IMUNOLOGIE SI IMUNOCHIMIE

CUPRINS

Cuvnt nainte Introducere Etapele dezvoltrii Imunologiei ca tiin Diviziunile Imunologiei

Capitolul 1. Caracterizarea general a antigenelor Modelul general de structur a unui antigen Proprietile definitorii ale antigenelor Clasificarea i imunogenitatea antigenelor Antigene naturale Antigene moleculare aptene Antigene corpusculare Antigene artificiale Antigene sintetice Determinanii antigenici Efectul de carrier Factorii care condiioneaz imunogenitatea Antigene endogene

Antigene heterofile Adjuvanii

Capitolul 2. Imunoglobulinele ( nticor!ii" !tructura moleculei de imunoglo"ulin #unciile moleculei de imunoglo"ulin Heterogenitatea anticorpilor eterogenitatea izotipic $ariantele alotipice $ariantele idiotipice IgG IgA !tructura moleculei de sIgA #unciile efectoare ale sIgA IgM IgE IgD Interaciuni g# c . %azele moleculare ale interaciunii Ag&Ac $azele moleculare ale reaciilor imune %ncruciate E'emple de reacii imune ncruciate

Capitolul 3. Sistemul imunocitar (limfoid"

&ecanisme de a!rare la ne'ertebrate (rganizarea sistemului imunitar la 'ertebrate Limfocitele (imfocitele % (imfocitele ) *eceptoul de antigen al limfocitelor ) +*C), Celulele -. $azele genetice ale di'ersitii rece!torilor de antigen Mecanismele genetice ale diversitii imunoglo"ulinelor Mecanismele genetice ale diversitii *C)i Dez'oltarea ontogenetic a sistemului imunocitar *olul "ursei lui #a"ricius n diferenierea limfocitelor % Diferenierea limfocitelor % la mamifere )imusul la mamifere i rolul lui n diferenierea limfocitelor ) Ar/itectura timusului Maturarea limfocitelor ) n timus #actorii celulari i moleculari ai diferenierii limfocitelor (rganele limfoide secundare (!eriferice" 0anglionii limfatici !plina !istemul imunitar al mucoaselor Recircularea limfocitelor %azele moleculare ale fenomenului /oming

*ecircularea limfocitelor n structurile limfoide ale mucoaselor *ecircularea limfocitelor n compartimentul teriar nelimfoid

Capitolul 4. ntigenele com!le)ului ma*or de +istocom!atibilitate !tructura molecular a antigenelor CM clasa I !tructura molecular a antigenelor CM clasa II Determinismul genetic al moleculelor CM Evaluarea diferenelor antigenice ale moleculelor CM Distri"uia tisular a moleculelor CM i semnificaia lor evolutiv

Capitolul 5. Rs!unsul imun Particularitile generale ale rs!unsului imun ,ta!ele rs!unsului imun Celulele prezentatoare de antigen relucrarea antigenelor *olul moleculelor CM n prezentarea antigenelor Antigenele e'ogene sunt prezentate n asociaie cu moleculele CM II

Antigenele endogene sunt prezentate n asociaie cu moleculele CM I Modelul recunoaterii antigenelor de ctre limfocitul ) Prezentarea antigenelor n asociaie cu moleculele CD 1 Activarea limfocitelor ! Activarea limfocitelor " !timularea nespecific a limfocitelor %

Cooperri celulare n ela"orarea rspunsului imun Activarea limfocitelor su" aciunea antigenelor timo&independente Activarea limfocitelor %1 Efectele stimulrii antigenice asupra esutului limfoid secundar Dinamica rs!unsului imun mediat +umoral Rs!unsul imun +umoral secundar #actorii care condiioneaz intensitatea rspunsului imun Anticorpi naturali %iosinteza imunoglo"ulinelor Cata"olismul imunoglo"ulinelor 2tilizri ale serurilor imune Imunitatea mediat celular &ediatorii moleculari ai reacti'itii imunitare Interleuc+ine IL#$ IL#% Alte citochine Interferonii i mecanismele aciunii lor Activiti "iologice efectoare ale interferonilor %azele moleculare ale activitii interferonilor Perspectivele producerii i utilizrii interferonilor $azele celulare i moleculare ale memoriei imunitare Reglarea rs!unsului imun

-olerana imunitar #actorii care condiioneaz inducerea strii de toleran )olerana ftului

Capitolul 6. Surse de gamaglobuline omogene roteinele de mielom &urse artificiale de gamaglo'uline omogene( !ehnologia hi'ridomului Etapele o"inerii /i"ridomului Avanta3ele "iote/nologiei /i"ridomului Aplicaii practice ale AMC

Capitolul 7. &ecanisme de a!rare antiinfecioas Rs!unsul imun s!ecific antiifecios !tructura antigenic a celulei "acteriene Mecanisme prin care microorganismele evit aprarea gazdei Rs!unsul imun %n infeciile 'irale *spunsul imun primar *olul anticorpilor n imunitatea antiviral Imunitatea antiviral mediat celular Mecanisme prin care celulele infectate evit efectorii rspunsului imun -i!urile de imunitate dob.ndit Imunitatea do"ndit artificial activ /accinurile

)accinuri de origine 'acterian* )accinuri virale Imunitatea do"ndit artificial pasiv Rezistena antiinfecioas %nnscut nes!ecific Sisteme celulare cu rol %n rezistena antiinfecioas nes!ecific &istemul fagocitar mononuclear *eceptorii mem"ranari ai macrofagului Activarea macrofagului Endocitoza *olul macrofagului n aprarea fa de "acteriile cu localizare intracelular Alte funcii ale macrofagului &istemul fagocitar polimorfonuclear Diferenierea neutrofilelor !isteme "actericide active n PM-Deficiene funcionale ale sistemului PM-&istemul complement Mecanismul general de activare a sistemului complement Calea clasic de activare a complementului !istemul de activare enzimatic Calea altern a fi'rii complementului #unciile complementului Proteine reglatoare ale activitii sistemului complement Epuizarea e'perimental a complementului seric

%iosinteza componentelor sistemului complement *olul complementului n aprarea antiinfecioas rocesul inflamator Diapedeza C/imiota'ia )ipuri de reacii inflamatorii Mediatorii reaciei inflamatorii *olul citoc/inelor n procesul inflamator *eactanii de faz acut

Capitolul 8. Reacii imunitare in vivo 01 Reaciile de +i!ersensibilitate Clasificarea reaciilor de /ipersensi"ilitate +eaciile de hipersensi'ilitate imediat* de tip I Declanatorii Mediatorii reaciilor de /ipersensi"ilitate de tip I Mecanismul celular i molecular al reaciilor de /ipersensi"ilitate tip I Efectele mediatorilor mastocitari E'emple de stri de /ipersensi"ilitate de tip I )estarea strilor atopice +eaciile de hipersensi'ilitate imediat* de tip II Aloimunizarea post&transfuzional Aloimunizarea feto&matern n incompati"ilitatea */

*eacia imunoalergic antieritrocitar determinat de medicamente +eaciile de hipersensi'ilitate imediat* de tip III Epurarea comple'elor imune i cauzele persistenei lor n organism Maladii determinate de comple'ele imune Modelul e'perimental al comple'elor imune Modelul clinic al maladiei cu comple'e imune +eacia de hipersensi'ilitate de tip I) ,Hipersensi'ilitatea int-rziat*. Declanatorii reaciilor de /ipersensi"ilitate ntrziat 14 *eacia de /ipersensi"ilitate ntrziat de tip tu"erculinic Efectorii celulari ai reaciei de /ipersensi"ilitate ntrziat 54 *eacia de /ipersensi"ilitate ntrziat de tip granulomatos )este in vivo pentru detectarea /ipersensi"ilitii ntrziate 64 ipersensi"ilitatea de contact +dermatita de contact,

21 Conflictul imunitar1 &aladiile autoimune Mecanisme ipotetice ale iniierii conflictului autoimun Inducerea e'perimental a maladiilor autoimune &ecanisme celulare i moleculare ale !rogresiei maladiilor autoimune Maladii autoimune ale esutului conjunctiv ,colagenoze. (upusul eritematos diseminat Artrita reumatoid %iologia molecular a artritei reumatoide #e"ra reumatismal "iologia molecular* a maladiilor autoimune cu specificitate de organ

Dia"etus mellitus insulino&dependent Maladii autoimune tiroidiene Anemia pernicioas M7ast/enia gravis Ciroza "iliar primitiv Maladia Addison %oala Cro/n i colita ulcerativ Anemiile /emolitice autoimune Purpura trom"ocitopenic Pemp/igus

Capitolul 9. Imunodeficienele Imunodeficienele nnscute Imunodeficienele do"ndite Imunodeficiena consecutiv infeciei cu I$

Capitolul 10. Imunologie tumoral ntigene tumorale Rs!unsul imun antitumoral Efectorii rspunsului imun antitumoral *olul celulelor -. Citoto'icitatea mediat de macrofage Imunitatea mediat de limfocitele )

Mecanisme de scpare a celulelor tumorale A"ordri terapeutice ale neoplaziilor

Capitolul 11. Imunitatea %n trans!lantul de esuturi i organe Argumente ale rolului reactivitii imunitare n respingerea grefei ,'oluia res!ingerii grefei de !iele *espingerea grefei de rinic/i Antigenele declanatoare ale respingerii grefei )este de /istocompati"ilitate 8enotransplantarea Imunosupresia

Capitolul 12. Interaciunile sistemului imunitar cu sistemul neuroendocrin *olul /ormonilor corticosteroizi n reglarea funciei imunitare *olul se'osteroizilor #actorii neuroendocrini favorizani ai maladiilor autoimune umane

CU/3N- 4N IN-,

Imunologia este unul dintre domeniile cele mai dinamice ale tiinelor iologice. !uncia imunitar" este esenial" pentru organismul uman i animal i de aceea# dis$unciile imunitare se%ere sunt incompati ile cu supra%ieuirea. &e de alt" parte# acti%area neadec%at" a $unciei imunitare are drept consecin" iniierea sau progresia st"rilor patologice de 'ipersensi ilitate i a maladiilor autoimune# ceea ce a ampli$icat interesul pentru studiul Imunologiei. (ceast" lucrare este intitulat" Imunologie i Imunoc/imie# pentru c" accentuea)" *n mod deose it# studiul reactanilor $undamentali ai imunit"ii+ antigene i anticorpi. ,ucrarea pre)int" *ntr-o $orm" didactic"# $oarte accesi il"# mecanismele moleculare ale reacti%it"ii imunitare *n di$eritele sale iposta)e+ r"spunsul imun $a" de antigene moleculare# antigene de natur" in$ecioas"# autoantigene# antigene tumorale sau antigene de transplantare. Coninutul acestei lucr"ri este re)ultatul c"ut"rilor de-a lungul mai multor ani i a *ncerc"rii de a pre)enta *ntr-o $orm" concis"# coerent" i unitar"# pro lematica ma.or" a Imunologiei# *n conte/tul do%e)ilor tot mai numeroase i mai con%ing"toare# c" $uncia imunitar" are nu numai rolul clasic de ap"rare antiin$ecioas"# ci este *ntr-o continu" e/pansiune a implic"rii sale# at0t *n meninerea 'omeosta)iei c'imice a organismului# c0t i *n numeroase st"ri patologice. Imunologie i Imunoc/imie este titlul unei lucr"ri care i-a propus ca de)iderat# s" consolide)e un mod de g0ndire i de *nelegere a $unciei de ap"rare ca o $uncie iologic" esenial"# a c"rei acti%are are nu numai e$ecte ene$ice# dar uneori generea)" mani$est"ri patologice# aa cum sunt reaciile de /ipersensi"ilitate i con$lictele imunitare care stau la a)a progresiei maladiilor autoimune. 1n construcia lucr"rii Imunologie i Imunoc/imie am pornit de la %olumul 2Imuno iologie3 i de la capti%antele cursuri inute# la *nceputurile Imunologiei *n !acultatea de 4iologie a 5ni%ersit"ii 4ucureti# de 6omnul (cademician &ro$esor 6octor 6ocent 7. 8(9:;(# c"ruia *i aduc un respectuos omagiu pentru genero)itatea e$ortului constructi% al 6omniei <ale# in%estit *n de)%oltarea disciplinelor micro iologice. ,ucrarea Imunologie i Imunoc/imie este materiali)area e$orturilor de actuali)are i conectare c0t mai trainic" a domeniului# la realit"ile tiini$ice ale momentului. ,ucrarea se adresea)" tuturor studenilor i a sol%enilor mai noi# dar mai ales celor %ec'i# ai $acult"ilor de %iologie9 Medicin uman i Medicin

veterinar# precum i specialitilor ale c"ror preocup"ri pro$esionale# practice sau teoretice# inter$er" cu domeniul Imunologiei. =in s" mulumesc anticipat tuturor acelora care %or studia lucrarea Imunologie i Imunoc/imie i %or $ace o ser%aii critice *ntemeiate# de care %oi ine seama *ntr-o %iitoare ediie a acestei c"ri.

IN-R(DUC,R,

Imunologia studia)"# *n primul r0nd# $uncia de ap"rare a organismului uman i animal# care $ace parte din categoria $unciilor de relaie i este esenial pentru supra%ieuire. <istemul imunitar este esenial pentru supra%ieuirea organismelor multicelulare# datorit" agresiunii permanente a agenilor in$ecioi >microorganisme i %irusuri?. @mul adult poart" pe supra$aa mucoaselor i a tegumentului# un num"r uria de celule acteriene >circa 10 14?# mai multe dec0t propriile celule# unele a%0nd potenialul de a iniia procese in$ecioase. 6is$uncia se%er" congenital" sau do 0ndit" a $unciei imunitare este incompati il" cu %iaa. Aermenul de imunitate are o pro%enien" social"+ *n 9oma antic"# persoanele scutite de impo)ite c"tre stat# erau considerate 2imune3. <ensul termenului s-a e/tins# ulterior desemn0nd persoanele scutite de a su$eri e$ectele in$eciei cu ageni patogeni. Imunologia s-a n"scut i s-a de)%oltat ca un domeniu al Micro"iologiei# a)0ndu-se pe cunotiinele i conceptele Patologiei i %ioc/imiei. 1n sensul clasic# restr0ns al noiunii# Imunologia studia)" reacti%itatea organismului animal i uman# consecuti% contactului cu agenii patogeni# mecanismele ela or"rii r"spunsului imun# precum i particularit"ile esuturilor# celulelor i moleculelor care condiionea)" starea de imunitate. In sens clasic# noiunea de imunitate de$inete starea de nereceptivitate sau de re)isten" a organismului $a" de un agent patogen in$ecios# *n situaia *n care sunt *ndeplinite condiiile pentru apariia unei maladii in$ecioase. 6in acest moti%# Imunologia s-a de)%oltat ca un domeniu al Micro"iologiei. 1n concepia clasic"# s-a considerat c" acti%area $unciei imunitare are un e$ect e/clusi% ene$ic# protector pentru organism.

:n concepia modern9 funcia imunitar se definete ca o proprietate "iologic esenial a organismului uman i animal9 care const n capacitatea de a diferenia rapid i specific9 su"stanele proprii de cele strine4 <istemul imunitar este tolerant $a" de su stanele proprii# deoarece 2a *n%"at3 s" le recunoasc" *n timpul %ieii em rionare# dar este dotat cu proprietatea de a recunoate i de a di$erenia prompt su stanele str"ine# $a" de care se acti%ea)" i le *ndep"rtea)" din organism. Aolerana imunitar" este re)ultatul unui proces de selecie a clonelor de lim$ocite# selecie ce are loc *n perioada de)%olt"rii em rionare a lim$ocitelor# ele $iind celulele e$ectoare ale r"spunsului imun. <elecia const" *n eliminarea clonelor de lim$ocite potenial autoreacti%e >potenial reacti%e $a" de moleculele proprii? Componentele c'imice proprii organismului# pe care sistemul imunitar le tolerea)"# sunt incluse *n noiunea de 2sel$3 > self# engle) B propriu?# iar cele str"ine# care se a at de la structura c'imic" programat" genetic a organismului# poart" denumirea de su"stane nonself sau antigene. (st$el# funcia imunitar este o funcie "iologic esenial9 prin intermediul creia organismele difereniaz prompt i cu mare sensi"ilitate9 componentele self de su"stanele nonself4 !uncia imunitar" are un rol determinant pentru p"strarea 'omeosta)iei mediului intern i a indi%idualit"ii c'imice a $iec"rui organism# prin $aptul c" sistemul imunitar recunoate i tolerea)" moleculele proprii# dar se acti%ea)" la contactul cu su stanele str"ine care se a at de la programul ioc'imic tolerat. 6up" ce *n%a" s" tolere)e sel$-ul# c'iar din perioada de)%olt"rii em rionare# $uncia imunitar" reali)ea)" un permanent 2control de calitate3 a moleculelor sel$. (a cum aparatul genetic asigur" sta ilitatea i integritatea unei specii ca sistem iologic# sistemul imunitar asigur" p"strarea 'omeosta)iei ioc'imice a organismului. !uncia imunitar" este mediat" de molecule cu rol de receptori de pe supra$aa limfocitelor i de molecule solu ile *n umorile organismelor. @ iectul de studiu al Imunologiei s-a di%ersi$icat odat" cu progresul general al tiinelor iologice i *n special# odat" cu apro$undarea cunoaterii $unciei de ap"rare. 1ncep0nd din anii C60# interesul tiini$ic pentru Imunologie a crescut considera il din dou" moti%e+ 1? 1n primul r0nd s-a demonstrat c" $uncia imunitar" este esenial pentru organism# insu$iciena sa m"rind riscul in$eciilor cu microorganisme patogene

sau potenial patogene# iar dis$uncia imunitar" se%er" este incompati il" cu %iaa. 2? <-a demonstrat c" acti%area $unciei imunitare nu este totdeauna ene$ic" pentru organism# ci uneori# stimularea ei determin" le)iuni tisulare se%ere# c'iar ire%ersi ile# asociate cu strile de /ipersensi"ilitate sau iniia)" e%oluia unor st"ri patologice gra%e# ca de e/emplu# maladiile autoimune4 ;/emplul clasic este o$erit de in$ecia cu M7co"acterium tu"erculosis sau cu M4 leprae. ,e)iunile tisulare# materiali)ate *n e/istena granuloamelor# se datorea)" c'iar r"spunsului imun# care este aa de amplu *nc0t produce mani$est"rile patologice. !trile de /ipersensi"ilitate de$inesc o stare de reacti%itate imunitar" crescut" i se caracteri)ea)" prin aceea c"# la primul contact cu o su stan" nonsel$# nu se produce un r"spuns imun detecta il# ci organismul do 0ndete o stare special" de sensi"ilizare imunitar $a" de un antigen. ,a contactul secundar ulterior# c'iar cu cantit"i $oarte mici ale antigenului sensi ili)ant# organismul r"spunde cu mani$est"ri patologice de intensit"i %aria ile# al c"ror re)ultat $inal poate $i $atal. (a se *nt0mpl" *n st"rile de 'ipersensi ilitate >alergii? la polen# la di$erite medicamente >de e/emplu# penicilina?# la %eninul insectelor sau la di$erite su stane alimentare. Dodi$ic"rile patologice consecuti%e alergiilor pot $i locale sau generali)ate. 5n domeniu %ast# *n continu" e/pansiune# dar relati% recent al Imunologiei *l constituie maladiile autoimune. In esen"# maladiile autoimune semni$ic" *ntreruperea st"rii de toleran" per$ect" pe care sistemul imunitar o mani$est" $a" de componentele sel$. 6atorit" unor st"ri $i)iologice legate de procese de *m "tr0nire# unor procese in$ecioase# datorit" unor procese patologice degenerati%e sau ca urmare a utili)"rii su stanelor medicamentoase# *n organism se produc modi$ic"ri c'imice tisulare care sunt detectate de celulele sistemului imunitar. Consecina este declanarea unui r"spuns imun $a" de componentele sel$ modi$icate c'imic. (st$el se iniia)" un con$lict autoimun# *n cursul c"ruia sistemul imunitar generea)" e$ectorii s"i E celule activate i molecule E care recunosc speci$ic moleculele sel$ modi$icate. 9espingerea gre$elor de esuturi i organe este consecina acti%"rii $unciei imunitare. (ntigenele esutului gre$at# solu ile sau $i/ate pe supra$aa celulelor din gre$"# acti%ea)" lim$ocitele >celulele e$ectoare ale r"spunsului imun?. (utogre$ele sunt totdeauna tolerate. 1n condiiile unei reacti%it"i imunitare normale# alogre$ele i /enogre$ele s$0resc prin a $i respinse. Cu c0t di$erenele genetice i implicit ioc'imice *ntre organismul donor i cel receptor de gre$" sunt mai accentuate# cu at0t gre$a este respins" mai repede.

Etapele dezvolt*rii Imunologiei ca /tiin*

Imunologia este o tiin" relati% t0n"r"# care a ap"rut iniial ca un domeniu a Dicro iologiei# care la *nceputurile sale a studiat mecanismele reaciilor de ap"rare a organismului uman i animal $a" de agresiunea in$ecioas". Imunologia a $ost $undamentat" de descoperirile lui &asteur i Detc'niFo$$ i p"strea)" *nc" leg"turi de esen" cu disciplina mam" - Dicro iologia# dei ast")i ea este una dintre ramurile cele mai importante i mai dinamice ale tiinelor iologice. (pariia Imunologiei ca tiin" a $ost precedat" cu milenii# de o"servaii empirice re$eritoare la $aptul c" %indecarea unor maladii in$ecioase era urmat" de o stare de re)isten" permanent" la rein$ecie sau cel mult de $orme uoare de *m oln"%ire. Cu 2-3 secole *.C.# *n C'ina i India s-a o ser%at c" unele maladii $oarte gra%e >%ariola# pesta# ciuma?# las" *n urm" o stare de re)isten" permanent" la rein$ecie sau cel mult# persoanele $"ceau $orme $oarte uoare de *m oln"%ire. 1n in$ecia %ariolic"# apar le)iuni caracteristice mai ales pe tegumentul $eei. Dai *nt0i apar %e)icule mici# pline cu lic'id clar# al c"ror coninut se tul ur" datorit" in$iltratului celular i $ac crust"# iar dup" %indecare# las" o cicatrice ce se p"strea)" toat" %iaa >%"rsat de %0nt?. <-a trecut la in$ectarea arti$icial" a persoanelor s"n"toase *n scopul declan"rii unei *m oln"%iri uoare# care s" instale)e starea de imunitate. &ractica variolizrii prin pri)area pe nas a mo.aratului de cruste uscate# recoltate de la cei trecui prin oal"# era *nsoit" de in$ecii gra%e# datorit" cantit"ii mari de %irus in'alat. 1n 1418# procedeul %arioli)"rii a $ost introdus *n (nglia de DarG HortleG Dontagu i s-a practicat o perioad"# cu toate riscurile *m oln"%irii cu se%eritate necontrolat". Iaccinarea anti%ariolic" a $ost introdus" de ;. Jenner >1796?. Ca %accin# el a utili)at un %irus de la o%ine >coKpo/?. Detoda s-a a)at pe o ser%aia empiric" a re)istenei *n cursul marilor epidemii de %ariol"# a mulg"torilor care $useser" in$ectai cu %irusul coKpo/. (cesta# produce o in$ecie pustular" i $iind *nrudit antigenic cu %irusul %ariolei# con$er" protecie anti%ariolic". Iaccinarea persoanelor s"n"toase s-a $"cut cu lic'idul recoltat din pustulele de pe ugerul %acilor. Perioada tiinific a Imunologiei a $ost inaugurat" de ,. &asteur# prin descoperirea unor vaccinuri cu o larg" aplicaie practic". 6enumirea de 2%accin3 a $ost dat" de &asteur# *n amintirea produsului recoltat de Jenner din le)iunile de pe ugerul %acii. 6enumirea s-a p"strat pentru toate produsele $olosite *n practic"#

pentru a crea o stare de re)isten" pre%enti%" $a" de e%entualul contact cu agentul patogen. &asteur a $undamentat tiini$ic practica producerii i utili)"rii vaccinurilor. ;l a demonstrat c" propriet"ile iologice >patogenitatea i %irulena? acteriilor i %irusurilor patogene nu sunt $i/e. In anumite condiii# aceste propriet"i se pot diminua prin anumite arti$icii de te'nic"# aa *nc0t un agent %irulent care de regul" determin" o in$ecie mortal"# poate $i trans$ormat *ntr-un agent care produce o in$ecie uoar"# $"r" semne clinice# dar creea)" o re)isten" $oarte solid". Iaccinurile atenuate *ndeplinesc aceste de)iderate. &asteur a atenuat %irulena agenilor patogeni prin dou" metode+ prin nvec/irea culturilor i prin cultivarea la temperaturi ridicate4 &asteur a descoperit trei %accinuri+ al 'olerei g"inilor# al antra/ului la o%ine i al ra iei. (gentul patogen al /olerei ginilor E ;ersinia pestis E este o acterie $oarte %irulent". 5n inocul de c0te%a celule este su$icient pentru a produce *m oln"%irea i moartea organismelor sensi ile. Cultura %irulent" de ;ersinia# prin meninere la temperatura camerei >*n%ec'ire? se atenuea)" i dup" inoculare la g"inile normale# nu mai produce *m oln"%irea. &"s"rile inoculate cu cultura acterian" atenuat"# de%in re)istente la rein$ecia cu o cultur" %irulent"# spre deose ire de p"s"rile lotului martor# care se *m oln"%esc i mor. Cultura acterian" %ec'e a creat o stare de imunitate# adic" a a%ut rolul unui vaccin. (tenuarea %irulenei prin *n%ec'irea culturii este un proces necontrolat i pro a il se datorea)" modi$ic"rilor ioc'imice sau genetice ale celulelor# su in$luena produselor de cata olism acumulate *n mediul de cultur" sau se datorea)" epui)"rii mediului *n su stanele eseniale pentru cretere. (gentul patogen al infeciei cr"unoase >ant'ra/? este %acillus ant/racis# o acterie sporulat". <porul se $ormea)" la 37 o. Cultura acterian" crescut" la 42 o# *i modi$ic" propriet"ile iologice# pierde capacitatea de sporulare >de%ine asporogen"?. (ceste modi$ic"ri se *nsoesc de pierderea progresi%" a %irulenei. Incu area la 42o este o modalitate a o inerii dintr-o cultur" %irulent"# a unei culturi cu %irulen" progresi% atenuat" pentru organismul ga)d">oaie# iepure# co ai# oarece?. C"r unele este o oal" gra%" a oilor# ce se transmite i la om. &asteur a imaginat o sc'em" de %accinare a o%inelor# *ncep0nd cu un inocul acterian %irulent pentru oarece i continu0nd cu inocul acterian cu %irulen" mai mare. ( creat o stare de imunitate a o%inelor# c"rora le-a con$erit re)isten" la acteriile $oarte %irulente. (gentul in$ecios al ra"iei nu a $ost e%ideniat de &asteur. (utorul a utili)at esut ner%os medular sau creier de la iepurele in$ectat e/perimental# pe care l-a modi$icat prin uscare *n pre)ena potasei caustice. ( o inut un %accin care# administrat c0t mai repede dup" muc"tura animalului ra id# creea)" o stare de re)isten"# *n a sena c"reia in$ecia ra ic" e%oluea)" in%aria il spre moarte.

Cercet"rile lui &asteur au pus a)ele Imunologiei medicale i ale o inerii i utili)"rii pe a)e tiini$ice a vaccinurilor. ( urmat o perioad" *n cursul c"reia s-au *nregistrat progrese importante *n o inerea i administrarea %accinurilor. 4a)ele conceptului imunitii /umorale au $ost puse de 4e'ring i Litasato >1890?# care au e%ideniat anticorpii serici# dup" imuni)area animalelor de la orator. <erurile imune pot $i $olosite *n scop terapeutic pentru a stopa sau a atenua e%oluia unei oli in$ecioase# cu condiia ca administrarea acestor seruri s" $ie $oarte precoce. In 1923# 4e'ring a organi)at producia de seruri imune# preluat" de Institutul &asteur din &aris >*n$iinat *n 1894? i apoi de Institutul 4a e i de Institutul Cantacu)ino. 1n 1894# &$ei$$er a descris $enomenul de "acterioliz# demonstr0nd c" serul sanguin al animalelor imuni)ate are proprietatea de a pro%oca li)a celulelor acteriene. ;l a demonstrat c" acterioli)a necesit" dou" componente+ serul sanguin al animalului imuni)at i o pic"tur" de ser proasp"t de co ai. &rocesul este $oarte speci$ic+ serul produce numai li)a celulelor acteriene care au speci$icitate $a" de anticorpii serici. J. 4ordet a e%ideniat c" $enomenul li)ei se produce i *n ca)ul 'ematiilor# dac" sunt puse *n contact cu serul sanguin de la iepurele imuni)at cu 'ematii# la care se adaug" ser proasp"t de co ai# *n care se g"sete complementul >ale/ina?. Conceptul imunitii mediate celular a $ost $ormulat de Detc'niFo$$ >1891?. ;l a e%idniat c" *n organism e/ist" o serie de celule speciali)ate# cu capacitatea de a recunoate celulele str"ine i de a le *nglo a prin procesul de $agocito)"# care sunt digerate i eliminate din celula $agocitar". Detc'niFo$$ a $"cut o ser%aii pe crustaceul Dap/nia magna# ale c"rui celule $agocitare *nglo ea)" i diger" sporii $ungici >Monospora "icuspidata?. C0nd in$ecia cu spori este masi%"# capacitatea de ap"rare a organismului este dep"it" i ga)da moare. Cele dou" doctrine ale $enomenului imunitar# care s-au con$runtat prin repre)entanii lor# au $ost uni$icate de Hrig't >1903?. ;l a demonstrat e/istena *n ser a unor anticorpi naturali denumii opsonine# care acionea)" *n cooperare cu fagocitele4 1n 1930# L. ,andsteiner a e%ideniat o structur" antigenic" pe supra$aa 'ematiilor umane i a sta ilit e/istena sistemului antigenic (4@# precum i a normelor ce tre uie respectate *n practica transfuziei de s0nge. 9amon >1925? a demonstrat c" unii ageni patogeni >ca de e/emplu# al di$teriei# al tetanosului? produc to/ine $oarte puternice. (ceste to/ine au un potenial $oarte ridicat+ cantit"i $oarte mici de to/ine sunt su$iciente pentru a pro%oca moartea animalelor de e/perien". Aratarea preparatului de to/in" cu $ormol 4Mo i meninerea amestecului la 39 o pentru o perioad" de timp# este

urmat" de pierderea complet" a propriet"ilor to/ice. &reparatul ato/ic este ino$ensi% i poate $i administrat *n cantit"i relati% mari# $"r" s" determine e$ecte patologice. &reparatul ato/ic *i p"strea)" propriet"ile imunogene i induce o stare de re)isten" a organismelor imuni)ate. <u aciunea com inat" a $ormolului i temperaturii# to/inele di$teric" i tetanic" au $ost trans$ormate *n anato'ine. Cercet"rile de ioc'imie>1930-1950? au permis elucidarea structurii moleculare a antigenelor# a imunoglo ulinelor i a 'aptenelor. <tudiul mecanismelor celulare ale proceselor imunitare >1950-1980? este marcat de progresele iologiei moleculare i de inter$erena cu $irologia9 Micro"iologia9 %iologia celular9 %iofizica # %ioc/imia9 0enetica. <-a e%ideniat rolul esenial al limfocitului *n $enomenele imunitare# precum i rolul plasmocitelor *n sinte)a i secreia anticorpilor. Dc !arlane 4urnet >1959? a ela orat teoria seleciei clonale a r"spunsului imun# iar J.!.(.&.Diller >1960? a sta ilit rolul esenial al timusului *n do 0ndirea competenei $uncionale a lim$ocitelor A. 9. 7ood >1960? a e%ideniat rolul "ursei lui #a"ricius *n gene)a sistemului imunitar la p"s"ri. J. 6ausset >1954? a demonstrat c" pe supra$aa celulelor oric"rui organism se g"sete o serie de molecule >antigene?# care con$er" $iec"rui organism o indi%idualitate antigenic" unic". 6atorit" acestor antigene# reaciile care sunt determinate de o gre$" de esut sau de organ# pot e%olua *n mod di$erit+ *ntre organismele $oarte *nrudite# gre$a prinde $oarte ine# iar o gre$" *ntre organisme cu di$erene ma.ore de ordin genetic# produce o reacie de respingere# care este cu at0t mai rapid" cu c0t di$erenele antigenice sunt mai mari. (ntigenele supra$eei celulare care con$er" indi%idualitate ioc'imic" unic" $iec"rui organism# se numesc antigene de /istocompati"ilitate. ;%aluarea di$erenelor celor doi parteneri >donor i receptor? *n ceea ce pri%ete moleculele de 'istocompati ilitate# este esenial" *nainte de gre$area organului. 6up" 1970# studiul sistemului imunitar corespunde unei a ord"ri integratoare. 6up" opinia lui :. L. Jerne >1985?# 2imunologia i-a pierdut statutul de disciplin" i)olat"# $iind pe cale de a $i a sor it" de iologia clasic"3. 6up" 1980# Imunologia s-a di%ersi$icat i s-a apro$undat# dar *n acelai timp este mai uni$icat" ca oric0nd# su imperati%ul numitorului comun al *nelegerii $unciei imunitare la ni%el molecular. ( ord"rile moleculare %or sta la a)a tuturor cercet"rilor %iitoare# legate de $uncia imunitar". 1n perspecti%"# ori)ontul de e%oluie a Imunologiei se e/tinde asupra *nelegerii genelor codi$icatoare ale moleculelor e$ectoare i reglatoare ale

r"spunsului imun i ale mecanismelor aciunii lor. (st$el %om *nelege di$erenierea lim$ocitelor# acti%area lor# mecanismele sinte)ei# secreiei# recircul"rii lim$ocitelor i mecanismele aciunii moleculelor e$ectoare. (r urma utili)area cunotiinelor imunologice pentru pre%enirea maladiilor cu su strat imunitar >alergii# maladii autoimune?# pentru pre%enirea respingerii gre$elor de esuturi i organe i pentru imunoterapia neopla)iilor. Ia $i o perioad" a re*ntoarcerii aplic"rii Imunologiei moleculare# la ni%elul *ntregului organism.

Diviziunile Imunologiei

Imunologia s-a n"scut ca un domeniu al Dicro iologiei i s-a de)%oltat ca un domeniu al %acteriologiei medicale# cu care a r"mas *n raporturi de dependen" p0n" c"tre anul 1960. Areptat *ns"# prin acumularea unui %olum mare de date tiini$ice care au demonstrat inter%enia $unciei imunitare i a reaciilor imune *n numeroase $enomene normale i patologice# Imunologia a de%enit o tiin de sine stttoare . Consecina $ireasc" a implic"rii $unciei imunitare *ntr-o multitudine de procese normale i patologice# a $ost aceea c" din domeniul Imunologiei s-au desprins ramuri care# la r0ndul lor# tind s" ai " o e/isten" autonom". Imuno"iologia este cea mai cuprin)"toare dintre ramuri. ;a studia)" $enomenele imunitare ca mani$est"ri ale unei $uncii iologice eseniale E $uncia de ap"rare. <tudia)" su stratul iologic al r"spunsului imun >celulele imunitare# originea i mecanismele di$erenierii lor# $actorii celulari i 'umorali care asigur" di$erenierea lor?# mecanismele celulare i moleculare ale iosinte)ei anticorpilor# e/plic" implantarea celulelor tumorale i gene)a cancerului clinic *n condiiile aciunii e$ectorilor sistemului imunitar. <tudia)" mecanismele imunitare ale respingerii gre$elor de esuturi i organe# mecanismele reacti%it"ii imunitare *n $ilogenie i ontogenie# precum i a)ele celulare i moleculare ale st"rilor de 'ipersensi ilitate i ale maladiilor autoimune. Imunoc/imia este o disciplin" de grani" ce aparine Imunologiei i %ioc/imiei# care studia)" $uncia imunitar" su aspect ioc'imic. &reocuparea esenial" a constat *n studiul c'imiei antigenelor i anticorpilor i al mecanismului lor de interaciune *n reacia antigen-anticorp. 6atele re$eritoare la structura c'imic" a antigenelor i anticorpilor au pus a)ele Imunoc'imiei# dar ulterior# domeniul i-a l"rgit s$era de acti%itate i studia)" urm"toarele aspecte+ - $actorii moleculari ai r"spunsului imun i *n special ai imunit"ii mediate celularN - moleculele de 'istocompati ilitateN - marFerii antigenici speci$ici di$eritelor populaii de celule lim$oideN

- moleculele cu $uncie de receptor de antigen# pe supra$aa celulelor lim$oideN - $actorii de cooperare celular" *n cursul ela or"rii r"spunsului imun >interleuc'ine?N - componentele complementului etc. Aermenul de Imunoc/imie a $ost introdus de c'imistul suede) (rr'enius >1907?. ;l i-a intitulat ast$el studiul cu pri%ire la reaciile c'imice care se produc *n organismul uman i animal# dup" imuni)are. !ondatorul Imunoc'imiei este &. ;'rlic'. ;l a introdus metode cantitati%e *n studiul reaciilor antigen-anticorp i a ela orat o teorie general" asupra recunoaterii imune >teoria catenelor laterale sau a receptorilor?. 6up" 1950# Imunoc'imia s-a de)%oltat spectaculos# datorit" descoperirilor din domeniul ioc'imiei# datorit" utili)"rii unor metode $i)icoc'imice de anali)" a macromoleculelor i prin aplicarea acestora la domeniul Imunologiei. <-a n"scut un set de metode# *n esen" ioc'imice# puse *n slu. a anali)ei moleculelor implicate *n $uncia imunitar". 6omeniul s-a numit analiz imunoc/imic i utili)ea)" metode care deri%" din *m inarea te'nicilor $i)icoc'imice cu cele imunologice. Imunoc'imia este deser%it" de metoda imunodifuziei9 imunofluorescenei9 *IA9 E(I!A9 dializa la ec/ili"ru etc. ;$ectul utili)"rii acestor metode de in%estigare a $ost cunoaterea mecanismelor moleculare care stau la a)a r"spunsului imun# *ndeose i 'umoral i aplicarea *n la oratorul clinic# a unor noi metode de diagnostic. 1n clinic"# studiile de Imunoc'imie au propus noi metode de tratament# a)ate pe interaciunea unor molecule cu rol de %e'icul pentru anticorpi# cu receptorii unor celule int" >imunoto/ine?. Imunogenetica studia)" determinismul genetic al r"spunsului imun+ mecanismele genetice care asigur" di%ersitatea anticorpilor i a antigenelor de 'istocompati ilitate. Imuno/ematologia s-a n"scut odat" cu sta ilirea di$erenelor antigenice ale eritrocitelor umane i cu preci)area grupelor sanguine >L. ,andsteiner# 1901? i s-a de)%oltat dup" ce s-a sta ilit e/istena unor di$erene $ine *ntre di$erite tipuri de eritrocite i# *n special# dup" descoperirea $actorului 9' i a rolului s"u *n patologia sarcinii. Imunologia medical uman" i %eterinar" s-a de)%oltat *n trei direcii+ - direcia profilactic# orientat" spre descoperirea i producerea unor noi %accinuri# capa ile s" cree)e o stare de re)isten". ;a se preocup"# de asemenea# de sc'emele de %accinare# de posi ilitatea asocierii di$eritelor %accinuri i de posi ilitatea stimul"rii r"spunsului imun cu a.utorul ad.u%anilorN

- direcia terapeutic studia)" posi ilitatea o inerii serurilor imune. ;le conin anticorpi i se administrea)" organismelor care pre)int" riscul *m oln"%irii prin in$eciiN - direcia diagnosticului studia)" posi ilitatea identi$ic"rii agenilor etiologici ai di%erselor maladii in$ecioase# cu a.utorul reactanilor imunologici >seruri imune i antigene?. Imunopatologia studia)" $enomenele imunitare *n relaie cu di$erite maladii. In multe situaii patologice# r"spunsul imun >acti%area $unciei imunitare? are e$ecte de$a%ora ile# pre.udiciante asupra organismului. 9"spunsul imun se instituie drept cau)"# dar *n special ca mecanism# pentru producerea unor mani$est"ri patologice. ($eciunile generate de acti%area sistemului imunitar >imunopatii? se grupea)" *n dou" categorii+ - st"rile de 'ipersensi ilitate>alergiile?N - maladiile autoimune. Imunopatologia studia)"# de asemenea# imunodeficienele >*n"scute i do 0ndite?# imunitatea de transplant i imunitatea antitumoral9 rspunsul imun n maladiile infecioase virale i "acteriene # precum i *n maladiile parazitare4 !erologia >Imunoserologia? s-a de)%oltat ca o ramur" practic"# dedicat" studiului te'nicilor de e/plorare a reaciilor imune in vitro.

