1. Imunogenitatea si specificitatea.

Specificitatea Este proprietatea antigenului de a reaciona specific numai cu receptorii specifici, fie ei solubili sau membranari, a cror producie a fost stimulat de antigen (???). Nu toate antigenele se caracterizeaz prin ambele proprieti, i se mpart n: A. Imunogenele: antigene complete cestea se pot mpri n: a) antigene timo!independente " categorie minoritar, declaneaz de regul #$% pentru c au capacitatea de acti&are direct a '( ), nefiind necesar prezena '( * b) antigene timo!dependente " pot declana fie #$% fie #$+ numai ca urmare a unei cooperri celulare la care este necesar prezena '( * ,. ele pot fi proteine B. Haptenele antigene incomplete -unt substane cu greutate molecular mic sau foarte mic, structur simpl, ele sunt capabile s interacioneze cu receptorii antigenici, dac e.ist, dar ele singure nu pot declana #$ dec/t dac sunt cuplate natural sau artificial cu macromolecule imunogene ce se numesc purttor = carrier E.emplu: 0initrofenol 1 0N2, )- 1 serum albumina bo&in 0N2 nu induce c anti 0N2 0N2 3 )- induce c anti 0N2 0eci ,aptenele au doar specificitate, nu i imunogenitate. Imunogenitatea este capacitatea de a satisface o condiie necesar i anume concentrarea ntr!o arie restr/ns a membranei celulare a tuturor cuplurilor antigen anticorp, se mai numete i cross!lin4are interreceptorial. stfel, imunogenele realizeaz cross!lin4area, deci declaneaz #$, pe c/nd ,aptenele nu pot declana #$ tocmai datorit imposibilitii de cross!lin4a5. 6n cazul ,aptenelor, a&em stimuli cu intensitate mic, ce se e.ercit la mare distan unul de altul, dar nu se pot nsuma i genera un stimul acti&ator, de aici parado.ul: recunoaterea nu nseamn i declanarea #$. *eoretic s!ar putea declana dac toate cuplurile s!ar concentra ntr!o arie, iar stimulii s!ar putea nsuma. 7aptenele singure nu se pot concentra ntr!o arie.

2. Determinanti antigenici. 7aptena se numete determinant antigenic, subcomponent al structurii antigenice care din punct de &edere funcional se mpart n: 8) determinani antigenici liniari, sec&eniali " peptidici, cu 9!8: aminoacizi dispui n serie unii dup alii. -unt recunoscui numai de '( *, sunt structuri amfipatice, sec&ene peptidice interiorizate n structura antigenului nati& ce pot fi eliberate numai n urma prelucrrii de 2+( ntigen 2resenting +ells). ;) determinani antigenici conformaionali ! 9!8: aminoacizi ce pot pro&eni din regiuni diferite ale lanului peptidic < lanurilor peptidice, ei fiind adui n apropriere ca urmare a unor legturi disulfurice sau neco&alente inter < intracatenare. -unt recunoscui numai de '( ) sau produii acestora: anticorpii. -unt constituii numai din aminoacizi ,idrofili, sunt dispui la suprafaa moleculei de antigen nati&, n poriunile de ma.im fle.iblilitate < mobilitate. 6mprirea ar fi de fapt n antigeni predominant sec&eniali i antigeni predominant conformaionali. +ea care conteaz foarte mult este conformaia molecular. $mportana conformaiei moleculare n determinanii antigenici sec&eniali Este pentru prezentarea antigenului i recunoaterea antigenului. E.emplu: %n fragment din mioglobin liniar, 8=;!8>?, cu structur amfipatic, este recunoscut numai de '( *, prin *+# (* cell receptor), doar dac sunt prezentai g de 2+(de e.emplu macrofagele). 2+ au numai legturi cu aminoacizii ,idrofobi prin @7+, '( * au legturi numai cu aminoacizii ,idrofili prin *+#. 6n timpul formrii legturilor, antigenul capt o conformaie ,elicoidal n care aminoacizii ,idrofobi trec ctre @7+, iar aminoacizii ,idrofili trec ctre *+#. $mportana conformaiei moleculare n determinanii antigenici conformaionali Este pentru recunoaterea antigenului, nefiind necesar prezentarea antigenului. E.emplu: antigenul 7E' (7en Egg '(zozime) 7E' are n structura sa o ans intern ce este poriunea cea mai imunogen. 2rin fragmentarea 7E' anticorpii dau reacie cu ansa intern, dac se rup legturile ce in ansa intern, deci ansa este derulat, reacia este compromis. nticorpii recunosc determinanii antigenici conformaionali dup principiul conformaional Ac,eie n broascB

3. Conditiile de imunogenitate a Ag-T dependente. ntigen 2resenting +ells ( 2+C celulele prezentatoare de antigen) sunt celule cu rol esenial n generarea unor rspunsuri imune umorale i celulare fa de antigenele timodependente. u trei funcii importante din punct de &edere imunologic: 1. sunt responsabile direct de declanarea rspunsului imunC 2. au rol esenial n ntreinerea (n timp) a rspunsului imunC 3. particip la controlul rspunsului imun. 2+ sunt implicate ntr!un fenomen de cooperare celular cu dou categorii de limfocite: I. 'imfocite cu rol imunoreglator, clasificate n dou sub&arieti: a. *!,elper cu rol n amplificarea rspunsului imunC b. *!supressor cu rol n in,ibare rspunsului imun. II. 'imfocite cu rol efector (care particip la realizarea efecti& a rspunsului imun): a. 'imfocite ) pentru rspunsul imun umoralC b. 'imfocite * citoto.ice pentru rspunsul imun celular. +elulele 2+ au urmtoarele caracteristici: a) dintre toate celulele participante la cooperare, 2+ sunt primele i singurele celule ce &in n contact cu antigenele ( g) nati&eC b) sunt singurele capabile s prelucreze g nati&e gener/nd fragmente antigenice (epitopi)C doar aceste fragmente sunt recunoscute de limfocite (i n special de limfocitele *)C c) 2+ sunt substratul morfologic al cooperrii celulare. +lasificarea 2+: I. 2+ profesionale: 1. macrofageC 2. celule dendriticeC 3. limfocite ) (n anumite condiii pot funciona ca 2+). II. 2+ ocazionale: 1. 2@N (dintre acestea sunt mai importante neutrofilele)C 2. +elulele endotelialeC 3. +elulele epiteliale.

4. Macrofagele ca APC $.8 2+ profesionale " macrofagele @acrofagele sunt celule de origine medularC mdu&a (n. ed. osoas ,ematopoietic) elimin continuu n circulaia periferic elemente (n.ed. figurate sanguine) tinere, nematurizate (monocite). 0up un scurt tranzit (;>D=? ,), acestea trec n esuturi, fiind atrase de anumii factori (c,emotactici). 6n esuturi se &or maturiza sub influena unor (n. ed. alii?) factori cum ar fi $EN (n. ed. gamainterferon), transform/ndu!se treptat n macrofage. @acrofagele pot ndeplini funcia de 2+ (trec/nd prin anumite transformri). *ransformarea macrofagelor n 2+ a fost mprit (n. ed. didactic) n : etape (n. ed notate DE n cursul de fa). A. +aptarea antigenelor: 8. macrofagele capteaz antigenele corpusculate (e. g. bacterii, &irui, parazii de dimensiuni mici, etc)C macrofagele nu capteaz niciodat antigene solubileC ;. captarea este un proces imunologic nespecificC =. captarea este un proces imunologic mediat receptorial. .8 ntigenele corpusculare captate de macrofage pot fi mprite n dou categorii: i) ntigene corpusculare opsonizate (adic Fn&eliteG de factori imunologici solubili)C opsonizarea fa&orizeaz net captarea g i endocitarea lor. Hpsoninele sunt reprezentate de: $) +=b " prezent n mod continuu n lic,idul interstiial, n cantitate micC generarea +=b se face prin funcie continu a cii alternati&e de acti&are a complementuluiC +=b are o foarte pronunat tendin de fi.are a oricror suprafee membranare non!self (n. ed. adic +=b, considerat nespecific, se leag specific i preferenial de structuri non!selfD I). @acrofagele au receptori capabili s lege +=bC aceti receptori se &or nota cu +# (+omplement #eceptor). $$) $g (mai ales $gJ) " prezente n lic,idul interstiial n concentraii mai mari. $g se ataeaz pe membrana bacterian datorit recunoaterii unor antigene de suprafa e.primate pe respecti&a membran. 2oriunea $g care se leag la determinantul antigenic a fost notat Eab (Eragment antigen!binding). Eragmentul Ec (Eragment constant) al $g astfel legate este liber n lic,idul interstiial. +aptarea are loc rapid prin legarea Ec la receptorii Ec# ai macrofagelor (n. ed. spre deosebire de complement, $g sunt specifice n ceea ce pri&ete g legat prin structura Eab, care este complementar cu structura antigenic recunoscutC pentru dou antigene diferite, Eab corespunztor nu poate fi acelaiC Ec este acelai indiferent de antigenul recunoscut de Eab).
4

