Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Mycoplasma pneumoniae, adenovirusuri, virusul respirator sincitial, rhinovirusuri, virusuri paragripale, si Legionella spp.
Produs Patolo g
IZOLARE
Produse patologice :
a) spalatura nazo faringiana se obtine cu ajutorul unor tampoane cu coada (sterile) introduse in cornetul nazal inferior. b) aspiratul nazofaringian se obtine folosind un speculum nazal prin administrarea a 3 ml ser fiziologic in nari cu o seringa atasata la un tub de plastic. c) lavaj traheobronsic se obtine prin bronhoscopie in conditii speciale de catre personal calificat
Sputa recoltata n urma tusei, lichidul veziculelor din mucoasa bucal sau materialul recoltat postmortem (plamn) nu sunt indicate n diagnosticul virozelor respiratorii.
Izolare virala. -
1. -pe culturi primare de rinichi de maimuta rhesus. -pe linia continua epiteliala de rinichi de ciine = =MDCK - Madin-Darby Canine Kidney.
Izolarea pe OGE
REACTIA DE HEMAGLUTINARE
Capacitatea unor virusuri de a aglutina hematiile unor specii de animale Virusurile care poseda capacitatea de a aglutina hematii se numesc virusuri hemaglutinante (rubeola, rujeola, urlian, unele adenovirusuri, enterovirusuri, gripale si paragripale) Punerea in contact a unor dilutii succesive, binare de antigen hemaglutinant cu hematiile corespunzatoare virusului incriminat
UHA
Etape: ag. viral dilutii binare suspensie de hematii Se incubeaza la temperatura camerei Se citesc rezultatele in 60 minute Martorul reactiei contine suspensie hematii Rol RHA: Demonstrarea prezentei virusului hemaglutinant Titrarea antigenului hemaglutinant inaintea reactiei de hemagutino-inhibare (1 unitate hemaglutinanta HA = 107 virioni numarati electronooptic)
UHAI
Diagnosticul serologic
Necesita recoltarea de probe de ser pereche de la acelasi pacient. Nu se practica in mod curent decit in caz de epidemii, pentru diagnostic retrospectiv. Diagnosticul necesita demonstrarea unei cresteri semnificative (de peste 4 ori) a titrului Ac specifici antivirali intre proba de faza acuta, recoltata la o saptamana de la debutul bolii si cea din convalescenta, recoltata 2-3 saptamani mai tarziu. Metoda preferata de evidentiere a anticorpilor anti virali specifici este hemaglutinoinhibarea.
PRODUSE PATOLOGICE
Recoltare recomandata in cazul leziunilor active (50% sanse de izolare virala)
Lichid vezicular Tampon conjunctival Tampoane vaginale, lavajul cervicovaginal, tampon uretral
HEp2 HEK NCI-H292 RD MR-5 Culturi primare de rinichi de iepure Culturi diploide de fibroblaste
Sanse crescute de izolare -in primoinfectie -in stadii incipiente vs. in cazul aparitiei crustelor -in cazul leziunilor veziculare fara suprainfectie
Extemporaneu fixare
ID PP
1.pp. amprentat direct pe lama 2. sedimentul celular obtinut prin recoltare cu MTV
Anticorpi monoclonali marcati ITCF anti epitopi specifici de la nivelul anvelopei -gp C si ICP35 (HSV1) =110-120kd -polipeptide (HSV2) =78-82kd
ID PP
Celule negative Testul este 1. pozitiv daca pe lama sunt cel putin 2 celule fluorescente 2. negativ daca sunt cel putin 20 de celule fara fluorescenta
CMV
Izolare virala pe fibroblaste diploide umane sau prin metode rapide tip: "spin enhanced culture", in care produsul patologic este inoculat pe lame individuale acoperite cu monostrat celular confluent, care sunt centrifugate la viteza mica pentru a favoriza adsorbtia. Dupa 2 zile se poate realiza detectia antigenelor timpurii prin IF. Pp n functie de simptomatologie: lavaj bronhoalveolar; LCR, leucocite, biopsii tisulare; singe pe anticoagulant, urina, (in orice boala generalizata, inclusiv boala cu incluzii CMV a nou nscutului)
PCR pentru ADN CMV. Pp sange pe anticoagulant, lichid amniotic ELISA de captur pentru anticorpi anti CMV IgM; ELISA cantitative pentru evidentierea seroconversiei in anticorpi anti CMV IgG pe probe pereche de ser.
ECP CMV
EBV
EIA si IF anticorpi anti capsidari IgM (anti VCA) anticorpi anti nucleari (anti EBNA) (pp=ser) PCR pentru ADN EBV (pp=biopsie tisulara, snge integral)