraii constante a glucozei sanguine, care condiioneaz activitatea optim a tuturor celulelor, face ca acest proces s fie de maxim importan pentru organism. Deoarece glicogenul hepatic nu este capabil s menin o glicemie constant dect maximum 18 ore, n acest proces vor interveni unii precursori ai glucozei (dintre care cei mai importani sunt acidul lactic, compus al metabolismului glucidic, un numr important de aminoacizi, aa-zii glucoformatori, i intermediari ai ciclului K r e b s , ca acidul malic).Acest proces reprezint calea metabolic principal de biosintez a monozaharidelor i polizaharidelor att n plante ct i n animale Formarea hidrailor de carbon din aminoacizi, acid lauctic se numete gluconeogenez. Un exemplu n acest sens l constituie sinteza glucozei n ficat din acidul lactic adus de ctre snge, n faza de repaos, dup o activitate muscular intens care conduce la acumularea acidului lactic format din glucoza. Gluconeogeneza reprezint grupul proceselor n care piruvatul este transformat n glucoz n special n cele dou organe cu specific anabolic, i anume ficatul i rinichiul, n anumite condiii se formeaz limitat i la nivelul intestinului subire. Deci acest proces nu are loc n toate organele i esuturile cu aceeai intensitate, dei se desfoar ntr-o mare msur sub aciunea reversibil a acelorai enzime care degradeaz glucoza pe cale glicolitic. Totodat, transformarea glucozei n acid piruvic sau acid lactic elibereaz o cantitate de energie. Este de la sine neles c reacia invers, de gluconeogenez, este endergonic. Energia necesar acestui proces este luat dlin respiraie, proces care se desfoar la nivelul mitocondriilor. Din aceast cauz reacia se desfoar pe o cale alternativ (fig. 1).

Fig.1 Reacia ocolitoare in sinteza glucozei din piruvat

Gluconeogeneza Acidul lactic, format cu precdere n muchi n cantiti dependente de efortul muscular depus, difuzeaz n snge, de unde ajunge n cele dou organe deosebit de bine irigate : ficatul i rinichii. Aici acidul lactic, sub aciunea LDH, este transformat n aicid piruvic care, ptrunznd n mitocondrie, poate fi metabolizat fie pe calea ciclului K r e b s, fie pe calea carboxilrii sub aciunea piruvatcarboxilazei; n acest caz se formeaz acidul oxalacetic, care poate accepta acetil-CoA formnd acid citric sau poate f i hidrogenat formnd acid malic. Acidul malic fiind unul dintre intermediarii metabolici din mitocondrie caro poate depi cu mult uurin membrana, ajunge n citoplasm unde este dehidrogenat din nou sub aciunea
3

malatdehidrogenazei citoplasmatice, acceptorul de hidrogen fiind NADP+. Se formeaz acidul oxalacetic, care, sub aciunea decarboxi- lant a fosfoenolpiruvatcarboxikinazei i n prezena obligatorie a GTP ca donator de grupri macroergice, formeaz fosfoenopiruvatul; din acest punct se urmeaz calea invers glicolizei pn la glucozo-6-fosfat. Transformarea Glucoz-6-fosfat n Glucoz, catalizat de enzima Glucozo-6fosfataz, se realizeaz la nivelul membranei reticolului endoplasmatic al celulelor ficatului:

Un alt proces catalitic l reprezint reacia invers transformrii Fructozei-6-fosfat n Fructoz-1,6-difosfat desfurat sub aciunea Fosfofructokinazei. Acest proces este catalizat de enzima Fructozo- 1,6-bifosfataz:

Pentru a realiza transformarea invers a Fosfopiruvatului n piruvat, catalizat de enzima Piruvatkinaz, este necesar o energie relativ mare asigurat de dou etape ale procesului de gluconeogenez.catalizatedePiruvatcarboxilaz.
4

Piruvatcarboxilaza este o enzim cu rol de reglare, a crei aciune depinde de concentraia acetilCoA. Bioxidul de carbon pentru carboxilarea acidului piruvic este adus de biotin, n calitate de coenzim a acestei enzime. Enzima a fost localizat i n fraciunea citoplasmatic, dar ntr-o proporie care reprezint maximum 15% din totalul activitii sale.