ii) ntigene corpusculare neopsonizate " captarea lor este mai puin eficient. @acrofagele au receptori care se leag la oligoza,aride ale peretelui bacterian ! radicalii fucozil, manozil ! de unde i notaia E<@#. .; +aptarea este nespecific pentru c macrofagele nu au contact direct cu determinanii antigenici de suprafa, contactul fc/ndu!se (n.ed. e.clusi&) prin +=b, Ec i radicali E<@ (n.ed. care sunt structuri constante)C . Endocitarea antigenelor corpusculare captate este un proces energodependent (Facti&G)C endocitarea presupune modificarea conformaiei membranare cu formare de pseudopode i &ezicule de endocitare. C. 2relucrarea<procesarea antigenelor endocitate. 6n lizozomi, sub aciunea proteazelor i ,idrolazelor are loc o proteoliz parial n urma creia rezult fragmente (epitopi). %lterior sunt selectai epitopii imunodominani (cei mai imunogeni). D. H parte din epitopii selecionai sunt conser&ai n macrofag i ser&esc la ntreinerea n timp a rspunsului imun. +antiti mici sunt eliberate i menin stimularea antigenic. !. +ea mai mare parte din epitopii selectai se cupleaz n macrofag cu molecule @7+ $ sau @7+ $$, rezult/nd comple.e @7+ $ (sau $$) " epitop care &or fi e.puse pe membrana macrofagului. 2rimele celule care &in la cooperare sunt limfocitele * (mai e.act subsetul *,). 'imfocitele *, pot recunoate epitopii doar n comple.e @7+ $$ ! epitop. +apacitatea de prezentare este deci condiionat de capacitatea macrofagelor de a sintetiza molecule de tip @7+ $$. 0e e.emplu: - KL M din macrofagele peritoneale sunt capabile s sintetizeze @7+ $$C - :L M din macrofagele splenice sunt capabile s elaboreze @7+ $$C - ma.im ;: M din macrofagele ,epatice sunt capabile s e.prime @7+ $$. @acrofagele care elaboreaz @7+ $$ sunt implicate n generarea unor rspunsuri imune. +ele care nu au aceast capacitate nu particip la generarea unor rspunsuri imune dar sunt implicate doar n reaciile inflamatorii locale. Etapele limitante ale procesului de transformare macrofag! 2+ sunt i E: - rata captrii depinde de numrul de receptori +#, Ec # funcionaliC - prezentarea depinde de capacitatea de sintez a @7+ $$. Euncia de ansamblu a macrofagelor n rspunsul imun: capteaz antigenele i le transport ctre ganglionii locoregionali unde le prezint limfocitelor *, aflate n aria timodependent a ganglionilor (paracorte.ul ganglionar).

". Clasele de celule dendritice si particularitatile lor fenotipice +elulele dendritice (n. ed. n cadrul seciunii $.; notaia &a fi +0) Dsunt celule de origine medular care n condiii de repaus emit prelungiri citoplasmatice (pseudopode). nsamblul pseudopodelor are urmtoarele caracteristici: - pseudopodele sunt foarte numeroaseC - sunt foarte fine, subiri, efilateC - sunt foarte lungi (lungimea minim este de :D? ori diametrul celular). ceste caracteristici dau celulei un aspect similar celor dendritice din -N+. 6n ceea ce pri&ete funcia 2+, despre celulele dendritice se poate afirma c: a. n general e.prim receptori pentru opsonine, deci pot capta antigeneC b. n general pot sintetiza @7+ $$. +elulele dendritice (+0) sunt o clas foarte ,eterogen, cu ase subtipuri, grupate n trei subuniti mai importante Jrupa $ 8. +0 din subtipul 8 se gsesc: - n submucoasa bucalC - tractul digesti&C - colul uterin. Euncia lor de ansamblu este de a capta antigenele i a le transporta n ganglionii locoregionali, n paracorte.ul acestora prezent/ndu!le limfocitelor *,. ;. +0 interstiiale au morfologie similar celulelor 'anger,ans. -unt foarte larg distribuite (se gsesc n toate spaiile interstiiale). Jrupa $$ este format din celule localizate n organele limfoide secundare. =. +0 interdigitate (engl. $0+) au aspect tipic dendritic i sunt distribuite n ariile timodependente din ganglionii limfatici i splin: - paracorte. ganglionarC - pars interna a splinei (strat limfoid periarteriolar intern). >. +0 foliculare au aspect tipic dendritic i sunt distribuite n foliculii limfoizi din organele limfoide secundare (foliculi limfoizi aglomerri de limfocite )), adic n ariile bursodependente din organele limfoide: - corte.ul ganglionarC - pars e.terna a splinei. +0 intracirculatorii :. +0 sanguine " ca morfologie sunt o&alare (n circulaie). -unt nt/lnite rar. ?. +0 &luroase (engl. &eiled) sunt aplatizate i o&alare. 2e lateral prezint foarte multe fran5uri i ondulaii. -unt prezente numai n circulaia limfatic, mai ales n limfaticele aferente. Eenotipic sunt +# (!), Ec # (!), @7+ $$ (!). -e consider c toate aceste celule dendritice (8D?) nu reprezint entiti morfologice distincte, ci sunt principalele etape ale traficului celulelor dendritice n organism. *oate +0 au aceeai origine (n.ed mdu&a osoas ,ematogen) i

n funcie de esutul pe care l parcurg i modific caracterele morfologice i fenotipice.

#. Traficul tisular$limfoid al celulelor dendritice Traficul i filiaia celulelor dendritice n organism se desfoar n patru sectoare: mdu&a, sectorul tisular, sectorul limfoid i sectorul &ascular. +0- $. +alea intratisular: a. n esutul cutanat de&in celule 'anger,ans: +#(3), Ec #(3)C se pot acti&a, caz n care transport antigenele spre ganglionii locoregionali prin limfaticele aferente, unde de&in +0 &luroase (+0N)C n paracorte.ul ganglionar aceste +0N de&in $0+, care sintetizeaz n cantiti mari @7+ $$ prin care prezint antigenele ctre limfocitele * ,elper (=LLLD>LLL *,: 8 $0+) incla&ate printre prelungirile $0+. b. n spaiile interstiiale din organele limfatice de&in +0 interstiiale, care e.prim +# i Ec#C prin acti&are migreaz i &or transporta antigenele pe dou ci: i. ctre ganglionii locoregionali " +0N! $0+ (n maniera descris mai sus la litera a.)C ii. migreaz antidromic ! n circulaie rede&in +0-, trec n splin de&enind $0+ n 2 '- internaC $0+ coopereaz cu limfocite *. $$. *raficul limfoid presupune trecerea direct: i. n ganglioni apoi n corte.ul ganglionar, unde are loc transformarea n +0EC ii. prin artera lienal n 2 '- e.terna cu transformare n +0E. $.= 'imfocitele ) pot funciona ca 2+ deoarece e.prim receptori de captare a antigenelor (+#, Ec#, )+#) (n. ed. aceasta este formularea dat n curs i trebuie s!i rm/nem fideli, c,iar dac este n mod clar un sofismC e.g. dac eu am o undi nu nseamn c sunt pescar). 'imfocitele ) capteaz doar antigenele solubile. 6n stadiul de limfoblast, ele elaboreaz cantiti crescute de molecule @7+ $$.