C R C-,RI5 R, 6,N,R 78 N-I6,N,7(R

6R1 &I98,SCU: C &,7I

&I98,SCU

Con%enional# antigenele se de$inesc ca su stane str"ine# care# consecuti% introducerii *n organismul uman sau animal pe o cale parenteral" >alta dec0t cea digesti%"?# declanea)" sinte)a anticorpilor cu care se com in" speci$ic. 6e$iniia este incomplet" din c0te%a moti%e. 1. Calea digesti%" de administrare a antigenelor nu e/clude totdeauna posi ilitatea declan"rii r"spunsului imun. &entru agenii in$ecioi care se multiplic" *n tractul digesti%# administrarea oral" asigur" o un" imuni)are >de e/emplu# %accinul polio se administrea)" oral# dei calea parenteral" este mai e$icient"?.

2. 5nele su stane nonsel$ sunt *n mod eronat considerate ca neantigenice# deoarece# dei in %i%o stimulea)" reacti%itatea imunitar" i induc sinte)a unei cantit"i mici de anticorpi# in %itro nu produc reacii %i)i ile antigen-anticorp. 3. !a" de unele antigene# organismele nu declanea)" r"spunsul imun# ci mani$est" o stare de toleran". 4. 5nele molecule *n stare nati%" nu induc un r"spuns imun# ci numai dup" cuplarea co%alent" cu o molecul" purt"tor. Dolecula nati%" *i p"strea)" proprietatea de a se com ina speci$ic cu anticorpii sinteti)ai. (st$el de molecule se numesc 'aptene. J. !. 4ac' >1976? de$inete antigenele ca $iind molecule care# consecuti% introducerii *n organism pe o cale adec%at"# induc un r"spuns imun materiali)at prin proli$erarea celulelor lim$oide i sinte)a moleculelor de recunoatere >anticorpi i receptori celulari?# cu care se com in" in %i%o i in %itro. Modelul general de structur* a unui antigen @ molecul" antigenic" este alc"tuit" din dou" componenteN - componenta purt"tor >2carrier3?# care corespunde celei mai mari p"ri a moleculei+ - grup"rile determinante de speci$icitate sau epitopi# locali)ate pe supra$aa componentei purt"tor i $ormate din sec%ene speci$ice de monomeri. ;pitopii# prin sec%ena proprie a monomerilor i prin con$iguraia spaial" speci$ic"# con$er" indi%idualitate c'imic" i speci$icitate antigenic" moleculei nonsel$. 7rup"rile determinante de speci$icitate sunt ec'i%alenii moleculari i $uncionali ai 'aptenei. 7rup"rile determinante de speci$icitate se g"sesc *n num"r %aria il pe supra$aa purt"torului i pot $i identice at0t *n ceea ce pri%ete compo)iia c'imic"# c0t i con$iguraia spaial" >ca *n ca)ul antigenelor poli)a'aridice cu epitopi repetiti%i? sau sunt di$erite# at0t ca sec%en" a monomerilor c0t i *n pri%ina con$iguraiei spaiale. !ig. 1. Dodelul general de structur" a unui antigen. Cea mai mare parte a oric"rei molecule antigenice este repre)entat" de gruparea carrier# pe care sunt locali)ai epitopii cu di$erite con$iguraii spaiale# stimulatori ai reacti%it"ii imunitare. 5nii epitopi pot $i unici# iar alii sunt multipli. 5neori# epitopii stimulea)" sinte)a anticorpilor cu a$init"i di$erite.

ropriet*ile definitorii ale antigenelor

1n studiile e/perimentale asupra imunogenit"ii unor molecule sintetice# D. <ela >1969? a descris dou" propriet"i eseniale ale antigenelor+ 1. Imunogenitatea sau antigenitatea este proprietatea unui antigen complet# $ormat din gruparea carrier i epitopi# de a declana un r"spuns imun# 'umoral sau celular# ori de c0te ori p"trunde *n organism pe o cale adec%at". &roprietatea de imunogenitate este asociat" cu gruparea carrier a moleculei de antigen# grupare care *ntr-o oarecare m"sur" in$luenea)" i speci$icitatea anticorpilor. 2. <peci$icitatea de$inete capacitatea antigenului *ntreg sau numai a epitopilor s"i de a se com ina speci$ic cu anticorpii sau cu receptorii celulari a c"ror sinte)" a $ost indus". &roprietatea de speci$icitate este dependent"# *n primul r0nd de epitopi# dar este in$luenat" *ntr-o m"sur" mai mare sau mai mic" i de gruparea carrier. :oiunea de imunogen# uneori# este distinct" de aceea de antigen. :oiunea de imunogen este mai restricti%" i semni$ic" proprietatea unei su stane# *n stare nati%"# de a stimula r"spunsul imun# $"r" s" necesite con.ugarea cu o alt" molecul". :oiunea de antigen este mai larg"# deoarece desemnea)" molecule nonsel$ care sunt imunogene *n stare nati%" sau de%in imunogene dup" con.ugarea cu o molecul" purt"tor. (ntigenul poate $i uneori inacapa il# *n $orma sa nati%"# s" stimule)e r"spunsul imun.

C7 SIFIC R,

;I I&UN(6,NI- -,

N-I6,N,7(R

6up" originea lor# antigenele sunt e/ogene i endogene. (ntigenele e/ogene sunt cele mai numeroase i pot $i *mp"rite *n trei categorii+ 1? naturaleN 2? arti$icialeN 3? sintetice. Antigene naturale (ntigenele naturale $ormea)" categoria cea mai cuprin)"toare. (ici sunt incluse toate macromoleculele naturale din %irusuri# microorganisme# $ungi# plante i animale. 6up" dimensiuni se disting antigene moleculare >2solu ile3? i antigene corpusculare.

(ntigenele moleculare >solu ile? constituie gruparea cea mai numeroas"# care include toate tipurile de macromolecule+ proteine# poli)a'aride# lipide# aci)i nucleici. (ntigenele corpusculare >2insolu ile3? sunt repre)entate de %irusuri i de celule >procariote i eucariote?. Antigenele moleculare Cele mai studiate antigene sunt proteinele i poli)a'aridele# la care se adaug" con.ugatele+ glicoproteine# nucleoproteine# lipoproteine# peptidoglicani# glicolipide. &roteinele sunt cele mai numeroase i mai importante antigene moleculare. 6i%ersitatea lor c'imic"# generat" de %ariaia sec%enei de aminoaci)i este uria". &ractic# $iecare tip de molecul" proteic" nonsel$ din lumea %ie este un antigen pentru organismul animal i uman# deoarece are o sec%en" unic" de aminoaci)i# care determin" o structur" secundar" i tridimensional" proprie i implicit# e/istena unor epitopi proprii ca sec%en" a aminoaci)ilor i con$ormaie spaial". Imunogenitatea este o proprietate general" a proteinelor# a celor cu rol structural >colagenul# c'eratina# elastina# $i roina %iermelui de m"tase# proteinele capsidei %irale?# a celor cu rol $uncional >mio)in"# actin"# al umin"# 'emoglo in"# mioglo in"# en)ime# 'ormoni# imunoglo uline?# a celor cu rol de depo)it de aminoaci)i>o%al umina# ca)eina# gliadina E din seminele de gr0u?. Aoate proteinele i polipeptidele cu o greutate molecular" mai mare de 1000 6 sunt imunogene# *ntr-o m"sur" mai mare sau mai mic". 6e cele mai multe ori# pentru antigenele proteice# nu se $ace distincia dintre epitopii inductori ai r"spunsului imun i gruparea carrier# deoarece proteinele posed" un spectru continuum de determinani antigenici# ce corespund unor sec%ene discrete ale supra$eei moleculare locali)ate *n )onele cele mai e/puse contactului cu receptorii sistemului imunitar. (ntigenitatea moleculelor glo ulare este determinat" adeseori# de con$iguraia lor spaial"# re)ultat" din plierea tridimensional". &entru cele mai multe proteine glo ulare >mioglo ina# 'emoglo ina# li)o)imul# ri onuclea)a etc.?# aproape toi determinanii antigenici sunt con$ormaionali# adic" sunt re)ultatul plierii spaiale a moleculei# iar alii sunt sec%eniali# adic" sunt repre)entai de o sec%en" particular" de aminoaci)i. Doleculele proteice $i rilare >c'eratina# colagenul# $i roina? au con$iguraii mai simple dec0t cele glo ulare# catenele lor $iind aran.ate sau r"sucite pe o singur" dimensiune. 6eterminanii antigenici ai acestor proteine sunt sec%eniali# $ormai din 3-6 aminoaci)i. <istemul imunitar al unui organism recunoate un num"r limitat de determinani antigenici ai unei molecule proteice. ;pitopii# con$ormaionali sau

sec%eniali# care stimulea)" r"spunsul imun in %i%o# iar in %itro induc proli$erarea lim$ocitelor# se numesc epitopi dominani. @ parte a determinanilor antigenici ai unei molecule nati%e# cel mai adesea# sunt neimunogeni >imunosilenioi?# ne$iind accesi ili sistemului imunitar al organismului# dar se pot e/prima *ntr-un anumit set de condiii de imuni)are >ga)d"# ad.u%ant etc.?. (cetia sunt epitopi interni ai proteinelor glo ulare. 5n determinant intern poate $i silenios *n molecula nati%"# dar de%ine imunostimulator dup" cli%area en)imatic" a moleculei# in %i%o sau in %itro. 6e aceea# D. <ela a recomandat utili)area termenului de 2grupare imunodominant"3# pentru epitopul sau epitopii care se e/prim" *n anumite condiii>ga)d"# ad.u%ant# cale de administrare? i determin" speci$icitatea r"spunsului imun. !ig.2. ;pitopii dominani sunt locali)ai la supra$aa moleculei glo ulare. ;pitopii su dominani de%in accesi ili dup" cli%area moleculei *n etapa prelucr"rii *n macro$ag# iar epitopii criptici sunt inaccesi ili $enomenului de recunoatere imunitar". Imunogenitatea antigenelor proteice se modi$ic" *n di$erite condiii. 6enaturarea moleculelor nati%e su aciunea agenilor c'imici i a c"ldurii# modi$icarea con$iguraiei moleculei su aciunea agenilor reduc"tori sau 'idroli)a en)imatic"# modi$ic" imunogenitatea. (nticorpii speci$ici $a" de proteina nati%" precipit" sla sau de loc proteina denaturat" termic sau c'imic. !ormalde'ida i glutaralde'ida sunt ageni de legare *ncruciat" a moleculelor proteice# constituind reele multimoleculare sta ile. (ceti ageni produc denaturarea proteinelor i modi$ic" $unciile celor cu acti%itate iologic" >to/ine# en)ime?. (st$el# e/oto/inele tratate cu $ormalde'id"# *i pierd propriet"ile to/ice# dar r"m0n imunogene. !ormalde'ida i glutaralde'ida se $olosesc pentru conser%area antigenelor cu greutate molecular" mic" >peptide?# dar sunt mai puin utili)ate pentru conser%area propriet"ilor antigenice ale moleculelor mari. (genii c'imici de legare *ncruciat" modi$ic" imunogenitatea moleculelor proteice prin sc'im area con$ormaiei moleculei i mascarea epitopilor sau prin modi$icarea c'imic" a aminoaci)ilor epitopului. 6enaturarea semni$ic" deplierea structurii r"sucite a moleculelor proteice i are loc prin modi$icarea pO# prin *nc"l)ire# prin reducerea leg"turilor <-< su aciunea ureii i a eta-mercaptoetanolului sau a acidului per$ormic. &rin denaturare# proteina *i pierde nu numai $uncia iologic"# dar *i modi$ic" speci$icitatea antigenic". 6e e/emplu# cele 4 puni <-< ale 9:-a)ei# *ntre resturile de cistin"# sunt reduse de P-mercaptoetanol i trans$ormate *n 8 resturi de cistein"# cu pierderea total" a acti%it"ii en)imatice. (nticorpii $a" de 9:-a)a pancreatic" o%in" nati%" nu precipit" moleculele de 9:-a)" denaturat" prin reducerea leg"turilor <-<. In%ers# anticorpii $a" de 9:-a)a denaturat"# nu

precipit" 9:-a)a nati%". Dodi$icarea speci$icit"ii anticorpilor sugerea)" c" reducerea leg"turilor <-< determin" pierderea epitopilor con$ormaionali. &roteinele denaturate re%ersea)" greu la $orma nati%"# c'iar prin resta ilirea condiiilor de mediu. Oidroli)a en)imatic" modi$ic" con$iguraia spaial" a moleculelor proteice nati%e i diminu" imunogenitatea lor# cu at0t mai mult cu c0t $ragmentele re)ultate au dimensiuni mai mici. &rin cli%are en)imatic" se anulea)" imunogenitatea epitopilor con$ormaionali i se rele%" epitopi care *n molecula nati%" au statutul de epitopi criptici. @ atenie special" s-a acordat studiului imunogenit"ii unor proteine ale c"ror propriet"i iologic-acti%e sunt uor de e%aluat+ en)ime# in'i itori en)imatici# 'ormoni proteici# to/ine# imunoglo uline >*n calitatea lor de antigene?# proteine ale capsidei sau ale *n%eliului %iral. ;n)imele sunt antigenice# indi$erent de originea lor. 9eacia moleculelor de en)im" cu anticorpii speci$ici a constituit o modalitate de determinare a po)iiei epitopilor. (nticorpii $a" de di$erii epitopi ai moleculei de en)im" modi$ic" *n grade $oarte di$erite acti%itatea ei catalitic". 6ac" anticorpii sunt speci$ici $a" de epitopi locali)ai la ni%elul situsului acti% al en)imei# molecula *i pierde acti%itatea $a" de su strat# deoarece legarea anticorpilor la situsul acti% in'i " competiti% legarea moleculelor de su strat. 7radul de in'i iie a acti%it"ii en)imatice este cu at0t mai accentuat# cu c0t molecula este mai mare. ;$ectul in'i itor al anticorpilor nu se produce dac" en)ima a legat de.a su stratul speci$ic. 6ac" grup"rile determinante de speci$icitate ale moleculei de en)im" sunt situate *n a$ara situsului catalitic# acti%itatea en)imei este parial in'i at"# datorit" modi$ic"rilor con$ormaionale care sur%in dup" reacia antigen-anticorp# sau r"m0ne intact". !oarte rar# comple/ul en)im"-anticorp are un e$ect catalitic superior# comparati% cu en)ima nati%". Oormonii sunt molecule sla imunogene# datorit" uni$ormit"ii relati%e a structurii lor c'imice *n regnul animal. (nticorpii speci$ici $a" de ma.oritatea 'ormonilor proteici se o in prin asocierea lor preala il" cu ad.u%antul !reund. Imunogenitatea 'ormonilor este *ntr-o relaie direct" cu gradul deose irilor c'imice e/istente *ntre 'ormonul e/ogen i 'ormonul produs de organismul receptor. Consecina este sinte)a anticorpilor anti'ormon. &ropriet"ile antigenice ale insulinei sunt ine cunoscute# datorit" utili)"rii clinice a 'ormonului. Dolecula de insulin" este alc"tuit" din dou" catene polipeptidice# cu un num"r total de 51 de aminoaci)i+ 21 ai catenei ( i 30 ai catenei 4. Cele dou" catene sunt reunite prin puni <-<. <tructura moleculelor de insulin" de la di$erite specii este $oarte asem"n"toare# 47 din cei 51 de aminoaci)i $iind identici. 6eose irile se g"sesc *n catena ( pentru aminoaci)ii 8# 9 i 10 >la o%ine (la# <er# Ial# la om sunt A'r# <er# Ile# iar la o%ine (la# 7lG# Ial?.

In catena 4# di$erena este limitat" la aminoacidul C-terminal. (ceste mici di$erene ale sec%enei de aminoaci)i nu modi$ic" $uncia 'ormonului. 6e aceea# insulina# indi$erent de pro%enien"# este la $el de e$icient" pentru tratamentul dia etului uman. Dicile di$erene de sec%en"# *n general# nu sunt sesi)ate de organismul receptor. Aotui# dup" administrare prelungit"# organismele receptoare cu reacti%itate imunitar" mai *nalt"# sinteti)ea)" anticorpi antiinsulin". &oli)a'aridele# dei au comple/itate structural" relati% mare# condiionat" de multitudinea posi ilit"ilor de legare a atomilor de car on# sunt molecule sla imunogene *n stare nati%"# comparati% cu proteinele. (ntigenitatea lor este con$erit" de succesiunea unit"ilor componente# de con$iguraia spaial" a moleculei i de greutatea molecular". Cele cu greut"i mai mici de 50 F6 nu sunt imunogene. &oli)a'aridele sunt antigene cu epitopi sec%eniali repetiti%i i cel puin uneori# *n $uncie de originea poli)a'aridului i de specia imuni)at"# sunt imunogeni. 6in punctul de %edere al structurii moleculare# se disting dou" tipuri de poli)a'aride+ a? cele care au o caten" central" pe care se inser" rami$icaiile lateraleN ? poli)a'aride lipsite de o caten" central"# iar rami$icaiile sunt dispuse aleatoriu# $"r" nici o simetrie. 9olul catenelor centrale *n con$erirea imunogenit"ii este contro%ersat# dar rami$icaiile laterale au o importan" deose it" pentru determinarea speci$icit"ii antigenice a poli)a'aridelor. 6in punctul de %edere al compo)iiei c'imice pot $i 'omo- sau 'eteropli)a'aride# iar *n ceea ce pri%ete sarcina# pot $i neutre sau *nc"rcate. @ligo- i poli)a'aridele pot do 0ndi o structur" teriar" >glo ular"?. 5neori# con$iguraia spaial" a polimerului glucidic este determinant" pentru speci$icitatea sa antigenic". <c'im "rile con$ormaionale ale poli)a'aridelor se produc mai uor dec0t ale proteinelor# pentru c" au ariere energetice sc")ute. &entru poli)a'aride# denaturarea este practic necunoscut"# ceea ce le con$er" sta ilitate. 6ac" imunogenitatea poli)a'aridelor nati%e este sla "# adeseori ele se comport" ca 'aptene# adic" de%in antigenice dup" cuplarea cu un purt"tor proteic# re)ult0nd lectine# cu o $oarte larg" distri uie *n lumea %ie. In calitate de 'aptene# poli)a'aridele au proprietatea de speci$icitate# adic" se com in" cu anticorpii complementari $a" de comple/ul glicoproteic. 6in moti%e de ordin practic# cele mai studiate poli)a'aride din punct de %edere antigenic sunt cele de origine acterian"+ de/tranul i poli)a'aridele capsulare. 6e/tranii sunt polimeri rami$icai de gluco)"# resturile gluco)il $iind unite mai ales prin leg"turi de tip Q 1-6# dar *n $uncie de specia produc"toare# punctele de rami$icaie ale catenelor polimere pot $i 1-2# 1-3 sau 1-4. 6e/tranii sunt sinteti)ai *n special de unele acterii lactice# din )a'aro)"# dup" reacia+

6e/trana)" :>)a'aro)"? --------------- >7luco)"?n R >!ructo)"?n 6e/tranii au greut"i moleculare $oarte di$erite >p0n" la 10 6 6?# *n $uncie de gradul de polimeri)are. :u sunt imunogeni i de aceea se $olosesc ca *nlocuitori ai plasmei. &rin trans$u)ii repetate cu soluii de de/tran la om i prin in.ectare repetat" la oarece# s-au sinteti)at anticorpi antide/tran. <peci$icitatea anticorpilor antide/tran este $oarte *nalt". In serul animalelor imuni)ate cu de/trani s-au detectat dou" tipuri de anticorpi+ unii speci$ici $a" de resturile de gluco)il legate 1-2 i alii speci$ici $a" de resturile de gluco)il legate 1-3# ce nu dau reacii *ncruciate# dei deose irea dintre cele dou" categorii de molecule de de/tran const" numai *n modul di$erit de legare a resturilor de gluco)il *ntre ele. &oli)a'aridele capsulare se pot g"si $ie su $orma moleculelor li ere >2solu ile3?# $ie su $orm" corpuscular" >ataate celulelor acteriene capsulate?. Iariaiile ioc'imice ale poli)a'aridelor capsulare# determinate de compo)iia glucidic" a catenei# de sec%ena monomerilor sau de modul de legare a lor *n caten"# con$er" tulpinilor acteriene# speci$icitate antigenic" de tip. ,a <tr. pneumoniae s-au identi$icat peste 80 de tipuri antigenice ale poli)a'aridelor capsulare. In compo)iia lor intr" 'e/o)e# pento)e# deri%aii lor aminai# metilai etc. <peci$icitatea antigenic" a poli)a'aridelor capsulare depinde at0t de compo)iia c'imic"# c0t i de succesiunea monomerilor *n catena poli)a'aridic". Ca %accinuri# poli)a'aridele induc starea de toleran". 1n stare puri$icat" sunt molecule neimunogene# datorit" uni$ormit"ii lor structurale *n lumea %ie. In.ectarea lor la animale nu induce sinte)a anticorpilor. (ci)ii nucleici nati%i sunt con.ugate nucleoproteice# *n care aci)ii nucleici au rolul de 'apten". Da.oritatea epitopilor con.ugatului sunt con$ormaionali. @ $racie din anticorpii anti-con.ugat se com in" cu aci)ii nucleici. (nticorpii anti-aci)i nucleici se com in" cu aci)ii nucleici *n stare pur"# indi$erent de pro%enien". &roteinele asociate aci)ilor nucleici con$er" o nou" speci$icitate antigenic" i determin" sinte)a anticorpilor care se com in" cu proteina put"tor. ;/perimental# anticorpii anti-aci)i nucleici se o in pe una din urm"toarele c"i+ 1. Imuni)area cu acterio$agi din seria A par >A 2# A4# A6?# supui ocului osmotic. (6: al acestor $agi se deose ete de (6: din celulele eucariote# prin pre)ena 5-'idro/i-metilcito)inei glico)ilate# *n locul cito)inei. (nticorpii au speci$icitate $a" de a)ele glico)ilate# ceea ce e/plic" lipsa reaciilor *ncruciate cu ali aci)i nucleici. 2. Imuni)area cu ri osomi din celulele %egetale sau animale. (nticorpii sinteti)ai reacionea)" cu (9: de origine acterian"# %egetal" sau animal"#

precum i cu polinucleotidele sintetice>poli-(# poli-C# poli-5?# dar nu reacionea)" cu (6: nati% i nici cu (6: denaturat. 3. Imuni)area cu con.ugate 'apten"-protein"# *n care 'aptena este repre)entat" de a)e a)otate# ri onucleo)ide# de)o/iri onucleo)ide# nucleotide# dinucleotide i trinucleotide. (nticorpii sinteti)ai reacionea)" at0t cu 'aptena c0t i cu (6: nati% sau denaturat. 4. Imuni)area cu comple/e $ormate din aci)i nucleici i al umin" metilat". Cele dou" molecule $ormea)" un comple/ neco%alent# datorit" interaciei dintre grup"rile negati%e ale aci)ilor nucleici i cele po)iti%e ale proteinei. (nticorpii sinteti)ai reacionea)" cu comple/ul molecular# cu proteina# cu acidul nucleic nati% i denaturat de di$erite origini. 5. (nticorpii anti-aci)i nucleici se g"sesc *n s0ngele pacienilor cu lupus eritematos diseminat >,;6?. (nticorpii sinteti)ai $a" de aci)ii nucleici cu rol de 'aptene *n con.ugatele cu proteine nu au speci$icitate# deoarece precipit" (6: monocatenar# (9: de di$erite origini# poliri onucleotide i aci)ii nucleici du lu catenari. ,ipidele sunt molecule neimunogene *n stare nati%"# dar se pot cupla cu proteinele i *n con.ugatul $ormat au rolul de 'aptene. 6in punct de %edere imunologic# cele mai importante lipide sunt $os$atidele >s$ingomielina i ce$alina? i glicos$ingolipidele>galactocere ro)ida?. @ 'apten" lipidic" cu o importan" practic" deose it" este cardiolipina# din cordul mami$erelor. In s0ngele indi%i)ilor in$ectai cu A. pallidum se g"sesc anticorpi care reacionea)" cu cardiolipina *nalt puri$icat" >reacie *ncruciat"?# e/tras" din cordul o%in. 5n alt antigen lipidic este antigenul !orssman# inductor al sinte)ei anticorpilor 'emaglutinani i *n pre)ena complementului# 'emolitici. <tudiul imunogenit"ii lipidelor a $ost *ngreunat de insolu ilitatea lor *n ap". &ro lema reacti%it"ii anticorpilor cu antigenele lipidice a $ost dep"it" parial# prin utili)area lipidelor au/iliare >lecitina i colesterolul? *n suspensia antigenic". 6isponi ilitatea liposomilor a permis studiul imunogenit"ii lipidelor asociate cu mem ranele. Haptene Oaptenele>'aptein# grec B a apuca? sunt su stane c'imice naturale sau de sinte)"# cu molecul" mic"# a c"ror imunogenitate este condiionat" de cuplarea cu o molecul" purt"tor# dar *i p"strea)" proprietatea de speci$icitate# adic"

reacionea)" cu anticorpii speci$ici a c"ror sinte)" a $ost indus" de 'aptena con.ugat" cu o molecul" cu rol de purt"tor. 6enumirea de 2'apten"3 a $ost introdus" de ,andsteiner pentru a caracteri)a din punct de %edere $uncional un e/tract alcoolic de rinic'i de cal# neimunogen ca atare pentru iepure# dar capa il s" se com ine cu anticorpii sinteti)ai dup" imuni)area iepurelui cu e/tractul alcoolic de rinic'i de cal# cuplat cu o molecul" purt"tor. ;l a propus ca *n categoria 'aptenelor s" $ie cuprins" orice su stan" natural" sau sintetic"# cu greutate molecular" mic" sau mare# care *n $orm" nati%" nu poate s" induc" un r"spuns imun detecta il# dar do 0ndete capacitatea imunogen"# dup" cuplarea sa in %i%o sau in %itro# cu o molecul" purt"tor cu greutate molecular" mare. Con.ugatul este imunogen nu numai *n raport cu epitopii moleculei purt"tor# ci i cu epitopul 'aptenei. 6in punct de %edere $uncional# 'aptenele s-au numit 2.um"t"i de antigene3# deoarece au numai una din cele dou" propriet"i eseniale ale antigenelor+ nu sunt imunogene# dar *i p"strea)" proprietatea de speci$icitate. 6e aceea# termenul 2antigenic3 nu este sinonim cu cel de 2imunogenic3. Oaptena este un antigen# dar *n $orma sa nati%"# nu este imunogen". 1n general# 'aptenele sunt molecule mici# dei uneori# macromoleculele pot $unciona ca 'aptene. ;/tractul alcoolic de rinic'i de cal este o 'apten" comple/". Oaptenele simple sunt repre)entate de polinucleotide# alcooli# $ormalde'ida# unele medicamente etc. 5tili)0nd 'aptenele simple# prin reacii de cuplare cu o molecul" purt"tor sau o inut antigene arti$iciale. Oaptena din comple/ul molecular are rolul grup"rii determinante de speci$icitate. <tudiul imunogenit"ii con.ugatelor 'apten"molecul" purt"tor a permis determinarea m"rimii grup"rilor determinante de speci$icitate ale antigenelor i indirect# determinarea situsului de com inare a anticorpilor. &e aceiai cale s-a e%aluat speci$icitatea# a$initatea i 'eterogenitatea anticorpilor. Oaptenele au $ost $olosite pentru studiile de cristalogra$ie cu ra)e S a unui comple/ antigen-anticorp. Oaptene autocuplante sunt molecule cu greutate molecular" mic"# a c"ror particularitate const" *n aceea c"# dup" in.ectare# *n organism se com in" spontan cu proteinele tisulare i $ormea)" con.ugate 'apten"-protein"# in %i%o. Con.ugatele 'apten"-protein" induc sinte)a anticorpilor i determin" procese de 'ipersensi ilitate sau iniia)" maladii autoimune. (st$el se comport" deri%aii dinitro$enolului su stituii cu clor sau $luor# unii produi de degradare a penicilinei. Antigenele corpusculare (ntigenele corpusculare sunt# *n esen"# antigene moleculare asociate %irusurilor i celulelor. &roteinele capsidale i glicoproteinele *n%eliului %iral sau

proteinele pre)entate pe supra$aa celulelor in$ectate cu %irusuri# sunt $oarte imunogene i stimulea)" r"spunsul imun al ga)dei. 6e aceea# imunitatea consecuti%" in$eciei %irale este# de o icei# de lung" durat". (ntigenele acteriene sunt $ie solu ile >eliminate *n mediul e/tracelular?# $ie corpusculare >legate de celul"?. 6in prima categorie $ac parte e/oto/inele i poli)a'aridele capsulare li ere# iar din cea de a II-a# antigenul somatic @ >endoto/ina acteriilor 7ram negati%e?# antigenele poli)a'aridice din glicocali/# $lagelina# pilina# aci)ii teic'oici# mureina etc. (ntigenele eritrocitare sunt glicoproteine ale supra$eei eritrocitare# cu determinism ioc'imic cunoscut# *n sistemul (# 4# 0. 7licoproteinele eritrocitare de grup sanguin se g"sesc i pe supra$aa celulelor tisulare# dar i *n secreiile e/ocrine >sali%"# suc gastric etc.?# la circa 75M dintre indi%i)i# denumii 2secretori3. 7licoproteinele din secreii sunt 'idrosolu ile i studiul lor a $ost mai uor dec0t al moleculelor eritrocitare. 7rup"rile glucidice ale glicoproteinelor mem ranei eritrocitare au rol dominant *n determinarea speci$icit"ii de grup sanguin# aa cum au e%ideniat studiile de digestie en)imatic" controlat". ;ritrocitele tuturor grupelor sanguine au un precursor antigenic comun E antigenul O >codi$icat de gena O?# ine e/primat pe supra$aa antigenelor de grup 0 i *n cantit"i progresi% descresc0nde pe 'ematiile de grup (# 4i ( . <peci$icitatea antigenic" de grup 0 este con$erit" de ,-$uco)". 7rupul ( are o gen" ce codi$ic" sinte)a glico)il-trans$era)ei# en)im" ce adaug" :-acetil-6galacto)amina# la galacto)a preterminal" a moleculei O. 6e aceea# speci$icitatea antigenic" a eritrocitelor de grup ( este con$erit" de tri)a'aridul :-acetilgalacto)amin"# galacto)" i ,-$uco)"+ :-acetil galacto)amin" >Q 1-3? 7al E 9 >9 B restul catenei poli)a'aridice? Q 1-2 !uc Indi%i)ii de grup 4au o gen" ce adaug" 6-galacto)a >*n loc de :-acetil galacto)amin"? la galacto)a preterminal" a moleculei O# a%0nd un determinant antigenic $ormat din dou" resturi terminale de 6-galacto)a i ,-$uco)a. !ig. 3. @ligo)a'aridele cu rol de epitopi determinani ai grupelor sanguine (4@. @ligo)a'aridul este ancorat *n mem rana eritrocitului prin intermediul s$ingomielinei# denumit" ceramid". 85M din indi%i)ii umani

secret" su stanele de grup sanguin *n sali%". ,a indi%i)ii 2secretori3# oligo)a'aridele sunt pre)ente su $orma con.ugatelor cu polipeptidele codi$icate de genele secretoare >dup" 9oitt# 1997?.

&re)ena restului de $uco)" >adic" antigenul O? este esenial" pentru e/presia epitopilor ( i 4. 7ena O i antigenul s"u lipsesc la $enotipul 4om aG. 6e aceea# trans$era)ele ( i 4 nu pot ad"uga glucidele speci$ice la restul 7al al poli)a'aridului i antigenele de grup ( i 4 nu sunt e/primate. ;/primarea antigenelor (4@ pe 'ematii poate $i modi$icat" prin tratamentul in %itro cu glico)ida)e+ o Q-glico)ida)" >e/tras" din o ul de ca$ea %erde? poate cli%a restul de 7al de pe 'ematiile de grup 4 i le con%ertete *n 'ematii de grup 0# ce pot r"m0ne $uncionale dup" trans$u)ia la su iecii de grup 0. (ntigenele de 'istocompati ilitate >descrise de J. 6ausset# 1958? sunt molecule de supra$a" ale ma.orit"ii esuturilor. 6in punct de %edere ioc'imic# ele sunt strict speci$ice $iec"rui organism uman i animal i con$er" indi%idualitate ioc'imic" proprie $iec"rui organism. <e numesc i antigene de transplantare# deoarece# dup" gre$area unui esut sau a unui organ# moleculele de 'istocompati ilitate se comport" ca antigene i declanea)" r"spunsul imun al organismului receptor# care determin" respingerea gre$ei. (ntigenele indi%iduale de 'istocompati ilitate se e%idenia)" prin reacia de respingere a gre$ei. 1n $uncie de raportul genetic dintre donor i receptor# antigenele de 'istocompati ilitate aparin urm"toarelor categorii+ 1? autoantigenele includ antigenele proprii de 'istocompati ilitate# care# *n condiii normale sunt tolerate de sistemul imunitar. <u aciunea unor $actori $i)ici# c'imici sau iologici# antigenele de 'istocompati ilitate se modi$ic" de%enind autoantigene# generatoare ale con$lictelor autoimuneN 2? i)oantigenele cuprind antigenele de transplantare comune orga-nismelor identice din punct de %edere genetic# care aparin unei linii genetic pure >in red?. Ieri$icarea purit"ii genetice a unei populaii de organisme se $ace prin transplantul de piele. 6ac" gre$a este acceptat"# organismele respecti%e aparin aceleiai linii in red. Aermenii 2i)oantigen3 i 2in red3 nu au coresponden" pentru populaia uman"N 3? aloantigenele >alos B altul? includ molecule care# dup" in.ectare declanea)" r"spunsul imun la organisme ale aceleiai specii# dar di$erite genetic# de organismul donor. (loantigenele sunt inegal r"sp0ndite la indi%i)ii unei specii i induc r"spunsul imun la organismele care nu posed" antigenul

respecti%. (loantigenele se e%idenia)" dup" imuni)area unui organism# cu o suspensie celular" pro%enit" de la organisme ale aceleiai specii# dar aparin0nd unui alotip di$eritN 4? 'eteroantigenele >/enoantigene# /enos B str"in? includ molecule care se g"sesc *nTpe celulele tuturor indi%i)ilor unei specii i care se comport" ca antigene $a" de organismele altei specii. Oeteroantigenele se e%idenia)" prin sinte)a anticorpilor $a" de antigenele celulelor pro%enite de la un organism al unei specii di$erite. Celulele unei specii di$erite aduc *n organismul receptor nu numai 'eteroantigene# ci i aloantigene i c'iar autoantigene. 6e aceea in.ectarea unui 'eteroantigen este una dintre cele mai utili)ate metode pentru a induce sinte)a autoanticorpilor. (ntigenele de organ sunt molecule speci$ice care con$er" particularit"ile ioc'imice i $uncionale ale celulelor unui organ. 6e e/emplu# proteinele 'epatice sau ale glandei mamare di$er" de proteinele esutului renal al aceluiai organism. ntigene artificiale ,a origine# antigenele arti$iciale sunt antigene naturale# modi$icate c'imic prin cuplarea# cel mai adesea co%alent"# cu una sau mai multe molecule mici# care le con$er" o nou" indi%idualitate antigenic" i o nou" speci$icitate de com inare cu anticorpii# *n raport cu molecula de origine. (ntigenele arti$iciale s-au o inut# *n principal# pornind de la moleculele proteice. &rin legarea moleculelor proteice cu di$erite 'aptene s-au o inut trei tipuri de antigene arti$iciale+ a? con.ugate 'apten"-protein"# prin reacia de dia)otare# iodurare i respecti% su stituie nucleo$il"N ? con.ugate protein"-protein"# prin intermediul unor ageni i$unc-ionali de legare >dii)ocianaii i car odiimidele?N c? proteine legate de suporturi insolu ile# prin reacia de dia)otare sau prin intermediul car odiimidelor. a? Con.ugatele 'apten"-protein" au $ost utili)ate de ,andsteiner# *n studiile cu pri%ire la mecanismele r"spunsului imun. In con.ugate# 'aptenele *ndeplinesc rolul de epitopi >grup"ri determinate de speci$icitate?# iar mole-culele proteice au rolul de carrier. 9"spunsul imun nu este orientat strict $a" de epitopii 'aptenici# ci i $a" de determinani antigenici ai grup"rii carrier.