Activitatea fosfoenolpiruvatcarboxikinazei depinde de concentraia citoplasmatic a acidului oxalacetic, de raportul ATP/ADP i de concentraia glucozei. De remarcat faptul c n mitocondriile celulelor hepatice a fost pus n eviden o activitate apreciabil a acestei enzime, care are ca efect sinteza fosfoenolpiruvatului, acesta putnd difuza cu uurin n citoplasm, metabolizndu-se ulterior pe calea gluconeogenezei. Imediat dup acidul lactic, ca importan n ceea ce privete sursa primar de sintez a glucozei, se situeaz aminoacizii glucoformatori. Se numesc aminoacizi glucoformatori acei care pot forma, n urma unor metabolisme particulare, diveri intermediari ai ciclului K r e b s, produi, care n stri de urgen pot fi metabolizai preferenial spre formarea de glucoz. Fosfoenolpiruvatul, rezultat pe seama acidului lactic sau a amino- acizilor glucoformatori, se metabolizeaz pe calea invers glicolizei, prin intermediul acelorai enzime, ajungndu-se ns la o nou etap limitant, aceea de trecere a F-1,G -P la F-6-P. Enzima care catalizeaz aceast reacie n gluconeogenez este fructozo-1,6-fosfataza (n glicoliz intervine fosfofructokinaza), enzim alosteric, tetramer cu mai multe izoenzime, care este mbibat de AMP i activat de ATP, fiind localizat numai n ficat i rinichi.

Lactatul obinut din piruvat n procesul de glicoliz ajunge prin intermediul sngelui n ficat. Aici este transformat n glucoz conform proceselor chimice succesive ciclice descrise sub denumirea de Ciclul Cori. Este de menionat c, n funcie de necesiti, acizii grai pot nlocui gradat glucoza n organele unde este posibil obinerea energiei i din alte substane (inim, muchi, rinichi, plmni), menajndu-se astfel rezervele de glucoz n vederea utilizrii lor n mod prioritar de ctre creier, hematii i suprarenal. Celelalte monozaharide se metabolizeaz prin intercalarea lor n secvena glicolitic, procesele avnd loc mai ales n ficat, primul organ care vine n contact cu monozaharidele exogene, absorbite dup digestie. Tot ficatul este organul care transform, la nevoie, glucoza n oricare monozaharid necesar sintezei diferitelor componente celulare, de exemplu sinteza endogen a ribozei pe calea pentozofosfailor sau sinteza galactozei, avnd ca precursor UDPglucoza. Consumul echivalent de energie poate fi exprimat i prin numrul de legturi desfcute de fosfat (P): - la nivelul ficatului se desfac 6 legturi, - la nivelul muchilor se desfac 2 legaturi , consumul net este de 4 legturi. Rezult o pierdere de energie pe ciclu care nu se realizeaz de fapt deoarece glicoliza i gluconeogeneza se echilibreaz reciproc. La nivel local aceast echilibrare se realizeaz prin intermediul adeninnucleotidelor. enzima fosfofruciokinaza este mbibat n glicoliz prin intermediul ATP i este stimult de AMP. enzima Fructozo-1r6-difosfataz este mbibat n gluconeogenez de AMP n condiiile n care nivelul de ATP (acidul adenozintrifosfat) este ridicat, iar cel de AMP (acidul adenozinmonofosfat) este sczut, degradarea glucozei nu se realizeaz, pentru a produce ATP. Dac nivelul de ATP este sczut (atunci cel de AMP este ridicat), iar celulele nu vor consuma energie pentru sintetizarea glucozei. Controlul procesului global se realizeaz n celulele ficatului prin transformri ciclice succesive ale AMP ; aceste transformri se realizeaz prin intermediul hormonului glucagon n condiii de nivelul sczut de glucoz. Exprimarea consumului de energie prin intermediul energiilor de legtur desfcute la nivelul moleculelor macroergice (ATP), justific faptul c organismul este acomodat la fluctuaii de energie relativ intense cu condiia succedrii perioadelor exerciiu-repaus pentru muchii scheletici (n acord cu transformrile din Ciclului Cori).