%. Moleculele M&C I$II @7+ $ sunt distribuite ubicuitar, cu e.cepia ,ematiilor +a structur sunt ,eterodimeri . 'anul are o poriune transmembranar pe c/nd este strict e.tracelular. ceste lanuri prezint organizare multidomenial datorit unor legturi disulfurice intracatenare. 'anul are trei domenii 8D= iar lanul are o singur bucl: - domeniile 8, ; sunt constituite din sec&ene ,iper&ariabile (difer de la un tip celular la altul) i de aceea sunt numite domenii polimorfe ale @7+ $C - domeniul = are o structur primar constant fa de tipul celulei (n.ed independent de tipul celulei pe a crei membran este e.primat molecula @7+ $ analizat)C - domeniul are o structur primar constant la toi indivizii unei specii date. Euncii: 0omeniile 8, ; sunt situate simetric i se asociaz form/nd o ca&itate de dimensiuni reduse n care este incla&at un antigen ( antigen endogen) situs combinati& pentru antigene. 0omeniul = se comport ca un antigen self foarte imunogen, fiind implicat n declanarea unor reacii de respingere a grefelor de organ< esut. Jena @7+ $ este situat pe autozomii ?. @7+ $$ sunt distribuite doar pe membranele celulelor ce particip la realizarea rspunsului imun: 2+, limfocite ) i limfocite *. +a structur sunt ,eterodimeri , ambele lanuri fiind transmembranare. Eiecare lan prezint c/te dou domenii (FbucleG) iar poziionarea lor simetric fa n fa d moleculei un aspect $g!li4e 0omeniile aminoterminale 8,8 sunt domeniile polimorfe ale moleculei @7+ $$ (&ariaz mult de la o clon celular la alta). 0omeniile carbo.iterminale ;,; au structuri primare constante (mai ales ;) i n consecin se numesc domenii monomorfe. 0omeniile polimorfe se asociaz form/nd ca&iti n care este incla&at pentru prezentare un antigen e.ogen situs prezentator pentru antigen. 0omeniile monomorfe (mai ales ;) au rol n declanarea unor reacii de respingere a grefelor i n cooperarea 2+!*,. Oi genele @7+ $$ sunt situate pe perec,ea ? de autozomi

'. Mecanismele pre(entarii selecti)e a Ag-elor pe molecule M&C II$I ecanismele prezentrii selective a antigenelor pe moleculele H! : dei ambele categorii de molecule @7+ sunt sintetizate n acelai subsector celular (#E#), ele prezint difereniat antigenele pentru c se cupleaz cu acestea n subsectoare celulare diferite. 6n cazul @7+ $ se sintetizeaz iniial lanul apoi . 2rin cuplarea acestora rezult molecula @7+ $ i are loc modificarea conformaional a lanului , cu desc,iderea larg a situsului combinati& pentru antigen. stfel, moleculele @7+ $ pot fi.a di&erse antigene: proteine endogene intracitoplasmatice " autoantigene sau neoantigene sau fragmente rezultate din prelucrarea unor microorganisme cu ,abitat sau dez&oltare intracelular (n.ed. n acest al treilea caz, nu se poate afirma c respecti&ele proteine au pro&enien endogen, nefiind biosintetizate pe o matri #N pro&enit din transcrierea unei sec&ene 0N proprii). 2rin prelucrarea respecti&elor polipeptide n citoplasm, sub influena proteozomilor (n. ed. lizozomi?) rezult epitopi care prin anumite sisteme transportoare (&ezi figura mai sus: * 2 8,;1 transportor asociat prezentrii de antigenC )+1 casetele de legare a antigenului) a5ung n #E# (reticul endoplasmic rugos). 6ncrcarea moleculelor @7+ $ cu epitopi implic o nou modificare conformaional, @7+ $ desprinz/ndu!se de pe perete i migr/nd pe membran. 6n cazul @7+ $$ se sintetizeaz pe l/ng lanurile i i un lan $$ in,ibitor ($$i) care FastupG (bloc,eaz) situsul de prezentare a antigenului. 'anul $$i trece printr!un dublu cli&a5 proteolitic: 8) ndeprtarea captului aminoterminal elibereaz situsul combinati& pentru antigen, care poate fi.a di&erse antigene (e.g. antigene e.ogene din procesele de fagocitare n endozomi) ;) al ;!lea cli&a5 ndeprteaz complet lanul $$ i iar moleculele @7+ $$ de&in neancorate pe pereii endozomali, trec/nd pe suprafaa membranar, unde pot fi recunoscute de limfocitele *,.

10

*. Structura si functiile comple+ului TC,-CD3 +omple.ul *+#!+0= 2e membrana unui '( * aflat n repaus se afl ntre ?L i 8LL de mii de asemenea comple.e. *+# Este un ,eterodimer, are dou lanuri diferite ce se asociaz ntre ele: un lan cu greutatea de >: 4d, genele ce codific acest lan se afl pe cromozomul K i un lan , cu greutatea de >L 4d, genele ce codific acest lan se afl pe cromozomul 8>. 'anurile i sunt transmembranare, capetele + (carbo.i!terminale) se afl n interiorul celulei, astfel se separ = segmente cu funcii distincte: e.tracelular, transmembranar, intracitoplasmatic. -egmentul e.tracelular: are dispoziie $g!li4e, cu dou bulcle i dou domenii, cu apro.imati& 88L aminoacizi. +ele dou bucle sunt constituite din sec&ene aminoacidice ,iper&ariabile i se numesc N (&ariabil ) i respecti& N, iar celelalte dou bucle (situate spre membran) au sec&ene constante, numindu!se + i +. N i N sunt alctuite dintr!o ca&itate ce se mai numete i situsul combinati& pentru g 0omeniile N, N nu anga5eaz legturi prin ntreaga lor sec&en, ci doar prin mici segmente de 9!8: aminoacizi ce pro&in n urma plicaturrii N , N i protruzion/nd ctre interiorul ca&itii, aceast sec&en se combin cu g prin potri&ire: regiuni determinante ale complementaritii 1 +0#. +ele ? +0# anga5eaz legturi difereniate cu moleculele de antigen, coopereaz cu 2+ ce prezint un epitop pe moleculele @7+. +0# 8 i +0# ; anga5eaz legturi cu moleculele @7+, recunosc/nd doar domeniile polimorfe (din @7+ 8 domeniile 8, ;, din @7+ ; domeniile 8, 8). +0# = anga5eaz legturi cu epitopul. 2rin *+# se recunosc i @7+ i epitopul, deci se face o recunoatere antigenic asociati& intrareceptorial. 'anurile i se asociaz cu legturi disulfurice, de aceea se formeaz ,eterodimerul, i rezult o poriune dotat cu ma.imum de mobilitate (baleiere), ce fa&orizeaz recunoaterea antigenic, numit zona balama (,inge engl.). -egmentul transmembranar are ;;!;: de aminoacizi, dispoziie ,elicoidal. -egmentul intracitoplasmatic este e.trem de scurt, are :!8; aminoacizi. *+# are rol n recunoaterea antigenic, este responsabil pentru generarea unor semnale acti&atoare, centripete, ctre centrul celulei, ctre sistemele enzimatice. *ransducia semnalului se face prin comple.ul +0 =.
11

+0 = Este un comple. pentameric, cu : lanuri transmembranare, dintre care = lanuri scurte cu ;L!;: 4d greutate, genele codificatoare pe cromozomul 88, denumite , , i dou lanuri identice, foarte subiri, efilate, lungi, ce ptrund mult n '( *, cu greutatea de 8? 4d, genele codificatoare pe cromozomul 8, numite (nu mai in minte litera greceascIII). 6n realitate, prin asocierea *+#!+0= se formeaz un comple. ,eptameric, cu +0 = responsabil de transducia semnalelor ctre sistemul enzimatic de profunzime. 'a recunoaterea g mai coopereaz i coreceptorii +0> i +09.

12

1-. Structura si functiile comple+ului CD4$CD' +0 > Este distribuit caracteristic pe '( *,, care se mai numesc de asta i '( * +0 >3. Este o glicoprotein transmembranar, e.primat pe cromozomul 8;, cu capul N (amino!terminal) e.tracelular. -egmentul e.tracelular are > bucle de aminoacizi, are segment transmembranar i intracelular foarte lung. Eunciile: 2rin segmentul e.tracelular se produce cooperarea dintre '( * , i 2+, +0> anga5/nd legturi cu moleculele @7+ $$ i recunosc/nd domeniul monomorf @7+ $$ (;). 2rin segmentul intracitoplasmatic are rol n acti&area '( * ,, are contact fizic cu o enzim important: protein 4inaza p:? (2P:?), sau se mai numete i 4inaza specific leucocitelor 1 lc4. +0 9 Este prezent pe suprafaa '( *c, '( *s, celule +093. Este o glicoprotein transmembranar, ,eterodimeric, cu greutate de K; 4d, genele codificatoare sunt pe cromozomul ;, lanurile se numesc , , cu segmente intracelulare foarte lungi. Eunciile: -egmentul su e.tracelular, cu dou bucle , , face cooperarea dintre '( *c sau '( *s, i 2+, realiz/ndu!se legturi cu moleculele @7+ $ prezente la suprafaa 2+, se recunoate domeniul monomorf =.