Cuplarea 'apten"-purt"tor necesit" e/istena unei grup"ri reacti%e a 'aptenei# care s" se lege co%alent cu grup"rile $uncionale ale purt"torului# cu condiia p"str"rii integrit"ii $uncionale a celor doi reactani. Oaptenele se pot cupla cu purt"tori $oarte di%eri# dar proteinele naturale >al umina# glo ulinele? $urni)ea)" con.ugate $oarte imunogene. ,andsteiner a cuplat amino- en)en-sul$onatul cu molecule proteice# prin reacia de dia)otare i a o inut a)oproteine+

6up" cuplarea 'aptenei cu Air# Ois sau ,Gs din structura unei proteine# re)ult" un antigen arti$icial care induce $ormarea a dou" categorii de anticorpi cu speci$icit"i di$erite# dup" cum reacionea)" cu 'aptena# sau cu molecula purt"tor. Con.ugatele a)oproteice au permis studiul in$luenei con$iguraiei spaiale a 'aptenei# asupra speci$icit"ii antigenice. 7ruparea sul$onat a $ost legat" *n po)iia orto# meta sau para a 'aptenei amino en)en. (ntiserurile o inute au speci$icitate $a" de $iecare i)omer. I)omerul meta al amino en)en-sul$onatului# cuplat cu proteina# p"strea)" capacitatea de a precipita cu anticorpii speci$ici $a" de proteina nati%"# *n timp ce con.ugatele cu i)omerii orto- i para- dau reacie $oarte sla " de precipitare. Conclu)ia este c" i)omerii de po)iie induc modi$ic"ri sterice >con$ormaionale? ale 'aptenei.

Con.ugatele 'apten"-protein" se pot o ine prin reacia de iodurare. &roteinele puternic iodurate *i modi$ic" speci$icitatea antigenic". ;le induc sinte)a anticorpilor care dau reacii *ncruciate de precipitare cu proteinele

iodurate 'eterologe. <emni$icaia este c" prin iodurare# proteinele *i pierd speci$icitatea antigenic". Aoate proteinele iodurate induc sinte)a anticorpilor $a" de o grupare iodurat"# *n special $a" de tiro)ina iodurat"# indi$erent de speci$icitatea grup"rii purt"tor. @ alt" reacie de o inere a con.ugatului 'apten"-protein" este cea de su stituie nucleo$il". Cele mai $olosite 'aptene sunt 2#4-dinitro$enolul>6:&? i 2#4#6-trinitro$enolul>A:&?. Decanismul molecular al cupl"rii este urm"torul+ un atom de O din gruparea @O # :O2R sau <-<O a proteinei# este *nlocuit de gruparea 'aptenic" prin eliminarea apei. &roteina pierde electroni# iar nucleul en)enic *i accept". 7rup"rile donoare de electroni sunt @O - # :O2R# <-<O. 7rup"rile 6:& i A:& sunt cuplate cu proteina purt"tor su $orma 2#4-dinitro en)en-sul$onatului de :a# a 2#4#6-trinitro en)en-sul$onatului de :a sau su $orma deri%ailor 'alogenai.
-

9eacia dintre o protein" i 2#4-dinitro en)en-sul$onatul de sodiu ilustrea)" mecanismul atacului nucleo$ilic# reacie *n care proteina cedea)" electroni# iar nucleul en)enic *i accept".

? Con.ugatele protein"-protein" se o in prin intermediul agenilor i$uncionali de legare+ dii)ocianaii i car odiimidele. 6eoarece grup"rile ciano au reacti%itate di$erit"# reacia de cuplare se reali)ea)" *n trepte. 6e e/emplu# gruparea din po)iia 4 a toluilen-dii)ocianatului este mai reacti%" dec0t gruparea ciano din po)iia 2. (ceasta permite ca una dintre proteine s" se cuple)e *n po)iia 4# iar ulterior# *ntr-o nou" etap" a reaciei# cea de a II-a protein" se %a cupla la gruparea ciano din po)iia 2+

Car odiimidele# utili)ate ca ageni i$uncionali pentru cuplarea proteinelor# sunt considerate an'idride simetrice ale ureii+

O2: E C E :O2 O: B C B:O E O@O @ Car odiimida 5ree simetric"

O2: E C 4 : Cianamida asimetric"

Car odiimidele pot $i su stituite simetric sau asimetric cu molecule proteice+ 91: B C B :91 sau 91: B C B :92. (genii i$uncionali de cuplare permit o inerea con.ugatelor proteice >con.ugate anticorpi-$eritin"# insulin"-al umin"?# dar se $olosesc i ca mediatori ai leg"rii di$eritelor molecule proteice pe supra$aa eritrocitelor. Darca.ul cu $eritin" este deose it de important din punct de %edere practic# deoarece se $olosete pentru e%idenierea electrono-optic"# la ni%elul mem ranei# a di$eritelor molecule proteice.

c? Con.ugatele protein"-suport insolu il se o in prin cuplarea proteinelor cu un suport insolu il# prin reacia de dia)otare# prin intermediul car odiimidelor sau al 4rC:. Ca suporturi insolu ile se $olosesc deri%ai celulo)ici+ sep'ade/# sep'aro)a# agaro)a etc. ,egarea proteinei de suport# prin reacia de dia)otare# se $ace prin intermediul tiro)inei# li)inei# 'istidinei# tripto$anului sau argininei. Con.ugatele anticorpi-suport insolu il se numesc imunosor eni i sunt $olosii cu o e$icien" deose it" pentru puri$icarea proteinelor dintr-un amestec# datorit" speci$icit"ii lor de com inare cu anticorpii corespun)"tori# $i/ai *ntr-o coloan" de material inert. (ntigenul complementar speci$icit"ii de legare a anticorpului $i/at *n coloan"# se leag" neco%alent de imunosor ent# dup" care poate $i eluat cu un agent c'imic. (nticorpii pot $i imo ili)ai pe un suport insolu il# prin tratamentul cu un agent de legare *ncruciat" >glutaralde'id"?# dar multe din situsurile reacti%e pt $i denaturate sau r"m0n ascunse. !ig. 4. &rincipiul $uncional al imunosor enilor utili)ai *n cromatogra$ia de a$initate. Coloana conine se$aro)"# pe care sunt $i/ate moleculele de anticorp. (mestecul de antigene este trecut prin coloan"# unde %a $i reinut numai antigenul care recunoate speci$ic anticorpul $i/at. Cel mai un suport de imo ili)are este agaro)a# un poli)a'arid o inut prin $racionarea agarului. (garo)a este re)istent" la aciunea degradati%" a en)imelor acteriene i a agenilor c'imici i poate $i regenerat". ;ste disponi il" su $orma s$erelor poroase 'idratate# cu diametrul de 40-300 Um i conine 2-8M agaro)" *n soluie apoas". In coloana de imunosor ent se pot $i/a nu numai anticorpii# ci i antigenele sau c'iar celule intacte. Imunosor enii se $olosesc *n acti%itatea de cercetare i *n clinic"# pentru prepararea unor produse iologice i a medicamentelor. ntigene sintetice (ntigenele sintetice sunt polimeri de aminoaci)i# cu sec%en" cunoscut"# o inui in %itro. &ropriet"ile imunogenice ale 'omopolimerilor >poli-,Gs# poli-7lu# poli-&ro? i ale 'eteropolimerilor au $ost studiate de D. <ela. <tudiul imunogenit"ii 'eteropolimerilor are a%anta.ul c" o$er" posi ilitatea studiului in$luenei compo)iiei c'imice# a greut"ii moleculare i a con$ormaiei moleculare# uur0nd studiul imunoc'imic al grup"rilor determinante de speci$icitate antigenic".

Catenele polipeptidice sintetice pot $i lineare sau rami$icate. Cele rami$icate re)ult" prin ataarea polimerilor lineari# la o caten" poli$uncional". 9ami$icarea se o ine mai uor cu aminoaci)i aromatici. Oomopolimerii nu sunt imunogeni# cu e/cepia poli-,-&ro# poli-,-7lu# poli-,(rg# poli-,-,Gs. Copolimerii $ormai din doi aminoaci)i nu sunt totdeauna imunogeni# dar cei re)ultai prin polimeri)area a trei aminoaci)i di$erii sunt totdeauna imunogeni. Cu c0t compo)iia lor este mai 'eterogen"# imunogenitatea este mai accentuat". &re)ena aminoaci)ilor aromatici con$er" o anumit" rigiditate a epitopilor i implicit# o imunogenitate superioar". &entru a $i imunogeni# copolimerii tre uie s" $ie cata oli)ai de aparatul en)imatic al celulelor care prelucrea)" i pre)int" antigenul. &olipeptidele $ormate din 6-aminoaci)i sunt sla imunogene# datorit" incapacit"ii organismului de a cata oli)a polimerul. &olipeptidele sintetice s-au do%edit a $i $oarte utile *n studiile de imunoc'imie# cu pri%ire la+ - determinarea m"rimii grup"rii determinante de speci$icitate i indirect# a situsului de com inare a anticorpilor speci$iciN - rolul dimensiunilor moleculei asupra propriet"ilor de imunogenitateN - rolul con$iguraiei spaiale a moleculei *n con$erirea propriet"ii de imunogenitateN - identi$icarea epitopilor sec%eniali i con$ormaionali.

I&UN(67($U7IN,7, ( N-IC(RPII"

;/istena anticorpilor a $ost demonstrat" de 4e'ring i Litasato >1890?# *n serul animalelor imuni)ate e/perimental cu to/ina tetanic". <erul lor neutrali)ea)" to/ina in vitro i o $ace ino$ensi%" pentru animalele de e/perien". (utorii au $olosit denumirea de 2anticorp3 pentru a desemna su stanele protectoare ce apar *n ser# cu speci$icitate $a" de un antigen corpuscular > acterii?. Oeidel erger >1930? a puri$icat anticorpii din ser i a e%ideniat c" aparin $raciei proteice. Aiselius i La at >1938? au demonstrat e/perimental c"# de cele mai multe ori# $uncia de anticorp este asociat" cu fracia gama a proteinelor serice i le-au dat denumirea de gamaglo"uline4 1n 1970# prin consens *ntre specialiti# @D< a sta ilit ca su stanele cu propriet"i de anticorp# s" $ie grupate *n categoria imunoglo"ulinelor# pornind de la $aptul c" toate su stanele din acest grup au $uncie imunitar" i sunt cuprinse

*n $racia glo ulinic" a serului. (nticorpii nu sunt numai gamaglo uline. ;/ist" i alte glo uline cu $uncie de anticorp# dup" cum e/ist" i gamaglo uline care nu au acti%itate de anticorp >de e/emplu# proteinele patologice 4ence-Jones?. #ig41<4 Do ilitatea electroforetic a imunoglo ulinelor serice. Ig7 are cea mai 'eterogen" sarcin" electric" i migrea)" *n regiunile gama i eta. Ig; are are mo ilitate similar" cu a Ig6# dar nu poate $i identi$icat pe electro$oregram" datorit" ni%elului seric sc")ut. (nticorpii sunt imunoglo uline care se sinteti)ea)" *n organism dup" p"trunderea unui antigen i au proprietatea de a se cupla speci$ic cu antigenul inductor i de a-i ani'ila aciunea noci%". Aermenul de 2anticorp3 *n accepiunea sa actual"# a $ost $olosit de ;'rlic' >1891? *n lucrarea 2<tudii e/perimentale asupra imunit"ii3. (nticorpii $ormea)" 20M din totalul proteinelor plasmatice# dar se g"sesc i *n lic'idele e/tra%asculare# *n secreiile e/ocrine >sali%"# lapte# lacrimi? i ca molecule receptor de anti&gen pe supra$aa lim$o-citelor 4. Doleculele de anticorpi au cea mai mic" mo ilitate electro$oretic". 6ei sunt asem"n"toare ca structur"# moleculele de imunoglo uline $ormea)" o $amilie de o diversitate imens# ne*nt0lnit" la nici o alt" protein". 6i%ersitatea lor uria" este ordonat" *n clase i su clase# *n primul r0nd pe a)a compo)iiei *n aminoaci)i. Oeterogenitatea compo)iiei *n aminoaci)i se re$lect" *n sarcina lor electric"# $oarte di$erit". ,a electro$ore)"# celelalte proteine serice migrea)" ca o and" compact"# cu o mo ilitate caracteristic"# deoarece moleculele lor sunt omogene *n ceea ce pri%ete sarcina electric"# la un pO dat. Imunoglo ulinele migrea)" ca o and" larg"# $iind 'eterogene# nu numai prin sec%ena aminoaci)ilor# ci i prin sarcina electric". &tructura moleculei de imunoglo'ulin* <tructura moleculei de imunoglo ulin" >Ig? s-a sta ilit prin anali)a proteinelor omogene secretate de plasmocitoame# cu metodologii comple/e+ ioc'imice# analitice# cristalogra$ia prin di$racie cu ra)e S. 5nitatea structural" de a)" a moleculei de Ig este monomerul. (cesta este o unitate tetrapeptidic"# $ormat" prin asocierea a dou" lanuri grele >O# ea%G B greu?# $iecare a%0nd circa 450 de aminoaci)i i o greutate molecular" cuprins" *ntre 50-76 F6 i dou" lanuri uoare >,# (ig't B uor?# $iecare a%0nd circa 216 aminoaci)i i o greutate molecular" de 25 F6. Cele 4 catene polipeptidice sunt legate *ntre ele prin puni <-< i se r"sucesc *n spiral" - at0t unul $a" de altul# dar i $iecare separat E $a" de propria-i a/"# re)ult0nd o con$iguraie tridimensional"# sta ili)at" prin 16-24 leg"turi <-< i prin alte interaciuni neco%alente. Donomerul tetrapeptidic tridimensional are $orm" de A sau de V. 1n $uncie de sec%ena aminoaci)ilor# $iecare lan polipeptidic este alc"tuit din dou" regiuni distincte+

a? regiunea constant >C ? corespunde .um"t"ii C-terminale a celor 4 catene polipeptidice. (re o sec%en" relati% uni$orm" a aminoaci)ilor i asigur" unitatea structural" i $uncional" a moleculei de IgN ? regiunea varia"il >I? cuprinde o sec%en" de circa 110 aminoaci)i *n .um"tatea :-terminal" a celor 4 catene polipeptidice. D"rimea sa nu este $i/"# deoarece inter%in inserii sau deleii de 3-6 aminoaci)i. 9egiunile %aria ile ale $iec"rei perec'i de catene $ormea)" situsul de com"inare al moleculei de Ig# care con$er" speci$icitate de legare cu antigenul. Iaria ilitatea ma/im" a sec%enei de aminoaci)i a catenei , se concentrea)" *n po)iiile 24-34# 50-55# 89-97# iar a catenei O# la sec%enele 30-36# 50-56# 86-91 i 95-100. (ceste sec%ene $ormea)" regiunile /ipervaria"ile sau regiunile determinante de complementaritate >96C?# $a" de con$iguraia spaial" a epitopului. (minoaci)ii acestor sec%ene intr" *n alc"tuirea situsului de com inare al moleculei de Ig. <ec%enele relati% in%ariante se numesc regiuni cadru >9C? i $ormea)" 8085M din regiunea %aria il" a moleculei de Ig. Iariaia sec%enei aminoaci)ilor la ni%elul regiunilor cadru este limitat" la 5M. <ec%ena regiunilor cadru i a celor determinante de complementaritate alternea)" ast$el+ 9C1# 96C1# 9C2# 96C2# 9C3# 96C3# 9C4# 96C4. (proape de .um"tatea catenelor O se g"sete o sec%en" de circa 15 aminoaci)i# *n care sunt grupate toate resturile de cistein" ce $ormea)" puni <-< intercatenare. (ceast" sec%en" se numete regiunea "alama. ;ste sensi il" la aciunea protea)elor $iind cli%at" de papain"# pepsin" etc. ,a IgD i Ig;# regiunea alama lipsete# dar cea omolog" alamalei este cli%at" de protea)e. 9egiunea alama asigur" fle'i"ilitatea moleculei de Ig# permi0nd mo ilitatea $ragmentelor !a # care# teoretic# pot $orma ung'iuri %aria ile# *ntre 0-180o# con$erind moleculei o geometrie %aria il". Cele 16-24 leg"turi <-< ale monomerului tetrapeptidic sunt constante ca num"r i locali)are pentru di$eritele clase de Ig. <e disting 3 categorii de puni <-<+ - leg"turi intercatenare O-O sau ,-O# ale unui monomer. ,eg"turile ,-, s-au descris la Ig(2 i la proteinele 4ence-Jones# care sunt dimeri de lanuri ,N - leg"turi intracatenare# care determin" structura teriar" a $iec"rui lan polipeptidic. - leg"turi intercatenare# *ntre lanurile O ce aparin unor monomeri di$erii# la Ig(2 i IgD# care $ormea)" comple/e moleculare polimerice+ moleculei de Ig se $ormea)" prin plierea $iec"reia din cele 4 catene polipeptidice i prin r"sucirea lor *n spiral". 6omeniile sunt regiuni glo ulare ale moleculei# legate *ntre ele prin sec%ene lineare scurte. 6omeniile se plia)" *ntr-o con$ormaie sta il"# con$erit" de sec%ena proprie de aminoaci)i. Comparati% cu sec%enele lineare# domeniile pliate sunt mai re)istente la proteoli)". Catena , are dou" domenii+ unul corespun)"tor regiunii %aria ile >I,? i altul corespun)"tor regiunii constante >C,?. Catena O are 4 domenii+ unul corespun)"tor regiunii %aria ile >IO? i trei domenii ale regiunii constante+ CO1# CO2# CO3. #ig4 11. a. 9epre)entarea sc'ematic" a structurii primare a

moleculei de imunoglo ulin". #ig4 11. b. ,ocali)area di$eritelor $uncii ale moleculei de anticorp. !iecare caten" O a moleculelor de IgD i Ig; are 5 domenii+ unul *n regiunea %aria il" >IO? i 4 *n regiunea constant" >CO1 E CO4?. <ec%ena de leg"tur" *ntre regiunea constant" >CO 1? i cea %aria il" a $iec"rei catene se numete zon de comutare >s B sKitc'?. !iecare domeniu are o $orm" cilindric" sau glo ular"# cuprinde o sec%en" de circa 60 de aminoaci)i i este sta ili)at prin interaciuni neco%alente de tip trans# cu domeniul omolog din lanul opus i de tip cis# cu domeniul %ecin al aceleiai catene. 6omeniile $iec"rui lan# *mpreun" cu cele omologe ale lanului opus# $ormea)" unit"i $uncionale denumite module. Cooperarea lor $uncional" este ilustrat" de $aptul c" domeniile I, i IO separate# au o capacitate $oarte limitat" de legare a antigenului# *n timp ce $orma lor asociat" >care constituie situsul de legare al moleculei? este $oarte e$icient" *n legarea antigenului. #ig4 154 9epre)entarea sc'ematic" a domeniilor pliate i sta ili)ate ale moleculei de Ig7. Doleculele de imunoglo uline e/ist" su dou" $orme+ secretate# ca anticorpi *n umorile organismului i legate de mem rana lim$ocitelor 4# *ndeplinind $uncia de receptori de antigen. !orma legat" pre)int" o sec%en" 'idro$o " la cap"tul Cterminal# de circa 30 de aminoaci)i# care str" ate mem rana i se ancorea)" *n structura ei. Detodele de clivare i de denaturare c/imic a moleculei de imunoglo ulin" au contri uit la *nelegerea structurii i $unciei sale. Cli%area s-a reali)at cu en)ime proteolitice >papain"# pepsin"# tripsin"? sau prin cianoli)" cu 4rC:. #ig4 16. Cliva3ul enzimatic al moleculei de Ig71 umane. &epsina cli%ea)" catena O i eli erea)" $ragmentele !>a C? 2 i regiunea !c >segmentul cristali)a il?. Oidroli)a prelungit" taie $ragmentul !cC *n peptide scurte. &apaina cli%ea)" molecula *n regiunea alama >la restul 224? i eli erea)" dou" $ragmente !a i un $ragment !c >dup" 9oitt# 1984?. &apaina scindea)" mo-lecula de imunoglo ulin" la ni%elul regiunii alama >aminoacidul 224? i eli e-rea)" dou" $ragmente #a" >#ragment antigen "inding? i $ragmentul #c >cristali)a il?. !iecare $ragment !a >50 F6? conine un lan , *ntreg i .um"tatea :-terminal" a lanului O# notat" cu !d >di$$icult?# care cuprinde domeniile IO i CO1. !rag-mentul !a poate $i scindat trans%ersal i re)ult" $ragmentul !% >%aria il? $ormat din domeniile I, i IO# se-parat de domeniile C, i CO1. !ragmentul !c >50 F6? este $ormat din .um"t"ile C-terminale ale celor dou" catene O# unite printr-o leg"tur" <-< i prin leg"turi neco%alente.

&epsina cli%ea)" lan-urile O su regiunea alama i eli erea)" $ragmentul !cC# mai mic dec0t $ragmentul !c papainic i dou" $ragmente !a C legate *ntre ele >!a C?2# prin puni <-< intercatenare. 4rC: scindea)" lanurile polipeptidice la ni%elul sec%enelor cu Det# pe care o trans$orm" *n 'omoserin". !ragmentele re)ultate sunt 'eterogene ca m"rime# *n $uncie de $rec%ena metioninei. &olipeptidele re)ultate prin cli%are en)imatic"# c0t i prin cianoli)"# se separ" prin te'nici cromatogra$ice. 6enaturarea moleculei de imunoglo ulin" prin reducerea leg"turilor <-<. (genii reduc"tori >mercaptoetanolul# mercaptoetanolamina# ditiotreitolul? au o grupare <O li er" i reduc leg"turile <-< intercatenare i intracatenare. O@ E CO2 E CO2 E <O >Dercaptoetanolul? ,eg"turile intercatenare >O-O sau O-,? sunt reduse mai uor# iar cele intracatenare# care sta ili)ea)" uclele domeniilor moleculei de imunoglo ulin"# sunt disociate mai greu. 9educerea leg"turilor <-< este re%ersi il". 6up" *ndep"rtarea agentului denaturant# renaturarea este rapid" i complet". 6in acest moti%# agenii denaturani se *ncorporea)" *n sistemul supus denatur"rii. 6enaturarea se poate sta ili)a prin di$erite metode c'imice. 0unciile moleculei de imunoglo'ulin* 1n ansam lul e$ectorilor sistemului imunitar# moleculele de imunoglo- ulin" *ndeplinesc dou" categorii de $uncii+ - $uncii de specificitate - $uncii grupate su denumirea de activiti "iologice efectoare <peci$icitatea imunoglo ulinei $a" de un antigen este e/primat" prin capacitatea de recunoatere $in" a epitopului complementar al antigenului i de com inare cu acesta. <peci$icitatea moleculei de imunogo ulin" este con$erit" de situsul s"u de com inare. Darea di%ersitate a moleculelor de anticorpi# asigur" o di%ersitate uria" a situsurilor de com inare# de ordinul a 10 8 E 109 speci$icit"i de legare. <peci$icitatea de legare este dat" de structura spaial" a situsului de com inare cu antigenul# con$erit" de resturile de aminoaci)i ale regiunilor 'iper%aria ile ale catenelor O i ,. (minoaci)ii care $ormea)" situsul de com inare al moleculei de imunoglo ulin"# prin plierea regiunilor 'iper%aria ile# delimitea)" o cavitate molecular ce di$er" ca $orm" i m"rime. Ca%itatea pre)int" su structuri >proeminene i depresiuni?# pe care le $ormea)" sec%enele 'iper%aria ile# *n timp ce restul regiunilor %aria ile ale celor dou" catene con$er" structura tridimensional" a ca%it"ii moleculare. &otri%irea spaial" dintre situsul de com inare al moleculei de anticorp i epitopul speci$ic# din punctul de %edere al con$iguraiei spaiale# este per$ect". ;%entualele imper$eciuni geometrice pot $i ocupate de moleculele de ap". &otri%irea per$ect" a celor dou" unit"i com inante este sugerat" de meta$ora 2c'eie- roasc"3.

6up" com inarea cu antigenul# modi$ic"rile spaiale ale situsului de com inare a anticorpului sunt minime# nedecta ile. ;pitopul antigenic are un rol important *n potri%irea con$ormaional" per$ect" cu situsul de com inare a anticorpului# deoarece corespunde unei regiuni moleculare cu $actor de temperatur" mai ridicat"# ceea ce sugerea)" o $le/i ilitate mai accentuat" a sec%enei moleculare respecti%e. !le/i ilitatea unui determinant antigenic *i permite s" se adapte)e mai uor *ntr-un situs de legare pree/istent al moleculei de anticorp# c'iar dac" epitopul nu se potri%ete e/act geometriei situsului de com inare a anticorpului. 6atorit" $le/i ilit"ii epitopului# legarea antigenului cu anticorpul se aseam"n" cu 2*nt0lnirea a doi nori3 i nu cu aceea a 2dou" pietre3. (nticorpii speci$ici $a" de sec%enele peptidice mo ile >calde? ale antigenului proteic# se leag" cu a$initate mai mare de proteina nati%". (ceste re)ultate sunt $oarte importante din punct de %edere practic# pentru selectarea segmentelor peptidice *n %ederea o inerii %accinurilor sintetice su unitare. 6imensiunile situsului de com inare s-au dedus indirect# prin determinarea m"rimii 'aptenei care loc'ea)" reacia de com inare a anticorpilor cu antigenul nati%+ oligo)a'aridul $ormat din =&> uniti monomerice ocup" complet situsul de com inare al moleculei de anticorp. @ligo)a'aridele mai mici in'i " parial reacia speci$ic" de precipitare. &entru anticorpii speci$ici $a" de antigene proteice# tetrapeptidele au locat cu ma/im" e$icien" reacia de precipitare dintre anticorpi i antigenul nati%. !unciile iologice e$ectoare sunt amorsate de reacia antigen-anticorp. :um"rul $unciilor iologice e$ectoare este mai mic i sunt dependente de regiunile constante ale moleculei de imunoglo ulin". !iecare domeniu al regiunii constante a moleculei de imunoglo ulin" *ndeplinete anumite $uncii+ - legarea antigenului pe imunoglo ulinele de supra$a" care $uncionea)" ca receptori pe lim$ocitele 4# declanea)" proliferarea i diferenierea lor# iar legarea antigenului cu imunoglo ulinele citotrope pentru mastocite# declanea)" degranularea acestor celuleN - dup" cuplarea cu antigenul# moleculele de imunoglo ulin" e/pun $ragmentul !c# recunoscut ulterior de receptorii speci$ici pentru !c de pe supra$aa monocitelor# macro$agelor# &D::. (st$el se stimulea)" procesul de $agocito)" a celulelor nonsel$ tapetate cu imunoglo uline# denumit imunofagocitoz? - celulele L# prin intermediul receptorilor pentru !c# interacionea)" cu celulele nonsel$ tapetate cu Ig7 i reali)ea)" li)a de contact prin $enomenul de citoto'icitateN - interaciunea antigen-anticorp generea)" un semnal care se transmite regiunii !c. (ceasta *i modi$ic" con$iguraia spaial" i e/pune un situs de recunoatere >pentru Ig7 situat *ntre 7lu 318 i ,Gs 322?# de care se leag" C1WN - regiunea alama este transductoare de semnale i are un rol important *n $le/i ilitatea moleculei de imunoglo ulin"# permi0nd %ariaia ung'iului dintre $ragmentele !a + ele trec re%ersi il de la $orma A la V. 7eometria %aria il" a moleculei de imunoglo ulin" m"rete e$iciena de legare a antigenului# deoarece a.ustea)" po)iia celor dou" situsuri de com inare ale anticorpului# *n $uncie de

distana la care se g"sesc determinanii antigenici pe supra$aa unui antigen particulat >%irus sau celul"?N - regiunea alama a moleculelor de Ig7 i Ig6 este sensi il" la aciunea en)imelor proteolitice# iar a moleculei de Ig( este re)istent". Componenta glucidic" a imunoglo ulinei *ndeplinete urm"toarele $unciiN - reali)ea)" i menine o con$ormaie a moleculei de imunoglo ulin"# esenial" pentru secreieN - m"rete solu ilitatea moleculelor de imunoglo ulin"N - are rol de spaiator *ntre domeniile unui lan i *ntre catenele moleculeiN - particip" la $unciile citotrope ale moleculei de imunoglo ulin"N - are rol *n legarea C1W# component" a sistemului complement. 9eterogenitatea anticor!ilor Doleculele de imunoglo uline din plasma oric"rui organism sunt $oarte 'eterogene# at0t datorit" di%ersit"ii epitopilor $a" de care s-au sinteti)at E ceea ce induce %ariaii ale sec%enelor 'iper%aria ile ale moleculei# c0t i datorit" %ariaiilor sec%enei de aminoaci)i *n regiunile constante ale moleculei. Oeterogenitatea anticorpilor este ordonat" *n clase# su clase# tipuri# alotipuri i idiotipuri9 pe "aza variaiei secvenei de aminoacizi4 Moleculele de imunoglo"uline au caliti du"le@ ele se comport nu numai ca molecule de recunoatere9 care recunosc specific antigenul9 dar la rndul lor sunt recunoscute ca antigene4 Pentru sporirea gradului de imunogenitate9 moleculele de imunoglo"uline se asociaz cu ad3uvantul #reund i se in3ecteaz la animale de e'perien4 $ariaiile de structur c/imic a imunoglo"ulinelor se comport ca determinani antigenici i induc sinteza anticorpilor anti&imunoglo"ulin4 $ariaiile de ordin c/imic ale imunoglo"ulinelor se evideniaz prin metode imunoc/imice de precipitare ntre moleculele de imunoglo"ulin cu rol de antigen i anticorpii anti& imunoglo"ulin din serul imun4 6in punctul de %edere al mani$est"rii imunopotenei determinanilor antigenici ai imunoglo ulinelor# s-au de$init trei ni%ele de 'eterogenitate+ izotipic9 alotipic i idiotipic4 Heterogenitatea izotipic* Oeterogenitatea i)otipic" >izos B acelai? de$inete %ariantele ioc'imice ale imunoglo ulinelor# comune pentru toi indi%i)ii unei specii. Iariantele ioc'imice se datorea)" %ariaiilor sec%enei de aminoaci)i *n regiunea constant" a catenei O. ;le se comport" ca determinani antigenici dup" in.ectarea *n organismul altei specii. &entru identi$icarea epitopilor i)otipici ai moleculelor de imunoglo ulin" uman"# acestea# *n asociaie cu ad.u%antul !reund# se in.ectea)" la iepure. !iecare indi%id al unei specii e/prim" toate %ariantele antigenice i)otipice caracteristice speciei. Iariantele antigenice izotipice ale imunoglo ulinelor umane s-au identi$icat iniial# n regiunea constant a catenei . ;/ist" 5 %ariante antigenice distincte ale catenelor O *n regiunea constant"# notate cu g# m# a# d# e# corespun)"toare celor 5 clase de imunoglo uline+ Ig7# IgD# Ig(# Ig6# Ig;. <erul imun $a" de un determinant antigenic de clas" nu d" reacii *ncruciate cu celelalte tipuri de determinani# deoarece catenele O ale di$eritelor

clase de imunoglo uline pre)int" di$erene mari de ordin c'imic *ntre domeniile ec'i%alente# care merg p0n" la circa 60M din totalul aminoaci)ilor. 6eterminanii antigenici ai unei clase de imunoglo uline sunt comuni tuturor indi%i)ilor unei specii i se e%idenia)" *n serul imun /eterolog# o inut prin imuni)area organismelor altei specii. 6e e/emplu# un antiser $a" de lanul uman # o inut pe iepure# %a precipita numai anticorpii clasei Ig7 din orice ser uman. 5lterior# determinanii antigenici s-au identi$icat i n regiunile constante ale catenelor (. 6eterminanii antigenici ai catenelor , determin" tipurile de imunoglo uline. Catena , are dou" %ariante antigenice# notate cu A i l# care se g"sesc la toate cele 5 clase de imunoglo uline. Cele dou" tipuri structurale de lanuri , >F i l? pre)int" deose iri de sec%en" a aminoaci)ilor *n regiunea constant" i nu au determinani antigenici comuni. 6e aceea# nu dau reacii imune *ncruciate. <erul imun 'eterolog anti-molecule de imunoglo uline umane cu caten" ,F# o inut pe iepure# precipit" toate moleculele de imunoglo uline umane care conin catena ,F# indi$erent de clas". <erul imun anti-,F nu precipit" moleculele de imunoglo uline care conin catena , l. @ molecul" de imunoglo ulin" are dou" catene de tip F sau l. !ormula general" a di$eritelor clase de imunoglo uline este g2F2 >sau g 2 l 2?# m2F2 >m2 l 2?# a2F2 >a2 l 2?. Catenele , de tip F i l determin" tipurile moleculare de imunoglo uline. ,a om# raportul Ig FT l este 7T3# iar la oarece este 19T1# %alori care pro a il re$lect" raportul numeric al genelor codi$icatoare pentru cele dou" tipuri de catene. I)otipurile catenelor O nu in$luenea)" $uncia de speci$icitate a moleculelor de imunoglo uline+ acelai antigen poate $i legat de oricare din cele 5 clase de imunoglo uline. &e l0ng" %ariantele antigenice menionate E clase i tipuri E s-au identi$icat di$erene mai su tile ale moleculelor de Ig7 i Ig(# *n ceea ce pri%ete propriet"ile $i)ice# c'imice i iologice# di$erene care corespund su"claselor antigenice. (ceasta *nseamn" c"# pe l0ng" determinanii antigenici de clas"# e/ist" i alte %ariante antigenice ale regiunii constante ale catenei # corespun)"toare su claselor. ;le se notea)" cu litera clasei# urmat" de o ci$r"+ Ig7 1# Ig72# Ig73# Ig74# respecti% Ig(1# Ig(2. Doleculele de imunoglo uline ale su claselor au *n comun determinanii antigenici proprii $iec"rei su clase# aduc0nd un ni%el superior de 'eterogenitate a catenelor O. 6i$erenele sec%enei de aminoaci)i ai catenei O# *ntre di$erite su clase sunt mici+ 24 de aminoaci)i *ntre Ig71 i Ig74. Cea mai important" deose ire const" *n num"rul leg"turilor <-< intercatenare. Doleculele di$eritelor su clase sunt sinteti)ate de celule di$erite. )ariantele alotipice 6escoperirea alotipiei >alos B altul? a pornit de la urm"torul $apt de o ser%aie+ *n serul pacienilor cu artrit" cronic" reumatoid" se g"sesc molecule

de tip special# *ncadrate *n categoria $actorilor reumatoi)i >!9?. !actorii reumatoi)i sunt molecule de auto-anticorpi# adic" IgD anti- Ig7. !actorii reumatoi)i se e%idenia)" in vitro# prin capacitatea lor de a determina aglutinarea eritrocitelor tapetate cu o do)" su aglutinant" de anticorpi speci$ici antieritrocitari >Ig7?. 7ru >1956? a o ser%at c" !9 seric# uneori# aglutinea)" 'ematiile tapetate cu auto-anticorpi speci$ici >care se sinteti)ea)" *n anemia 'emolitic" autoimun"? ale unor pacieni# iar alteori# reacia de 'emaglutinare nu se produce# testul e%idenierii !9 in vitro $iind $als negati%. Conclu)ia reaciei de 'emaglutinare pe care# uneori# !9 din serul pacienilor de artrit" reumatoid" o produce asupra 'ematiilor tapetate cu o do)" su aglutinant" de anticorpi speci$ici# a $ost urm"toarea+ autoanticorpii de pe supra$aa eritrocitelor unor indi%i)i cu anemie 'emolitic" autoimun"# posed" determinani antigenici di$erii# pe care !9 poate s"i recunoasc". (st$el s-a dedus c" moleculele de imunoglo ulin" de la indi%i)i di$erii# sunt di$erite din punct de %edere antigenic. 1n consecin"# imuni)area unui indi%id cu imunoglo ulinele pro%enite de la alt indi%id al aceleiai specii# determin" sinte)a anticorpilor $a" de determinanii antigenici ai moleculelor imunoglo ulinice ale donorului. Imunoglo ulinele sunt aloantigene ine$iciente dac" sunt in.ectate ca proteine solu ile *n organismul uman. 6e aceea# trans$u)iile de s0nge total# de plasm" sau in.ectarea imunoglo ulinelor solu ile# de cele mai multe ori# nu induc sinte)a anticorpilor anti-imunoglo uline ale donorului. Doleculele de imunoglo uline de%in antigenice dup" asocierea lor cu ad.u%antul !reund. <emni$icaia %ariantelor antigenice alotipice ale moleculelor de imunoglo uline este analog" celei a antigenelor de grup sanguin. !enomenul este general# adic" i alte molecule pro%enite de la un organism pot $i imunogene pentru alte organisme ale aceleiai specii# la care se comport" ca aloantigene. Iariantele alotipice ale imunoglo ulinelor se detectea)" *n reacia de precipitare cu aloantiseruri o inute pe organisme ale aceleiai specii# dar cu alotip di$erit de acela al organismului donor al antigenului imunoglo ulinic. Iariantele moleculare alotipice sunt consecina e/istenei genelor alele perec'i >aa?# o caracteristic" general" a organismelor diploide. &rin mutaii succesi%e# *n acelai locus# apar mai multe alele care $ormea)" o serie polialelic" a1# a2# a3 XX an. 7enele alele ocup" acelai locus pe cromosomii omologi# ca i gena de tip s"l atic a. !iecare indi%id %a a%ea o com inaie de gene alele+ aa1# aa2 X.. aan sau a1a2# a1a3 XX a1an# cu %ariante antigenice distincte. (lotipurile imunoglo ulinelor sunt re)ultatul %ariaiilor sec%enei aminoaci)ilor *n regiunile constante ale catenelor O i ,# ceea ce le con$er" un grad superior de 'eterogenitate# consecin" a alelelor codominante la acelai locus. &entru moleculele imunoglo ulinice umane s-au descris trei categorii de marFeri alotipici+ - $actorii 7m >gama marFer?# numerotai de la 1 la 25# pe catena O a su claselor de Ig7. 6e e/emplu# marFerul 71m>a? pe moleculele de Ig71 are sec%ena (sp-7lu-,eu-A'r-,Gs# iar moleculele altor indi%i)i au sec%ena 7lu-7luDet-A'r-,Gs# adic" doi aminoaci)i di$erii. &entru Ig73 sau descris 14 aleleN - $actorii (2m>1? i (2m>2?# identi$icai pe catenele O ale su clasei Ig(2N

- $actorii Lm>In%?# pe catenele ,F# *n num"r de treiN - dou" %ariante alelice pentru Ig;. !oarte rar# determinanii antigenici alotipici sunt locali)ai *n domeniile %aria ile ale moleculei. Ca i *n alte sisteme alelice# indi%i)ii pot $i 'omo)igoi sau 'etero)igoi pentru genele care codi$ic" marFerii. 7enele se e/prim" codominant i se transmit *n descenden" dup" mecanismul mendelian. 6e e/emplu# alotipurile 4 5 pe catenele , ale imunoglo ulinelor de iepure se e/prim" ast$el+ un organism 'omo)igot 4 4 sau 5 5 e/prim" alotipul 4# respecti% 5. 6ar genotipul 4 5 re)ultat *n descendena lor e/prim" marFerul 4 pe o $racie a moleculelor i marFerul 5# pe restul moleculelor de imunoglo uline. )ariantele idiotipice Idiotipul >idios B indi%idual? este repre)entat de o populaie omogen" de molecule de anticorpi# sinteti)ate de descendenii unei clone celulare# care recunosc i se com in" cu un singur determinant antigenic >epitop?. <peci$icitatea idiotipic" a unei populaii de anticorpi s-a dedus pe cale e/perimental"+ - antigenul >celule de !4 t7p/i? s-a in.ectat la organismele ( i 4 >iepuri?# identice din punct de %edere genetic. <e sinteti)ea)" anticorpi aglutinani anti !4 t7p/iN - anticorpii aglutinani 1>produi de organismul (? s-au in.ectat la organismul C >iepure din aceiai linie genetic"?. <e sinteti)ea)" anticorpi anti-anticorpi 1# e%ideniai *n reacia de precipitare. <urprin)"tor# anticorpii anti-anticorpi 1 nu precipit" anticorpii 2# dei anticorpii 1 i anticorpii 2 au aceiai speci$icitate $a" de antigenele !4 t7p/i# iar organismele (# 4# C aparin aceluiai alotip. Conclu)ia este c" anticorpii 1 i anticorpii 2# dei au aceiai speci$icitate $a" de antigenul de !4 t7p/i# la r0ndul lor# au determinani antigenici proprii. 6e aceea# anticorpii anti-anticorpi 1 nu precipit" anticorpii 2# sinteti)ai de un alt organism. Doleculele de anticorpi cu aceiai speci$icitate de com inare $a" de un antigen# sinteti)ate de organisme identice genetic# au o indi%idualitate antigenic" distinct"# denumit" specificitate idiotipic. Oeterogenitatea idiotipic" este consecina determinanilor idiotipici# locali)ai *n regiunile 'iper%aria ile ale catenelor O i ,. <peci$icitatea idiotipic" a moleculelor de anticorpi sinteti)ai de o clon" de celule este con$erit" de unicitatea sec%enei de aminoaci)i de la ni%elul sec%enelor 'iper%aria ile ce particip" la $ormarea situsurilor de com inare# care determin" epitopi cu caracter strict indi%idual denumii idiotopi. 5nii idiotopi sunt locali)ai c'iar *n interiorul situsului de com inare sau *n imediata sa %ecin"tate. 6o%ada o constituie $aptul c" legarea epitopului speci$ic de situsul de com inare a anticorpului# loc'ea)" *ntr-o m"sur" mai mare sau mai mic"# legarea anticorpilor anti-idiotipici. #ig4 1B. Ilustrarea diagramatic" a /eterogenitii anticorpilor. Colecia de idiotopi ai situsului de com inare a unei molecule de imunoglo uline $ormea)" idiotipul ei. Idiotipul este re)ultatul con$iguraiei spaiale unice a regiunilor 'iper%aria ile ale catenelor O i ,# con$erit" de o sec%en" unic" a aminoaci)ilor.