Gluconeogeneza din intermediari ai ciclului acizilor tricarboxilici Calea de la piruvat la glucoz descris mai sus permite sinteza net a glucozei din diveri precursori ai piruvatului sau fosfoenol- piruvatului. Dintre ei, cei mai importani sunt intermediarii ciclului acizilor tricarboxilici, care se pot oxida laoxalilacetat. Acesta este apoi convertit la fosfoenolpiruvat prin aciunea fosfoenolpiruvat carboxikinazei. Prin aceast cale, trei atomi de carbon de la diveri intermediari ai ciclului acizilor tricarboxilici sunt n cele din urm convertii n trei atomi de carbon ai fosfoenolpiruvatului. Aceti atomi de carbon provin din atomii carboxil, a (carbonil) i atomii de carbon ai oxalilacetatului. Aceast cale a fost amplu verificat prin numeroase experimente cu izotopi marcai, realizate cu animale intacte, pe seciuni de esuturi sau n extracte. S-a stabilit, de asemenea, prin numeroase experimente, c intermediarii ciclului acizilor tricarboxilici produc sinteza net a glucozei de novo" n ntregul animal. ntr-un tip de experiment, obolanii snt nfometai pentru 24 h sau mai mult, tratament care reduce nivelul de glicogen n ficat de la aproximativ 7% din greutatea umed la 1% sau mai puin. Cnd. succinatul sau ali intermediari ai ciclului acizilor tricarboxilici sunt introdui ca hran, ei cauzeaz o cretere net a cantitii totale de glicogen n animalul nfometat, ndeosebi datorit creterii glicogenului hepatic. O asemenea conversie a internediarilor ciclului acizilor tricarboxilici la glucoz se observ i la animalele tratate cu glicozidul toxic floridzin .Aceast otrav blocheaz reabsorbia glucozei din tubulii renali n snge i, astfel, provoac eliminarea aproape cantitativ a glucozei din snge n urin . Hrnirea animalului otrvit cu floridzin , cu succinat sau ali intermediari ai ciclului acizilor tricarboxilici produce eliminarea unei cantiti de glucoz aproape echivalente cu trei din atomii de carbon ai intermediarului administrat.

Gluconeogeneza din aminoacizi Aminoacizii pot fi transformai n acetil CoA sau n intermediari ai ciclului Krebs i mai departe n glucoz. Ei se numesc glucoplastici i sunt de tipul alaninei, acidului glutamic i a acidului asparagic. Ei sunt dezaminai la piruvat, -cetoglutarat i oxalacetat care, n ciclul acizilor tricarboxilici, sunt transformai n malat i, n sfrit n fosfoenolpiruvat. Unii sau toi atomii de carbon ai unor aminoacizi pot fi, n final, convertii de vertebrate fie n piruvat fie n intermediari ai ciclului acizilor tricarboxilici, care, la rndul lor, snt precursori i fosfoenolpiruvatului. Aceti aminoacizi, care sunt i precursori ai glucozei, sunt numii aminoacizi glucogenici Un exemplu l constituie acizii glutamic i aspartic, care pot fi convertii direct,