13

11. ,eceptorii de ade(iune intracelulara a limfocitelor T si functiile lor u ca funcie ma5or stabilirea de contacte ntre 2+ i '( *, fapt important pentru cooperrile dintre aceste celule. +0; Este prezent pe toate '( *, este prezent i pe celulele NP. Este o glicoprotein transmembranar, cu greutatea de :L 4d, n segmentul e.tracelular are ; bucle, un segment intracelular foarte lung. Eunciile segmentului e.tracelular sunt acelea de contact cu un contraligand reprezentat de 'E = (+0:9) o legtur prin complementaritate. re contribuie n pregtirea acti&rii '( *, prin segmentul intracelular ce se afl n contact cu fosfolipaza +. cti&area se face astfel: modificarea conformaional de segment intracelular +0; ce produce alunecarea 2'+ spre suprafaa membranei unde acti&eaz cascada inozitol ,e.afosfat($2?) i aa mai departe. +0; este prezent pe suprafaa '( * numite nai&e, adic cele care nu au nt/lnit nc antigenul. +uplul +0;!'E = este considerat un cuplu de adeziune celular de linia $, adic sunt primele legturi celulare ntre 2+ i '( *, a&/nd o foarte mare afinitate ntre receptori. 'E 8 Este un ,eterodimer, cu un lan (+088a), cu greutate de Q: 4d i un lan (+089) cu greutatea de 89L 4dC cele dou lanuri prezint c/te ; bucle aezate simetric Euncia : 'E 8 are legturi cu moleculele din clasa $+ @, este un receptor de adeziune larg nt/lnit: pe '( *, mai ales pe cele cu memorie, '( ), celule N4, membrana 2@N. +uplul de adeziune 'E 8 " $+ @ este un cuplu de linia a doua, sunt legturi instabile, 'E 8 are afinitate sczut pentru $+ @ dac '( * este neacti&at. Eunciile receptorilor de adeziune: - receptorii de adeziune permit contacte intime ntre membranele celulare permi/nd cooperarea intercelular, sunt n&inse forele de respingere electrostatic. ceste cupluri realizeaz un efect de fermoar, apoziie intim pe suprafee foarte mari, permite o cooperare intim, fa&orizeaz net recunoaterea g. - 0atorit apoziiei receptorii @7+ i *+# difuzeaz prin membran p/n a5ung fa n fa.

14

12. ,ecunoasterea Ag-ic asociati)a #ecunoaterea asociati& este dubl, intrareceptorial i interreceptorial: prima este ntre *+# i +0=, iar a doua este ntre *+# i +0> sau +09. +omple.ul anga5eaz un numr de ; legturi cu g: prin *+# cu +0#= N, +0# = NC > legturi prin *+# cu +0# 8 N , N, cu +0# ; N, N i nc o legtur cu +0> sau +09 deci : legturi. 6n concluzie '( * este mai interesat de structurile prezentatoare de g dec/t de g. n realitate Ly T recunosc doar Ag mem ranare! iar din totalitatea lor doar anumite categorii" 0eci: g ataate sunt recunoscute de c g constituti&e sunt recunoscute de c, celule NP g prezentate de @7+ sunt recunoscute doar de '( * - '( * recunosc numai g prezentat de @7+ - 6n funcie de @7+ se dau rspunsuri imune diferite: @7+ $ #$%C @7+ $$ i @7+ $$ #$+

15

13. Mecanismele si consecintele acti)arii limfocitelor T aceast acti&are nu se realizeaz n orice condiii. cti&area are loc n condiii diferite in &itro fa de in &i&o. 2entru acti&area in &i&o, sunt mai importante trei condiii: 8. limfocitele * pot fi acti&ate doar de antigene timodependenteC ;. acti&area limfocitelor * se realizeaz doar n cadrul unei cooperri celulare la care este obligatorie prezena 2+ (presc. ntigen 2resenting +ells). =. cooperarea celular i acti&area care rezult pentru generarea unui #$ eficient sunt bidirecionale. +ele dou celule se stimuleaz reciproc. 0in acest punct de &edere distingem dou tipuri de acti&ri: a) cti&area anterograd se realizeaz dinspre 2+ spre limfocitele * fiind urmat de acti&are metabolic a limfocitelor *. -e numete anterograd pentru c ea se e.ercit n acelai sens cu prezentarea i recunoaterea antigenului. cti&area anterograd presupune transmiterea spre limfocitele * a unor semnale. 0ou ci sunt mai importante pentru aceast transmitere: $. +alea *c#!+0= este utilizat n cazul recunoaterii antigeniceC semnalele transmise pe aceast cale determin activarea metabolic a limfocitelor T i stimularea diviziunii mitotice a limfocitelor T antigen"specifice , cu creterea numrului de celule al clonei antigen!specifice (e.pansiune clonal)C $$. +alea accesorie +09L!+0;9 de acti&are anterograd se realizeaz prin +0;9. #eceptorul +0;9 de pe membrana limfocitului * se acti&eaz n urma legrii cu +09L de pe membrana 2+. #ealizarea comple.ului +09L!+0;9 costituie semnalul acti&ator, care iniiaz maturarea funcional a limfocitului T, n urma creia rezult limfocitul * acti&at. 'imfocitele * acti&ate: - produc cantiti crescute de interleu4ine (subsetul * ,elper)C - produc cantiti crescute de mediatori citoto.ici (subsetul * citoto.ice). #ezultatele acti&rii anterograde asupra limfocitelor * sunt: 8. acti&area metabolicC ;. e.pansiunea clonalC =. maturarea funcional. # cti&area retrograd ( #) se realizeaz dinspre limfocitele * acti&ate metabolic spre 2+C la sf#ritul ei are loc activarea metabolic a A$! . cti&area retrograd decurge n sens opus prezentrii i recunoaterii antigenului. # se realizeaz prin intermediul unor cito4ine produse de limfocitele * ,elper. 0intre acestea sunt mai importante $'!> i $EN a&/nd ca aciune comun stimularea receptorilor de suprafa ai 2+ (n.ed. repetai dup mine: FNu conteaz c ne consider idioiG). ceast stimulare duce la intensificarea e.presiei @7+ pe suprafaa acestor celule (mai ales a @7+ $$), cu creterea e.presiei de epitopi pe suprafaa celular. +a urmare rezult o stimulare antigenic suplimentar a
16

limfocitelor * i cascada se poate relua p/n la atingerea &alorii prag a declanrii #$ (n. ed. fenomen de amplificare prin feedbac4 poziti&).

17

14. Mecanismele si consecintele acti)arii limfocitelor ecanismele activrii limfocitului B: cti&area limfocitului ) este rezultatul recunoaterii prin )+# a diferitelor antigene. -timulii acti&atori se transmit pe dou ci: a. calea scurt const n acti&area direct a 2*P. 2*P preia 2 din citoplasm i l transmite unor structuri cum ar fi de e.emplu segmentul intracitoplasmatic al $g i $g . 2rin fosforilare +0 KQ sufer transformri conformaionale. -emnalul se transmite apoi pe calea lungC calea lung: de la +0 KQ semnalul a5unge la +0 >:, care acti&at are funcie de 2*!fosfataz, prelu/nd 2 de pe +0 KQ i transmi/ndu!l 2'+ b. 2rin fosforilare 2'+ este acti&at, iniiind cascada fosfatidilinozitolilor. E.presia fenotipic se modific: - crete e.presia 'E 8C - crete foarte mult e.presia moleculelor @7+ $$. 6n stadiul de limfoblast, ca urmare a acestor modificri, limfocitul ) i comut funcia de la recunoatere antigenic la 2+. +elulele care trec de stadiul J 2 intr n di&iziune mitotic. 6n urma mitozei ma5oritatea celulelor rezultate sunt celule ) efectorii (plasmocite). %n numr mic de celule de&in limfocite ) cu memorie (limfocite ) preacti&ate), ntre stadiile J -!J1.

18

1". !tapele desfasurarii intrasplenice a ,I. 2rincipalele etape ale #$% intrasplenic ! ntigenele din circulaie pot fi: ntigene solubile (n.ed. libere)C ntigene (n. ed. solubile) transportate de celulele dendritice sanguine. 6n pals e.terna antigenele solubile sunt captate de +0 (care au rol de filtru)C rezult o concentrare local de antigene. 0atorit recunoaterii antigenului limfocitele ) se acti&eaz trec/nd n limfoblaste ) care ncepe s migreze. ntigenul transportat a5uns n splin se cantoneaz doar n pals interna, unde are loc tranziia +0- " $0-. $0- prezint antigenul n conte.t @7+ $$. 2entru unele limfocite (n. ed. *) are loc acti&area limfocitar i transformarea n limfoblaste *. 'imfoblastele * migreaz n pals e.terna. 6n pals e.terna, prin stimulare are loc definiti&area acti&rii limfocitelor ), care se transform n plasmocite. 2lasmocitele migreaz la distan de antigen i produc< secret anticorpi. %anglionii " 2arenc,imul ganglionar are = zone: 8. corticala este )!dependent i este format din limfocite ) dispuse n grupuri numite foliculi limfoizi. +/nd limfocitele ) sunt neacti&ate, aceti foliculi se numesc foliculi limfoizi primariC ;. 2aracorticala este format din limfocite * distribuite uniformC =. @edulara are celularitate mi.t, fiind format din limfocite ), *, monocite i macrofage. Eunciile ganglionului sunt aceleai cu ale splinei. -

19

1#. !tapele desfasurarii intraganglionare a ,I. &tapele celulare ale 'I( intraganglionar " #$% intraganglionar este declanat de drenarea prin limfatice aferente a unor antigene tisulare, concentrate mai ales subcapsular (aduse de +0). 0ac antigenele sunt recunoscute foliculii primari trec n foliculi secundari (prin acti&are antigenic). Eoliculii secundari sunt de dimensiuni mari i se e.tind foarte mult spre interiorul parenc,imului (n urma stimulrii antigenice limfocitele ) se di&id i migreaz). +elularitatea foliculului se modific ! ,istologic zona subcapsular este format din limfocite ) mici (aflate n repausC nestimulate antigenic), zona central este clar i alctuit din puine limfocite ) mici iar zona densa este alctuit din limfocite ) mari (limfoblati pro&enii din zona clar, care au recunoscut antigenul i au migrat).