9epertoriul idiotipurilor este de acelai ordin de m"rime cu acela al speci$icit"ii situsurilor de com- inare. &entru situsul de com inare al moleculei de imunoglo ulin" s-a pro-pus denumirea de paratop. ,a alc"tuirea idiotipului particip" am ele catene. Cele dou" catene disociate nu pot s" lege anti-idiotipul sau *l leag" cu o e$icien" $oarte sc")ut".

SIS-,&U7 I&UNI- R

;/istena tuturor organismelor %ii este condiionat" de acti%itatea unor mecanisme de re)isten" i de imunitate# capa ile s" prote.e)e indi%idualitatea lor c'imic"# prin mecanisme de recunoatere i di$ereniere a su stanelor proprii >sel$? de cele str"ine >nonsel$?. In mod normal# aceste mecanisme sunt per$ect tolerante $a" de moleculele sel$# dar se acti%ea)" i reacionea)" mai mult sau mai puin %iguros pentru a *ndep"rta# a neutrali)a sau a distruge su stanele nonsel$. Decanismele de re)isten" i imunitate sunt pre)ente pe toat" scara e%oluti%" a organismelor# *ncep0nd cu acteriile i se comple/ea)" *n e%oluie. Celulele acteriene posed" mecanisme de protecie a indi%idualit"ii genetice# repre)entate de+ - fenomenele de restricie mediate de pre)ena unor sisteme en)imatice speci$ice >en)ime de restricie?# care recunosc moleculele str"ine de (6:# le cli%ea)" la ni%elul unor situsuri speci$ice# re)ult0nd $ragmente mai mici# sensi ile la aciunea e/o- i endonuclea)elorN - $enomenele de reparaie genetic dependente de acti%itatea unor sisteme en)imatice care recunosc modi$ic"rile (6: induse de mutaii sau de lipsa de $idelitate a mecanismelor de replicare# transcriere i traducere genetic"# corect0ndu-le $ie complet >sistemele error $ree? sau minimali)0nd erorile *n ca)ul sistemelor reparatorii predispuse la erori >error prone sGstems?. ,a plantele superioare# mi.loacele de ap"rare speci$ic"# aparent sunt a sente# dar e/ist" o gam" larg" de modalit"i de ap"rare nespeci$ic"+ - continuitatea i integritatea esuturilor epidermice# acoperite sau impregnate cu su stane impermea ile pentru %irusuri i microorganismeN - re)istena $i)iologic" con$erit" de coninutul *nalt de )a'aruri reduc"toare# pre)ena taninurilor# a di$eriilor aci)i organici# a pseudoanticorpilor cu acti%itate 'emaglutinant" *n sucurile %egetale.

,a protozoare# procesele de recunoatere asigur" selecia 'ranei# identi$icarea partenerilor pentru con.ugare la parameci# iar la cele para)ite# procesele de recunoatere media)" interaciunea cu ga)da. &,C NIS&, D, P8R R, 7 N,/,R-,$R -,

6ei nu au sistem lim$oid# ne%erte ratele recunosc i r"spund la su stanele nonsel$# la $el de e$icient ca i %erte ratele. ,a ele $uncionea)" o di%ersitate de mecanisme# unele $iind inducti"ile. 9"spunsul este de scurt" durat" i nu are speci$icitate $a" de agentul in$ecios patogen. 9"spunsul imun al ne%erte ratelor se aseam"n" calitati% cu cel *n"scut al %erte ratelor mediat de celulele $agocitare i de moleculele neimunoglo ulinice. ,a ne%erte rate# ap"rarea organismului este asigurat" de ariere $i)icoc'imice comple/e+ secreia mucoas care acoper" corpul celenteratelor# anelidelor# molutelor i protocordatelor# omoar" potenialii patogeni. ;/osc'eletul dur al celenteratelor# molutelor# artropodelor# ec'inodermelor i protocordatelor# $ormea)" o arier" protectoare e$icace $a" de agenii in$ecioi. Da.oritatea ne%erte ratelor superioare au sistem circulator cu celule al e# denumite /emocite sau celomocite# *n $uncie de natura ca%it"ii corpului. ,ipsesc 'ematiile. 1n mediul intern al ne%erte ratelor se g"sesc $agocite# $actori antimicro ieni constituti%i i inducti ili cu e$ect neutrali)ant i litic# $actori de coagulare a macromoleculelor str"ine. Aoate ne%erte ratele# c'iar cele care nu au ca%it"i ale corpului >spongieri# anemone# %iermi lai?# au $agocite# uneori de mai multe tipuri. Ca i la %erte rate# $agocitele sunt e$ectorii r"spunsului in$lamator# sinteti)ea)" en)ime li)osomale i posed" mecanisme citocide dependente de supero/id. 9eaciile de ap"rare >repararea tisular"# $agocito)a# reacia de *ncapsulare?sunt mediate de $agocite i de celulele 'emostatice. Ingestia microorganismelor in%adatoare este re)ultatul aciunii $agocitelor# iar un num"r mare de microorganisme i de meta)oare para)ite este *ncapsulat de celulele 'emostatice i de tip $agocitar. ;ndopara)itul care p"trunde *n organismul ne%erte ratelor este $agocitat# sau dac" are dimensiuni prea mari# este *ncapsulat. Incapsularea este re)ultatul unei $agocito)e $ruste. (deseori# endopara)itul *ncapsulat# este omor0t su aciunea intermediarilor to/ici ai unei cascade en)imatice. ,a ne%erte rate lipsesc lim$ocitele i moleculele de imunoglo uline# dar acestea sunt compensate de o %arietate de $actori umorali de ap"rare+ aglutinine# li)o)im# actericidine# en)ime li)osomale# $actori de imo ili)are. ,a insecte s-au

detectat peste 15 tipuri de proteine anti acteriene inducti ile *n c0te%a ore dup" in.ectarea unui antigen. :e%erte ratele nu au proteinele cascadei complementare# dar %iermii# insectele# crustaceii conin sistemul profenolo'idazei. Componentele acestui sistem sunt acti%ate de o serie de en)ime. ,a cap"tul cascadei de acti%are se $ormea)" en)ima acti%" fenolo'idaza# cu rol esenial *n *ndep"rtarea su stanelor nonsel$. #ig45=. 5n mecanism posi il de activare a profenolo'idazei la fenolo'idaz9 la artropode. (cti%area este stimulat" de le)iunile tisulare# de in$ecia cu microorganisme# de sc'im "ri ale concentraiei ionilor de Ca2R i ale %alorii pO# care pot duce la coagularea plasmei i generarea $actorilor care media)" e%enimentele ulterioare ale imunit"ii >dup" 9oitt# 1997?. !agocito)a este $oarte acti%" i este stimulat" de aglutininele i actericidinele cu rol de opsonine. 6in punct de %edere $uncional# aglutininele i actericidinele sunt similare anticorpilor. (cestea sunt lectine# cu rolul de a lega componenta glucidic" a glicoproteinelor de pe supra$aa celulelor nonsel$# re)ultatul $iind aglutinarea. ,ectinele sunt molecule care au ap"rut timpuriu *n e%oluie i sunt u ic%itare+ se g"sesc la acterii# plante# ne%erte rate i %erte rate. ;le tapetea)" microorganismele in%adatoare i au rolul de a le imo ili)a# dar au i rol opsoni)ant# uur0nd $agocito)a. In $uncie de speci$icitatea lor de legare cu glucidele# lectinele sunt $oarte di$erite. 1n corpul gras al insectelor superioare s-au caracteri)at circa 100 de peptide antimicro iene# a c"ror sinte)" rapid" este indus" de in$ecie. 6in punct de %edere structural sunt de dou" tipuri+ - peptide ciclice# care conin puni <-< >de e/emplu# drosmGcina?# acti%e $a" de acteriile 7ram po)iti%e i $a" de $ungiN - peptide lineare >cecropine ogate *n 7lG i &ro?# acti%e $a" de acteriile 7ram negati%e. Componentele celulare i 'umorale cu $uncii protectoare media)" reacii de ap"rare nespeci$ice >*n"scute?# $"r" r"spuns accelerat la stimularea antigenic" secundar".

(R6 NI5 R,

SIS-,&U7UI I&UNI- R 7 /,R-,$R -,

,a %erte rate# ap"rarea este asigurat" de mecanisme complicate celulare i 'umorale# de re)isten" i imunitate. !uncia esenial" a sistemelor de ap"rare este protecia $a" de agenii patogeni in%adatori. Interaciunea permanent" cu microorganismele are un rol 'ot"r0tor *n do 0ndirea comple/it"ii structurale i $uncionale a sistemului imunitar. 6o%ada o constituie $aptul c" la animalele germ-$ree >a/enice?# num"rul lim$ocitelor 4 i titrul anticorpilor serici naturali sunt de 5-10 ori mai mici dec0t la organismele con%enionale. ;%oluia a generat tipuri celulare speciali)ate# tot mai e$iciente $uncional# care neutrali)ea)"# sec'estrea)"# omoar" sau *ndep"rtea)" agenii in$ecioi. ,a %erte rate# reaciile de ap"rare sunt re)ultatul aciunii unor factori /umorali nespecifici >complement# su stane actericide? i specifici >anticorpi? i a unor populaii de celule speciali)ate# cu aciune nespecific >$agocite? sau specific >lim$ocite?. 6in punct de %edere structural# *n concepia modern"# sistemul imunitar al organismelor superioare este considerat ca un organ difuz sui-generis# alc"tuit dintr-un num"r $oarte mare de molecule i celule# reunite *ntr-o reea de interaciuni comple/e# a c"rei $uncie este asigurarea integrit"ii i indi%idualit"ii structurale a organismului. 1n concepia restricti%" a lui :.L. Jerne# sistemul imunitar este repre)entat *n e/clusi%itate de limfocite# iar *ntr-o accepiune mai larg"# pe l0ng" lim$ocite# *n alc"tuirea sistemului imunitar intr" o serie de celule accesorii cu rol esenial *n declanarea r"spunsului imun+ macrofagele i o serie de celule nrudite>celulele ,ager'ans din tegument# celulele dendritice i cele interdigitate?. <e aprecia)" c" num"rul lim$ocitelor# la adultul normal# este de 10 12# iar al moleculelor de imunoglo uline# de ordinul a 10 20. Impreun"# aceste componente $ormea)" organul difuz# cu greutatea de circa 910 g >1-2M din greutatea corpului?# a c"rui e/isten" este adeseori ignorat"# datorit" caracterului sau di$u)# *n tot organismul. Celulele i moleculele sistemului imunitar sunt pre)ente *n toate esuturile# dar *n unele organe >splin"# ganglioni lim$atici# pl"ci &eGer# amigdale# timus?# componentele celulare au o densitate ma/im". <istemul imunitar este unul din cele mai comple/e ale organismului. Comple/itatea lui deri%" din structura de reea complicat" de comunicaii intercelulare# din u ic%itatea sa *n organism i din e$ectele multiple pe care le

determin" un num"r mic de categorii celulare. <istemul imunitar este considerat un ade%"rat 2creier mo il3. 6in punct de %edere structural i $uncional# sistemul de ap"rare al organismelor superioare pre)int" numeroase dualit"i+ - e/istena unui compartiment al rezistenei nespecifice i neadap& tative >*n"scut"? i a unui compartiment cu aciune specific i adaptativ >sistemul imunitar?N - pre)ena a dou populaii *nclinate de lim$ocite >A i 4?# care media)" imunitatea celular i respecti% /umoral? - acti%itatea lim$ocitelor este modulat" $ie stimulator# $ie in/i"itor# su aciunea unor celule i a unor $actori 'umoraliN - e/istena organelor limfoide centrale >primare? i periferice >secundare?N - e/istena unui r"spuns imun primar i a unui rspuns imun secundarN - dualitatea structural >dou" perec'i de catene polipeptidice? i $uncional" > i%alena? a moleculei de anticorpN - comportamentul du"lu al moleculei de anticorp+ molecula de anticorp recunoate epitopul speci$ic i la r0ndul ei este recunoscut" de molecule cu rol receptor. :um"rul celulelor sistemului imunitar >cu un ordin de m"rime superior neuronilor? i al moleculelor sale nu re$lect" $idel potenialul de ap"rare a organismului# deoarece *n cursul r"spunsului imun are loc proli$erarea i ampli$icarea numeric" a lim$ocitelor# precum i a potenialului de iosinte)". ,a aceasta se adaug" o rat" *nalt" de re*noire i re$acere a re)er%elor sale celulare. ,a om se produc )ilnic un miliard de lim$ocite ce trec *n circulaie. Circul0nd i recircul0nd prin reeaua %aselor sanguine i lim$atice# celulele i moleculele sistemului imunitar asigur" supra%eg'erea organismului# recunoaterea moleculelor i a celulelor nonsel$# pentru a le elimina.

Limfocitele
<istemul imunitar este repre)entat de esuturi deri%ate din me)oderm# a c"ror principal" component" celular" este limfocitul. 6e aici deri%" denumirea de sistem limfoid. In ultimul timp se $olosete denumirea de 2lim$on3# care semni$ic" totalitatea organelor lim$oide E primare i secundare# precum i celulele componente cu $uncia de a recunoate antigenul.

,im$ocitele sunt celule care *n cursul ela or"rii r"spunsului imun# recunosc speci$ic antigenul i de aceea se mai numesc imunocite. 6e aici deri%" denumirea de sistem imunocitar# ec'i%alent" celei de sistem lim$oid. Aoate celulele acestui sistem poart" pe supra$aa lor# molecule cu rol receptor# capa ile s" recunoasc" speci$ic determinanii antigenici str"ini. <istemul imunitar $uncionea)" pe a)a interaciunii dintre semnal >antigen? i receptorul speci$ic lim$ocitar pre$ormat. 1n concepia modern"# limfocitul este celula central" a sistemului imunitar. ;a nu este celula 2cap de serie3 E aa cum o considerau %ec'ii 'istologi# ci pre)int" o e/traordinar" capacitate de reacti%itate i di$ereniere. :um"rul lim$ocitelor. Copiii au un num"r mai mare de lim$ocite i de aceea %0rsta tre uie considerat" ca un parametru $i)iologic de %ariaie# *n e%aluarea numeric" a acestor celule. ;le repre)int" 25-33M din totalul leucocitelor# adic" circa 2100 celuleTmm3 de s0nge. Ialori mai mici de 1500 lim$ociteTmm 3 semni$ic" starea de limfocitopenie i cel mai adesea semni$ic" un de$icit numeric al lim$ocitelor A. &0n" *n anii C50# lim$ocitele erau distinse numai dup" dimensiuni+ mari# mi.locii i mici. Cele mai multe lim$ocite circulante au dimensiuni mici+ 7-10 Um diametru. ,a microscopul optic# pe $rotiul colorat DaG 7runKald E 7iemsa# lim$ocitele se disting de celelalte dup" dimensiuni# sunt agranulare i au cel mai mare raport nucleocitoplasmatic. ,im$ocitele mari au un raport nucleocitoplasmatic mai mic i *n citoplasm" se g"sesc granulaii a)uro$ile. <e numesc limfocite granulare mari >,7,?. In vitro# lim$ocitele sunt neaderente i nu $agocitea)". (st")i# Imunologia are la a)" conceptul unei 'eterogenit"i $uncionale nelimitate a lim$ocitelor# care deri%" din di%ersitatea speci$icit"ii receptorilor supra$eei lor. &opulaia de lim$ocite care are receptori identici de antigen i recunoate un singur epitop >sau c0i%a *nrudii? $ormea)" o clon. Aoate celulele unei clone sunt descendente ale unei singure celule-mam". In consecin"# *n organism sunt tot at0tea clone de lim$ocite# c0te tipuri de determinani antigenici e/ist" >teoretic? *n natur". Corespondena complementarit"ii spaiale dintre receptorii lim$ocitari de antigene i epitopii antigenici asigur" posi ilitatea ela or"rii unui r"spuns imun speci$ic# dup" contactul lim$ocitelor cu oricare dintre epitopi. Caracteri)area $uncional" a lim$ocitelor este re)ultatul cercet"rilor *ntreprinse dup" anul 1960. 1n raport cu organul lim$oid primar *n care se produce di$erenierea i maturarea# 9oitt i col. >1966? au *mp"rit lim$ocitele *n dou" categorii distincteN

- limfocite )# care se di$erenia)" i se maturea)" *n timusN - limfocite %# care se di$erenia)" i se maturea)" *n ursa lui !a ricius la p"s"ri i *n ec'i%alenii ei $uncionali# la mami$ere. 1n $uncie de capacitatea lor de a interaciona cu antigenul speci$ic# lim$ocitele sunt+ - incompetente >imature?# cele care nu recunosc antigenulN - competente >mature?# cele care recunosc antigenul speci$ic. <tarea de competen" este condiionat" de pre)ena receptorilor prin intermediul c"rora antigenele sunt recunoscute. &e supra$aa unei celule pot $i p0n" la 100 000 de molecule receptoare identice# care ateapt" *nt0lnirea cu su stanele nonsel$ corespun)"toare. 6up" ce lim$ocitul i-a do 0ndit competena *n unul din organele lim$oide primare# poate s" r"m0n" *n repaus# dac" organismul nu a recepionat mesa.ul antigenic corespun)"tor. (ceste lim$ocite sunt neanga3ate >nein$ormate sau nai%e?. Cele care au %enit *n contact cu antigenul speci$ic sunt lim$ocite anga3ate >in$ormate?. ;le constituie su stratul material al memoriei imunologice i ori de c0te ori se %or re*nt0lni cu antigenul# %or produce un r"spuns imun rapid i amplu. 6up" durata %ieii# lim$ocitele sunt+ - cu via scurt >e$ectoare ale r"spunsului imun?N - cu via lung >de memorie?. ;le recircul" *n organism perioade *ndelungate >de ordinul anilor?. ,a om# lim$ocitele de memorie ar supra%ieui circa 10 ani# $"r" s" se di%id". 1n raport cu $uncia pe care o *ndeplinesc# se disting urm"toarele categorii de lim$ocite+ - efectoare# cele care direct sau indirect# prin molecule e$ectoare# neutrali)ea)" antigenulN - reglatoare# cele care rali)ea)" ec'ili rul optim al r"spunsului imun. Limfocitele " ,im$ocitele 4 repre)int" 5-15M din totalul lim$ocitelor circulante i constituie o di%i)iune $uncional" ma.or" a populaiei lim$ocitare. Impreun" cu descendenii

lor di$ereniai >lim$o lastul# plasmocitul?# lim$ocitele 4 sinteti)ea)" anticorpi# e$ectorii rspunsului imun mediat /umoral >9IDO?. ,im$ocitul 4 imunocompetent >matur# neanga.at? sinteti)ea)" cantit"i mici de molecule ale unui i)otip de imunoglo uline# care r"m0n legate de mem rana lim$ocitului# a%0nd rol de receptori de antigen# ade%"rate 2antene3 de detectare a antigenului speci$ic. <u aspectul speci$icit"ii de legare a antigenului# $iecare organism posed" milioane de clone de lim$ocite 4# adic" mici populaii celulare identice# descendente din aceiai celul" mam"# care recunosc i leag" acelai antigen i produc anticorpi cu aceiai con$iguraie spaial" a situsului de com inare. 6up" acti%are# toi descendenii lim$ocitului 4 sinteti)ea)" imunoglo uline i le secret" ca anticorpi# cu aceiai speci$icitate de legare pe care a a%ut-o receptorul. 9eceptorul de antigen al lim$ocitelor 4. Da.oritatea lim$ocitelor 4 umane din s0ngele peri$eric e/prim" dou" i)otipuri de imunoglo uline pe supra$aa lor+ IgD i Ig6 sau numai Ig6. <itusurile de legare ale celor dou" i)otipuri sunt identice. :umai 10M dintre lim$ocitele 4 au pe supra$aa lor# ca receptor de antigen# molecule de Ig7# Ig( sau Ig;. Cele care au ca receptor molecule de Ig(# sunt locali)ate *n esutul lim$oid asociat mucoaselor. Doleculele receptoare de imunoglo ulin" sunt incla%ate cu cap"tul C-terminal *n mem ran". Intre IgD legat de mem ran" >IgDm?# cu $uncia de receptor de antigen i IgD seric >IgDs?# sunt dou" deose iri ma.ore+ - IgDm conine o sec%en" C-terminal" 'idro$o "# prin care se ancorea)" *n mem rana lim$ocitelor mature neanga.ate# care nu au %enit *n contact cu antigenulN - IgDm este monomer# iar IgD seric este pentamer. <ec%ena C-terminal" a IgDm cuprinde 25 de aminoaci)i 'idro$o i ce $ormea)" domeniul transmem ranar# urmat de o sec%en" cationic" ,Gs-Ial-,Gs. Ca la toate proteinele ancorate *n mem ran"# acest domeniu $ormea)" un Q'eli/# cu o lungime su$icient" pentru a str" ate mem rana. !iind 'idro$o "# sec%ena de aminoaci)i are interaciuni str0nse cu lipidele mem ranei. <ec%ena cationic" se e/tinde *n citoplasm"# m"rind gradul de sta ilitate a moleculei *n mem rana celular". 6up" stimularea antigenic"# sinte)a se comut" la IgD seric. Arecerea de la IgDm la IgDs este re)ultatul unor di$erene ale modului de prelucrare a (9: premesager. Copia de (9: premesager pentru sinte)a catenei U>O? are dou" situsuri poteniale de cli%are i ataare a resturilor de poli-(# ce marc'ea)"

cap"tul (9:m. 6up" stimularea antigenic"# din (9: premesager sunt cli%ate sec%enele codi$icatoare ale domeniului C-terminal 'idro$o i se sinteti)ea)" molecule de IgD $"r" sec%ena C-terminal" de aminoaci)i 'idro$o i. Comutarea IgDm --- IgDs nu modi$ic" lanul , al moleculei. Cele dou" $orme ale IgD au domenii identice IO i I,# adic" au aceiai speci$icitate de legare a antigenului >au acelai idiotip?. ,im$ocitul 4 are receptori mem ranari pentru su stanele mitogene# pentru complement >C3 ?# pentru regiunea !c a imunoglo ulinelor# pentru insulin" etc. 9eceptorul pentru C3 $uncionea)" i ca receptor pentru %irusul ;pstein-4arr. ,im$ocitele 4 neacti%ate au receptori de mic" a$initate pentru I,-2# dar dup" stimularea antigenic"# ele e/prim" rapid# receptori pentru I,-2 de *nalt" a$initate. ,im$ocitele 4 r"spund la e$ectul stimulator al I,-2# prin proli$erare rapid" i secreia IgD. &e supra$aa lim$ocitelor 4 se g"sesc la densitate *nalt"# moleculele CDO II. Limfocitele ! ,im$ocitele A repre)int" p0n" la 80M din totalul lim$ocitelor circulante. Ialorile normale *n s0nge# pentru lim$ocitele A sunt cuprinse *ntre 16204320Tmm3# *ntre una i 18 luni de %ia" i *ntre 590-3090Tmm 3# dup" 18 luni. &roporia lim$ocitelor A se poate determina prin metoda ro)etelor cu 'ematii de er ec sau prin metoda imuno$luorescenei cu anticorpi monoclonali $a" de receptorul de antigen. ,im$ocitele A mature e/prim" marFerulY C64YY sau C68. (ceste molecule aparin supra$amiliei imunoglo ulinelor. Celulele C6 4 au de o icei $uncie /elper# iar cele ce e/prim" marFerul C68 sunt citoto'ice. ,im$ocitele A *ndeplinesc $uncii comple/e# at0t efectoare ale r"spunsului imun mediat celular c0t i reglatoare# prin intermediul unor $actori 'umorali pe care-i secret"# denumii limfoc/ine. ,im$ocitele A reali)ea)" urm"toarele $uncii+ E li)ea)" celulele care e/prim" molecule nonsel$ pe supra$aa lorN E reglea)" r"spunsul imunN E media)" reaciile de 'ipersensi ilitate *nt0r)iat". (ceste $uncii sunt re)ultatul 'eterogenit"ii $uncionale i se datorea)" acti%"rii unor su populaii distincte de lim$ocite A+ - limfocite )c >Acl# citoto/ice sau citolitice? e/prim" pe supra$aa lor marFerul A8 >C68?N

- limfocite )/ >'elper? au pe supra$a" marFerul C6 4. (cestea sunt cele mai numeroase# repre)ent0nd 60-65M din num"rul total de lim$ocite A ale organismului umanN - limfocite )s >supresoare?# purt"toare ale marFerului C64N - limfocite )D sau )D >delaGed /Gpersensiti%itG? e/prim" marFerul C68. !unciile lim$ocitelor A' se reali)ea)" prin intermediul lim$oc'inelor secretate. In $uncie de lim$oc'inele pe care le sinteti)ea)"# lim$ocitele A' se clasi$ic" *n dou" su seturi+A'-1 i A'-2. Celulele A'-1 >A'-c? secret" I!: gama# I,-2 i A:! eta >citoc'ine de tip 1# stimulatoare ale imunit"ii mediate celular?. Citoc'inele de tip 1 produc urm"toarele e$ecte+ stimulea)" reacia de citoto/icitate i in$lamatorie asociat" cu reaciile de 'ipersensi ilitate *nt0r)iat". In esen"# lim$ocitele A'-1 au rol *n edi$icarea unui rspuns imun mediar celular >9IDC?. Celulele A'-2 >A'- ? secret" citoc'ine de tip 2+ I,-4# I,-5# I,-6 i I,-10 >dar nu secret" Il-2? i stimulea)" acti%itatea lim$ocitelor 4 de memorie. Citoc'inele tip 2 >I,-4# I,-5? stimulea)" rspunsul imun /umoral $a" de para)iii e/tracelulari >stimulea)" di$erenierea lim$ocitelor 4 spre plasmocit? i instalarea st"rilor alergice prin capacitatea lor de a induce sinte)a Ig; i de a stimula mastocitele. In esen"# lim$ocitele A'-2 sunt implicate *n edi$icarea r"spunsului imun mediat 'umoral >9IDO?. &rin toate aceste e$ecte# lim$ocitele A' sunt ampli$icatoare ale r"spunsului imun ,im$ocitele C68 >A citototo/ice? repre)int" 25-35M dintre lim$ocitele A circulante. !uncia lor const" *n efectul litic prin contact celular direct asupra celulelor in$ectate cu %irusuri# maligni)ate sau alogenice. ,im$ocitele A6 sunt mediatoare ale reaciilor de /ipersensi"ilitate ntrziat >delaGed? de tip tu erculinic. ;le secret" lim$oc'ine cu e$ecte locale asupra macro$agelor i lim$ocitelor din $ocarul in$lamator. ,im$ocitele As sunt in'i itoare ale amplitudinii r"spunsului imun# dup" epui)area antigenului. ;le au rolul de a diminua intensitatea 9IDC i 9IDO# menin0nd *n limite $i)iologice intensitatea reaciilor imunitare. <e pare c" *i e/ercit" rolul supresor asupra r"spunsului imun# prin in'i area acti%it"ii lim$ocitelor A'# dar au i e$ect supresor direct asupra lim$ocitelor A i 4 e$ectoare. ,im$ocitele As au rol important *n inducerea st"rii de toleran" $a" de antigenele e/ogene# ca i $a" de moleculele sel$. 6e$icienele $uncionale ale lim$ocitelor As creea)" predispo)iii pentru maladiile autoimune. 6istincia $uncional" *ntre lim$ocitele AC6 4 i AC68 nu este totdeauna net". 5nele clone de lim$ocite AC6 4 au propriet"i citoto/ice# iar unele clone AC6 8#

dup" contactul cu antigenul# proli$erea)" i secret" lim$oc'ine# ca i lim$ocitele AC64. +eceptorul de antigen al limfocitelor ! ,+C!. 6ei moleculele de anticorpi au $ost printre primele a c"ror structur" c'imic" s-a identi$icat# caracteri)area ioc'imic" a receptorului de antigen al celulelor A s-a $"cut $oarte greu# deoarece nu a e/istat un ec'i%alent celular A al tumorilor de mielom. Dolecula cu rol de receptor de antigen a lim$ocitelor A s-a identi$icat recent# dup" ce a $ost posi il" culti%area liniilor de 'i ridom de celule A. Doleculele receptoare de antigen ale lim$ocitelor A au o larg" %ariaie ioc'imic"# corespun)"toare speci$icit"ii de legare a spectrului $oarte larg de antigene. Ca i *n ca)ul anticorpilor# pentru receptorul de antigen al celulelor A# se $olosete termenul de 2idiotip3 >Ai?# pentru a desemna o molecul" a 9CA cu un set unic de epitopi asociai# deri%ai din con$iguraia sa spaial" unic"# complementar" pentru legarea speci$ic" a unui epitop antigenic. &entru i)olarea i identi$icarea receptorului Ai s-au utili)at anticorpi monoclonali >(DC? anti- Ai# care precipit" speci$ic moleculele Ai dintr-un amestec comple/ de proteine mem ranare. ;/aminarea peptidelor *n imunoprecipitatele di$eritelor clone de celule A# prin metoda electro$ore)ei *n <6<-poliacrilamid"# a e%ideniat c" 9CA este un /eterodimer i const" dintr-o glicoprotein" de 80-90 F6# care *n condiii reduc"toare se disocia)" *n dou" peptide de 40 i respecti% 43 F6. Dolecula *ntreag" const" dintr-o perec'e de lanuri peptidice# similare ca dimensiuni# legate prin puni <-<.

,anul Q

,anul P

#ig4 5C. <tructura receptorului de antigen al lim$ocitului A. Dolecula este un 'eterodimer $ormat din lanurile Q i P# care se e/tind prin mem rana celular" i au scurte poriuni citoplasmatice. Comple/ul A3 este alc"tuit din 4 su unit"i proteice >Z# [i 2 \?# locali)ate *i du lul strat lipidic i *n

citoplasm".

Cele dou" peptide sunt distincte i s-au notat Q i P. ,anul Q are 248 aminoaci)i# cu punctul i)oelectric la pO B 5#0-5#5. ,anul P are 282 aminoaci)i# iar punctul i)oelectric este la pO 6#5-7#0. !iecare caten" are 4 domenii+ unul %aria il >I Q# respecti% I P?# unul constant >C Q# respecti% C P?# unul transmem ranar i unul intracitoplasmatic. (st$el alc"tuit"# molecula 9CA $ace parte din supra$amilia moleculelor imunoglo ulinice. &rin dimensiuni se aseam"n" cu lanul , al imuno-glo ulinelor+ domeniul %aria il al $iec"rui lan are 110 aminoaci)i# dar pentru c" se ancorea)" *n mem ran"# se aseam"n" cu lanul O. 6omeniile %aria ile >Q i P? sunt e/trem de %aria ile >ca i regiunile %aria ile ale celor dou" catene ale imunoglo ulinelor? i particip" la $ormarea situsului de com inare al 9CA. <itusul de com inare al 9CA este alc"tuit din regiunile /ipervaria"ile sau regiunile determinante de complementaritate E96C >3 ale catenei Q i 4 ale catenei P? i este aplati)at# adaptat $unciei sale de a lega supra$aa aplati)at" a moleculelor CDO. ,a om# 9CA 'eterodimer este asociat cu molecula A 3# o grupare de trei peptide asociate neco%alent. !uncia pro a il" a lui A 3 este aceea de transductor al semnalului de acti%are# de la Ai la citoplasm"# constituind# prin modi$ic"ri con$ormaionale# un canal de trecere a ionilor de Ca 2R prin mem ran"# dup" ce receptorul a legat epitopul speci$ic. <-au identi$icat dou" tipuri de 9CA+ !ig.28.a. <u seturi ma.ore de celule A #ig4 5>. . <u seturi $uncionale de celule A C64R <u seturi de limfocite )# *n $uncie de tipul de 9CA >9CA-2# 9CA-2?. ,im$ocitele 9CA-1 au un repertoriu restr0ns de interaciune cu antigenul# dar nu mani$est" $enomenul restriciei CDO. ,im$ocitele 9CA-2 e/prim" C64 sau C68#

care determin" recunoaterea antigenului asociat cu moleculele CDO II sau CDO I. ,im$ocitele AC9-2R C64R sunt di%i)ate pe a)a lim$oc'inelor pe care le secret"# *n su seturi de celule A'1>stimulatoare ale IDC? i A'2 >stimulatoare ale IDO? >dup" 9oitt# 1997?.