prin transaminare, n intermediarii ciclului acizilor tricarboxilici, -cetoglutaratul i oxalilacetatul. n tabelul 4 snt prezentai aminoacizii care sunt glucogenici la mamifere. Sunt artai, de asemenea, aminoacizii care sunt att glucogenici cit i cetogenici, cum sunt fenilalanina i tirozina, care, prin degradare, sunt descompuse cu formare de acid fumaric, care este glucogenic. Aminoacidul leucina nu genereaz nici piruvat nici vreun intermediar al ciclului acitzilor tricarboxilici n timpul degradrii sale oxidative. Deoarece genereaz acetil CoA, care poate fi convertit la corpi cetonici, dar nu la piruvat, leucina este un aminoacid cetogenic. La plante i multe microorganism nu se poate face distincie ntre aminoacizii glucogenici i neoglucogenici pentru c toi aminoacizii pot contribui n final la formarea net a glucozei prin reaciile combinate ale ciclului acizilor tricarboxilici i ale ciclului glioxilatului. Gluconeogeneza din acetil CoA

pot fi sintetizate plecnd de la acetil CoA ce se obine din acizii grai.Acetil CoA este transformat n succinat n ciclul acidului glioxilic, prin urmtoarea reacie general: + 2Acetil CoA + NAD + 2H 0Succinat + 2CoA + NADH + H Enzimele specifice din acest ciclu sunt: izocitrat-liaza i malat-sintetaza. Aceste enzime nu sunt prezente la animalele superioare.
n plante i microorganisme, glucidele
+ 2

Fig. 4. Ciclul acidului glioxilic Succinatul format este ulterior oxidat la oxalacetat i apoi transformat n fosfoenolpiruvat. Prin aceast reacie, grsimile de rezerv transformate n glucoz n seminele care ncolesc.

sunt

Fig. 5 Reacia izocitatrazei

Este foarte important s se fac distincie ntre sinteza net a glucozei din precursori mai mici i ncorporarea unui 1izotop al carbonului dintr-un metabolit marcat n glucoz fr sinteza net de glucoz de nov . I)e exemplu, cnd acidul acetic marcat la atomii de carbon este administrat unui animal, atomii si de carbon marcai vor fi ncorporai n resturile de glucoz ale glicogenului hepatic i anume n atomii de carbon 1, 2, 5 i 6. Reglarea gluconeogenezei

n fig. 6 sunt prezentate punctele de control ale cilor metabolice dintre piruvat i glucoz n esuturile animale. Prima reacie n calea metabolic de la piruvat la glucoz este catalizat de o enzim reglatoare , piruvat carboxilaza , care exercit primul control. Aceast reacie este iniiat de modulatorul alosteric acetil- CoA. Ca urmare, cnd se sintetizeaz acetil-CoA mitocondrial n exces fa de necesitile imediate energetice ale celulei, este iniiat sinteza glucozei. Al doilea punct de control al acestei ci este reacia catalizat de hexozodifosfataz, care este stimulat de precursorii glucozei, citratul i 3-fosfogliceratul, i mbibat de AMP. Astfel, calea metabolic de la piruvat la glucoz este reglat att de nivelul combustibililor respiratori, cum sunt acetil- CoA i citratul, ct i de nivelul energetic al sistemului ATP. Prin contrast, calea metabolic direct de la glucoz la piruvat este reglat mai nti de enzima alosteric fosfofructokinaza, care este stimulat de AMP i ADP, dar mbibat de ATP, citrat i NADH . Un al doilea punct de reglare este reprezentat de hexokinaz, care este mbibat de glucozo-6-fosfat i probabil de acetil-CoA i fosfoenolpiruvat. Vedem deci c enzimele reglatoare importante ale cilor metabolice opuse, glicoliza i gluconeogeneza, sunt situate n acele puncte n care cele dou ci nu sunt identice, aceasta asigurnd reglarea independent a fiecreia. n concluzie, ori de cte ori celula prezint un nivel ridicat de ATP i combustibilii respiratori ca acetil-CoA, citratul sau NADH sunt disponibili, glicoliza este mbibat i este iniiat gluconeogeneza. Invers, cnd nivelul energetic este sczut sau combustibilii respiratori nu snt disponibili, glicoliza este accelerat i gluconeogeneza este mbibat.

10

Fig. 6 Reglarea alosteric a cilor opuse le la piruvat la glucoz (sgeile n culori) i de la glucoz la piruvat (sgeile negre).

11