20

1%. Cooperarea celulara in ,I.- modelul de cooperare in etape succesi)e g * dependent e preluat de ctre 2+ (la poarta de intrare a g n organism " la ni&el tisular). 2+ migreaz i transport g captat intratisular, n ariile * dependente ale organelor limfoide. ceste 2+ sunt non ) : monocitele i principalele celule dendritice ('anger,ans i interstiiale). 2+ e.pun g ctre '( * , pe moleculele @7+ $$, cu partea carrier a g i ncepe o cooperare cogniti& ntre 2+ i '( * , , la care se adaug o cooperare noncogniti& realizat prin $' 8 i anume acti&area '( * , ce se transform n limfoblati *,. 2e msura transformrii celulelor *, ele migreaz de la contactul cu g n ganglioni sau n splin. ;. g declanator aflat n stare liber difuz n tot organismul i a5unge n ariile burso!dependente ale organelor limfoide, unde sunt captate i concentrate pe loc ca urmare a funciei de filtru a celulelor foliculare dendritici (+0E) . ceste g pot fi ulterior de '( ) care prin acti&are de&in limfoblati ) ce prsesc contactul g i migreaz, a5ung/nd n contact cu limfoblatii * , . +ele dou categorii de limfoblati coopereaz: +ogniti& " limfoblatii prezint g pentru c e.prim cantitate crescut de @7+ $$ - limfoblastul *, recunoate g prin partea de carrier - acti&area complet a limfoblatior * , ce produc cantiti mari de $' 8 i $' > Noncogniti& prin $'8 i $' > se acti&eaz limfoblatii ) ce de&in n final plasmocite ce lanseaz n circulaia c g!specifici(recunosc g dup partea sa ,aptenic). 0intre toate '( ce particip, primele care &in la contactul cu g sunt '( * , (celule intens recirculante) . 'a cooperare particip toate cele = tipuri de 2+ profesionale, primele fiind monocitele i celulele dendritice (pentru c sunt de5a prezente la poarta de intrare a g n organism ) mai t/rziu particip i limfocitele ) acti&ate la stadiul de limfoblati ) ( 2+ neoformate). '( ) ndeplinesc funcii foarte comple.e : 8. recunosc i capteaz g declanator ;. prezint g ctre '( *, sunt responsabile de producerea de c specifici 8.

21

1'. Cooperarea celulara ,I.- cooperare cogniti)a si noncongniti)a APC-T&

8. +ooperarea cogniti& dintre cele dou celule: - se stabilesc ntre cele ; celule ; categorii de contacte: g!nespecifice i g!specifice a) legturile g!nespecifice se realizeaz prin cuplurile de adeziune intercelular: de linia 1: +0; (*,) i 'E = ( 2+) (cei doi receptori au o foarte mare afinitate unul pentru cellalt). 'egturile sunt stabile fiind foarte numeroase( sute de mii de cupluri n c/te&a secunde) de linia 2 : 'E 8 (*,) i $+ @ ( 2+) " aceste legturi apar mai t/rziu i sunt instabile un anumit timp pentru c cei doi receptori au afinitate mic. cestea sunt contactele g!nespecifice ce permit stabilirea unor contacte g!specifice . b) legturile g!specifice @7+ $$ ce prezint epitopi i *+# c/nd &in fa n fa se stabilesc legturi g!specifice se acti&eaz '( *, pe calea *+# a&/nd ca efect intensificarea fosforilrilor. -ubstratul fosforilrilor este lanul al lui 'E 8 , rezult/nd modificri an lanului ce cresc mult afinitatea lui 'E 8 pentru $+ @, legturile 'E 8 " $+ @ de&in foarte stabile i se intensific i recunoaterea g. ;. +ooperarea noncogniti& -impla recunoatere a comple.ului @7+ $$ " epitop prin *+# nu este suficient pentru acti&area '( *, la un ni&el corespunztor pragului declanrii unui #$% eficient. cest prag e atins i depit printr!un co!stimulator ($' 8 ) asupra lui '( *, . $' 8 este o glicoprotein cu masa de 8K 4d, ca surse de $'8 sunt monocitele (produc cea mai mare cantitate de $'8 ), celulele dendritice, '( ) , ultimele dou fiind 2+ profesionale. +lasificarea $' 8 : a# $' 8 ! nu are funcie imunologic, este o form inflamatorie # $' 8 ! singura implicat n #$%, este produs de monocite, dar nu e niciodat e.ocitat i e e.pus pe membrana 2+ (spre deosebire de $' 8 ) de aceea se mai numete i $' 8 membranar (e e.pus n spaiul dintre monocit i '( * , strict acti&area '( *, e strict direcionat i se e&it stimularea nt/mpltoare a altor '( * ,. - e receptat de un receptor de pe '( * , $'8 # ce declaneaz stimuli acti&atori i rezult ; efecte ma5ore: la ni&elul nucleului acti&eaz metabolic '( *, datorit acti&rii genelor pentru $' ; i genelor pentru receptorul $' ; (+0 ;:) receptorul fiind e.pus pe membrana '( * ,, acti&are autocrin prin propria $' ; .

22

'( *, ncep s se maturizeze funcional i s se diferenieze n subclase de '( *,.

23

1*. Maturarea limfocitelor T& in su/etape Nu sunt celule preformate, ci apar n timp n cadrul cooperrii celulare (se formeaz Ain situB). @orfologic i fenotipic sunt identice (toate e.prim pe suprafaa lor receptorii +0> i +09). 6n funcie de setul de $' produse se mpart n mai multe categorii (ce apar doar n cadrul cooperrii celulare). 8. '( *, 2rimiti&e ('( *,p) sau productoare de $' ; - sunt '( *, imature (se afl la primul contact cu antigenul) i dein n genom toate genele pentru $' C cu e.cepia genelor pentru $' ; toate celelalte sunt in,ibate. - +a urmare a unei scurte acti&ri antigenice ele se acti&eaz la '( * ,o ;. '( *,L BzeroB ce de&in productoare de toate clasele de $' n cantiti mici, insuficiente i deci $' produse nu folosesc la nimic de unde numele de AzeroB 3" o etap a cooperrii celulare duce la '( * ,8, implicate n amplificarea #$+ pentru c produc $' ; n cantitate mare, $' =, mult $EN , mult *NE >. dac sunt prezente '( ) atunci '( *, L se transform n '( *, ;, care sunt celule ce amplific #$% prin producerea de $' >, $' :, $' ? i $' 8L. '( *,L se transform n '( *, 8 sau '( *, ; i datorit mecanismului de e.cludere reciproc, prin $' produse: '( * , 8 in,ib diferenierea n '( * , ; prin $EN cu efect distructi& pentru '( *, ;C '( *, ; in,ib diferenierea n 8 prin $' 8L care declaneaz apoptoza '( *, 8. 0eci rspunsurile Ain &i&oB sunt clare , ori umoral ori celular

24

2-. Interleu0ina 2 -ursa este n celulele '( *, p, '( *, L i '( *, 8. ceste celule trebuie s fie complet acti&ate cogniti& (stimulare g) i necogniti&(prin $' 8 i $' ?) ciunile sunt autocrine ntre $' ; i *# p i paracrine. cti&eaz alte celule dec/t cele productoare '( *c, '( ), NP, trombocite, monocite. #ezultatul este stimularea de ctre $' ; a receptorilor pentru $'; adic, +0;:. +0;: se prezint sub forma de ,eterotrimer: = lanuri , , transmembranare, cu capetele N7; terminale ce sunt e.terne, se asociaz ntre ele i formeaz situsul receptor pentru $' ;, declan/nd stimuli acti&atori transmii n profunzime de lanul (transmembranar cu segmentul intracelular foarte profund). 'anul se afl n contact cu un tip de 2*P(fosfo!tiro!4inaz) particular acti&at prin acti&area 2'+ declanarea cascadei fosfatidil!inozitolilor. cest mecanism acti&ator seamn cu cel de pe calea *+# (*+#!li4e) . $'; poate acti&a di&erse tipuri de #$, depinz/nd de sursa ei: a) dac $' ; e produs de '( *, 8, rezult un #$+ b) dac este produs de '( *, p, '( *, L, atunci $' ; declaneaz #$% primare, ce apar la primul contact cu g