- 9CA-2 este 'eterodimerul $ormat din polipeptidele Q i P# legate prin puni <-<# pre)ent pe supra$aa a circa 90M dintre lim$ocitele AN - 9CA-1 este asem"n"tor structural cu 9CA-2# dar const" din polipeptidele D i [# cu o alt" speci$icitate antigenic"# identi$icat" prin intermediul anticorpilor monoclonali. <e g"sete pe supra$aa a 0#5-15M dintre lim$ocitele A circulante umane# dar este mai $rec%ent pe lim$ocitele intraepiteliale ale mucoasei intestinale. ,im$ocitele A DT[ e/prim" marFerul C63 i recunosc antigenul printr-un mecanism asem"n"tor cu acela al lim$ocitelor A QTP# adic" recunosc epitopii asociai cu moleculele CDO I i II# dar $rec%ent par s" interacione)e cu molecule CDO neclasice# iar speci$icitatea interaciunii lor cu epitopii antigenici este limitat". (ceste lim$ocite pot s" recunoasc" antigene necon%enionale# ca de e/emplu# proteinele de oc termic i antigenele nepeptidice +glucidice,4 1n general# lim$ocitele cu 9CA-1 > DT[? sunt negati%e pentru marFerul C6 4 i pentru C68# dei unele e/prim" ni%ele sc")ute ale unuia dintre marFeri. 5nele studii sugerea)" c" aceste celule contri uie la r"spunsul iniial al ga)dei# la di$erii ageni in$ecioi+ %irusuri# acterii>*n special mico acterii?# para)ii# dar i la r"spunsul anti-tumoral. ;le par s" constituie 2prima linie de ap"rare3. Ipote)a este *n acord cu locali)area lor anatomic"# la poarta de intrare *n organism# *n esuturile nelim$oide >tegument# intestin?# dar i *n situsurile in$lamatorii. ,im$ocitele A DT[ se aglomerea)" *n $ocarele in$lamatoare cronice>mem rana sino%ial"# le)iunile asociate cu lupusul eritematos diseminat?. ,a rumeg"toare# 30-80M din totalul lim$ocitelor A circulante au receptor DT[# %alorile ma/ime *nregistr0ndu-se la organismele nou-n"scute. ,a alte specii# num"rul acestor lim$ocite A este mic. ( undena lor numeric" la rumeg"toare este corelat"# pro a il# cu acteriemia masi%" care *nsoete procesul digesti%. 1n esen"# marFerii 9CA i C63 sunt de$initorii pentru lim$ocitele A. ,im$ocitele A au un marFer distincti% pe supra$aa lor# $a" de lim$ocitele 4+ A'G 1 >C690?. (cest marFer poate $i e/primat i pe alte tipuri celulare i lipsete la o mic" proporie a lim$ocitelor A. Celulele 12

Celulele :L >natural Filler? repre)int" circa 15M din totalul lim$ocitelor sanguine. ;le deri%" din m"du%a osoas" i au origine comun" >acelai progenitor?# ca i celulele A. In vitro# sunt neaderente i ne$agocitare# ceea ce le aseam"n" cu lim$ocitele. 6in punct de %edere mor$ologic# celulele :L sunt mari# granulare >(0(# large granular lGmp'ocGtes?# a%0nd citoplasm" mai ogat" dec0t celelalte lim$ocite# cu granulaii a)uro$ile. Celulele :L nu au nici unul din receptorii de antigen caracteristici lim$ocitelor A sau 4 i de aceea au $ost denumite celule 2nule3. Celulele :L au pe supra$aa lor unii marFeri caracteristici lim$ocitelor+ au receptor pentru !c D de mic" a$initate# $ormea)" ro)ete ;# au receptor de mic" a$initate pentru I,-2# produc I,-2 i I!: D. (u i receptori caracteristici seriei mieloide. 1n de)%oltarea lor# celulele :L nu sunt dependente de timus. Celulele :L au %ia" scurt" i repre)int" o linie important"# primordial" *n e%oluie# cu rol esenial *n mecanismele de ap"rare *n"scut" a organismului+ sunt acti%e *n respingerea gre$elor i a celulelor modi$icate su raport antigenic. !uncia celulelor :L este de a recunoate i de a li)a anumite celule tumorale i celule in$ectate cu %irusuri. Celulele :L au li)at celulele liniilor 4 lim$o lastoide trans$ormate de ;4I# de$iciente *n molecule CDO I# dar nu au mai li)at aceste inte dup" trans$ecia cu genele O,(-4 sau O,(-C. Decanismul recunoaterii celulelor purt"toare de molecule nonsel$ nu este cunoscut. <e admite c" celulele :L recunosc moleculele CDO i se acti%ea)" c0nd receptorii lor nu *nt0lnesc moleculele CDO pe supra$aa celulelor int" sau c0nd moleculele CDO au o densitate mai mic" dec0t cea normal". ;$ectul interaciunii este li)a celulei int". (ciunea de$initorie a celulelor :L este citoto'icitatea. ;le li)ea)" $"r" restricie CDO# celulele tumorale sau pe cele in$ectate cu %irusuri. (cti%itatea celulelor :L este $oarte *nalt" la oarecele nud >$"r" timus? sau la oarecii timectomi)ai neonatal. 6up" acti%are# celulele :L eli erea)" I!: D. Cel mai studiat receptor mem ranar al celulelor :L este receptorul de mic" a$initate pentru !c al Ig7 >C616?. @ su populaie distinct" a celulelor :L o repre)int" celulele . >Filler?. ;le sunt tot ,7,# dar spre deose ire de celulele :L# e/prim" receptorul de mare afinitate pentru #c D. (ciunea lor principal" este citoto'icitatea mediat de anticorpi >(6CC?# $a" de celulele modi$icate antigenic. In %itro# lim$ocitele A din s0nge# su aciunea stimulatoare a unor citoc'ine >I,-2# I!: Q? di$erenia)" o su populaie# care au $ost denumite (A. >lGmp'oFine

acti%ated Aillers?. In vitro9 prin ad"ugarea I,-2 i a antigenului tumoral# de%in citoto/ice $a" de celulele tumorale omologe.

Y DarFerii de supra$a" ai lim$ocitelor A umane s-au identi$icat cu di$icultate# datorit" naturii out red a populaiei. <-au notat cu literele AC6# urmate de o ci$r"# *n ordinea descoperirii+ AC61# AC62 etc. (nticorpii monoclonali au constituit instrumentul esenial de lucru. Cel mai cunoscut este marFerul AC64# deoarece $uncionea)" ca receptor pentru OII. ;ste un glicopeptid cu o regiune e/tracelular" $ormat" din 4 domenii# un domeniu transmem ranar i unul citoplasmatic# iar C68 este dimeric i pre)int" un domediu asem"n"tor cu domeniul %aria il al moleculei de imunoglo ulin". YY C6 >cluster designation? se re$er" la grupele >cluster? de anticorpi monoclonali utili)ai pentru identi$icarea su populaiilor de lim$ocite. !iecare grup" de (DC are speci$icitate $a" de un anumit marFer celular.

N-I6,N,7, C(&P7,<U7UI & =(R D, 9IS-(C(&P -I$I7I- -, (C & 9"

;/istena antigenelor de 'istocompati ilitate a $ost dedus" din $aptul c" alogre$ele tegumentare sau de organe# nu sunt %ia ile *n organismul receptor. 6up" 7-10 )ile# esutul transplantat se in$lamea)" i cur0nd dup" aceea# gre$a este respins". 9espingerea gre$ei este de natur" imunitar"+ sistemul imunitar al receptorului de gre$" recunoate ca nonsel$# anumite molecule ale celulelor gre$ei i se acti%ea)". Doleculele de supra$a" ale celulelor gre$ate# recunoscute ca nonsel$# sunt denumite antigene de /istocompati"ilitate. ;le con$er" indi%idualitate ioc'imic" $iec"rui indi%id. Antigenele de /istocompati"ilitate se definesc ca molecule ale suprafeei celulare i care9 datorit diferenelor "ioc/imice individuale sunt recunoscute de sistemul imunitar al unui organism cu un alotip diferit +cu o alt com"inaie de gene alele la situsul codificator,4 6i%ersitatea ioc'imic" la ni%el indi%idual a acestor molecule# st" la a)a unicit"ii ioc'imice a $iec"rui indi%id uman i este determinat" de o di%ersitate genetic" corespun)"toare. 6eoarece se comport" ca antigene ma.ore *n organismul receptor de gre$"# antigenele CDO se numesc i antigene de transplantare.

1n $uncie de capacitatea lor de a stimula r"spunsul imun de respingere a gre$ei# antigenele CDO sunt tari i sla"e. (ntigenele CDO tari repre)int" principala arier" *n calea transplantului de esuturi i organe. ,a oarece# moleculele CDO tari aparin sistemului O-2. 7re$ele de esuturi i organe *ntre organisme care di$er" prin antigenele comple/ului O-2 ale supra$eei celulare sunt in%aria il respinse *n 10-14 )ile. (ntigenele tari aparin claselor I i II. Antigenele sla"e >uoare? sunt codi$icate de sistemul minor de /isto& compati"ilitate i determin" respingerea lent" a gre$ei de piele# *n circa 200 de )ile. ,a om# corespondentul sistemului molecular antigenic O-2 de la oarece este comple/ul antigenic al sistemului (A > uman (eucocGte Antigen?. 6enumirea semni$ic" $aptul c" moleculele sistemului au $ost detectate iniial >J. 6ausset# 1958?# pe supra$aa leucocitelor. (ntigenele comple/elor O-2 i O,( au o %arietate antigenic" indi%idual" i de aceea natura lor c'imic" se poate studia numai *n populaii genetic pure >in red? de oarece# o inute prin *mperec'eri multiple *ntre indi%i)ii aceleiai descendene. &tructura molecular* a antigenelor CMH clasa I (ntigenele codi$icate de genele CDO clasa I sunt glicoproteine de mem ran"# a c"ror regiune C-terminal" se g"sete *n citoplasm"# iar cea :terminal" este e/pus" e/tracelular. @ molecul" CDO clasa I este alc"tuit" dintr-un lan > ea%G? polipeptidic glico)ilat >45 F6?# *n asociaie str0ns"# neco%alent"# cu E&5 microglo"ulina >12 F6?# un polipeptid care se g"sete i *n ser. Catena O este alc"tuit" din 339 aminoaci)i# distri uii *n urm"toarele 5 domenii+ - trei domenii e'tracelulare# *n regiunea :-terminal"# notate cu Q-l# Q-2# Q-3# $iecare cu c0te 90 de aminoaci)i. <u aciunea papainei# pot $i cli%ate de restul moleculei. 6omeniile Q-2 i Q-3 pre)int" leg"turi <-< intracatenare i $ormea)" ucle de 63 i respecti% 86 aminoaci)iN

- domeniul transmem"ranar conine 25 resturi de aminoaci)i 'idro$o i# care tra%ersea)" mem rana. Imediat #ig4F54 9epre)entare sc'ematic" a deasupra acestui domeniu se g"sesc 5 structurii moleculelor CM clasa I# a)ici >(rg# ,eu?# tipici ancorate *n mem rana citoplasmatic". aminoaci)i pentru proteinele legate de mem ran"# Catena codi$icat" de gena CDO pre)int" 3 domenii glo ulare >Q-1# Q-2# cu rolul de a ancora lanul polipeptidic *n mem ran"N Q-3?. 6omeniul Q-3 este asociat cu un peptid E P-2 microglo ulina# un mic peptid glo ular de 12 F6 cu o structur" teriar" asem"n"toare unui domeniu al Ig# sta ili)at printr-o punte <-<. - domeniul 'idro$il cito-plasmatic >30 de aminoaci)i la om# 40 la oarece?# conine *n special serin"# unele resturi $iind $os$orilate# este implicat *n transmiterea semnalului de la domeniile e/tracelulare# la mediatorii citoplasmatici. (cest domeniu conine resturi de cistein" cu rol *n legarea prin intermediul punilor <-<# de alte catene O sau de proteine citoplasmatice. Componenta glucidic este alc"tuit" din dou" grup"ri# $iecare $iind $ormat" din 12-15 resturi de )a'aruri# ataate de domeniile Q-1 i Q-2. <unt oligo)a'aride care conin mano)"# de care se leag" catene laterale de gluco)amin" i acid sialic. Catena O are o regiune %aria il" *n .um"tatea :-terminal"# cu dou" su )one 'iper%aria ile# care di$er" prin mai mult de 60M din aminoaci)i# de la un organism la altul# locali)ate *n domeniile Q-1 i Q-2. <tudiile prin di$racie cu ra)e S ale domeniilor e/tracelulare# cristali)ate dup" cli%area cu papain" arat" c" domeniile Q-1 i Q-2 sunt $oarte asem"n"toare ca sec%en" de amino-aci)i i prin pliere $ormea)" *mpreun" o cavitate molecular# presupus" a $i situsul de legare sta il" a epitopului antigenic. Ca%itatea# susinut" de sec%ene P-pliate ale acelorai domenii Q-1 i Q-2# este ocupat" de o molecul" linear"# care este un peptid ce cristali)ea)" concomitent cu catena O. <itusul ca%itar# dup" ce leag" antigenul# $ormea)" un comple/ recunoscut de lim$ocitele AC6 8. 9estul catenei O corespunde regiunii constante. #ig4F6.a. 9epre)entarea sc'ematic" *n 2oc'i de pas"re3 a supra$eei superioare a moleculei CM clasa I umane# a)at" pe structura o inut" *n cristalogra$ie cu ra)e /. <ec%enele P-pliate care $ormea)" a)a ca%it"ii sunt marcate prin s"gei groase# orientate *n direcia aminocar o/il. <ec%enele Q-'elicale sunt repre)entate prin liniile groase spiralate. <upra$eele interne ale celor dou" 'elice i $aa superioar" a sec%enelor P-pliate $ormea)" o ca%itate. Cele dou" s$ere negre repre)int" o leg"tur" <-<

ntracatenar". . Iedere lateral" a aceleiai molecule# care arat" anatomia ca%it"ii i plierea domeniilor Q-3 i P-2 m >4 catene P-pliate antiparalele pe o $a" i 3 pe cealalt"? >dup" 9oitt# 1997? E&5 microglo"ulina >P-2 m? >o glo ulin" mic"# ce migrea)" la electro$ore)" *n regiunea P-2? a $ost descoperit" *n 1968# *n urina pacienilor cu dis$uncie renal" pro%ocat" de into/icaia cronic" cu cadmiu. ;ste sinteti)at" de ma.oritatea celulelor din organism. Conine circa 100 aminoaci)i# cu uoare %ariaii numerice. :u pre)int" %aria ilitate detecta il" pe cale c'imic" sau imunologic" i nu este glico)ilat". Ca i domeniul Q-3 al catenei O# P-2 m pre)int" omologie a sec%enei de aminoaci)i cu domeniile constante ale moleculei de Ig. <ec%ena de aminoaci)i a P-2 m $ormea)" un singur domeniu sta ili)at printr-o punte <-<# *ntre dou" resturi de cistein". P-2 m se asocia)" neco%alent cu lanul O al moleculei CDO clasa I# prin interaciunea cu domeniul Q-3# dar studiile recente de cristalogra$ie cu ra)e S# sugerea)" un contact e/tins cu toate cele trei domenii. Doleculele de P-2 m legate# se a$l" *n ec'ili ru cantitati% cu cele din plasm". (socierea celor dou" catene se $ace dup" terminarea sinte)ei lor i este o condiie o ligatorie pentru transportul moleculelor CDO I de la reticulul endoplasmic la mem rana citoplasmatic" i pentru ancorarea lor *n mem ran". Celulele liniei 6audi >deri%at" din lim$omul 4urFitt?# dei sinteti)ea)" catena O# nu e/prim" molecule CDO I# deoarece nu sinteti)ea)" P-2 m. Doleculele CDO I au un turno%er constant. Cele %ec'i se eli erea)" i trec *n circulaie sau sunt endocitate i se sinteti)ea)" altele noi. <ta ilitatea lor este condiionat" de rata disocierii peptidului i P-2 m. Catenele O li ere se denaturea)" i sunt degradate. Doleculele CDO clasa I sunt ade%"rate 2certi$icate de identitate3 ioc'imic" i genetic"# pentru $iecare organism# datorit" polimor$ismului lor ioc'imic $oarte accentuat. ;le %eg'ea)" la p"strarea 'omeosta)iei ioc'imice a organismului i de%in inta sistemului imunitar *n urm"toarele situaii+ dup" gre$area esuturilor i organelor care poart" molecule incompati ileN dup" ce se asocia)" cu antigenele %irale# tumorale sau cu cele induse de agenii c'imiciN dup" modi$icarea ioc'imic" printr-un proces mutaional.

&tructura molecular* a antigenelor CMH clasa II (ntigenele CDO clasa II-a sunt glicoproteine 'eterodimere de mem ran"# $ormate din dou" catene di$erite# notate cu G i E. &rin solu ili)are cu detergent# aceste molecule se eli erea)" *ntregi. ,anul Q are 30-34 F6# iar lanul P are 26-29 F6. !iecare caten" este $ormat" din 4 domenii+ - dou" e/tracelulare# alc"tuite din circa 90 de aminoaci)i $iecare# notate cu Q-1# Q-2# respecti% P-1# P-2N un domeniu transmem ranar >circa 30 de aminoaci)i?N un domeniu citoplasmatic >10-15 aminoaci)i?. #ig4 FB. 9epre)entarea sc'ematic" a moleculelor CM clasa II&a. Dolecula este $ormat" din 2 catene di$erite >Q i P?# legate neco%alent# a c"ror e/tremitate Cterminal" se inser" *n citoplasm". Cele dou" catene au c0te dou" domenii glo ulare# asem"n"toare cu domeniile Ig. Cu e/cepia domeniului Q-1# toate celelalte sunt sta ili)ate printr-o punte << intracatenar". Cele dou" catene sunt glico)ilate >dup" 9oitt# 1997?. 6omeniile Q-1 i P-1 au o %aria ilitate accentuat" a sec%enei de aminoaci)i. ;le se asocia)" pentru a $orma o structur" ce delimitea)" o cavitate n care este legat peptidul antigenic.

6omeniile Q-2 i P-2 pre-)int" omologie a sec%enei de aminoaci)i# cu domeniile mole-culei de Ig. 6omeniile Q-2# P-1 i P-2 sunt sta ili)ate prin leg"turi <-<# iar domeniile Q-1# Q-2 i P-2 sunt gli-co)ilate. 7ruparea glucidic" conine mano)"# galacto)"# $uco)"# glu-co)amin". 6i$erenele greut"ii mo-leculare a celor dou" catene se dato-rea)" ni%elului di$erit de glico)ilare. Determinismul genetic al moleculelor CMH

Doleculele CDO sunt codi$icate de genele comple/ului ma.or de 'istocompati ilitate. Cali$icati%ul 2comple/3 este .usti$icat de num"rul mare de gene componente# iar cel de 2ma.or3 semni$ic" importana deose it" a moleculelor codi$icate de aceste gene# *n reali)area unor $uncii imunitare importante+ -ela orarea r"spunsului imun -respingerea gre$elor de esuturi i organe. 1n raport cu tipul de proteine pe care le codi$ic"# genele CDO aparin clasei I i clasei a II-a. ,a oarece# genele CDO codi$icatoare ale moleculelor comple/ului antigenic O-2 sunt locali)ate pe cromosomul 17# *ntr-un $ragment de 2000-4000 F perec'i# su$icient de mare pentru a codi$ica circa 200 de proteine de dimensiuni medii. In acest comple/ se g"sesc 3 tipuri de gene descoperite independent+ &primul grup de gene >descoperit *n anii C40? codi$ic" antigenele 2tari3 de transplantare# care induc respingerea rapid" a gre$elor de tegument i de organe# *ntre indi%i)i neidentici genetic >aparin unor alotipuri di$erite?. (cestea sunt genele CDO clasa I# care codi$ic" moleculele CDO clasa IN -al II-lea grup# denumite genele rspunsului imun >I9? codi$ic" sinte)a unor molecule care condiionea)" intensitatea rspunsului imun al organismului# sla sau puternic# $a" de un antigen. 7enele I9 codi$ic" proteinele clasei a II-a de molecule CDO# denumite i molecule Ia >I associated?N -al III-lea set de gene ale comple/ului CDO codi$ic" sinte)a unor componente ale complementului4 ,a oarece# moleculele CDO I sunt codi$icate de gene situate la e/tremit"ile comple/ului genic O-2# notate L i 6. 7ena L are circa 55 de %ariante alelice. !iecare %ariant" codi$ic" proteine distincte. #ig4 FF. 9epre)entare diagramatic" a locali)"rii su"regiunilor genice CM la oarece i om i po)iia genelor ma.ore *n aceste su regiuni. ,a om# locusurile genice clasa II-a sunt locali)ate *ntre centromer i locusurile clasei I# ca i la alte specii de mami$ere. Com!le)ul 9#2 la oarece (!e cromosomul 0>"1

9egiunea L cromosomal" Clasa I ,ocusuri L genice

I II (# ;

< III C4# C2# 4$# A:!

6 I 6# ,

,a om# moleculele CDO clasa I sunt codi$icate de genele (A# iar moleculele CDO II# de regiunea cromosomal D# locali)ate pe cromosomul 6. Doleculele CDO I sunt codi$icate de trei gene+ O,(-(# O,(-4# O,(-C. <-au descris genele O,(-;# -!# -7# -O i -J# dar acestea sunt considerate gene neclasice pentru c" produsele lor de sinte)" se deose esc structural i $uncional de ale genelor O,(-(# -4 i EC. Doleculele CDO II sunt codi$icate de regiunea cromosomal" O,(-6# ce aparine genelor clasei a II-a. 7enele clasei a III-a codi$ic" sinte)a acelorai proteine plasmatice >C4# C2# 4$?.

Com!le)ul 97 (!e cromosomul ?"1

9egiunea cromosomal" Clasa ,ocusuri genice

C4# C2# 4 C ;# !# 7# O# J 4$ ( 7ene II III I neclasice 6&# 6]# C4# C2# 4 C ;# !# 7# O# J 69 4$ ( 6

7enele O,( clasa I i II au cel mai *nalt grad de polimor$ism genetic dintre toi determinanii genici cunoscui ai organismului uman+ O,(-( are 83 de alele O,(-4# 185 de alele O,(-C# 42 de alele.

:um"rul alelelor este *n continu" cretere pe m"sur" ce se identi$ic" noi %ariante. &olimor$ismul genic este consecina e/istenei a cel puin dou" alele pentru un locus. &e $iecare din cei doi cromosomi perec'e# un indi%id pre)int" 3 gene CDO di$erite >O,(-(# O,(-4# O,(-C?. Celulele umane pre)int" 6 %ariante di$erite de gene clasa I# c0te trei de la $iecare p"rinte. 7enele CDO I sunt codominante# ast$el c" pe supra$aa $iec"rei celule se e/prim" produsele de sinte)" ale am elor alele parentale. <e sinteti)ea)" ast$el 6 %ariante ioc'imice de molecule CDO I. 1ntr-o populaie uman"# moleculele CDO I i CDO II sunt $oarte di$erite din punct de %edere ioc'imic# ca o e/presie a polimor$ismului genic al indi%i)ilor umani. (ntigenele O,(-(# 4 i C sunt antigenele ma.ore recunoscute de sistemul imunitar al ga)dei# *n reacia de respingere a gre$ei. Cantitati%# moleculele O,(-C sunt in$erioare $a" de O,(-( i O,(-4. Aoate sunt capa ile s" pre)inte antigenul. Doleculele CDO neclasice >;# !# 7? nu pre)int" antigenul. &olimor$ismul ioc'imic al moleculelor CDO I este limitat la domeniile Q 1 i Q 2# la ni%elul sec%enelor ce $ormea)" ca%itatea molecular". 0enele CM II sunt locali)ate *n regiunea O,(-6. 9egiunea genic" O,(-6 controlea)" r"spunsul lim$ocitelor *n amestec. <peci$icit"ile alelice ale genelor CDO II au $ost de$inite prin tipi)are limfocitar i aparin locusurilor 6K i O,(6& sau prin tipi)are serologic i aparin locusurilor O,(-6&# 6]# 69. 9egiunea 6 este di%i)at" *n trei su regiuni $uncionale ma.ore# care codi$ic" moleculele 69# 6] i 6&. In su regiunile 6] i 6& se g"sete o perec'e de gene $uncionale 6](1 i 6]41# respecti% 6&(1 i 6&41# care codi$ic" cele dou" catene >Q i P? ale moleculei CDO II. <u regiunea 69 este mai comple/". ;a conine o singur" gen" pentru sinte)a catenei Q# 69(1 i una sau dou" gene pentru sinte)a catenei P >6941# 6943# 6944 sau 6945?. :r. alelelor 69(1 6941 6943 6944 6945 6](1 6]41

2 184 11 8 12 18 31

6&(1 6&41

10 77

Ca i genele codi$icatoare ale moleculelor CDO I# genele codi$icatoare ale moleculelor CDO II sunt codominante. <e sinteti)ea)" ast$el 8 %ariante ioc'imice de molecule CDO II >deoarece sunt dou" gene codi$icatoare ale genei P pentru mlecula O,(-69?. Com inarea aleatorie a num"rului mare de alele e/plic" polimor$ismul e/tensi% al moleculelor CDO *ntr-o populaie uman". :um"rul com inaiilor genice posi ile *ntre aceste alele este e%aluat la circa 10 90# un num"r cu mult mai mare dec0t al indi%i)ilor umani care coe/ist" la un moment dat. In conte/tul e/istenei unui num"r mare de gene alele codi$icatoare# posi ilitatea ca doi indi%i)i ne*nrudii s" ai " proteine identice ale moleculelor CDO clasele I i II este mic". :u e/ist" doi indi%i)i identici pentru toate cele 6 %ariante de molecule CDO I i pentru cele 8 %ariante de molecule CDO II. Doleculele CDO I i II au rolul de a lega peptidele antigenice. @ %ariant" molecular" poate s" lege un num"r limitat de peptide antigenice>de ordinul milioanelor?# dar pro a ilitatea unei potri%iri spaiale crete mult prin e/istena a 6 %ariante de molecule CDO I i a 8 %ariante de molecule CDO II. &eptidul antigenic este legat deose it de sta il *n situsul ca%itar al moleculelor CDO I i II. Evaluarea diferenelor antigenice ale moleculelor CMH !iecare organism are o speci$icitate antigenic" proprie con$erit" de moleculele CDO clasa I. 6i$erenele antigenice dintre indi%i)ii alotipici ai unei specii# dependente de moleculele CDO I se e%aluea)" serologic. <erul imun speci$ic anti-molecule CDO se o ine prin in.ectarea unei suspensii de leucocite# la un organism al aceleiai specii# di$erit din punct de %edere genetic# adic" un organism cu o alt" com inaie de gene alele codi$icatoare ale moleculelor CDO I. @rganismul receptor sinteti)ea)" anticorpi $a" de antigenele O,( ale leucocitelor donorului# care se deose esc de propriile sale molecule. <peci$icitatea antigenic" a unui organism poate s" conste *n pre)ena unei molecule antigenice pe sau *n celulele sale# care nu e/ist" pe sau *n celulele altor organisme sau se datorea)" unor di$erene structurale $ine ale moleculelor de 'istocompati ilitate# pre)ente la toate organismele speciei# *n %ariante genetice distincte. (nticorpii anti-O,( se g"sesc *n serul $emeilor multipare i se sinteti)ea)" ca re)ultat al stimul"rilor antigenice O,( de origine patern"# e/primate pe celulele $"tului# dar a sente pe supra$aa celulelor organismului matern.

,eucocitele $"tului care str" at ariera placentar" trec *n circulaia matern" i induc sinte)a Ig7# cu persisten" *ndelungat" *n circulaie. @ alt" surs" de ser imun anti-O,( o constituie pacienii politransfuzai . (st$el ei se imuni)ea)" $a" de antigenele O,( alotipice de pe supra$aa leucocitelor donorilor de s0nge. (ntiserurile O,( se pot o ine prin imuni)area %oluntarilor. 6i$erenele antigenice dintre doi indi%i)i# determinate de moleculele CDO clasa II-a se e%aluea)" prin capacitatea lor de a iniia reacia limfocitar mi't >9,D?. ,im$ocitele de la doi indi%i)i ce poart" alele di$erite la locusul O,(-6 sunt co-culti%ate in vitro. Condiia reacti%it"ii lim$ocitare este di$erena unei singure alele la locusul ce codi$ic" aceste molecule. Indi%i)ii care au molecule CDO I identice nu reacionea)" serologic# dar dac" celulele lor di$er" prin moleculele CDO II# codi$icate de alele di$erite ale locusului O,(-6 produc un r"spuns intens *n 9,D. 1ntr-un amestec de celule lim$oide 'omo)igote aa i "" se acti%ea)" am ele populaii de lim$ocite# deoarece lim$ocitele aa reacionea)" $a" de antigenul "# iar lim$ocitele "" se acti%ea)" $a" de antigenul a. Intr-un amestec de lim$ocite 'omo)igote aa# cu populaia de lim$ocite 'etero)igote a"# r"spund numai lim$ocitele aa. 9"spunsul idirecional apare i *n amestecul lim$ocitelor ac i a". 6e o icei se e%aluea)" capacitatea lim$ocitelor receptorului de gre$" de a se acti%a $a" de antigenele donorului i pentru a induce un r"spuns unidirecional# populaia de lim$ocite a donorului este tratat" cu mitomicin" C >un in'i itor al sinte)ei (6:? sau este iradiat". Aratamentul nu modi$ic" imunogenitatea celulelor. !uncia stimulatoare a celulelor lim$oide este restr0ns" la celulele speciali)ate pre)entatoare de antigen# radiore)istente i care nu se di%id in vitro4 9"spunsul celulelor *n 9,D este orientat e/clusi% $a" de moleculele CDO I i II. Doleculele CDO II constituie un stimul primar esenial pentru 9,D. Doleculele CDO clasa I i II au rol esenial *n ela orarea r"spunsului imun# iar din punct de %edere antigenic# determin" respingerea alogre$elor >gre$e *ntre indi%i)i ai aceleiai specii# dar aparin0nd unor alotipuri di$erite?. Distri'uia tisular* a moleculelor CMH I /i II /i semnificaia lor evolutiv* Doleculele CDO I se g"sesc pe supra$aa ma.orit"ii esuturilor# pe celulele endoteliale ale capilarelor# iar leucocitele e/prim" cea mai *nalt" densitate a moleculelor CDO I+ 1M din moleculele de supra$a" ale mem ranei leucocitare sunt molecule O,(.

Doleculele CDO I au o densitate mai mic" pe supra$aa celulelor 'epatice# din pl"m0n# rinic'i i sunt $oarte diluate pe supra$aa celulelor musculare i a celor mai multe glande endocrine >cu e/cepia suprarenalelor?. Doleculele CDO II sunt e/primate predominant# pe supra$aa lim$ocitelor 4 i pe celulele speciali)ate pentru prelucrarea i pre)entarea antigenelor+ celulele seriei monocit-macro$ag# celulele endoteliale ale capilarelor sanguine i lim$atice# celulele Lup$$er# celulele dendritice# eo)ino$ile# microglia <:C. Doleculele CDO lipsesc pe eritrocite# pe celulele endoteliului corneean# pe componenta e/ocrin" a pancreasului# pe celulele acinare ale glandelor parotide# pe neuronii <:C# pe celulele endoteliale ale capilarelor <:C# pe esutul placentar. 1n condiii normale# o $orm" solu il" de molecule O,( se g"sete *n plasm". :i%elul ei crete marcat *n timpul in$eciei %irale# pro a il datorit" creterii ratei sinte)ei moleculelor O,(# stimulat" de inter$eron i de alte citoc'ine. Intensitatea e/prim"rii noleculelor CDO II este %aria il"# $iind controlat" de di$erii $actori+ inter$eronul Z i I,-2# sinteti)ai de lim$ocitele A# ampli$ic" ni%elul de e/primare a moleculelor CDO II# iar &7; 2# glucocorticoi)ii# Q-$etoproteina# ,&< din acteriile 7ram negati%e# diminu" densitatea acestor molecule# a%0nd ast$el rol imunosupresor. ,im$ocitele 4 i celulele tumorale secret" molecule CDO II. &ri%it" *n perspecti%a e%oluiei# e/istena moleculelor CDO nu semni$ic" respingerea gre$elor de esuturi i organe# deoarece acestea nu se reali)ea)" *n mod natural# ci au $ost introduse *n practica medical" a ultimelor decenii. In sens e%oluti%# e/istena moleculelor CDO ar putea $i atri uit" necesit"ii organismelor de a semnali)a rapid# celulele care pre)int" molecule antigenice pe supra$aa lor+ celulele in$ectate cu %irusuri sau cele trans$ormate malign. In acest conte/t# moleculele CDO au o semni$icaie deose it"+ pentru supra%ieuirea organismului# li)a celulelor purt"toare de molecule nonsel$ tre uie s" $ie rapid"# *nainte ca %irusul s" se multiplice i respecti%# *nainte ca celula malign" s" se di%id" i s" $orme)e o microtumor".

&entru ca inter%enia lim$ocitelor Ac s" $ie e$icient"# este necesar ca moleculele CDO s" $ie pre)ente pe oricare celul" ce poate $i in$ectat" de un %irus sau poate s" $ie trans$ormat" malign. &e de alt" parte# moleculele CDO# al c"ror rol esenial este acela de a pre)enta epitopii nonsel$# tre uie s" permit" aciunea e$icient" i rapid" a lim$ocitelor Ac. Doleculele CDO *ndeplinesc i $uncii neimune. Doleculele CDO I sunt componente ale receptorilor de 'ormoni. 6e e/emplu# linia celular" sta ili)at" 6audi nu e/prim" moleculele CDO I i nu are nici receptor pentru insulin"# deoarece nu sinteti)ea)" P 2-microglo ulina.

R8SPUNSU7 I&UN

@rganismul# ca sistem $uncional este ec'ili rat at0ta timp c0t in$ormaia antigenic" pe care o primete# este identic" cu cea proprie. !a" de moleculele str"ine# care se a at de la modelul in$ormaional propriu# sistemul imunitar r"spunde prin acti%area mecanismelor de recunoatere pentru a *ndep"rta moleculele nonsel$. Ansam"lul fenomenelor comple'e n cascad9 declanate de interaciunea specific a sistemului imunitar cu antigenul9 n cursul crora celulele imunocompetente se activeaz9 prolifereaz i se difereniaz n celule efectoare i celule de memorie9 constituie rspunsul imun4 !uncionalitatea sistemului imunitar se suprapune parial# modelului general al arcului refle'# deoarece presupune e/istena unui $lu/ in$ormaional care corespunde unui e'citant specific >(g? $a" de un receptor >lim$ocitele?# o cale aferent >celulele care *nglo ea)" i prelucrea)" (g?# un organ central >celulele lim$oide dintr-un organ lim$oid secundar? i efectorii r"spunsului imun >anticorpi# celule e$ectoare?. (sem"n"rile dintre sistemul imunitar i sistemul ner%os se e/tind i asupra altor particularit"i+ - sistemul imunitar este dotat# ca i sistemul ner%os# cu 2inteligen"3 >capacitatea de a recepiona un num"r mare de stimuli >adic" de a recunoate un num"r mare de determinani antigenici di$erii? i de a prelucra in$ormaie c'imic". <istemul ner%os prelucrea)" in$ormaie senzorial9 iar sistemul imunitar recunoate i prelucrea)" in$ormaie molecular4 2Inteligena3 sistemului imunitar

se mani$est" discontinuu# *n $uncie de agresiunile antigenice asupra organismuluiN - 2educaia3 sistemului imunitar >adic" stocarea in$ormaiei antigenice primit" prin stimul"ri repetate?# ca i *n ca)ul sistemului ner%os# *ncepe dup" natereN - am ele sisteme 2*n%a"3 prin e/perien"# pentru c" am ele sunt dotate cu memorie# care poate $i consolidat" prin repetarea stimulului. Demoria am elor sisteme este *nscris" *n modi$ic"ri moleculare persistente ale reelei# dar nu poate $i transmis" la descendeniN - am ele sisteme sunt organi)ate dup" modelul unei comple'e reele celulare i moleculare. 1ntre cele dou" sisteme e/ist" i deose iri+ sistemul ner%os recepionea)" stimuli de orice natur"# care acionea)" la ni%elul *ntregului organism# iar sistemul imunitar recunoate i reacionea)" numai la stimuli de natur" molecular"# care tind s" pertur e ec'ili rul c'imic al organismului.

P R-ICU7 RI-8@I7, 6,N,R 7, 7, R8SPUNSU7UI I&UN

;la orarea r"spunsului imun $a" de o su stan" nonsel$ este un proces $i)iologic care se caracteri)ea)" printr-o mare e$icien" i suplee i are urm"toarele particularit"i generale+ - $uncia imun" are caracter adaptativ# care decurge din orientarea speci$ic" a reaciilor sale $a" de o su stan" nonsel$. Caracterul adaptati% al r"spunsului imun implic" mo ili)area unor celule preprogramate care ateapt" s" $ie acti%ate de un anumit antigen# corespun)"tor speci$icit"ii lorN - caracterul $oarte economic al $unciei imunitare deri%" din speci$icitatea aciunii sale. In timpul r"spunsului imun se selecionea)" i se acti%ea)" numai clonele de lim$ocite care au recunoscut speci$ic epitopii antigenului# toate celelalte clone r"m0n0nd disponi ile pentru alte interaciuniN - eficiena $unciei imune deri%" din caracterul $oarte economic al mi.loacelor celulare i moleculare pe care le mo ili)ea)" i din capacitatea de a ampli$ica e$ectorii s"i# pe dou" c"iN su a? proliferarea masiv >circa 8 generaii celulare? a celulelor selecionate aciunea stimulatoare a su stanei nonsel$. 6up" acti%are se produc

modi$ic"ri $uncionale calitati%e ale acestor celule# de di$ereniere proli$erati%" i maturare# re)ultatul $iind generarea celulelor e$ectoare cu mare capacitate de aciune i a celulelor de memorieN ? celulele e$ectoare produc cantiti mari de molecule de recunoatere# su $orma receptorilor speci$ici $a" de su stana nonsel$N - caracterul de reea a celulelor acti%ate *n r"spunsul imun# conectate prin mediatori moleculari >interleuc'ine? i care condiionea)" e$iciena r"spunsului imunN - celulele sistemului imunitar cooperea)" stimulator cu numeroase alte categorii de celule# capa ile la r0ndul lor s" con$ere re)isten" organismului. Cooperarea are loc# inclusi% cu $actorii nespeci$ici >*n"scui? ai re)istenei >$agocitele# proteinele sistemului complement# molecule actericide sau acteriolitice din plasm"?N - r"spunsul imun adaptati% necesit" o perioad de timp pentru acti%area i proli$erarea lim$ocitelor care au recunoscut antigenul# *n timp ce reaciile neadaptati%e sunt prompteN - r"spunsul imun adaptati% asigur" protecia organismului i a descendenilor s"i# prin trans$erul placentar al anticorpilor i prin secreia lactat"N - r"spunsul imun adaptati% are o proprietate $undamental" unic" - memoria imun - consecin" a e/perienei antigenice indi%iduale# netransmisi il" la descendeni. 9"spunsul imun este re)ultatul cooper"rii unui num"r restr0ns de tipuri celulare i moleculare. In $uncie de predominana componentei celulare sau moleculare *n compartimentul e$ector al r"spunsului imun# se disting dou" tipuri de reacti%itate imunitar". 1. *spunsul imun mediat /umoral >9IDO?# care se caracteri)ea)" *n esen"# prin sinte)a anticorpilor ca molecule e$ectoare. ;$ectele 9IDO sunt urm"toarele+ - neutrali)area to/inelor i a in$ecio)it"ii particulelor %irale - opsoni)area antigenelor celulare> acterii# celule eucariote? - legarea antigenelor moleculare *n comple/e (g-(c i eliminarea lor.

Imunitatea mediat" 'umoral este trans$era il" de la un organism la altul prin intermediul serului. 9IDO este protector $a" de in$eciile acteriene >*n special piogene?# $a" de rein$eciile %irale i $a" de antigenele moleculare pe care le neutrali)ea)". 2. *spunsul imun mediat celular >9IDC? se caracteri)ea)" prin aceea c"# dup" p"trunderea antigenului# de regul" celular# sistemul imunitar mo ili)ea)" celule speciali)ate# care atac" antigenul int". (tacul se reali)ea)" $ie prin contact celular direct *ntre lim$ocitele A e$ectoare i celula int"# $ie prin mediatori moleculari. 9"spunsul imun mediat celular este declanat de antigene care se e/prim" pe supra$aa celulelor+ - antigene virale e/primate pe supra$aa celulelor in$ectate# *n special dup" in$ecia %iral" primar"N - antigene fungiceN - antigene e/primate pe supra$aa celulelor in$ectate de acteriile cu locali)are intracelular o"ligat >*icAettsia9 Co'iella9 C/lam7dia? sau facultativ intracelular >M4 tu"erculosis9 M4 "ovis9 M4 leprae9 %rucella sp49 (isteria monoc7togenes9 #rancisella tularensis?# *n special *n macro$ageN - antigenele tumorale? - antigenele celulare din gre$ele de esuturi i organe alogenice. ;/istena celor dou" compartimente ale r"spunsului imun este argumentat" de re)ultatele e/perimentale# dar i de o ser%aiile clinice# ade%"rate 2e/periene ale naturii3# asupra unor indi%i)i cu a$eciuni determinate de incapacitatea 9IDO sau 9IDC. !indromul Di 0eorge se caracteri)ea)" prin apla)ia congenital" a timusului i paratiroidelor. 4olna%ilor le lipsete reacti%itatea $a" de antigenele care mo ili)ea)" IDC i de aceea sunt sensi ili la in$eciile %irale# $ungice i la cele produse de acterii cu locali)are intracelular". <inte)a i titrul Ig serice sunt normale. ipo& i agamaglo"ulinemia congenital de tip %ruton este o a$eciune congenital" determinat" de gena tiro)in-Fina)ei# situat" pe cromosomul S# care a$ectea)" di$erenierea celulelor lim$oide 4 i produce imunode$iciena S lincat" >Sid?. Celulele 4 *n s0nge sunt rare# dei num"rul lim$ocitelor pre-4 *n m"du%a osoas" nu este semni$icati% redus# ceea ce sugerea)" o moarte celular" crescut" la tran)iia pre-4-4. 6e$iciena clinic" const" *n incapacitatea de a sinteti)a anticorpi i din aceast" cau)"# copiii# dup" 3-6 luni de %ia"# $ac in$ecii

repetate i recurente cu acterii 7ram po)iti%e i pre)int" mani$est"ri ale maladiilor autoimune. 9eacti%itatea IDC r"m0ne nemodi$icat"# pentru c" organismul *i p"strea)" re)istena $a" de in$eciile %irale i $a" de acteriile 7ram negati%e. <epararea celor dou" compartimente ale r"spunsului imun# 'umoral i celular# este arti$icial"# deoarece *ntre ele este o condiionare reciproc" i pro$und"+ anticorpii au $uncie opsoni)ant"# $a%ori)0nd ast$el IDC# iar pe de alt" parte# IDC este mediat" de numeroi $actori solu ili. Cele dou" compartimente interacionea)" sinergic pentru producerea unui r"spuns imun e$icient. Aotui# separarea este meninut" deoarece re$lect" di$erenele $undamentale ale mecanismelor de aciune ale celor dou" populaii de lim$ocite+ lim$ocitele 4 pentru 9IDO i lim$ocitele A pentru 9IDC. :ici un antigen nu induce un r"spuns imun pur# 'umoral sau celular. Aotdeauna r"spunsul imun este mi/t# cu predominana unuia sau a celuilalt dintre compartimente.

,- P,7, R8SPUNSU7UI I&UN

9"spunsul imun este re)ultatul succesiunii urm"toarelor etape+ - p"trunderea antigenului *n organism i *nglo area lui de c"tre celulele accesoriiN - prelucrarea antigenului i pre)entarea epitopilor pe supra$aa celulelor accesoriiN - recunoaterea speci$ic" a componentelor nonsel$ i acti%area celulelor e$ectoareN - producerea e$ectorilor r"spunsului imun. Ptrunderea antigenului *n organism se reali)ea)" pe di$erite c"i+ - pe cale cutanat" - pe calea circulaiei sanguine - pe calea mucoaselor>respiratorie# gastro-intestinal" i urogenital"?. ;piteliul tegumentar i mucoasele repre)int" o supra$a" $oarte mare# e/pus" la o mare di%ersitate de su stane antigenice. Aegumentul este o arier" mecanic" $a" de cele mai multe antigene# iar mucoasele sunt prote.ate# *n primul

r0nd# de Ig( din secreii. ;piteliul tegumentar i epiteliile mucoaselor au rol *n $enomenul 2e/cluderii antigenice3. <c'im ul li er *ntre mediul e/tern i cel intern are loc numai *n situaii patologice. ;la orarea r"spunsului imun este# *n esen"# re)ultatul cooper"rii a dou" categorii de celule+ celulele accesorii ale r"spunsului imun i celulele limfoide. (ntigenul este recunoscut de celule speciali)ate $uncional i *nglo at# cel mai adesea prin aciunea unor mecanisme nespeci$ice# de celulele accesorii9 cu rolul de a prelucra i de a prezenta antigenul . Celulele !rezentatoare de antigen (CP "

Celulele accesorii au rol esenial *n ela orarea r"spunsului imun# datorit" capacit"ii lor de a *nglo a su stanele str"ine# de a le prelucra i de a le pre)enta lim$ocitelor# de a $agocita celulele opsoni)ate i de a sinteti)a su stane imunomodulatoare. &re)entarea antigenului este treapta o ligatorie care precede recunoaterea antigenelor proteice de c"tre celulele A. @rice celul" care poart" pe supra$aa ei molecule CDO poate s" participe la ela orarea r"spunsului imun. Celulele pre)entatoare de antigen au urm"toarele propriet"i+ preiau antigenele# le internali)ea)" i le prelucrea)"N e/prim" moleculele CDO I i IIN e/prim" moleculele de aderen" care $a%ori)ea)" interaciunea cu lim$ociteleN produc molecule stimulatoare ale creterii i di$erenierii lim$ocitelor AN eli erea)" citoc'ine. Cele mai importante celule accesorii pentru ela orarea r"spunsului imun sunt macrofagele. In vivo# macro$agul particip" decisi% la procesul de imunogene)". Indi$erent de calea de p"trundere *n organism# antigenele sunt captate de celule accesorii# cel mai adesea# de macro$ag. Cea mai mare parte a antigenelor circulante sunt eliminate *nainte de a declana r"spunsul imun# *n primul r0nd de celulele Lup$$er# locali)ate pe $aa luminal" a capilarelor sinusoide din $icat. ,a ni%elul $icatului se elimin" circa 90M din totalul antigenelor circulante > acteriile care str" at ariera mucoasei digesti%e# endoto/inele a sor ite la ni%elul colonului# antigenele de origine alimentar"?. (lte celule speciali)ate# cu rol ma.or *n pre)entarea antigenului sunt celulele dendritice i limfocitele %4 Celulele dendritice $ac parte dintr-o $amilie care cuprinde urm"toarele tipuri de celule+

- celulele (anger/ans# locali)ate *n epiderm# dar i *n mucoase>oral"# na)al"# eso$agian"# ronic"# *n mucoasa tra'eii? - celulele cu voal# din lim$a a$erent" - celulele dendritice# din epiderm# din epiteliile mucoaselor# din organele lim$oide i din s0nge - celulele interdigitate# din aria paracortical" a ganglionilor lim$atici. @riginea acestor celule nu este cert"# dar se admite urm"toarea $iliaie+ monocitul sanguin# celula (anger/ans din epiderm# celula cu voal din lim$a a$erent" ganglionului lim$atic# celula dendritic din derm# din organele lim$oide i din s0nge. Celulele dendritice s-au i)olat din organele lim$oide i din s0nge# pe a)a capacit"ii lor de a adera de suport >ceea ce permite eliminarea lim$ocitelor din amestec? i de a-i pierde aderena dup" 24 de ore de culti%are. 9olul lor *n pre)entarea antigenului este argumentat de $aptul c" stimulea)" intens reacia lim$ocitar" mi/t". Celulele dendritice au rol $oarte important pentru iniierea r"spunsului imun. <unt larg distri uite *n esuturile lim$oide i nelim$oide la toate speciile de mami$ere studiate. &recursorii celulelor dendritice i ai macro$agelor sunt locali)ai *n m"du%a osoas"# iar monocitul este un stadiu comun# *nainte de di$erenierea pe cele dou" linii. Donocitul trece *n s0nge# de unde se diseminea)" *n esuturile nelim$oide >epiderm# epiteliul tractului respirator# gastrointestinal# urogenital? i se di$erenia)" n celul dendritic4 1n tegument# celulele dendritice i celulele (anger/ans $ormea)" o reea rami$icat" *n tot epidermul. ;le au capacit"i optime de captare i prelucrare a antigenelor# care p"trund pe cale tegumentar". 6up" maturare# $a%ori)at" de citoc'inele produse local# migrea)" din esuturile nelim$oide# *n esuturile lim$oide secundare. Digrarea din epitelii are loc pe cale lim$atic"# p0n" *n ganglionii lim$atici regionali# iar cele din spaiile interstiiale migrea)" pe cale sanguin" *n splin". In timus# celulele dendritice pre)int" comple/ele CDO-peptide# timocitelor care *i do 0ndesc competena imunitar"# pentru inducerea toleranei imune. Celulele acestei $amilii nu au receptori pentru !c i nici pentru C3# dar e/prim" la un ni%el ridicat# moleculele CDO I i II. Celulele (anger/ans repre)int" 2-8M din totalul celulelor epidermice i $ormea)" o reea printre c'eratinocitele straturilor pro$unde. ;le repre)int" celulele dendritice imature i e/prim" ni%ele mai mari de molecule CDO II. <unt capa ile s" preia antigenul e/ogen prin intermediul moleculelor de supra$a"# $iind celule pre)entatoare de antigen $oarte e$iciente. Celulele ,anger'ans pot s" pre)inte antigenul local# *n epiderm# sau pot s" se mo ili)e)e# s" p"r"seasc"

stratul a)al i s" migre)e pe cale lim$atic"# p0n" *n ganglionii regionali. In timpul migr"rii# celulele au prelungiri mem ranare i se numesc celule cu voal. In ganglionul lim$atic# ele se distri uie *n aria paracortical">corte/ul pro$und? i de%in celule dendritice i celule interdigitate >o %ariant" mor$ologic" cu prelungiri mai scurte?# a%0nd rol esenial *n pre)entarea antigenelor i acti%area lim$ocitelor A. Celulele ,anger'ans# celulele cu %oal i celulele interdigitate sunt stadii di$erite ale liniei celulelor dendritice. Celulele acestei $amilii nu au propriet"i $agocitare. Aotui# li se atri uie un rol important *n procesul prelucrrii antigenelor. (ntigenele r"m0n legate la ni%elul mem ranei celulare i sunt prelucrate prin intermediul ectoproteazelor pe care le secret". Iradierea tegumentului cu ra)e 5I duce la dispariia celulelor ,anger'ans. (imfocitul % este celula e$ectoare a 9IDO# dar are i rolul de captare i pre)entare a antigenului speci$ic. ;$iciena sa *n captarea antigenului este ma/im"# deoarece receptorul imunoglo ulinic leag" speci$ic epitopii corespun)"tori c'iar la concentraii $oarte mici# de 1000 de ori mai mici dec0t cele necesare pre)ent"rii sale de c"tre macro$ag sau de c"tre celula dendritic". ,im$ocitul 4 recunoate i pre)int" numai antigenele moleculare mici >peptide?. &ro a il c" proteinele mari nu le sunt accesi ile. ;/ist" do%e)i c" antigenul peptidic legat la supra$aa lim$ocitului 4# prin intermediul receptorului imunoglo ulinic speci$ic# este endocitat# prelucrat *n compartimentul acid i pre)entat *n asociaie cu moleculele CDO II# pentru a $i recunoscut de lim$ocitele A. ,im$ocitele 4 e/prim" ni%ele relati% *nalte ale moleculelor CDO II. 9olul lor de captare i e%entual# prelucrare a antigenului este semni$icati% la contactul secundar cu antigenul. Cele mai importante celule# cu $uncia de captare i prelucrare a antigenului sunt macrofagele i celulele dendritice4 &rima treapt" a interaciunii antigenului e/ogen cu C&( >macro$ag# celula dendritic"? este legarea nespeci$ic"# neco%alent"# cu structuri nedeterminate ale supra$eei celulare. (ntigenele din comple/ele imune sunt recunoscute de C&( prin intermediul receptorilor pentru !c i C3. 6up" ce a p"truns *n organism# antigenul este repede *nglo at i depo)itat *n interiorul macro$agului. <coaterea antigenului din circulaie are o semni$icaie $uncional" deose it"# deoarece constituie un depo)it din care este eli erat treptat i stimulea)" imunogene)a. (ntigenul li er *n organism poate s" induc" una din cele dou" st"ri de$a%ora ile pentru reacti%itatea imunitar"+ - poate $i eliminat prea rapid din organism# *nainte de stimularea r"spunsului imunN

- do)ele prea mari de antigen li er sunt de$a%ora ile reacti%it"ii imunitare# prin locarea r"spunsului lim$ocitelor. <tarea caracteri)at" prin incapacitatea de r"spuns imun a organismului se numete paralizie imunologic4 ;ste o stare de locare complet" a reacti%it"ii imunitare prin 2inundaie antigenic"3. (ntigenele moleculare sau particulate cu o un" imunogenitate sunt reinute parial *n macro$ag su o $orm" re)istent" la degradare# pentru perioade mai lungi de timp. Dacro$agele modi$ic" imunogenitatea antigenelor+ dup" legarea de macro$ag# cele sla imunogene de%in mai imunogene# iar cele cu imunogenitate ridicat"# dup" legarea de macro$ag *i pierd parial aceast" calitate. Prelucrarea antigenelor

&relucrarea antigenelor e/ogene este o etap" o ligatorie deoarece lim$ocitele A >A' i Ac? nu recunosc i nu preiau direct in$ormaia antigenic" nati%". ,im$ocitele A recunosc numai in$ormaia antigenic" pre)entat" pe supra$aa C&(. Celulele accesorii ale r"spunsului imun prelucrea)" antigenele moleculare mari i pe cele particulate. 6in punct de %edere ioc'imic# prelucrarea semni$ic" deplierea# cli%area proteinelor i generarea peptidelor# ca re)ultat al unei proteoli)e pariale. &relucrarea antigenului e/ogen de c"tre celulele pre)entatoare# parcurge urm"toarele etape+ internalizarea antigenului *n %e)iculele mem ranare acideN proteoliza parial"N cuplarea cu moleculele CDON transportul la ni%elul mem ranei plasmatice. 7radul prelucr"rii antigenului este dependent de natura sa. Inter%alul de prelucrare este de 45-60 minute. 6urata s-a determinat prin inacti%area meta olic" a macro$agelor cu para$ormalde'id"# la di$erite inter%ale de timp dup" contactul cu antigenul. ;/perienele cu antigen marcat au e%ideniat c" *n C&(# materialul imunogen are dou" destinaii+ o parte este e/pus" pe supra$aa celulei i este recunoscut" de celulele A# iar o alt" parte este sec'estrat" *n celul"# de unde este eliminat" acti% *n mediul e/tracelular i este preluat" de alte C&(. &rincipalul mecanism degradati% care are loc *n C&( este proteoliza lizosomal4 Conclu)ia a $ost dedus" e/perimental+ amoniacul i cloroWuina >su stane li)osomotrope? se acumulea)" *n li)osomi i loc'ea)" acti%itatea en)imelor prin creterea pO li)osomal. Dacro$agele ast$el tratate sunt incapa ile s" pre)inte antigenele proteice sau acteriene. CloroWuina loc'ea)" numai etapa prelucr"rii antigenului# dar nu i recunoaterea sa de c"tre lim$ocitele A#

deoarece administrarea ei dup" o or" de la contactul macro$agelor cu antigenul# a r"mas $"r" e$ect. CloroWuina a locat pre)entarea antigenului de c"tre celulele dendritice# dei ele nu sunt $agocitare in vitro i au un ec'ipament li)osomal puin de)%oltat. <-a dedus c" ele prelucrea)" antigenul la supra$a"# prin intermediul ectoproteazelor mem ranare# dei nu e/ist" do%e)i directe *n acest sens. &re)entarea antigenelor i asocierea cu moleculele CDO I nu este sensi il" la aciunea su stanelor li)osomotrope alcalini)ante. Proteinazele cisteinice >$uncionea)" prin intermediari co%aleni en)im"su strat? sunt importante pentru prelucrarea antigenelor proteice# aa cum s-a demonstrat cu antigene sintetice. &roteoli)a rapid" i e/tensi%" este cau)a sla ei imunogenit"i a unor antigene >sau c'iar a a senei imunogenit"ii?. 5nele antigene sintetice >copolimerul ,-acid glutamic-,-alanin"? sunt mult mai imunogene dup" in'i area aciunii proteina)elor cisteinice. Decanismele moleculare ale prelucr"rii antigenelor sunt puin cunoscute. In macro$age se produce o digestie selectiv a antigenului # *n urma c"reia o parte din epitopi se p"strea)"# dar cea mai mare parte a antigenului este complet degradat". Comple/itatea antigenului condiionea)" num"rul de peptide cu rol de epitopi# care deri%" prin procesul de prelucrare i care pot $i legate de moleculele CDO. 6ac" antigenul este o acterie# num"rul de epitopi este nedeterminat i speci$icitatea lor antigenic" este %aria il"# *n $uncie de comple/itatea aparatului en)imatic 'idrolitic al celulei care prelucrea)" antigenul. :u toate antigenele necesit" proteoli)a >$ragmentarea? preala il" recunoaterii de c"tre celulele A. 5neori este su$icient" numai denaturarea >deplierea? proteinelor pentru ca antigenul s" $ie pre)entat de C&(# c'iar tratate cu cloroWuin". !orma su care lim$ocitele A recunosc antigenele# depinde at0t de natura C&(# dar *n special de natura antigenului. Da.oritatea proteinelor sunt rapid endocitate i prelucrate# dar unele sunt legate de mem rana celulei i pre)entate *n stare nativ9 $"r" o prelucrare preala il". (ntigenele peptidice mici >insulina# angiotensina? pot $i recunoscute *n $orm" nati%"# de unele su populaii de lim$ocite A# *n timp ce altele recunosc $ormele prelucrate ale acelorai antigene. 6imensiunea i con$iguraia spaial" a moleculei de antigen sunt 'ot"r0toare *n ceea ce pri%ete gradul prelucr"rii sale# *nainte de a $i pre)entat.

6e regul"# moleculele mari necesit" prelucrarea preala il"# iar cele mici sunt pre)entate *n $orm" nati%". !orma c'imic" a antigenului# dup" prelucrare# nu este cunoscut" cu certitudine. !oarte pro a il# este un polipeptid de dimensiuni mici >9-20 aminoaci)i?. 6up" ali autori# prelucrarea nu este necesar" pentru ca antigenul s" $ie pre)entat lim$ocitelor A# dar totdeauna este necesar" con%ersia sa la o $orm" care s"-i permit" interaciunea cu moleculele CDO II ale C&( i cu receptorii lim$ocitelor A. 6o%ada este adus" de $aptul c" liposomii cu molecule CDO II inserate *n stratul lipidic# la care s-au ataat o %arietate de antigene proteice nati%e# stimulea)" clonele de lim$ocite A in vitro# *n a sena complet" a C&(. ;pitopii antigenelor peptidice e'ogene sunt e/pui la supra$aa C&(# *n asociaie cu moleculele CDO clasa II# iar epitopii antigenelor de origine endogen sunt pre)entai *n asociaie cu moleculele CDO clasa I. +olul moleculelor CMH 3n prezentarea antigenelor 9"spunsul imun este re)ultatul interaciunilor comple/e *ntre celulele care pre)int" antigenele i lim$ocitele A i 4. &re)entarea antigenelor este o etap" o ligatorie a ela or"rii r"spunsului imun# ce deri%" din $aptul c" lim$ocitele nu interacionea)" direct cu antigenele *n stare nati%"# ci numai dup" ce acestea au $ost prelucrate i pre)entate pe supra$aa unei celule. Doleculele CDO *ndeplinesc $uncia de pre)entare a antigenelor i au un rol esenial *n declanarea r"spunsului imun. &entru a de%eni disponi ili interaciunii cu receptorii de antigen ai lim$ocitelor# epitopii sunt asociai intracelular# cu moleculele CDO I sau II i sunt transportai la supra$aa C&( ca $ragmente peptidice sau ca proteine intacte# *n $uncie de natura i de m"rimea antigenului. #ig4 F=. Prelucrarea i prezentarea antigenului e'ogen9 *n asociaie cu moleculele CDO II. Doleculele CDO II# cu catena in%ariant"# sunt asam late *n reticulul endoplasmic >9;? i transportate prin reeaua 7olgi# de unde sunt orientate spre %e)icula endosomal"# care conine protein" degradat" parial# deri%at" din antigenul e/ogen. 6egradarea catenei in%ariante# $ace posi il" asocierea peptidului antigenic cu molecula dimeric" >6D?. Comple/ul este

transportat la supra$aa celulei i este recunoscut de lim$ocitele A'. Doleculele CDO I i II au capacitatea $uncional" de a lega i de a e/pune pe supra$aa celulei# un num"r neli-mitat de peptide di$erite. Comple/ul $ormat de mo-leculele CDO I sau II i epitopul peptidic este recu-noscut de lim$ocitele A. :u se cunoate modalitatea interaciunii dintre moleculele CDO i epitopii antigenici. (r putea $i o interaciune $erm" sau moleculele CDO au numai rolul de suport pentru epitopii antigenici. <e accept" ideia unei ierar'ii a epitopilor cu pri%ire la ordinea leg"rii competiti%e de moleculele CDO# dato-rit" sensi ilit"ii di$eren-iate la protea)e. 9e)ult" peptide cu a$initate di$erit" $a" de situsul de legare a moleculelor CDO. (st$el# e/ist" epitopi dominani# care se asocia)" cu mare pro a ilitate de molecu-lele CDO# epitopi su"dominani# cu mai puine anse de asociere cu moleculele CDO i epitopi criptici# care se asocia)" rareori *n comple/e cu moleculele CDO i care nu de%in accesi ili lim$ocitelor A potenial reacti%e. Antigenele e4ogene sunt prezentate 3n asociaie cu moleculele CMH II Doleculele CDO II leag" peptide deri%ate din proteinele e/ogene endocitate de celule+ proteine solu ile# proteine ale capsidei %irale# proteine acteriene sau proteine ale proto)oarelor endocitate de celul". In vitro# s-a demonstrat c" moleculele CDO II puri$icate# leag" su$icient de sta il o molecul" peptidic"# pentru a $i i)olate *mpreun" prin gel-$iltrare. (ntigenele e/ogene sunt *nglo ate i prelucrate *n $agoli)osomii celulelor pre)entatoare de antigen >C&(?. Doleculele CDO II se sinteti)ea)" *n reticulul endoplasmic granular i sunt modi$icate post-traducere# *n cisternele 7olgi. Cele dou" catene ale moleculei sunt reunite prin catena invariant. (socierea este meninut" p0n" c0nd moleculele CDO II a.ung *n sistemul endocitar al celulei. In drumul lor spre supra$aa celulei# moleculele CDO II a.ung prin $u)iunea %e)iculei transportoare# *n compartimentul fagolizosomului ce conine antigenul parial degradat. ,a acest ni%el este eliminat" catena invariant ce reunete catenele Q i P i care ocup" situsul de legare a antigenului. Doleculele CDO II se asocia)" cu peptidul antigenic de 13-25 aminoaci)i. Comple/ul $ormat este e/pus la ni%elul mem ranei# unde este recunoscut de lim$ocitele AC6 4. <itusul de legare al moleculei CDO II este o ca%itate $ormat" prin P-plierea domeniilor Q-1 i P-1# delimitat" de sec%enele Q-'elicale ale domeniilor Q-1 i P-1. Comple/ul $ormat este recunoscut de lim$ocitele AC64. #ig4 FC. 9epre)entarea sc'ematic" a asocierii moleculelor

CM II cu peptidul antigenic >dup" CressKell# 1994?. Doleculele CDO II au $uncia $undamental" de a stimula ela orarea r"spunsului imun speci$ic $a" de antigenele e/ogene# prin intermediul lim$ocitelor AC64. ,im$ocitele AC64 secret" I,-2# I,-4# I,-5# I!: Z# cu e$ect stimulator $a" de lim$ocitele Ac i 4. (socierea unui peptid nonsel$ cu moleculele CDO II semni$ic" 2cererea de a.utor3 pentru eliminarea antigenului# materiali)at *n acti%area lim$ocitelor AC6 4 i secreia de lim$oc'ine stimulatoare ale r"spunsului imun. Doleculele CDO II au rol esenial pentru stimularea r"spunsului imun# dar i pentru reglarea intensit"ii sale. Interaciunea moleculelor CDO II cu epitopii antigenici nu este speci$ic". 6eoarece moleculele CDO sunt polimor$e# e/ist" di$erene# uneori importante# *ntre organismele out red ale unei specii de a r"spunde la un antigen. (st$el se e/plic" di$erenele indi%iduale de sensi ilitate $a" de un agent in$ecios. 5n r"spuns imun mai amplu# este generat de un organism care e/pune mai muli epitopi antigenici di$erii# asociai cu di$eritele %ariante de molecule CDO II# comparati% cu un organism care e/pune mai puine $ragmente antigenice asociate cu 1 sau 2 tipuri de molecule CDO II. Antigenele endogene sunt prezentate 3n asociaie cu moleculele CMH I 9olul moleculelor CDO *n procesul recunoaterii antigenelor care se sinteti)ea)" *n interiorul celulei >proteine endogene?# a $ost demonstrat de 8incFernagel i 6o'ertG >1974?# pentru antigenele %irale# *n e/periene de genul urm"tor+ - oarecii liniei in red 6 au $ost inoculai cu %irusul coriomeningitei lim$ocitare >cu speci$icitate antigenic" (?# pentru a stimula proli$erarea lim$ocitelor Ac $a" de celulele in$ectate cu acest %irusN - culturile de $i ro laste de la em rionii liniei 6 se in$ectea)" cu %arianta antigenic" ( i respecti% 4# iar $i ro lastele liniei L se in$ectea)" cu %arianta antigenic" (N - lim$ocitele Ac ale organismelor liniei 6# stimulate cu %irusul (# recunosc i li)ea)"# in vitro# $i ro lastele liniei 6# in$ectate cu %arianta antigenic" (# dar nu recunosc i nu li)ea)" $i ro latele liniei 6 in$ectate cu %arianta antigenic" 4 i nici $i ro lastele liniei L# in$ectate cu %arianta antigenic" (.

Conclu)ia a $ost c" nucleoproteinele citosolice %irale# sinteti)ate *n celul"# pot de%eni inta celulelor Ac# dup" ce sunt e/puse ca un peptid prelucrat# *n asociaie cu moleculele CDO I ale celulei in$ectate. &e a)a acestei conclu)ii s-a sta ilit principiul general c" proteinele intracelulare >care nu sunt destinate mem ranei citoplasmatice?# pot s"-i semnale)e pre)ena *n raport cu celulele A# prin e/punerea asociat" cu moleculele CDO I. 9e)ultatele au $ost e/trapolate i pentru categoria larg" a antigenelor e/ogene. #ig4 F>. Aciunea limfocitelor )c este restricti%" *n raport cu moleculele CDO I# deoarece celula Ac recunoate at0t antigenul speci$ic# c0t i molecula CDO I. (m"nunte *n te/t. 9ecunoaterea asociat" a antigenelor cu moleculele CDO I sau II are dou" semni$icaii ma.ore+ - celulele sistemului imunitar interacionea)" cu proteinele proprii# numai dac" acestea sunt asociate cu un determinant antigenic nonsel$# de origine %iral"# tumoral" sau indus de ageni c'imiciN - recunoaterea antigenului este condiionat" de e/istena $enomenului de 'istocompati ilitate# adic" celulele care pre)int" antigenul i cele care *l recunosc >lim$ocitele Ac i A'? tre uie s" poarte molecule CDO identice# adic" celulele care interacionea)" tre uie s" aparin" aceluiai organism sau unor organisme genetic identice>ale aceleiai linii in red?. (cesta este fenomenul de restricie >limitare? a interaciunilor celulare prin moleculele CDO. Doleculele CDO I au rolul de a lega i de a pre)enta proteine sel$# peptide deri%ate din cata olismul proteinelor citosolice# antigene acteriene sau ale para)iilor intracelulari# antigene %irale sinteti)ate *n celul" prin traducerea unui (9:m %iral# antigene tumorale sau antigene a c"ror sinte)" a $ost indus" de ageni c'imici. 6up" asocierea cu epitopi antigenici# moleculele CDO I de%in inta atacului lim$ocitelor AC68. ,im$ocitele Ac sunt implicate# *n primul r0nd# *n recunoaterea i eliminarea celulelor in$ectate cu %irusuri sau a celor trans$ormate malign. (m ele tipuri de antigene sunt sinteti)ate *n celul" i sunt considerate ca a%0nd origine endogen. ;%enimentele celulare al c"ror re)ultat este pre)entarea peptidelor# se succed *n urm"toarele trepte+ - cata olismul antigenului proteic >*n citoplasm"? - transportul peptidului din citosol# *n cisternele reticulului endoplasmic - asam larea comple/ului $ormat din peptid i molecule CDO I

- transportul comple/ului la supra$aa celulei. (ntigenele endogene se asocia)" cu moleculele CDO I# c'iar *n cisternele reticulului endoplasmic granular. ,a acest ni%el# moleculele CDO II sunt inaccesi ile asocierii cu epitopii antigenici# deoarece catenele Q i P sunt reunite prin catena in%ariant". &re)entarea antigenelor endogene# asociate cu moleculele CDO I nu este sensi il" la aciunea agenilor li)osomotropi alcalini)ani >amoniac# cloroWuin"?# dar este sensi il" la deri%aii peptidici>di- sau tripeptide alde'idice? care in'i " proteasomul. &roteasomul este un comple/ proteic multicatalitic# compus din mai multe su unit"i inelare suprapuse# asam late *ntr-o structur" cilindric"# *n care se produce proteoli)a moleculelor proteice citosolice con.ugate cu u ic%itina. &roteasomul este o structur" care controlea)" turn-o%erul proteinelor citosolice# inclusi% al $actorilor de transcriere i al ciclinelor. 5 ic%itina este un polipeptid mic# care este asociat pe cale en)imatic" dependent" de (A&# de li)ina proteinelor citosolice. ,egarea u ic%itinei produce deplierea proteinei int" i asigur" recunoaterea de c"tre elementele comple/ului proteasomic citosolic. &roteinele celulare modi$icate dup" cuplarea cu u iWuitina# de%in sensi ile la proteoli)". &roteoli)a are loc *n mediul apos al structurii cilindrice i este independent" de (A&. (st$el sunt prote.ai constituienii celulari de degradarea necontrolat". &eptidele re)ultate *n proteasom sunt $oarte rapid degradate *n citoplasm". 6e aceea s-a presupus c" ele se asocia)" cu proteinele c/aperone# cu rol protector i de orientare a peptidelor *n lumenul reticulului endoplasmic. #ig4 FH. Prelucrarea i prezentarea antigenului endogen# de c"tre moleculele CDO I. &roteinele citosolice sunt degradate de comple/ul proteosomic# *n peptide care sunt transportate *n reticulul endoplasmic >9;?. ,a acest ni%el# P-2 m induce diso-cierea catenei O de proteina c'aperone >calne/ina?. <e asam lea)" molecula CDO I i se asocia)" cu peptidul antigenic. Comple/ul peptid-CDO I se eli erea)" din asocierea cu transportorul A(&# tra%ersea)" cisternele 7olgi i se e/prim" pe supra$aa celulei# gata s" $ie recunoscut de 9CA. Celulele de$iciente *n A(&1T2 nu eli erea)" peptidele pentru a se asocia cu moleculele clasa I i nu pot e/ercita e$ectul citoto/ic asupra intei >dup" 9oitt# 1997?. #ig4 =<4 !ormarea comple'ului CM I&peptid *n cisternele 9;. &eptidele re)ultate din pre-lucrarea antigenelor endogene sunt transportate *n reticulul endo-plasmic# de o categorie de proteine transportoare# denumite A(& >pro-teine transportoare asociate cu pre)entarea antigenului? care $olo-sesc energia re)ultat" din 'idroli)a (A&# pentru a transporta prin mem rane di$erite

proteine# ioni# anti iotice. Dolecula A(& este un 'eterodimer# $ormat din dou" su unit"i >A(&1 i A(&2?. !iecare su unitate are o regiune 'idro$o " :-terminal" transmem ranar" i un domeniu C-terminal ce leag" (A&. Doleculele A(& au capacitatea de a transloca peptidele prin mem rana 9;. Catenele moleculei CDO I se sinteti)ea)" separat pe cisternele 9; i odat" cu traducerea sunt transportate *n 9;. Catena O# P-2 m i peptidul se asam lea)" *ntr-un comple/# c'iar *n cisternele 9; sau *n compartimentul pregolgian. 1n cisternele 7olgi# catena O este glico)ilat"# iar comple/ul CDO Ipeptid este ancorat *n mem ran" i e/pus la supra$aa celulei. Doleculele CDO I leag" peptide mici# de 8-10 aminoaci)i. <peci$icitatea de legare este larg". Dolecule CDO I identice leag" peptide di$erite. ,iniile celulare care nu sinteti)ea)" P-2 m# nu e/prim" molecule CDO I pe supra$aa lor. (cesta este un e/emplu al $unciei de 2control de calitate3 pe care *l are 9;. Doleculele CDO pliate incorect nu sunt transportate la ni%elul mem ranei# ci r"m0n *n cisternele 9; i sunt degradate. ( sena P-2 m determin" plierea greit" i degradarea catenei mari. Controlul de calitate este mediat de un set de proteine c/aperone# care se asocia)" re%ersi il cu proteinele pliate incorect i ast$el permit 2corectarea3 greelii de pliere. ,a ni%el mem ranar# comple/ul molecular este recunoscut de lim$ocitele Ac i re)ultatul interaciunii este liza celulei int4 Doleculele CDO I nu disting *ntre peptidele sel$ i nonsel$. &eptidele asociate cu moleculele CDO I au $ost i)olate# $racionate prin O&,C >'ig'per$ormance liWuid c'romatograp'G? i sec%eniate. !iecare celul" e/pune pe supra$a "# sute de peptide# cele mai multe $iind proteine citosolice autologe. (socierea moleculei CDO I cu un peptid nonsel$ pe supra$aa celulei# semni$ic" necesitatea distrugerii celulei int". 6o%ada *n $a%oarea acestei ipote)e este adus" de $aptul c"# in vivo# situsul de legare al moleculelor CDO I este ocupat de peptide sel$# adic" $ragmente ale proteinelor proprii# pe care celulele le captea)" din spaiul interstiial sau le produc *n proteasom i le pre)int" ca i pe cele nonsel$. 6up" disocierea peptidului# molecula CDO I 2goal"3 e/pus" la supra$aa celulei# este insta il". !aptul c" situsul de legare al moleculelor CDO I este ocupat de peptide sel$# este *n acord cu teoria supraveg/erii imune# con$orm c"reia# celulele Filler i lim$ocitele Ac controlea)" permanent supra$aa celulelor organismului# pentru a detecta e%entuala apariie a antigenelor tumorale sau %irale. Celulele care e/prim" pe supra$aa lor molecule nonsel$# sunt eliminate prompt.