25

21. Interleu0inele 41" si #. I2 4 -urse : '( *, L, '( *, ; Euncii: acti&eaz #$% secundar (apar la al doilea contact cu g, i la urmtoarele), prin: a) stimularea produciei i a maturaiei intramedulare a '( ) b) $' > stimuleaz funcia de 2+ a '( ) pentru c $O' > crete foarte mult e.presia de @7+ $$ pe membrana limfoblatilor ) c) $' > stimuleaz producia de $g J , in,ib/nd producia de $g @(pentru c $'> stimuleaz n genomul '( ) mecanismul de AsRitc,B, sau comutare izotipic) I2 " -urse : '( *, L, '( *, ; -timuleaz #$% desfurat n mucoase pentru c are ; proprieti fundamentale: 8. stimuleaz producia i maturarea de '( ) ;. fa&orizeaz net producia c de tip $g , in,ib/nd n paralel producia de $J @ (prin acelai mecanism de AsRitc,B) I2 # Euncioneaz n cadrul unei cascade de $'. -urse: '( *, L, '( *, ; Euncii: acti&eaz #$+ i #$+ pentru c determin creterea produciei de ctre '( *, a receptorilor pentru $' ; i a $' ;, are efecte protectoare prin acti&area sintezei proteinelor de faz acut elaborate de ficat (limiteaz apariia unor leziuni tisulare ca urmare a declanrii proceselor inflamatorii sau imune).

26

22. Cooperarea celulara in ,I.-cooperare cogniti)a si noncogniti)a T&re loc la ni&elul zonei pals e.terne (splin) i paracorticala ganglionilor cel mai frec&ent. +ontactele stabilite ntre cele ; celule sunt de ; feluri: 8. +ontacte g!specifice - 'imfoblastul ) e pe post de 2+C produce multe molecule @7+ $$, prezint g captat limfoblastului *, prin partea carrier (*+#). - 'imfoblastul *, recunoate g prin *+# - 'imfoblastul ) e.prim +0>L (,eterodimer), receptor ce anga5eaz legturi cu un contraligand +0>L' de pe limfoblastul * ,, un inceput de cooperare bidirecional. - -emnale transmise pe calea *+#: a5ung n genom i sunt acti&ate genele pentru $', sunt lansate mai multe $' n spaiul dintre cei ; limfoblati (cooperare noncogniti&) - -emnalele acti&atoare pe calea +0>L se transmit n genom i se acti&eaz genele pentru receptorii pentru $', receptori e.pui pe membrana limfoblatilor ) (cooperare cogniti&). - 'imfoblatii ) se transform datorit $' n plasmocite i produc c n funcie de tipul de $' ce a stimulat limfoblastul: a) produc $g @ dac au fost stimulate de $' ; (limfoblastul * , a fost limfoblast *, p sau L) b) produc $g J dac stimulul s!a produs prin $' > ('( *,;) c) produc $g prin stimulare cu $' : ('( *,;)

27

23. ,etrocontrolul ,I.-prin limfocite TS-Id3 Este procesul comple. ce implic acti& '( * s. '( *s este o clas foarte ,eterogen, are di&erse tipuri: $ '( *s g specifice " clas destul de omogen: 8. 2rezint pe suprafaa lor acelai fenotipC sunt celule +093, dar '( * s sunt celule +0;9!, spre deosebire de '( *c. ;. -unt acti&ate numai de g e.puse pe membrana 2+ n comple. cu @7+ $. =. Hdat acti&ate, elaboreaz anumii factori supresori ce in,ib cooperrile celulare. >. -unt celule ce in,ib #$% i #$+ la care ele &or s participe, sunt supresoare nespecifice. $$ '( *s idiotip specifice " clas foarte ,eterogen: sunt apro.imati& ?L de tipuri: 8. ?:M sunt celule +093, restul sunt celule +0>3, asemntoare cu '( *,. ;. -e numesc idiotip specifice pentru c sunt acti&ate n urma recunoaterii prin receptorii lor de suprafa a prii g a unor receptori pentru g (idiotop, idiotip) =. $n,ib #$% prin acti&area unor factori *-E(?) ce pro&in prin solubilizarea receptorilor de suprafa. #eceptorul de suprafa al '( *s idiotip specifice e un comple. format din = structuri diferite: a) #eceptorul propriu zis pentru g ($g!li4e) situat n e.clusi&itate n afara celulei (nu are contact cu membrana). E ataat de membrana celulei printr!o b) molecul @7+ $$!E, fi.at la suprafaa '( *s prin c) pies de 5onciune (segment ce se inser n membrana '( * s). 2rin acti&are comple.ul receptorial se desolidarizeaz n componente solubile: - e eliberat receptorul propriu zis ($g!li4e) - e pus n libertate receptorul pentru g (solubil 1 liber n faz fluid), receptorul capt proprieti in,ibitorii(receptorul este asemntor cu *-E(?)

28

2#. Su/i(otipurile de Ig4-particularitati structurale si functionale a. $articulariti funcionale ale subizotipurilor Ig% $gJ1 reprezint circa ?: M din totalul $gJ: a.8 acti&eaz intens cascada complementului pe calea clasicC a.; este fi.at de toate tipurile de Ec# (+0 ?>, +0 =; i +0 8?). a.= traverseaz placenta i contribuie la imunizarea pasi& a nou! nscutuluiC $gJ2 reprezint circa ;: M din totalul $gJ: b.8 acti&eaz foarte slab complementulC b.; nu sunt fi.ai de Ec# $ (+0 ?>)C b. = nu tra&erseaz placenta. $gJ3 reprezint circa 8L M din totalul $gJ: c.8 sunt anticorpii $gJ cu cea mai mare putere de acti&are a complementuluiC c.; sunt fi.ai de oricare tip de Ec#C c.= nu tra&erseaz placenta. $gJ4 reprezint circa : M din totalul $gJ: d.8 nu acti&eaz sub nici o form complementulC d.; sunt fi.ai slab de Ec#C d.= nu tra&erseaz placenta.

b.

c.

d.

nticorpii $gJ sunt caracteristici #$% secundar. -ecreia de $gJ este stimulat de $'> produs de limfocitele *!,elper ; (*,;).

29

2%. Imunoglo/ulinele M $zotipul $g@ $g@ sunt prezente n concentraii mici comparati& cu $gJ (8,:D; mg<ml). -unt anticorpi cu &ia scurt (KD8L zile). -unt distribuii predominant intra&ascular i mai puin e.tra&ascular. -unt pentameri (n.ed &ezi comentariul fcut la afirmaia c $gJ sunt monomeri). )tructura Ig este pentamericC fiecare monomer!macromolecul $g@ se asociaz la o glicoprotein (pies de 5onciune) cu masa molecular de circa Q?L 40a. 'anurile 7 ale $g@ sunt mult mai lungi dec/t cele ale $gJC au c/te un domeniu &ariabil i patru domenii constante. *unciile Ig : $g@ sunt importante n aprarea antibacterian i anti&iral, realiz/nd o aglutinare bacteriilor i a &irionilor. -unt anticorpii cei mai acti&atori de complement (n aceast pri&in ordinea descendent este $g@S $gJ 3S $gJ1), deoarece sunt pentameri i n plus n fiecare lan 7 e.ist c/te dou domenii acti&atoare de complement (+72 i +73C n. ed. 6n cazul $gJ, numai +7 2 este acti&ator de complement). $g@ sunt anticorpi caracteristici #$% primare.

30

2'. 5unctiile generale ale complementului in cadrul ,I. 0efiniie: este un sistem multienzimatic alctuit din apro.imati& ;:!=L componente care n cadrul #$% 5oac rolul unui mecanism efector, au.iliar ce ndeplinete ; funcii ma5ore: 8. definiti&eaz aciunea c asupra g ;. realizeaz o recunoatere imunologic nespecific a diferitelor structuri non!self 2ot fi funcii e.ercitate separat sau coroborat. +ele dou funcii se e.ercit i coroborat n #$%. +omplementul inter&ine n faza terminal i iniial a #$%. $niial se capteaz g de 2+, faz fa&orizat de complement ( 2+ au pe ele receptor pentru complement). 6n faza a doua complementul nu inter&ine, a&/nd loc cooperarea celular i acti&area limfocitelor ) i generarea de c specifici. 6n faza terminal: c generai recunosc g declanatoare i se ataeaz pe suprafaa g rezult/nd cascada complementului pe calea clasic ce duce la @ + ce perforeaz membranele bacteriene i rezult distrugerea g comple.e.