6eoarece celulele prelucrea)" i pre)int" continuu molecule proprii# celulele sistemului imunitar sunt stimulate permanent. ,im$ocitele controlea)" calitatea moleculelor CDO I i detectea)" celulele ce pre)int" molecule alterate sau molecule nonsel$. Indi%i)ii umani de$icieni ai moleculelor CDO I# nu par a a%ea o inciden" crescut" a in$eciilor %irale se%ere# ceea ce sugerea)" e/istena i a altor mecanisme de recunoatere a moleculelor nonsel$# neasociate cu moleculele CDO I. #ig4 =1. C68. 9epre)entarea sc'ematic" a moleculelor C64 i

Modelul

recunoa/terii

antigenuluide

c*tre

limfocitele

9ecunoaterea antigenului de c"tre lim$ocitele A este mediat" *n primul r0nd# de receptorul de antigen >9CA?. <ec%enele 'iper%aria ile ale lanurilor Q i P $ormea)" regiunile determinante de comple-mentaritate >96C 1 i 96C 2?. 4uclele 96C 1 i 96C 2 ale regiunilor %aria ile >I? Q i P ale 9CA# interacionea)" cu regiunea Q 'elical" a moleculei CDO# iar cele dou" sec%ene 96C 3# interacionea)" cu peptidul antigenic. Interaciunea lim$ocitului cu celula pre)entatoare de antigen este mediat" i de alte molecule. ,im$ocitele Ac pre)int" pe supra$aa lor# marFerul C6 8 i recunosc antigenele asociate cu moleculele CDO I# iar lim$ocitele A' pre)int" marFerul C64 i recunosc antigenele asociate cu moleculele CDO II. Doleculele C6 4 i C68 sunt proteine mem ranare# monomor$e# participante la recunoaterea comple/elor CDO-peptide# de pe supra$aa celulelor int". 6omeniile lor e/tracelulare# prin sec%ena aminoaci)ilor# se aseam"n" cu domeniile imunoglo ulinelor. Dolecula C64 este monomeric" i este pliat" *n 4 domenii e/tracelulare# omologe cu ale moleculei de Ig# sta ili)ate prin puni <-<. C68 este o protein" dimeric"# iar con$ormaia sa spaial" pre)int" un domeniu asem"n"tor domeniului %aria il al moleculei de imunoglo ulin". 1n procesul recunoaterii antigenului# molecula C6 8 se asocia)" cu domeniul constant Q-3# al moleculei CDO clasa I# iar molecula C6 4 se asocia)" cu domeniile constante Q-2 sau P-2 ale moleculei CDO clasa II-a.

Doleculele C68 i C64 sunt importante nu numai pentru orientarea lim$ocitelor spre intele adec%ate# dar au i rol *n transducerea semnalului# deoarece co)ile lor citosolice leag" o tiro)in-Fina)"# cu rol esenial *n transmiterea semnalului acti%ator al lim$ocitului A. 9eceptorul de antigen al lim$ocitelor A recunoate $ragmentele peptidice comple/ate cu moleculele CDO I sau II. &entru $iecare organism# di%ersitatea moleculelor CDO este limitat"# dar ele leag" o larg" %arietate de peptide scurte >8-9 aminoaci)i# pentru moleculele CDO I i circa 14 aminoaci)i# pentru moleculele CDO II?. 6ei nu este o legare pe a)a speci$icit"ii# interaciunea peptidului antigenic cu moleculele CDO este caracteri)at" de o a$initate *nalt"# deoarece se sta ilete cu grup"rile :O2 i C@@O de la e/tremitatea peptidului# restul sec%enei de aminoaci)i r"m0n0nd disponi ili pentru interaciunea cu 9CA.

#ig4 =5. 6iagrama domeniilor e/tracelulare ale moleculelor CM clasa I >sus? i clasa II >.os?. <itusurile de legare ale celor dou" clase de molecule au con$iguraii tridimensionale asem"n"toare i sunt ocupate de peptidul re)ident sel$ sau nonsel$ >dup" 9oitt# 1993?.

6eoarece moleculele CDO I i II leag" peptide scurte# epitopii celulelor A sunt alc"tuii din sec%ene peptidice lineare# adic" con$iguraia epitopilor nu este dependent" de con$ormaia proteinei nati%e. 6eoarece epitopii recunoscui de lim$ocitele A sunt peptide scurte# re)ult" c" prelucrarea proteolitic" a antigenelor este o etap" o ligatorie# care precede interaciunea lor cu lim$ocitele A. rezentarea antigenelor asociate cu moleculele CD $

(ntigenele nepeptidice sunt pre)entate celulelor A# prin alte mecanisme. Doleculele C61 se aseam"n" structural cu moleculele CDO I. ;le pre)int" antigenele *n asociaie cu domeniile 'idro$o e# care $ormea)" ca%it"i# capa ile s" lege antigenele lipidice i glico-peptidice. 1n aceast" asociaie# antigenele sunt recunoscute de lim$ocitele A. <e cunosc 4 i)o-$orme distincte de molecule C6 1 >C61a# - # -c# -d?# codi$icate de 5 gene situate pe cromosomul 1. &re)entarea antigenelor lipidice *n asociaie cu moleculele C6 1 este sensi il" la agenii de acidi$icare a endosomului >cloroWuin"# concana-micin" (?. &ro a il# asocierea antigenelor lipidice cu cu C61 se produce *n compartimentul endo-somal acid. Doleculele C61 sunt impor-tante pentru reaciile de ap"rare anti-in$ecioas"# pentru c" ele pre)int" antigenele de mico acterii >acidul micolic# lipoara inomananul?# celulelor A.

Calea C61 de pre)entare a antigenelor se aseam"n" cu c"ile de pre)entare a antigenelor peptidice *n asociaie cu moleculele CDO I i II. C6 1 este asem"n"toare din punct de %edere structural# cu moleculele CDO I# dar asocierea cu antigenul are loc *n endosomul lipidic. &re)entarea antigenelor *n asociaie cu moleculele C61 este considerat" ca o cale distinct". cti'area limfocitelor -

#ig4 =64 Moleculele CM regleaz r"spunsul imun. a. @ celul" A citoto/ic" >C68? recunoate peptidul *n asociaie cu o molecul" CDO clasa I# pe supra$aa unei celule in$ectate cu un %irus. b. @ celul" A 'elper >C6 4? recunoate peptidul antigenic asociat cu o molecul" CDO clasa II# pe supra$aa unei celule pre)entatoare de antigen >C&(?. ;pitopii antigenici sunt recunoscui de 9CA# dar la procesul recunoaterii particip" i moleculele C68 i respecti% C64. C68 recunoate domeniul Q-3 al moleculei CDO I# iar C64 se leag" de domeniile Q-2-P2 ale moleculei CDO II. Cel puin trei molecule distincte sau comple/e moleculare# $i)ic independente# ale mem ranei au rol *n transducerea e$icient" a semnalului acti%ator al celulei A# $iecare $iind asociat" cu o acti%itate en)imatic" rele%ant"+ - 9CA1 Q-P i comple/ul C63 >Z-[-\?. &artea in%ariant" a 9CA este asociat" cu tiro)in-c'ina)a p59$GnN - coreceptorii C64 sau C68# asociai cu tiro)in-c'ina)a p56lcFN - C645# cu acti%itate $os$ata)ic" tiro)in-speci$ic". ,im$ocitele A mature cu 9CA Q-P sunt C64 sau C68. Celulele AC64 recunosc $ragmentele peptidice legate de moleculele CDO II# iar celulele AC6 8 recunosc $ragmentele peptidice legate de moleculele CDO I. (ceast" speci$icitate a condus la sugestia c" molecula C6 4 poate s" lege molecula CDO II# iar molecula C68 leag" molecula CDO I# am ele a%0nd rol de coreceptori de antigen. #ig4 =B. a. !uprafamilia genelor care codi$ic" imunoglo ulinele i di$erite alte molecule cu rol *n recunoaterea intercelular". Aoate aceste molecule au o structur" asem"n"toare. !amilia moleculelor multigenice# cu

rol *n recunoaterea antigenului cuprinde imunoglo ulinele# 9CA# moleculele CDO I i II. b. !amilia moleculelor monogenice cuprinde molecula )/7 >e/primat" pe celulele A i pe neuroni?# receptorii de poli&Ig >transport" Ig( prin epiteliul mucoaselor?# --CAM >o molecul" de aderen" a neuronilor?# CDB9 CD># precum i alte proteine >o protein" plasmatic" uman"# o protein" neurocitoplasmatic"? >dup" 9oitt# 1997?. Coreceptorii C64 i C68 sunt glicoproteine trans-mem ranare. !iecare este aso-ciat" cu o molecul" de tiro)in-Fina)" speci$ic" celulei A# p56 lcF. In procesul acti%"rii celulei A de c"tre antigen# coreceptorul tre uie s" se lege de aceiai molecul" CDO ca i 9CA# pentru transducerea optim" a semnalului. Interaciunea $acilitea)" transmi-terea semnalului acti%ator cu o e$icien" de p0n" la 300 de ori mai mare. C64 i C68 sunt mem- re ale supra$amiliei imuno-glo ulinelor. 6ei am ele au rol de coreceptori i se asocia)" cu aceiai tiro)in-Fina)" >p56 lcF?# nu au omologie structural". <tudiile de cristalogra$ie cu ra)e S au ar"tat c" domeniul e/tern al moleculei C64 $ormea)" o protru)ie pe $aa lateral" a moleculei# implicat" *n legarea moleculei CDO II. Dolecula C68 este $ormat" din dou" catene di$erite >Q i P? i are un singur domeniu de omologie cu molecula de Ig# la cap"tul amino. (cesta este urmat de o sec%en" cu con$iguraie nede$init" i cuprinde resturile de cistein" care permit legarea moleculelor *n dimeri $uncionali. Dolecula C6 8 are rol de coreceptor# particip0nd la recunoaterea antigenului# prin asocierea cu domeniul Q-3 al moleculei CDO I. #ig4 =F. 6i$erite aran.amente ale *C) i ale co&receptorilor s"i sunt determinate de i)o$ormele lui C645 e/primate pe celula A. &e celulele neanga.ate# C64# C645 i 9CA migrea)" independent pe supra$aa celulei. &e celulele A de memorie# cele trei molecule sunt asociate. &e celulele A'2 clonate# o i)o$orm" de C645 cu gr. mol mic"# se leag" de C64# dar acest comple/ nu se asocia)" cu 9CA. (cti%area optim" a celulei are loc *n ca)ul *n care cele trei molecule sunt asociate str0ns pe supra$aa lim$ocitului >dup" JaneKaG# 1997?. Coreceptorii se asocia)" $i)ic cu 9CA *n timpul acti%"rii celulei A. Dolecula C645 este o $os$ata)" transmem ranar" tiro)in-speci$ic". ;ste un antigen leucocitar# pre)ent pe toate celulele de origine 'ematopoietic"# alc"tuit

dintr-un domeniu e/tern %aria il i un domeniu citoplasmatic constant ce const" din dou" su domenii cu acti%itate $os$ata)ic" tiro)in-speci$ic". C645 pre)int" mai multe i)o$orme# care %aria)" cu tipul celular. Iariailitatea re)ult" din cli%area alternati%" a (9:m. Celulele A *i sc'im " i)o$orma de C645 *n timpul acti%"rii i dup" acti%are. &e lim$ocitele A neanga.ate# i)o$ormele de C645 sunt toate cu greutate molecular" mare# iar celulele A acti%ate sau de memorie e/prim" o %ariant" a C645 cu greutate molecular" mic". I)o$ormele distincte se asocia)" *n mod di$erit cu celelalte componente ale comple/ului la celulele neanga.ate i la cele de memorie# modi$ic0nd e$iciena transmiterii semnalului de acti%are. ,im$ocitele AC64 recunosc com-ple/ul molecular CDO II-epitop# e/pus la supra$aa celulei pre)entatoare de antigen >C&(? i se acti%ea)". ,im$ocitul acti%at secret" I,-2# o interleuc'in" esenial" pentru e/pansiunea clonal" a lim$ocitelor AC64 i ampli$icarea r"spunsului imun. (mpli$icarea r"spunsului imun parcurge mai multe etape+ #ig4 ==. Decanismul activrii celulei A. - dup" legarea lim$ocitului AC64 de C&(# ultima produce I,-1N - stimulea)" lim$ocitul AC64 s" produc" I,-2. I,-2 acionea)" stimulator asupra celulelor care o produc > ucl" autocrin"? i asupra lim$ocitelor *n%ecinate# care au aceiai speci$icitate a receptorului de antigen >aciune paracrin"?# e$ectul $iind e/primarea intens" a receptorilor pentru I,-2 pe supra$aa lim$ocitelor stimulateN - lim$ocitele AC64 acti%ate de I,-2 proli$erea)" i generea)" o populaie de celule imunoreacti%e# A'1 i A'2# care la r0ndul lor# prin intermediul interleuc'inelor pe care le secret"# au e$ecte acti%atoare asupra compartimentului imunit"ii celulare sau stimulea)" acti%area i proli$erarea lim$ocitelor 4 speci$ice# *n $uncie de natura antigenului. #ig4 =C4 Amplificarea r"spunsului imun. &entru ca epitopii s" $ie recunoscui# moleculele CDO tre uie s" e/pun" simultan pe supra$aa celulei# un num"r mare de peptide nonsel$# pentru un inter%al su$icient# ast$el *nc0t s" permit" lim$ocitelor A s" controle)e calitatea moleculelor CDO ale $iec"rei celule. Aimpul de generaie al unei celule A# dup" stimularea antigenic" poate $i de 4#5 ore# adic" *ntr-o s"pt"m0n"# dintr-o singur" celul" A pot s" re)ulte 10 12 celule# ceea ce ar *nsemna du larea num"rului de lim$ocite A *n organism. @

protein" de dimensiuni medii# cu 2-10 epitopi# poate $i recunoscut" de 10-1000 celule neanga.ate# *n $uncie de capacitatea moleculelor CDO de a pre)enta epitopii peptidici. Consecuti% unei in$ecii %irale# num"rul celulelor C6 8 cu speci$icitate $a" de antigenele %irale# la oarece poate s" creasc" de 10 ori. 6urata de %ia" a lim$ocitelor A este greu de e%aluat# dar moartea lor prin apopto)" este declanat" de I,-2 i de antigen. 6up" stimularea ciclului celular su aciunea antigenului# lim$ocitele A de%in $oarte sensi ile la apopto)". &roli$erarea celulelor A este stimulat" dup" ce I,-2 se $i/ea)" pe receptorul speci$ic. 6up" unul sau c0te%a cicluri# lim$ocitele A *n $a)a 7 1 sau <# de%in $oarte sensi ile la apopto)". (a se e/plic" moartea 'i ridoamelor A ca r"spuns la legarea *ncruciat" a 9CA. (popto)a celulelor A este declanat" *n dou" situaii+ su stimulatoare a antigenului i *n a sena lim$oc'inelor. aciunea

9"spunsul celulelor A la antigen se des$"oar" *n dou" $a)e# cu e%enimente moleculare distincte+ $a)a de activare i cea de proliferare. !a)a de acti%are const" *n inducerea genelor pentru sinte)a I,-2 i a receptorului de mare a$initate pentru I,-2. In aceast" $a)"# apopto)a este practic a sent". !a)a de proli$erare a lim$ocitelor A este iniiat" de $i/area I,-2 pe receptorul s"u. 6up" ce celulele A au parcurs unul sau c0te%a cicluri celulare i intr" *n $a)a 71 sau <# de%in $oarte sensi ile la apopto)". !actorul esenial al apopto)ei este I,-2. Conceptul controlului $eed- acF al intensit"ii r"spunsului imun prin $enomenul apopto)ei >reglarea propriocid"? s-a n"scut din ne%oia de a e/plica acest nou rol al I,-2# care contrastea)" cu propriet"ile sale proli$erati%e. Aeoria a$irm" c" I,-2 con$er" celulelor A# sensi ilitate la apopto)". 7radul stimul"rii antigenice determin" inducerea apopto)ei. 6up" *ncetarea stimul"rii antigenice# sinte)a I,-2 i a receptorului s"u scade. In a sena I,-2# cu rol tro$ic pentru lim$ocitele A# se iniia)" apoptoza pasiv. In%ers# dac" celulele A intrate *n ciclul di%i)iunii sunt intens stimulate de antigen# se produce apoptoza activ >indus" de antigen?. (popto)a pasi%" diminu" e/pansiunea populaiei celulelor A# i o adaptea)" la intensitatea unui r"spuns $i)iologic. (popto)a acti%" este indus" numai de acti%area 9CA. Ca re)ultat al acestor dou" $orme de apopto)"# r"spunsul $eed- acF elimin" celulele A dac" antigenul i I,-2 sunt *n e/ces sau *n de$icit. s" @ parte a celulelor A poate s" scape morii apoptotice pasi%e sau acti%e i de%in" lim$ocite A de memorie# cu %ia" lung".

1 <tructura 9CA a $ost pre)entat" 1ntr-un capitol anterior.

SURS, D, 6 & 67($U7IN, (&(6,N,

Doleculele de anticorpi ale unui ser imun sunt $oarte 'eterogene din punctul de %edere al speci$icit"ii lor de com inare cu epitopii antigenici inductori# deoarece# at0t antigenele moleculare# dar *n special cele corpusculare >%irusuri# celule?# pre)int" o mare di%ersitate de epitopi. C'iar i antigenele moleculare cele mai simple sunt mo)aicuri de epitopi. <peci$icitatea de com inare a moleculelor de anticorpi corespunde epitopilor $a" de care s-au sinteti)at. 6i%ersitatea uria" a speci$icit"ii de com inare a anticorpilor >e%aluat" la 108-109? generea)" o 'eterogenitate "ioc/imic de acelai ni%el# materiali)at" *n %ariaia sec%enei de aminoaci)i# ceea ce a constituit un o stacol ma.or *n calea studiului lor prin metode analitice# dei anticorpii se g"sesc totdeauna *n s0nge# cu e/cepia ca)urilor patologice de agamaglo"ulinemie4 (nali)a ioc'imic" a imunoglo ulinelor a $ost condiionat" de e/istena unei surse omogene de molecule de anticorpi# cu o sec%en" identic" a aminoaci)ilor. Condiia identit"ii sec%enei de aminoaci)i este *ndeplinit" de anticorpii care au aceiai speci$icitate de legare# nu $a" de un antigen# ci $a" de un singur epitop. Proteine de mielom

<ursa natural" de molecule de imunoglo ulin"# omogene# identice din punct de %edere ioc'imic >monoclonale?# este mielomul multiplu >plasmocitomul?# o a$eciune tumoral" malign"# iniiat" *n m"du%a osoas" i re)ultat" prin proli$erarea unui plasma"last. &lasmocitomul produce molecule de imunoglo uline identice din punct de %edere ioc'imic i al sarcinii electrice# denumite proteine de mielom# deoarece toate celulele tumorii sunt descendente ale unei singure celule produc"toare de anticorpi. Doleculele secretate de o tumor" de mielom se numesc proteine M >Mielom? sau paraproteine i pot s" repre)inte p0n" la 95M din totalul gamaglo ulinelor plasmatice. Aumorile de mielom apar spontan cu o $rec%en" mic" la om# c0ine# cal# o olan# oarece sau se induc e/perimental la oarecii liniilor in red :84 i 4(,4Tc. Aumora este transplanta il" *n serie.

5neori# proteinele D au aceiai sec%en" de aminoaci)i ca i imunoglo ulinele normale# dar adeseori# sinte)a catenelor patologice este incomplet"+ lipsesc di$erite sec%ene de aminoaci)i# de di$erite lungimi. 9areori# proteinele de mielom *i p"strea)" c'iar proprietatea de a lega speci$ic determinani antigenici cunoscui+ de e/emplu# 5M din proteinele D ale unei linii in red de oarece# leag" determinani antigenici ai supra$eei celulelor acteriene enterice# ceea ce sugerea)" c" tumora *i are originea *n descendenii lim$ocitelor 4# care proli$erea)" ca r"spuns la stimularea speci$ic" cu antigene ale micro iotei enterice. Aumorile de mielom# de cele mai multe ori# secret" molecule incomplete sau $ragmente de molecule imunoglo ulinice. 1n celulele tumorilor de mielom# rata sinte)ei catenelor O i , este de)ec'ili rat". 6e e/emplu# mielomul %ence&Iones# sinteti)ea)" catenele , *n mare e/ces. &roteinele 4ence-Jones sunt dimeri de lanuri , >F sau ^?. 5na din cele dou" catene , are rolul catenei O i particip" la $ormarea situsului de legare. Dolecula patologic" are acti%itate de anticorp $a" de unele componente tisulare sau $a" de antigene mici. Mielomul lanurilor grele Z sau U# ,sinteti)ea)" numai catenele O ale i)otipurilor Q iar mielomul macroglo ulinemiei Haldenstrom sinteti)ea)" molecule de IgD. Da.oritatea mieloamelor produc proteine 4ence-Jones. 1n la oratorul clinic# diagnosticul de mielom se pune dup" detectarea *n ser# prin electro$ore)"# a unei cantit"i mari de molecule ale unui i)otip de imunoglo ulin" >circa 50 mgTml?. &roteinele de mielom precipit" la 50-60 o# la pO 4-6# se redi)ol%" prin *nc"l)ire la 80-90o i reprecipit" prin r"cire. ,a pacienii cu mielom# *n special la cei cu macroglo ulinemie Haldenstrom# %0sco)itatea s0ngelui crete mult# datorit" cantit"ii e/cesi%e de proteine produse de mielom. ;liminarea proteinelor patologice se $ace prin procedeul plasmaferezei . &lasma$ere)a este te'nica de recoltare a unor %olume mari de s0nge# urmat" de reintroducerea *n organism# a celulelor sanguine suspendate *ntr-un *nlocuitor de plasm". Surse artificiale de anticor!i monoclonali1 -e+nologia +ibridomului Detoda clasic" de o inere a anticorpilor necesari studiilor clinice i de diagnostic# const" *n stimularea repetat"# prin in.ectarea antigenului *ntr-un organism cu reacti%itate imunitar" optim". C0nd titrul anticorpilor speci$ici este

ma/im# animalul este s0ngerat i se o ine serul imun >antiserul?# care este $olosit *n stare nati%" sau este utili)at pentru puri$icarea anticorpilor. Detoda are c0te%a de)a%anta.e+ - cantitatea i calitatea anticorpilor $a" de un antigen %aria)" de la un organism la altul i c'iar *ntre s0nger"rile succesi%e ale aceluiai animalN - serul imun este un amestec $oarte 'eterogen de molecule de anticorpi# c'iar i *n ca)ul *n care imuni)area se $ace cu un antigen cu grad *nalt de puritateN - oric0t de simplu ca structur" molecular"# un antigen are mai muli epitopi care stimulea)" mai multe clone de lim$ocite# ce produc anticorpi cu speci$icit"i i a$init"i di$eriteN - antigenele *nalt puri$icate conin impurit"i antigenice care induc sinte)a anticorpilor speci$ici *n cantit"i disproporionat de mariN - c'iar dup" puri$icare E proces costisitor E antiserurile conin anticorpi cu a$init"i di$erite i cu reacti%itate *ncruciat". 6in aceste cau)e# toate serurile imune sunt amestecuri de anticorpi policlonali# *n cantit"i %aria ile de la un organism la altul. @ inerea unor cantit"i mari de anticorpi cu speci$icitate de legare $a" de un epitop unic# prin metoda clasic" este imposi il". Ae'nologia modern" de o inere a anticorpilor omogeni# denumit" /i"ridoma >'i rid R mieloma? a $ost propus" de L_'ler i Dilstein >1975?# se a)ea)" pe urm"toarele principii metodologice i teoretice+ 1? (ntigenul puri$icat se in.ectea)" animalelor de e/perien". 2? ,a momentul adec%at# din splin" sau din ganglionii lim$atici# se separ" lim$ocitele. !iecare lim$ocit i plasmocitele deri%ate sinteti)ea)" molecule omogene de anticorpi# cu speci$icitate unic" de com inare pentru un singur epitop# denumii anticorpi monoclonali >AMC?. 3? ,im$ocitele 4 tr"iesc puin *n a$ara organismului# iar plasmocitele care sinteti)ea)" cea mai mare cantitate de anticorpi# nu supra%ieuiesc in vitro i de aceea culti%area sau clonarea lor nu este posi il". 4? Celulele de mielom sunt nemuritoare# datorit" capacit"ii lor de a se menine un timp nelimitat *n cultur". !u)iunea lor cu lim$ocitele 4 in vitro9 le con$er" celor din urm" proprietatea de 2nemurire3# re)ult0nd o celul" 'i rid">'i ridom?# care sinteti)ea)" i secret" anticorpi monoclonali >(DC?. (DC sunt considerai ca %arianta in vitro a proteinelor de mielom# pentru c" *n am ele

ca)uri# o clon" de lim$ocite proli$erea)" i secret" anticorpi cu o anumit" speci$icitate 5? Oi ridomul produc"tor de anticorpi motenete caracteristici at0t de la lim$ocit E adic" secret" anticorpi cu speci$icitate $a" de un antigen# c0t i de la celula de mielom# adic" este nemuritor. 6? Celulele 'i ridoma pot $i clonate indi%idual i $iecare clon" produce anticorpi speci$ici $a" de un singur determinant antigenic. ;le pot $i meninute inde$init prin pasa.e in vivo sau prin culti%are in vitro. #ig4H1. 4iote'nologia /i"ridomului de producere a anticorpilor monoclonali se a)ea)" pe $u)iunea lim$ocitului# cu celula tumoral" de mielom de oarece. (ntigenele mem ranare speci$ice ale celor dou" celule# se distri uie *n mo)aic pe supra$aa celulei $u)ionate 'eterocarion. Etapele o'inerii hi'ridomului

Detodologia o inerii unei linii celulare 'i ride# nemuritoare# produc"toare de (DC# parcurge mai multe etape. 1. J"inerea celulelor de mielom. 4a)a te'nologiei 'i ridomului a $ost o inerea unei linii celulare mutante de mielom# care nu secret" anticorpi i este de$icient" pentru /ipo/antin-guano)in-fos$o-ri o)il-trans$era)" >O7&9A?. Dielomul >plasmocitomul? este re)ultatul di%i)iunilor necontrolate ale unui singur plasma last sau ale unui precursor al s"u din linia lim$ocitar" 4. &roli$erarea necontrolat" este *nsoit" de sinte)a unor cantit"i mari de molecule omogene de imunoglo ulin"# cu propriet"i ioc'imice uni$orme. Doleculele sinteti)ate de tumorile de mielom se deose esc de imunoglo ulinele normale# prin aceea c" nu pre)int" speci$icitate de legare cu antigenul. Aumorile de mielom apar spontan la multe mami$ere# iar la om# 1M din tumori sunt mieloame. Aumorile de mielom se induc e/perimental la mai multe linii de oarece >4(,4Tc i :84?# dup" in.ectarea intraperitoneal" a uleiurilor minerale# sau dup" implantarea materialelor plastice# care produc o reacie in$lamatorie cronic". Aumorile apar dup" 120-130 de )ile i se pot menine prin pasa.e seriate la oareci din aceiai linie in red sau prin culti%are in vitro i produc cantit"i su$iciente de imunoglo uline pentru anali)a ioc'imic". :u s-au o inut mieloame care s" sinteti)e)e anticorpi cu speci$icitate de legare $a" de un antigen. Oi ridoamele se o in din linii speciale de mielom# care au dou" particularit"i mutaionale+

- nu sinteti)ea)" propria molecul" de imunoglo ulin"# ast$el c" celula 'i rid" %a produce e/clusi% molecule de imunoglo ulin" caracteristice lim$ocitului 4 normalN - sunt de$iciente pentru sinte)a en)imei O7&9A# necesar" sinte)ei aci)ilor nucleici. - &entru 'i ridare sunt disponi ile linii celulare de mielom de oarece# de o olan# de om# dar cea mai $olosit" este linia & 3-S63-(g8# i)olat" de la linia 4(,4Tc# cu urm"toarele caracteristici+ E este O7&9A-N - este tumorigen" pentru oareceN - are o $rec%en" relati% *nalt" >1T10 5-106? de $u)iune cu lim$ocitele de oareceN - nu sinteti)ea)" imunoglo ulina proprie i nu represea)" genele pentru sinte)a imunoglo ulinei *n 'i ridomN - are o e$icien" *nalt" de clonare in vitro. 6eoarece sunt de$iciente pentru sinte)a en)imei O7&9A# celulele sale nu deto/i$ic" e$ectul aminopterinei# care se adaug" *n mediul de cretere. (minopterina# un antagonist al reducta)ei acidului $olic# loc'ea)" calea sinte)ei (6: prin in'i iia sinte)ei purinelor >(# 7? i a timidinei. In mediul cu aminopterin"# celulele cu O7&9A- nu supra%ieuiesc. 54 Imunizarea. @ inerea unei populaii mari de lim$ocite 4# prin $enomenul e/pansiunii clonale# anga.ate *n sinte)a anticorpilor speci$ici $a" de un anumit epitop# se reali)ea)" prin imuni)are. (ntigenul stimulea)" mai multe clone de lim$ocite. !iecare clon" de lim$ocite acti%ate# sinteti)ea)" anticorpi speci$ici $a" de unul din epitopii antigenului. &rocedura de imuni)are >cantitatea de antigen# tipul de ad.u%ant# calea de administrare? este selectat" empiric. Cea mai un" surs" de lim$ocite r"m0ne splina de oarece i de o olan# dar *n special oarecele 4(,4Tc# pentru c" mielomul are aceiai origine i prin 'i ridare se e%it" incompati ilitatea CDO. Oi ridoamele de o olan# o inute prin $u)iunea lim$ocitelor splenice cu celule de mielom# sunt mai sta ile i anticorpii pe care *i sinteti)ea)" $i/ea)" complementul. Cantitatea de antigen necesar" pentru imuni)are depinde de imunogenitatea acestuia. (ntigenele celulare acteriene sau ale celulei eucariote sunt $oarte imunogene. (ntigenele solu ile >polipeptide# glucide# 'ormoni? sunt sla antigenice. Imunogenitatea lor crete dup" cuplarea cu 'emocianin" de

(imulus >L,O? sau cu al umina. Cea mai un" imuni)are se o ine prin in.ectare intra%enoas" sau intraperitoneal" repetat"# timp de c0te%a s"pt"m0ni sau luni# a antigenului sla imunogen. <plina se recoltea)" *nainte de atingerea titrului ma/im al anticorpilor serici. 4lastele $u)ionea)" mai uor dec0t celulele *n repaus. @ alternati%" a imuni)"rii este stimularea lim$ocitelor in vitro# prin incu area *n pre)ena antigenului. 64 #uziunea se reali)ea)" *n scopul 2imortali)"rii3 celulelor produc"toare de anticorpi i este esena iote'nologiei 'i ridomului. <copul 2imortali)"rii3este p"strarea capacit"ii lim$ocitelor indi%iduale de a secreta un singur tip de (DC# prin creterea nelimitat" *n timp# $"r" senescen"# in vivo sau in vitro# ca o consecin" a trans$orm"rii# indus" cu celule de mielom. ,im$ocitele sau imortali)at pe trei c"i+ - prin $u)iune cu celule tumorale de mielom - prin in$ecie cu un %irus trans$ormant (6: - prin trans$ecie cu (6: trans$ormant din celulele maligne sau cu (6: al unui oncodna%irus. Cea mai utili)at" metod" de 2imortali)are3 este aceea a $u)iunii cu o celul" de mielom. !u)iunea lim$ocitelor %ia ile din splin"# o inute prin de)agregare mecanic"# cu celulele de mielom O7&9A - se reali)ea)" prin amestecul lor *n proporie de 2-5 celule spleniceTo celul" de mielom. &rocesul $u)iunii este stimulat pe mai multe c"i# dar cel mai adesea se $olosete &;7 cu gr. mol. de 4000 6. (mestecul de celule se menine 3 minute *n 0#20-0#50 ml &;7 40M# la 37 0# pO 7#5-8#0. !rec%ena $u)iunii crete su aciunea impulsurilor electrice scurte# de mare intensitate. :um"rul i %arietatea 'i ridoamelor o inute este mare# ceea ce impune selecia celor produc"toare de anticorpi cu speci$icitatea dorit". B4 !elecia celulelor de /i"ridom . (mestecul de $u)iune conine celule splenice i celule de mielom ne$u)ionate# celule splenice $u)ionate *ntre ele# celule de mielom $u)ionate *ntre ele i celule /i"ridom# re)ultate prin $u)iunea splenocitelor cu celule de mielom. <elecia are ca scop# separarea celulelor de 'i ridom i eliminarea din amestec# a celorlalte tipuri celulare# ne$u)ionate sau $u)ionate neutili)a ile. In acest scop# amestecul de celule se culti%" pe mediul selectiv A) >/ipo/antin"-

aminopterin"-timidin"?# *n care splenocitele ne$u)ionate i $u)ionaii splenocit / splenocit mor *n 1-2 s"pt"m0ni# copleite $iind numeric de celulele de 'i ridom# care se di%id la $iecare 17-24 de ore. Dediul selecti% O(A permite supra%ieuirea numai a fuzionailor mielom ' splenocit i este in'i itor pentru celulele de mielom# ca i pentru $u)ionaii mielom / mielom. (ciunea sa selecti%" se a)ea)" pe urm"toarele condiii e/perimentale+ a? (minopterina din mediul O(A loc'ea)" sinte)a purinelor >(# 7? pe calea ino)in-mono$os$atului i ast$el loc'ea)" sinte)a aci)ilor nucleici. In acest mediu# celulele O7&9A- de%in dependente de surse e/terne de purine >(# 7? i de timidin". Oipo/antina din mediul O(A poate $i con%ertit" la ino)inmono$os$at# de c"tre en)ima O7&9A i se $ormea)" adeno)in-mono$os$at i guano)in-mono$os$at. Aimidina poate $i $os$orilat" la timidin-mono$os$at i timidintri$os$at# de c"tre en)ima AL. (m ele en)ime >O7&9A i AL? se g"sesc *n splenocitele normale. ? Celulele de mielom sunt O7&9A - i pe mediul selecti% O(A nu supra%ieuiesc nici celulele ca atare# nici $u)ionaii mielom-mielom. &e acest mediu supra%ieuiesc i se di%id inde$init# celulele de 'i ridom# deoarece sunt O7&9AR >codi$icat" de genomul splenocitelor? i sunt 2nemuritoare3# calitate con$erit" de celulele de mielom. 5. Clonarea. Clona este o populaie de celule identice# genetic sta ile# deri%ate din di%i)iunea unei singure celule. Clonarea se $ace prin diseminarea suspensiei celulare diluate# pe medii nutriti%e agari)ate. !iecare celul" de 'i ridom# prin di%i)iuni succesi%e# produce o colonie# adic" o clon celular. @peraia de clonare se repet" pentru a garanta o descenden" omogen". 6intre sutele de 'i ridoame clonate# este necesar" selectarea celor cu capacitate de sinte)" a anticorpilor speci$ici $a" de antigenul cu care s-a $"cut imuni)area. !ig.92. Ilustrarea sc'ematic" a etapelor producerii anticorpilor monoclonali >(DC?. (nimalele# de o icei oareci# sunt imuni)ate cu un antigen >de e/emplu# un microorganism care conine 4 antigene de supra$a" - a# # c# d?. !iecare antigen conine un num"r de epitopi# de e/emplu molecula conine epitopii # C# 3. <erul animalelor imuni)ate este policlonal i conine anticorpi (# 4# 4C# 43# C# 6. &rima treapt" *n producerea (DC este o inerea suspensiilor de celule 4 i celule de mielom. In etapa urm"toare# cele dou" populaii de celule >m i s? sunt puse *n amestec# *n pre)ena &;7# ca agent de $u)iune. <uspensia se reparti)ea)" *n godeurile unei pl"ci pentru culti%area celulelor# la o diluie adec%at" ast$el *nc0t# $iecare godeu s" nu conin" mai mult dec0t o celul" 'i rid". Celulele se culti%" *n mediu O(A pentru a

in'i a creterea celulelor de mieloma ne$u)ionate. Celulele splenice ne$u)ionate nu se di%id i mor dup" c0te%a )ile. In procesul de selecie mor i $u)ionaii s & s i m & m4 <upra%ieuiesc i proli$erea)" $u)ionaii am9 "m9 "Km9 dm i 'm. Clonarea se repet". Oi ridoamele se culti%" i se determin" speci$icitatea anticorpilor sinteti)ai. Cele care sinteti)ea)" anticorpi cu speci$icitatea necesar" se propag" *n recipiente mai mari *n care se o in 1-10 UlTml. Celulele pot $i in.ectate *n ca%itatea peritoneal" de oarece# unde se multiplic" su $orma ascitei i produc 1 mgTml anticorpi speci$ici. Oi ridoamele produc"toare de anticorpi cu speci$icitatea dorit"# se culti%" in vitro# *n culturi cu per$u)ie continu" cu mediu proasp"t sau *n ioreactoare cu capacitate mare. Cea mai simpl" te'nic" este a culti%"rii in vivo i const" *n inocularea intraperitoneal" a circa 2 / 10 6 celule 'i ridoma# la organisme ale aceleai linii genetice >pentru e%itarea $enomenului de incompati ilitate CDO?. Oi ridomul se de)%olt" intraa dominal i lic'idul de ascit" care o *nsoete# conine anticorpi *n proporie de 50M din totalul proteinelor sale. 9andamentul producerii (DC in vivo este de 100-1000 de ori mai mare dec0t in vitro. (nticorpii din lic'idul ascitic se puri$ic" prin $racionare cu sul$at de amoniu sau prin metoda cromatogra$iei cu sc'im de ioni. Avantajele 'iotehnologiei hi'ridomului

&roducerea (DC prin te'nologia 'i ridomului are un a%anta. net $a" de metoda con%enional" a o inerii serului imun# deoarece se pot o ine anticorpi speci$ici produi de c0te un 'i ridom# pentru $iecare epitop al unui antigen natural. Clonarea indi%idual" a $iec"rui 'i ridom# creea)" condiii ca $iecare clon" celular" s" secrete anticorpi cu speci$icitate unic" $a" de un singur epitop al unui antigen. Celulele de 'i ridom proli$erea)" rapid# ceea ce scurtea)" timpul necesar o inerii (DC. Oi ridoamele produc cantit"i $oarte mari de anticorpi# ce dep"esc de c0te%a ori concentraia anticorpilor din serul animalelor imuni)ate. Clonele de 'i ridom se menin inde$init prin culti%are in vitro sau in vivo.