31

2*. Particularitatile functionale ale cascadelor complementului 8. complementul funcioneaz mereu pe principiul cascadei: di&eri factori ai complementului circul sub form de enzime inacti&e sau zimogeni, aceti factori se acti&eaz unul pe altul. ;. acti&area factorilor complementului se face prin proteoliz limitat: con&ersia zimogenului n enzim acti& prin liz parial i rezult un fragment mai mic Ta i unul mai mare Tb. Ta rm/ne n faz fluid, T b reprezint enzima acti&. =. enzimele acti&e rezultate se depoziteaz mereu pe membrana celulei form/nd comple.e multimoleculare pe principiul comple.elor multienzimatice, se face constituirea unui comple. bimolecular TbUb >. funcia cascadei complementului este rezultatul comutrii specifice de substrat a enzimei acti&ate. 2rin ataarea U b, Tb i modific structura i rezult un Vb care se ataeaz de membran ca un comple. trimolecular T bVbUb.

32

3-. Componenta C1 a complementului

8. componenta +8 a complementului1 comple. trimolecular alctuit din + 8W,

+8r i +8s. +8W este componenta de recunoatere a complementului, + 8r i +8s sunt componentele enzimatice (serin!esteraze, cea mai acti& fiind + 8s) C16 Este componenta central a lui + 8, n mediile lic,idiene este ntr!o concentraie de KLg<l, este alctuit din ? subuniti identice, asamblate ; c/te ; cu formarea a = uniti identice ce adopt n spaiu profilul literei U. 'anurile polipeptidice , ), + dintr!o subunitate prezint spre capul N7;!terminal o dispoziie regulat de triplu ,eli. 1 configuraia colagen!li4eC spre captul +HH7 terminal are dispoziie globular. 2rin captul +HH7 terminal +8W realizeaz legturi cu domenii acti&atoare de complement ale $g: +7; ($g J), +7;, +7= ($g @). ceste legturi se realizeaz secundar recunoaterii $g a diferitelor g. 6n urma recunoaterii g de ctre $g se fac modificri conformaionale n $g J i se e.teriorizeaz sec&ene acti&atoare de aminoacizi, sec&enele sunt recunoscute de +8W. +8W recunoate prezena comple.elor imune g! c. @odificrile conformaionale n +8W dinspre cap + spre cap N duce la e.teriorizarea sec&enelor de aminoacizi spre capul N7 ; ce fi.eaz i acti&eaz +8r. +8r fi.at, fi.eaz la r/ndul ei pe + 8s ce se acti&eaz. +8s scindeaz funcional +>, +; din calea clasic.

33

31. Componenta C3 a complementului ! Este componenta central a complementului. ! se afl n concentraii foarte mari (L.:!8.:mg<ml) ! acti&eaz pe ambele ci ! are ca structur ; lanuri (greutatea molecular este de 89L4d) i , legate ntre ele prin puni disulfurice. -unt lanuri antiparalele(lanul e orientat cu capul N spre capul + al lanului ). 'anul e foarte lung, ctre capul c prezint un buzunar n care e internalizat relati& o grupare intern tiol!esteric (realizat ntre o cistein i glutamin). 'anul e mai mic C are un situs fi.ator pentru componenta + : a complementului. Vimogenul de += poate fi acti&at prin ; mecanisme: a) enzimatic " astfel += funcioneaz pe calea clasic i pa calea altern b) nonenzimatic: acioneaz strict doar pe calea altern cti&area enzimatic a lui += -e realizeaz prin += con&ertaze ce cli&eaz lanul ctre capul N terminal i elibereaz un mic fragment din ce de&ine solubil (componenta +=a ) cu funcii proinflamatorii (determin &asodilataie i crete permeabilitatea capilar) #estul de molecul += se numete componenta +=b i se ataeaz de membrana celular, dac acestea nu sunt prote5ate anticomplement, prin stabilirea de legturi. 6n urma cli&rii se produc modificri ale lanului (cap N ! cap +), cu rela.area buzunraului ,idrofob i aducerea la suprafa a gruprii tiol! esterice, o legtur electronofil ce anga5eaz legturi cu gruprile nucleofile ce se afl n membrana celular (!H7 din glucidele membranei celulare i N7 ; din proteinele membranei celulare). ceast ataare (depozitare) duce la opsonizarea membranei i derularea cascadei complementului. cti&area nonenzimatic cti&area nonenzimatic se datoreaz particularitilor buzunarului ,idrofob ce realizeaz o internalizare relati& a gruprii tiol!esterice: permite ptrunderea lent a moleculei de ap n buzunar interacion/nd cu gruparea tiol! esteric i form/nd radicali "+HH7 i "-7. #uperea legturii tiol!esterice duce la modificri conformaionale transmise dinspre cap +HH7 spre cap N7 ; terminal ce se soldeaz cu e.teriorizarea situsului combinati& pentru factorul ) > al complementului. @oleculele de ap ptrund permanent n buzunar, deci calea altern funcioneaz permanent.
34

32. Componenta C4 a complementului ! este componenta ce acti&eaz calea altern ! se afl n concentraii mici (>LL!:LL g<ml) ! ca structur prezint = lanuri asociate ntre ele prin puni disulfurice ( ,,): lanul (gm 1 QL P0) prezint ctre capul +HH7 terminal un buzunar care internalizeaz se&er o grupare tiol!esteric. lanul are ?L 4d lanul prezint o sec&en de aminoacizi capabil s se ataeze pe + ; a complementului. Vimogenul +> poate fi acti&at doar enzimatic (acioneaz doar n calea clasic). Enzima este +8s ce cli&eaz lanul unde&a ctre capul N7; terminal, pstr/ndu!se puntea disulfuric ntre lanul i , rezult/nd +>a. restul moleculei de +> se numete +>b: ! nu rm/ne n stare fluid, ci se ataeaz de membrana celulei acceptoare de complement. ! apar modificri conformaionale (n direcia N +) ca rela.area buzunarului ,idrofob, e.teriorizarea gruprii tiol!esterice ! gruparea tiol!esteric realizeaz legturi cu grupri nucleofile (!N7 ;, !H7) din structurile glucidelor din membrana celular ! n urma atarii lui +> de membrana celular se produce fi.area zimogenului de +; (prin modificri conformaionale de ansamblu ce duc la e.teriorizarea situsului acti&ator pentru +; ) se fi.eaz zimogenul de +; pe lanul . +> nu poate fi acti&at de moleculele de ap pentru c buzunarul are o gur foarte str/ns prin care nu poate ptrunde apa. +; " este cli&at sub aciunea lui +8s - reprezint componenta enzimatic a lui + = " con&ertazei generat pe calea clasic a complementului +:, +?, +K ! iniiaz comple.ul de atac al membranei (@ +) +9 ! funcioneaz ca o polimeraz: polimerizeaz pe + Q +Q " este un lan polipeptidic unic ce se dispune sub forme de mic plcue care n prezena calciului i a polimerazei + 9 se asambleaz i formeaz structuri mici tubuliforme ce se inser n membrana non!self i duce la liza osmotic a celulei.

35

33. !tapa generarii C3 con)erta(ei pe calea clasica a complementului. 2rincipiul etapei: comple.ele imune membranare actioneaza asupra + 8, care formeaza un comple. (+8Wrs)C +8seste partea enzimatica propriu!zisa. 0etalii: +8Wrs este generat pe membrana unor celule (de obicei non!self) prin atasarea $g de g. g pot fi constituti&e ale membranei celulei sau doar atasate deea. g sunt recunoscute de $g acti&atoare de complement ($g@ si $gJ =, $gJ8 si $gJ; (slab) ($gJ> nu sunt deloc acti&atoare de complement)). +ele mai acti&atoare de complement sint $g@ (pentameri), dar $gJ sunt bine reprezentate e.tra&ascular (in lic,idele interstitiale)C $g@ nu prea pot trece prin membrana capilara deoarece sunt prea mari. 'a legarea de g, in fragmentul Eab se transmit niste modificari conformationale spre Ec!!S e.teriorizarea situsului acti&ator al complementului (pe +7; pentru $gJ). cesta realizeaza legaturi cu unitatea de recunoastere a complementului !!S legaturi intre +7; si +8W (portiunea globuloasa). 0upa legare se transmit modificari conformationale la partea colagenica a + 8W !!S se e.teriorizeaza situsul de acti&are si legare a +8r. +8r (fi.at si acti&at) fi.eaza si acti&eaza +8s. +8s fi.eaza si cli&eaza +> la ni&elul lantului X (spre capatul amino! terminal) se elibereaza un mic fragment " +> (anafilato.ina slaba). +>b se ataseaza membranei celulei tinta, anga5ind legaturi prin gruparea tiolesterica. +>b se fi.eaza in 5urul comple.elor imune. +>b fi.eaza pe membrana componenta +;. +; se fi.eaza practic la +>b si nu la membrana. +>b este un cofactor pentru +;. cum +; de&ine substrat pentru !+s (nu sunt sigur ca e bineIIII). -e elibereaza un mic fragment fluif +;a. 2e membrana ramane ansamblul format din fragmentele mari ale +> si +; +>b;b1+=! con&ertaza clasica. +>b este un cofactor pentru +;, iar +;b este partea enzimatica propriu! zisa a +=!con&ertazei.

36

34. !tapa generarii C"-con)erta(ei pe calea clasica a complementului. 2rincipiu: +>b;b actioneaza asupra += (bine reprezentat in mediile lic,idiene). -e desprinde +=a care este o puternica anafilato.ina (este responsabila de aparitia unor reactii inflamatorii cresterea permeabilitatii &asculare,&asodilatatie). #ezulta si += care poate urma ; caiC o parte din +=b se asociaza la +=! con&ertaza de5a depozitata pe membranacomple. trimolecular +>b;b=b1+: con&ertaza. 2artea enzimatica acti&a este +;b. 2rin aditia +=b, +;b isi modifica specificitatea de substrat. #estul de +=b se depun in molecula langa molecula pe suprafetele membranelor celulare (neprote5ate impotri&a complementului non!self) opsonizarea celulelor tinta, fa&orizand recunoasterea imunologic nespecifica, iar daca este posibil duce la fagocitoza. 0etalii: += con&ertaza lizeaza lantul X spre capatul N7 ; terminal +=a si +=b. 2rin fi.area +=b la +=!con&ertaza se creaza posibilitatea functionarii comple.ului in rest. Hpsonizarea membranelor non!self cu fragmente +=b se face prin intermediul legaturii tiolesterice permite recunoasterea celulelor tinta de catre macrofageC acestea au un receptor pentru +=b (se numeste +# 81+0=:). 0aca celula tinta are dimensiuni destul de mici, atunci este fagocitata. Hpsonizarea este utila in #$ primar. $g@ nu trec in mod obisnuit e.tra&ascular, decat cand e.ista o permeabilitate crescuta. 'egarea $g@ intrasang&in nu permite fagocitarea.

37

3". !tapa generarii MAC pe calea clasica a complementului. 2rincipiu: +:a ramane in faza fluida si are efecte de anafilato.ina foarte importanta. +:b nu se ataseaza membranei, ci re&ine in faza fluida. +:b face legaturi cu +? mai ales prin complementaritate. +? acti&at interactioneaza cu +K+:b?K (in faza fluida). +K are un caracter lipofil si se comporta ca un detergent se ataseaza membranelor celulare. ici capata posibilitatea de a acti&a +9. +9 de&ine polimeraza, care polimerizeaza +Q (in prezenta +a ;3). +Q se organizeaza sub forma de structuri tubuliforme, care inserate in membrana celueli duc la liaza osmotica a ei. +:b?K9Q se numeste comple.ul de atac al membranei @ +. 0etalii: +: fi.eaza de lantul Y al +=b. +K capata functia de detergent. 2e membrana, cK capata si capacitateade a acti&a +9. +9 de&ine polimeraza care polimerizeaza +Q sub forma unui tub inserat in membrana. 2rin acest canal se pot face sc,imburi libere de apa si ioni Na3 si apa intra in celula ,iper,idratare liza.

38

3#. 5actorii specifici 7acti)atori$in8i/itori9 ai caii alterne a complementului. +alea alterna se declanseaza in lipsa unei stimulari antigenice. $. Eactori acti&atori

E +*H#%' ) ! se gaseste in concentratii de ;LL Zg<ml) ! initiaza reactiile din calea alterna ! intra in constitutia += si +: con&ertazelor, in cadrul carora indeplineste aceeasi functie ca +;b. E +*H#%' 0 - se gaseste in concentratii infinitezimale (8!; Zg<ml) - este o proteaza serinica e.trem de acti&a si care se gaseste in lic,idele interstitiale nu sub forma de zimogen, ci sub forma de enzima acti&a. - 0esi este acti&a si intensa, ea nu are efecte defa&orabile asupra altor proteine deoarece se afla in concentratie foarte mica si (mai ales) are o specificitate de substrat foarte restransa substratul ei este factorul ) cu conditia ca acesta sa fi fost legat de += 2#H2E#0$N - cu e.ceptia factorului 0, dintre toti factoriii complementului, ea se afla in concentratiile cele mai mici (ma.im ;L Zg<ml) . - intra in constitutia +=!con&ertazei ade&arate a caii alterne $$. Eactori in,ibitori

E +*H#%' 7 - >LL Zg<ml - se opune formarii += si +: con&ertazelor caii alterne - este si cofactor prentru factorul $ E +*H#%' $ - ?: Zg<ml - lizeaza total componentele +=b, +>b daca acestea s!au depozitat accidental pe membrana celulelor self reduce posibilitatea constituirii tuturor +=!con&ertazelor caii alterne.

39

3%. Ansa de autoacti)are a caii alterne a complementului. 0esfasurarea caii alterne are un dublu ni&el de functionalitate: ni&el bazal si ni&el amplificat. Ni&elul bazal - functioneaza permanent, dar cu o intensitatem ai redusa - lantul X al += are acel buzunar ,idrofob in care pot intra totusi molecule de apaC acestea ,idrolizeaza gruparea tiolesterica. cest fenomen se produce lent dar permanent se e.teriorizeaza (pe lantul X) permanent situsul pentru factorul ) ceasta functie are loc in lic,idele interstitiale si se mai numeste Aansa de autoacti&areB 0etalii: += ,idratat capata afinitate mare pentru factorul ). Eactorul ) atasat de +=(7;H) de&ine substrat pentru facotrul 0 din ) se desprinde (este lizat) fragmentul )a si ramane )b. +omple.ul +=(7;H))b este +=!con&ertaza initiala a caii alterne. re o functionalitate foarte redusa. Ea lizeaza slab += +=a si +=b(in lic,id). +=b se alipeste de membranele celulare prin gruparea tiolesterica. %nele membrane il accepta, altele nu. +=b nu se poate depozita pe membranele self deoarece acestea sunt prote5ate anti!complement. +=b in contact cu membranele non!self se depoziteaza pe ele. cum e.ista ; posibilitati: opsonizarea membranei sau initierea ansei de amplificare a caii alterne.

40

3'. Ansa de amplificare a caii alterne a complementului. 0esfasurarea caii alterne are un dublu ni&el de functionalitate: ni&el bazal si ni&el amplificat. Ni&elul amplificat! acti&area complementului se face la un ni&el corespunzator daca in mediile lic,idiene sunt prezente membrane celulare care permit depozitarea complementului pe ele (membrane non!self). - e.emplu: bacterii, &irusi, paraziti - aceasta cale se numeste Aansa de amplificareB - la final conduce la constituirea @ + pe membranele celualre straine. 0etalii: +=b aditioneaza factorul ) comple.ul +=b)C acesta de&ine substrat pentru facotrul 0. #ezulta comple.ul +=b)b (+=!con&ertaza). ceasta este ce&a ami acti&a ca cealalta con&ertaza (+=!con&ertaza initiala), dar este instabila. ceasta con&ertaza este stabilizata prin formarea unui comple. cu propederina. +omple.ul +=b)b2 este stabil si este +=!con&ertaza (+=! con&ertaza ade&arata a caii alterne). Ea functioneaza la acelasi ni&el ca +=! con&ertaza caii clasice. +=!con&ertaza ade&arata cli&eaza si mai mult += cerc poziti& (feed!bac4 poziti&) de amplificare a reactiei. ceasta amplificare are loc pana l aepuizarea properdinei (care se gaseste in cantitati mici). 'a epuizarea properdinei, e.cesul de +=b intractioneaza cu +=! con&ertaza instabila comple.ul +=b)b+=b se sc,imba specificitatea de substrat are afinitate pentru +: (deci +=b)b+=b este +:!con&ertaza. poi toata reactia se desfasoara identic ca in calea clasica pana la formarea @ +. 0iferenta este ca @ + se formeaza pe membrane non!self (membrane neprote5ate anti!complement). $g nu au nici un rol in aceasta cale.

41