Oi ridomul o$er" posi ilitatea o inerii AMC marcai# prin ad"ugarea precursorilor marcai radioacti% >marcare intern"?. (nticorpii marcai in situ >*n timpul sinte)ei? o$er" un a%anta. net *n raport cu anticorpii marcai dup" puri$icare >marcare e/tern"?. Darcarea e/tern" cu I 125 implic" puri$icarea imunoglo ulinelor din antiserul con%enional# dar presupune modi$icarea c'imic" i denaturarea parial"# cu pierderea proporional" a speci$icit"ii de legare. &entru marcarea intern" se $olosesc elemente radioacti%e cu perioada de *n.um"t"ire mai lung" dec0t a I125 + C14# <35# O3. Darca.ul radioacti% intern este net superior celui cu pero/ida)" i $eritin"# utili)at *n te'nicile con%enionale. Ae'nologia 'i ridomului este un model e/perimental care poate $i e/tins i la alte categorii de celule care sinteti)ea)" su stane utile >inter$eron# insulin"?. @ inerea unor 'i ri)i dintre celula de mielom de oarece i un lim$ocit normal# de la aceiai specie# *n scopul producerii (DC# a introdus un concept nou *n iologia molecular" - conceptul imortalizrii funciilor specifice difereniate . Aplicaii practice ale AMC

(DC repre)int" un reacti% imunoc'imic ine de$init i de aceea# re)ultatele o inute prin utili)area lor sunt reproducti ile. (DC se $olosesc ca reacti%i de mare speci$icitate *n cercetare# *n diagnosticul clinic# *n farmacologie pentru profila'ia i terapia unor in$ecii la om i animale# *n te'nicile de "ioc/imie analitic" pentru puri$icarea unor molecule. 1n domeniul cercetrii imunocitoc/imiceY# (DC sunt reacti%i cu *nalt" speci$icitate# utili)ai pentru identi$icarea unor proteine care se g"sesc *n cantit"i $oarte mici. 6e e/emplu# (DC marcai cu $luorescein" permit e%idenierea moleculelor mem ranare# inaccesi ile in%estigaiei cu metodele clasice. (DC au $ost marFeri e$icieni pentru identi$icarea di$eritelor su populaii de lim$ocite A i 4# a antigenelor mem ranare ale celulelor seriei mieloide i monocitare. <istemul C6 >cluster di$$erentiation? este de$init *n *ntregime pe a)a utili)"rii (DC i cuprinde acum peste 200 de marFeri de supra$a". (DC cu speci$icitate C6 se $olosesc pentru a detecta apariia sau a sena populaiilor celulare *n timpul stimul"rii antigenice. !ig. 93 <tructura fluoresceinei. 6atorit" speci$icit"ii lor de legare# (DC se $olosesc pentru a e%idenia di$erenele antigenice minore *ntre di$erite %ariante moleculare. (st$el sau identi$icat %ariaiile compo)iiei *n aminoaci)i ale spiculelor glicoproteice# consecuti%e dri$tului antigenic la %irusul in$luen)a (.

(DC se $olosesc pentru identi$icarea moleculelor neurotransmi"toare# a receptorilor sinaptici i a en)imelor de iosinte)". <-au o inut (DC $a" de receptorul de acetilcolin"# dar di$icult"ile sunt mari pentru c" neurotransmi"torii sunt antigene sla e. 1n diagnosticul serologic# serurile imune o inute prin metoda clasic" au a%ut adeseori incon%enientul ma.or al lipsei reproducti ilit"ii re)ultatelor. (DC se $olosesc ca reacti%i de mare speci$icitate pentru diagnosticul ra iei pe seciunile de esut ner%os al animalelor in$ectate# (nticorpul este marcat cu o molecul" generatoare de semnal >de e/emplu# un $luorocrom# o en)im" produc"toare de culoare prin aciunea sa asupra su stratului speci$ic# ori o particul" metalic"?. <ensi ilitatea metodei# adic" puterea semnalului poate $i m"rit" prin creterea raportului dintre molecula indicator >anticorpul marcat? i antigen. Imunocitoc'imia necesit" producerea anticorpilor speci$ici i tratamentul adec%at al esuturilor# adic" $i/area i 'istoprepararea pentru a $a%ori)a interaciunea optim" *ntre reacti% i molecula int" a 'epatitelor %irale 4# C# 6# a in$eciei cu OII >prin determinarea pre)enei antigenelor *n ser? i a unor in$ecii acteriene. &entru diagnostic se $olosesc anticorpi marcai cu $luorescein" sau metodele ;,I<( sau 9I(. (DC se $olosesc pentru diagnosticul neoplaziilor# pe a)a e%idenierii antigenelor speci$ic-tumorale. 1n acest scop se utili)ea)" (DC marcai cu i)otopi radioacti%i# cu speci$icitate $a" de C;(# (!& etc. (DC se $olosesc pentru detectarea /ormonilor polipeptidici+ A<O# !<O# OC7. Oormonii sunt molecule cu un num"r mic de epitopi. <u unit"ile Q ale di$eriilor 'ormoni sunt $oarte asem"n"toare# dar di$er" *n special prin catenele P. ;/ist" (DC speci$ici pentru am ele su unit"i i (DC care recunosc epitopii con$ormaionali ai moleculei nati%e. (DC se $olosesc *n farmacologie. In scop profilactic se $ac imuni)"ri pasi%e $a" de in$eciile acteriene care nu ene$icia)" de preparate %accinale i sunt re)istente la anti iotice+ Pseudomonas9 Clostridium4 1n scop terapeutic# (DC se $olosesc pentru tratamentul ra iei# pentru neutrali)area endoto/inelor >,&<? produse de in$eciile cu acterii 7ram negati%e# consecuti%e arsurilor. <epticemiile sunt cau)ate de o larg" %arietate de acterii 7ram negati%e# toate a%0nd *n comun lipidul ( *n structura c'imic" a ,&<. &entru tratamentul ma.orit"ii in$eciilor acteriene se utili)ea)" anti iotice# la un pre de cost in$erior *n raport cu (DC. (DC se $olosesc *n controlul fertilitii+ (DC anti-OC7 i anti-)ona pelucida sunt $olosii pentru imuni)area pasi%" a $emeilor $ertile.

<perana utili)"rii (DC *n tratamentul tumorilor s-a n"ruit. 5na din cau)e este c" ma.oritatea tumorilor umane *i au originea *n celulele epiteliale ale colonului# s0nului# pl"m0nului i prostatei# iar oncogenele acti%ate codi$ic" proteine intracelulare# inaccesi ile terapiei cu (DC. !rec%ena acestor tumori nu crete la persoanele imunosupresate# ceea ce este un argument *n $a%oarea codi$ic"rii antigenelor intracelulare# inaccesi ile sistemului imunitar. C'imioterapia o$er" mult mai multe anse de succes# la un pre de cost in$erior. 1n sistemul 'ematopoietic i imunitar# (DC se $olosesc pentru a distruge toate populaiile celulare# cu e/cepia celulelor stem# cu scopul elimin"rii celulelor maligni)ate i a precursorilor ei care poart" oncogena acti%at". (DC se $olosesc medicamente >digo/ina?. pentru neutralizarea ni%elelor to/ice ale unor

(DC se $olosesc ca ageni imunosupresori. 9eceptorilor de gre$" li se administrea)" (DC speci$ici $a" de comple/ul antigenic mem ranar C6 3# *n ca)urile *n care imunosupresia c'imic" >cu ciclosporin"? nu reuete. 1n maladiile autoimune# (DC se administrea)" pentru a reali)a o imunosupresie parial"# care s" permit" ap"rarea $a" de in$eciile cu ageni oportuniti. (DC se $olosesc pentru producerea imunoto'inelor >con.ugate (DCmedicamente?. Dedicamentele utili)ate sunt ageni citoto/ici# care# prin intermediul situsului de legare a (DC# sunt destinate s" se lege speci$ic de celulele int">de e/emplu# celulele maligne?. In acest scop sunt necesari (DC cu o a$initate *nalt" a speci$icit"ii de legare $a" de antigene speci$ic tumorale. (DC se cuplea)" cu to/ine >di$teric"# ricin"# a rin"?# cu medicamente citostatice sau cu radionucli)i. (DC se $olosesc *n te'nicile de "ioc/imie analitic"# *n scopul puri$ic"rii proteinelor# su $orma coloanelor de a$initate imunoa sor ante. (DC sunt imo ili)ai pe suporturi *n coloane solide >imunosor eni?# prin care este trecut amestecul de proteine. In coloan" sunt reinute speci$ic# moleculele care se leag" cu (DC. (st$el se puri$ic" proteine care se g"sesc *n amestec# *n concentraii $oarte mici >I!:?.

YImunocitoc'imia este o te'nic" de la orator care permite identi$icarea %i)ual" a moleculelor int" *n esuturi i celule# prin interaciunea speci$ic" a anticorpilor marcai# cu antigenul.

&,C NIS&, D, P8R R, N-IINF,C@I( S8

<istemul imunitar a e%oluat i s-a comple/at structural i $uncional# *n condiiile presiunii selecti%e permanente pe care o e/ercit" agenii in$ecioi# ce tind s" in%ade)e# s" coloni)e)e i s" se multiplice *n esuturi. <tructura sistemului imunitar este o re$lectare direct" a interaciunilor sale cu di%ersitatea agenilor in$ecioi care-l stimulea)". Cele dou" $ore opo)ante s-au modelat reciproc# *ntrun con$lict constant. 7a)dele care nu neutrali)ea)" agentul in$ecios sunt sortite morii# iar cele care supra%ieuiesc sunt mai ine adaptate s" re)iste in$eciilor ulterioare. &ro lema 'eterogenit"ii antigenice a %irusurilor i acteriilor patogene este important" nu numai din punct de %edere teoretic# ci este esenial" pentru aspectul practic al vaccinrii# deoarece e/ist" riscul stimul"rii r"spunsului imun $"r" e$icien" protectoare. Consecina stimul"rii unui r"spuns imun ine$icient poate $i agra%area maladiei in$ecioase sau c'iar acti%area mecanismelor patogenit"ii autoimune. ;%aluarea imunogenit"ii moleculelor structurilor supra$eei %irusurilor i acteriilor este di$icil"# deoarece o molecul" *n soluie poate a%ea o alt" con$iguraie a epitopilor dec0t *n ansam lul structural nati%. 6i$erena deri%" din raporturile sale spaiale cu moleculele %ecine# pe supra$aa agentului in$ecios. 6in aceast" cau)"# r"spunsul imun al organismului# la stimularea cu un agent patogen# r"m0ne un domeniu de studiu practic nelimitat. @ alt" complicaie este consecina $aptului c" speci$icitatea antigenic" a unor molecule este# uneori# %aria il" de la o tulpin" la alta# at0t la %irusuri c0t i la acterii. 9"spunsul imun tre uie s" contracare)e nu numai di%ersitatea antigenelor la care este e/pus# ci tre uie s" g"seasc" soluia de r"spuns# pentru %ariaia ioc'imic" a unei structuri# la di$erite tulpini de microorganisme. R8SPUNSU7 I&UN SP,CIFIC N-IINF,C@I(S 9"spunsul imun anti acterian i anti%iral are at0t o component" 'umoral" c0t i una celular". &re%alena unuia sau altuia dintre cele dou" compartimente este di$erit" *n $uncie de natura agentului in$ecios. 6e cele mai multe ori# predomin" r"spunsul imun mediat 'umoral# iar *n ca)uri mai rare >de e/emplu# in$ecia cu M4 tu"erculosis sau cu M4 leprae? este preponderent r"spunsul imun mediat celular.

9"spunsul imun $a" de di$erite antigene ale agenilor patogeni are grade %ariate de protecie antiin$ecioas"# *n $uncie de natura agentului# de gradul s"u de %irulen" i de natura r"spunsului imun pe care-l iniia)". 5neori# r"spunsul imun antiin$ecios este puin ene$ic pentru ga)d" sau este c'iar detrimental# din di$erite cau)e+ - r"spunsul imun este orientat $a" de componente moleculare neeseniale ale agentului in$ecios. <timularea antigenic" acti%ea)" un r"spuns imun ine$icient. (nticorpii nu au e$ect neutrali)ant al in$ecio)it"ii# pentru c" structurile de care se leag" speci$ic nu constituie situsuri critice ale agentului patogen >de e/emplu# anticorpii anti$lagelari# care in vitro determin" aglutinarea# in vivo au o e$icien" mai sc")ut"# limitat" la imo ili)area celulelor acteriene?N - r"spunsul imun poate produce le)iuni mai puternice i mai e/tinse dec0t *nsui agentul in$ecios. In$ecia propriu-)is" produce le)iuni minime# dar acti%area imunit"ii mediate celular ampli$ic" le)iunile tisulare i gr" ete e%oluia procesului in$ecios >de e/emplu# le)iunile consecuti%e in$eciei cu %irusul coriomeningitei lim$ocitare la oarece i li)a 'epatocitelor in$ectate cu %irusul 'epatiei 4 umane?. Componentele structurale antigenice ale unui agent in$ecios# care stimulea)" un r"spuns imun protector se numesc situsuri critice sau structuri imunodominante. 5n r"spuns imun e$icient >protector? tre uie s" ai " ca re)ultat $inal# le)area structurii peretelui acterian# $ungic sau a *n%eliului %iral# prin aciunea com inat" a anticorpilor i a proteinelor complementului. &tructura antigenic* a celulei 'acteriene Dulte molecule acteriene modulea)" acti%itatea sistemului imunitar# a%0nd ori un e$ect stimulator >ad.u%ant?# ori diminu" reacti%itatea imunitar". ;le modi$ic" r"spunsul celulelor imunitare competente# prin mecanisme de semnali)are. 6e aceea se numesc molecule imunomodulatoare4 ;$ectele lor reali)ea)" un ec'ili ru comple/ *ntre mecanismele de recunoatere i neutrali)are a antigenelor i %irulena acterian". Imunomodulatorii pot a%ea e$ecte asupra lim$ocitelor A# 4 i asupra macro$agelor# similare cu cele produse de citoc'ine. Imunomodulatorii cu acti%itate mitogenic"# induc activarea policlonal a lim$ocitelor A i 4# care se deose ete de acti%area speci$ic". 9e)ultatul este sinte)a anticorpilor cu speci$icit"i multiple# dintre care# o $racie sunt speci$ici $a" de agentul in$ecios. 6ei $"r" speci$icitate# sinte)a rapid" a anticorpilor poate $i su$icient" pentru stoparea in$eciei. Doleculele imunomodulatoare modi$ic" nu numai reacti%itatea imunitar"# ci i mo ilitatea celulelor# *n special a $agocitelor >de e/emplu# pot in'i a migrarea

macro$agelor din $ocarul in$lamator?. 6ac" moleculele imunomodulatoare persist" *n esuturi# stimulea)" cronic sistemul imunitar# cu e$ecte patologice autoimune# cea mai cunoscut" $iind artrita de ad.u%ant. Dulte molecule imunomodulatoare de origine acterian" au e$ecte mai generale# care se e/tind asupra altor sisteme+ ele produc $e r"# in$luenea)" sistemul de coagulare sanguin"# concentraia ionilor# a !e etc. Doleculele acteriene cu rol imunomodulator sunt locali)ate pe supra$aa celulei. ;le sunt polimeri ai *n%eliului# dar i molecule e/cretate# cu e$ect to/ic. &e de alt" parte# e$iciena r"spunsului imun anti acterian# depinde de raportul dintre reacti%itatea sistemului imunitar i mecanismele de autoprotecie ale acteriei# menite s" de%ie)e r"spunsul imun. 6in punct de %edere antigenic# acteriile interacionea)" cu ga)da prin modalit"i di%erse. ,a o e/tremitate sunt cele lipsite de atri utul in%a)i%it"ii# care produc cantit"i mici de to/ine# iar la cealalt"# sunt acteriile care cresc cu o rat" *nalt" *n esuturi sau *n s0nge i produc septicemii. 5nele acterii pre)int" determinani antigenici asem"n"tori ca structur" c'imic"# moleculelor sel$ ale organismului ga)d". 9"spunsul imun speci$ic %a $i a sent ori nesemni$icati%# sau e$ectorii imunitari dau reacii *ncruciate cu moleculele sel$. (lteori# supra$aa acterian" posed" determinani antigenici de natur" proteic" sau poli)a'aridic"# inductori ai r"spunsului imun. Cele mai semni$icati%e structuri acteriene din punct de %edere antigenic sunt cele parietale+ peptidoglicanul din peretele 7ram po)iti% i 7ram negati%# peptidoglicolipidele din peretele comple/ al mico acteriilor i structurile parietale ale spiroc'etelor. Aoate tipurile structurale de perete conin murein" >peptidoglican?# dar se deose esc prin alte numeroase componente c'imice cu semni$icaie antigenic". 5nitatea minim" a peptidoglicanului care p"strea)" acti%itatea imunostimulatoare este :-acetil-muramil-,-alanina-6-i)oglutamina > muramil dipeptid- D6&?. (t0t componenta glucidic" c0t i aminoaci)ii D6& au $uncie imunomodulatoare. ( II-a clas" de polimeri imunomodulatori sunt acizii teic/oici i lipoteic/oici ai acteriilor 7ram po)iti%e. &roteinele de supra$a" asociate peretelui celular au# uneori# semni$icaie antigenic". Cea mai cunoscut" este proteina M de la !tr4 p7ogenes >grup (?# care con$er" speci$icitate de tip. <-au identi$icat peste 80 de %ariante antigenice# cu rol de $actor de %irulen". Componentele antigenice eseniale ale mem ranei e/terne a acteriilor 7ram negati%e sunt lipopoliza/aridele >,&<?# a c"ror speci$icitate este con$erit"

de poli)a'aridul @# o structur" imunodominant" care cuprinde p0n" la 40 de unit"i glucidice. :umeroasele %ariaii structurale ale catenei glucidice determin" e/istena unui num"r corespun)"tor de %ariante antigenice acteriene. ,&< este componentul principal al acteriilor 7ram negati%e# acti%ator al r"spunsului imun *n"scut# prin componentul s"u lipidic. Aermenii 2,&<3 i 2endoto/in"3 sunt $rec%ent utili)ai cu acelai sens. ,&< tre uie s" desemne)e moleculele puri$icate# iar termenul de 2endoto/in"3 semni$ic" ,&< i proteinele asociate din mem rana e/tern"# eli erate din supra$aa celulei. ,&< sunt molecule amfifile# ceea ce condiionea)" interaciunea lor cu celulele organismului. ;le au o regiune /idrofo"# capa il" s" sta ileasc" leg"turi cu lipidele mem ranare i o parte /idrofil# care poate r"m0ne *n $a)a apoas". @ prim" modalitate de interaciune este cea direct# dintre molecula am$i$il" i supra$aa celulei. Dolecula ,&< poate $i inserat" *n mem rana celulei# prin .um"tatea 'idro$o " sau se leag" de receptorii mem ranari prin .um"tatea 'idro$il". ( II-a modalitate de interaciune a moleculei ,&< cu celulele este indirect# mediat" de proteina care leag" >"inding? (&< >,4&?. Dolecula de ,&< este recunoscut" i legat" de o glicoprotein" plasmatic" de 60 F6# din categoria proteinelor de faz acut. ;ste sinteti)at" de 'epatocite i are un situs de legare pentru lipidul (. Poliza/aridele capsulare ale unor acterii patogene 7ram po)iti%e i negati%e# li ere *n supernatant sau legate de perete# sunt $oarte imunogene dac" conin lipide sau proteine terminale. Iariaia lor ioc'imic" deri%" nu numai din sc'im area ordinii unit"ilor glucidice componente# ci# *n primul r0nd# din posi ilitatea leg"rii mono)a'aridelor de oricare din cei 6 atomi ai 'e/o)ei adiacente. 6i$erenele de sec%en" a mono)a'aridelor generea)" determinani antigenici care nu reacionea)" *ncruciat cu anticorpii speci$ici $a" de un alt determinant cu aceiai compo)iie. )o'inele de natur" proteic" sunt imunogene i stimulea)" r"spunsul imun cu e$ect protector. &eretele celular al mico"acteriilor este $oarte re)istent la aciunea $actorilor litici. In alc"tuirea sa intr" glicolipide# $ormate din resturi de acid micolic# legai co%alent de resturile de ara ino-galactan > lipoara"inogalactan? i ara inomanan >lipoara"inomanan?. Comple/ul glicolipidic se leag" de peptidoglican# prin puni $os$at. Dem rana e/tern" a spiroc'etelor este ogat" *n lipide i lipopeptide# stimulatoare ale r"spunsului imun i ale reaciilor de 'ipersensi ilitate. 4acteriile to/igene# lipsite de in%a)i%itate > C4 dip/teriae9 C4 tetani# clostridiile enterice? stimulea)" r"spunsul imun 'umoral antito/ic.

4acteriile in%a)i%e determin" in$ecii regionale sau generali)ate >sistemice?. Da.oritatea se multiplic" *n spaiile e/tracelulare# unele au locali)are $acultati% intracelular"# iar altele sunt o ligat intracelulare. 4acterii cu locali)are e/tracelular" 4acterii $acultati% intracelulare# 4acterii o ligat intracelulare !treptococcus M7co"acterium *icAettsia sp tu"erculosis !tap/7lococcus M4 leprae C/lam7dia sp -eisseria sp %rucella sp4 (isteria Esc/eric/ia coli monoc7togenes .le"siella sp4 ;ersinia sp4 Proteus sp4 !almonella t7p/i Pseudomonas !4 parat7p/i sp4 %acteroides )reponema fragilis pallidum aemop/ilus influenzae Actinom7ces sp4

4acteriile cu locali)are e'tracelular induc un rspuns imun mediat /umoral. (cti%area lim$ocitelor 4 este re)ultatul cooper"rilor celulare macro$aglim$ocit 4-lim$ocit A'. In $ocarul de in$lamaie# acteriile cu locali)are e/tracelular" determin" $ormarea a cesului# *n care predomin" polimor$onuclearele 4acteriile cu locali)are intracelular" induc# preponderent# un rspuns imun mediat celular. &ersistena lor *n celulele $agocitare are ca re)ultat $inal# $ormarea granulomului. Cele mai tipice pentru natura lor imunitar" sunt granuloamele care se $ormea)" *n in$eciile cu M4 tu"erculosis i cu M4 leprae. Mecanisme prin care microorganismele evit* ap*rarea gazdei

In$ecio)itatea microorganismelor patogene este dependent" de capacitatea lor de a coloni)a esuturile ga)dei i de a contracara mecanismele de ap"rare ale ga)dei. Capacitatea de %ariaie rapid" a moleculelor de supra$a" este o tr"s"tur" e%oluti%" comun" *n tot spectrul patogenilor. <e cunosc e/emple de acterii patogene care au ela orat mecanisme ce permit variaia antigenic rapid" i e$icient". Doleculele de supra$a" pre)int" regiuni ine conser%ate#

ancorate *n mem ran"# dar nu sunt niciodat" e/puse contactului cu sistemul imunitar al ga)dei. 9ata *nalt" de mutaie produce un num"r mare de %ariante antigenice. (st$el# *n patogene)a gonoreii i meningitei# cau)ate de -eisseria sp# rolul $im riilor este esenial pentru ataarea de celulele epiteliale. Doleculele de $im rilin" e%idenia)" sec%ene constante# semi%aria ile i 'iper%aria ile. 9egiunile 'iper%aria ile determin" antigenitatea acestor structuri i tropismul $a" de celulele epiteliale ale tractului urogenital uman. -4 meningitidis este capsulat" i numai $im riile proemin" dincolo de limitele stratului poli)a'aridic. 6e aceea# pierderea $im riilor in'i " proprietatea de aderen". &oli)a'aridul capsular este repelent pentru $agocite# deoarece celulele $agocitare nu au receptori pentru poli)a'aridele capsulare. 5neori# acestea sunt asem"n"toare oligo)a'aridelor din moleculele glicoproteice proprii organismului# ceea ce e/plic" sla a lor imunogenitate. Aulpinile %ariante# necapsulate sunt mai puin %irulente# dar au a%anta.ul c" nu sunt recunoscute de anticorpii speci$ici $a" de antigenele capsulare. ( sena capsulei# la aemop/ilus influenzae# con$er" celulei o capacitate sporit" de a se ataa i de a in%ada celulele epiteliale ale ga)dei. ,a !tr4 p7ogenes s-au identi$icat peste 80 de serotipuri di$erite# ce re)ult" din mutaiile puncti$orme ale genei ce codi$ic" proteina M# component" a peretelui celular. ,&< prote.ea)" $i)ic celula $agocitelor# constituind un strat oligo)a'aridul terminal# con$er" o t7p/imurium s-au identi$icat peste speci$icit"i serologice. acterian" de aciunea complementului i a protector# iar di%ersitatea glucidelor din %ariaie antigenic" e/trem de larg". ,a. !4 2000 de %ariante antigenice# cu tot at0tea

,a spiroc'eta %orrelia /ermsii >agentul $e rei recurente# caracteri)at" prin cri)e $e rile# separate de inter%ale asimptomatice?# episoadele $e rile semni$ic" apariia i multiplicarea unei noi %ariante antigenice. (ntigenul %ariant este o protein a undent" a mem"ranei e'terne >ID& B varia le ma.or protein?. 5nul dintre cele mai ine studiate e/emple de %ariaie antigenic" i rolul ei *n in$ecie# este al tripanosomelor a$ricane care produc oala somnului. )4 "rucei produce o para)itemie# care crete i descrete# deoarece generea)" su populaii care sunt %ariante antigenice ale unei glicoproteine specifice >I<7 E variant-speci$ic glGcoprotein? a supra$eei celulei. 5ndele de para)itemie constituie tr"s"tura principal" a in$eciei cronice# care persist" p0n" c0nd indi%idul tratat se %indec"# ori netratat# moare. In stadiile terminale# agentul patogen in%adea)" alte esuturi i capacitatea de ap"rare este dep"it". 1n cursul in$eciei# num"rul mare de para)ii# d" natere la o su populaie care poart" o I<7 modi$icat" ioc'imic i antigenic# ce scap" controlului imediat

al r"spunsului imun. 5lterior# aceast" %ariant" nou" este recunoscut" de sistemul imunitar# dar generarea rapid" a noilor I<7 *mpiedic" eliminarea in$eciei. Capacitatea para)itului de a se comuta la di$erite I<7 duce la epui)area $orelor de ap"rare ale ga)dei *n $a)ele terminale ale olii. In$ecia cu Plasmodium falciparum este persistent"# recurent" i se caracteri)ea)" printr-un ta lou $oarte %aria il al mani$est"rilor clinice. Imunitatea speci$ic" se de)%olt" lent i numai dup" in$ecii ample i repetate# se consolidea)" un r"spuns imun protector $a" de in$ecia se%er"# dar este o imunitate incomplet" i incapa il" s" sterili)e)e organismul. In ariile geogra$ice cu o rat" *nalt" de transmitere a para)itului# apar complicaii se%ere# cu mortalitate crescut"# la copiii su 5 ani. Copiii care dep"esc 5 ani# au imunitate adec%at" pentru a controla in$ecia. <tarea de protecie persist" tot restul %ieii# *n condiiile inocul"rii continue a sporo)oiilor de la 0narii in$ectai. 9"spunsul imun $a" de antigenele para)itului este mediat de anticorpi >Ig7?. ,a pacienii cu <I6( >care e/acer ea)" dramatic e%oluia tu erculo)ei sau in$eciile oportuniste?# malaria nu are o e%oluie mai se%er"# ceea se *nseamn" c" sinte)a Ig7 este independent" de celulele A. ;ritrocitele in$ectate sunt ingerate de macro$age# independent de I!:. 6i%ersitatea antigenic" a tulpinilor de Plasmodium este argumentat" de miniepidemiile de malarie se%er"# care apar *n )onele endemice mari. Aulpinile mai %irulente au propriet"i antigenice i de citoaderen modi$icate. 6i$erenele propriet"ilor de aderen" produc mani$est"ri se%ere# inclusi% malarie cere"ral# iar modi$ic"rile de antigenitate permit para)itului s" persiste i s" produc" in$ecii repetate. Doleculele de supra$a" ale eritrocitelor in$ectate cu P4 falciparum pre)int" variaie antigenic# ceea ce condiionea)" citoaderena. (derena eritrocitelor in$ectate# de esutul cere ral# renal sau 'epatic# este cau)a malariei se%ere. 7enerarea continu" a di$eritelor populaii %ariante antigenice de para)ii# cu di$erite speci$icit"i de aderen"# este cau)a in$eciilor persistente caracteri)ate prin unde de para)itemie i mani$est"ri clinice speci$ice malariei. 6i%ersitatea $enotipic" corespun)"toare %ariaiei antigenice este o strategie $oarte e$icient" pentru adaptarea la presiunea selecti%" pe care o e/ercit" e$ectorii r"spunsului imun i la di%ersitatea de particularit"i structurale i $uncionale ale esuturilor ga)dei. Decanismele de %ariaie sunt deose it de importante pentru succesul disemin"rii unei in$ecii *n populaia ga)d". R8SPUNSU7 I&UN 4N INF,C@II7, /IR 7, In$eciile %irale constituie# *nc"# o cau)" ma.or" a mor idit"ii i mortalit"ii# dei %accinarea a redus incidena in$eciilor se%ere >polio# oreion# ru.eol"#

ru eol"? i a eradicat %ariola. Cunoaterea mecanismelor r"spunsului imun anti%iral este important" pentru e%aluarea pro lemelor clinice de $ond >de e/emplu# dinamica r"spunsului imun? i pentru c"utarea unor noi metode de o inere a %accinurilor. Interaciunea %irusurilor cu organismele# este modulat" de sistemele de ap"rare *n"scute i do 0ndite. &entru a se perpetua *ntr-o populaie# %irusul tre uie s" $ie %irulent# dar su$icient de $le/i il *n modularea %irulenei# pentru a se p"stra *n populaia sensi il". In perspecti%" e%oluti%"# interaciunea %irusului cu organismul sensi il tre uie s" con$ere superioritate %irusului. 6ac" este prea %irulent i nu poate $i controlat de imunitatea ga)dei# re)ultatul poate $i moartea i *n $inal dispariia ga)dei. 6ac" este lipsit de %irulen"# %irusul %a $i eliminat prea rapid de sistemul imunitar al ga)dei i poate s" dispar" prin incapacitatea de a se perpetua. (deseori# %irulena %iral" este diminuat" prin mutaie i *n acelai timp se selectea)" ga)de mai ine adaptate imunitar# re)ult0nd un ec'ili ru $luctuant# *n care coe/ist" at0t ga)da c0t i %irusul. &roteinele %irale# componente ale capsidei i peplosului# sunt imunogene i induc un r"spuns imun intens *n organismul in$ectat. 9"spunsul imun anti%iral este orientat at0t $a" de antigenele e/primate pe supra$aa %irionilor# c0t i $a" de antigenele pre)entate pe supra$aa celulei in$ectate. (ntigenele e/puse pe supra$aa celulei in$ectate# di$er" *n $uncie de natura %irusului >nud sau acoperit? i de mecanismul matur"rii %irionilor. Celulele in$ectate cu %irusuri nude >adeno-# reo-# entero%irusuri? e/pun pe supra$aa lor proteine %irale asociate cu moleculele CDO I# iar cele in$ectate cu %irusuri *n%elite# *n special cu %irusuri care se maturea)" prin *nmugurire la ni%elul mem ranei# e/pun glicoproteinele peplosului# inserate *n arii limitate ale mem ranei. In am ele ca)uri# celula in$ectat" de%ine inta mecanismelor de recunoatere imunitar". (ntigenele e/puse pe supra$aa %irionului sau a celulei in$ectate# stimulatoare ale r"spunsului imun# se numesc antigene protectoare. (ntigenele intrinseci ale %irionului# au rol protector nesemni$icati%# deoarece nu %in *n contact cu sistemul imunitar# dec0t *n ca)ul *n care se sinteti)ea)" *n e/ces i se elimin" din celula in$ectat". (ntigenele %irale li ere sau asociate %irionului# stimulea)" rspunsul imun /umoral# iar cele pre)entate pe supra$aa celulelor in$ectate# stimulea)" rspunsul imun celular. (cti%area unuia sau altuia dintre compartimentele imunit"ii# depinde de mai muli $actori+ de tipul de in$ecie >primar" sau secundar"?# de re)ultatul interaciunii %irus-celul" >li)" sau in$ecie persistent"? etc.

Iirusurile care produc infecii acute# determin" o competiie *ntre replicarea %iral" i e$ectorii r"spunsului imun. 9e)ultatul este *ns"n"toirea sau moartea ga)dei. &entru %irusurile care produc infecii cronice# scara de timp este mai lung". Iirionii sau antigenele %irale din s0nge sau din alte $luide# determin" $ormarea comple/elor (g-(c# cu mani$est"ri patologice secundare. (lteori# anticorpii anti%irali i celulele A acti%ate# pot produce le)iuni ale celulelor in$ectate. Da.oritatea mani$est"rilor clinice care *nsoesc in$eciile %irale cronice# sunt consecina r"spunsului imun al ga)dei# stimulat de antigenele %irale. +*spunsul imun primar Decanismele de ap"rare nespeci$ic" >inter$eronul# aciunea celulelor :L# r"spunsul mucociliar? pot in$luena re)ultatul in$eciei. 6up" in$ecia %iral" primar" sau dup" administrarea %accinului inacti%at# se stimulea)" r"spunsul imun mediat celular>citoto/ic? i 'umoral. 9"spunsul 'umoral# cu sinte)a anticorpilor# are o dinamic" lent". In stadiul acut al in$eciei# titrul anticorpilor speci$ici este a ia detecta il# dar atinge %aloarea ma/im" la 2-4 s"pt"m0ni i persist" s"pt"m0ni sau luni# *n $uncie de ga)d"# %irus etc. &entru %irusul $e rei gal ene i cel ru.eolic# ni%elul detecta il al anticorpilor persist" tot restul %ieii. 6up" in$ecia primar" sau dup" %accinarea cu preparatul %iral atenuat sau inacti%at# se sinteti)ea)" anticorpi din clasele IgD# Ig( i Ig7. <inte)a anticorpilor este indus" de marea ma.oritate a %irusurilor# dar rolul protector al imunoglo ulinelor este %aria il de la un %irus la altul# *n $uncie de sediul multiplic"rii# care la r0ndul s"u condiionea)" mani$est"rile patologice ale in$eciei. 1n $uncie de mecanismul patogene)ei# se disting trei tipuri de %irusuri+ - %irusurile care in$ectea)" mucoasele tractului respirator i digestiv i r"m0n la poarta de intrare+ rino%irusuri# in$luen)a# parain$luen)a# %irusul respirator sinciial# entero%irusuriN - %irusuri care in$ectea)" i se multiplic" la ni%elul mucoaselor# iar ulterior se disemineaz pe cale sanguin"# lim$atic" sau a/onal"# pentru a in$ecta %iscerele sau sistemul ner%os central+ %irusul poliomielitei# ru.eolic# al oreionului# 'erpes simple/# po/# %irusul 'epatitei (N - %irusuri inoculate direct n snge# prin muc"tur"# *nep"tur"# prin traume# iar de aici se r"sp0ndesc la organele int"+ OII# %irusul 'epatitei 4# %irusul ra ic#

%irusurile

ence$alitogene>al$a-

$la%i%irusuri?.

+olul anticorpilor 3n imunitatea antiviral* Cei mai importani anticorpi cu rol protector anti%iral sunt cei care au speci$icitate de com inare $a" de epitopii critici ai supra$eei %irionilor. ,egarea anticorpilor cu %irionul se $ace dup" modelul complementarit"ii spaiale *ntre epitopii antigenelor supra$eei %irale i situsul de com inare al anticorpilor. ;$ectul principal al interaciunii anticorpilor cu particulele %irale# *n $a)a $luid"# este neutralizarea# adic" pierderea in$ecio)it"ii %irionilor. &entru producerea e$ectului neutrali)ant# este necesar" legarea mai multor molecule de anticorpi# care tre uie s" recunoasc" o structur" esenial" a %irionului# denumit" situs critic. 6e e/emplu# $agii din seria A-par au un singur situs critic i in$ecio)itatea lor este anulat" de legarea anticorpilor speci$ici la ni%elul $i relor co)ii. Iirionul gripal are situsuri critice multiple+ anticorpii anti-O( sunt neutrali)ani# cei speci$ici anti-:( au e$ect neutrali)ant minim# iar anticorpii anti-protein" D sunt total ine$icieni. ,a adeno%irusuri# situsurile critice sunt capsomerele /e'onice i fi"ra pentonic. (nticorpii speci$ici $a" de aceste structuri sunt neutrali)ani# iar anticorpii anti-penton nu diminu" in$ecio)itatea. &entru OII# situsul critic este )ona prin care %irionul se ataea)" de moleculele C6 4 ale lim$ocitului A'. (nticorpii speci$ici $a" de situsul de legare al %irusului ;pstein-4arr de receptorul pentru C3 al lim$ocitului 4# au e$ect neutrali)ant. Doleculele de anticorpi legate pe supra$aa %irionului *n%elit $ormea)" comple/e# care# in vivo sau in vitro# iniia)" $i/area complementului. 9e)ultatul $inal este liza virionilor *n%elii. 5n alt e$ect al interaciunii anticorpilor cu %irionii# in vitro# este agregarea. !enomenul este dependent de un prag limit" a densit"ii %irionilorTunitate de %olum. (gregarea %irionilor este *nsoit" de diminuarea infeciozitii# deoarece c'iar *n ca)ul unui mare e/ces al moleculelor de anticorpi# unele particule %irale din interiorul agregatului# r"m0n *n a$ara contactului cu anticorpii neutrali)ani i *i p"strea)" in$ecio)itatea# denumit" infeciozitate rezidual sau persistent. (gregarea %iral" $iind dependent" de un prag al densit"ii %irionilor# este un $enomen care se mani$est" numai in vitro. In vivo nu se reali)ea)" niciodat" o densitate limit" a %irionilor care s" produc" acest e$ect. (nticorpii anti%irali ce se sinteti)ea)" *n cursul r"spunsului imun primar# au energie mic" >a$initate? de legare cu situsurile antigenice ale %irionilor i se disocia)" uor# l"s0nd o in$ecio)itate re)idual". (lteori# moleculele de anticorpi nu acoper" situsurile critice ale %irionilor# care condiionea)" iniierea procesului in$ecios.

;$ectul protector al anticorpilor circulani este demonstrat pentru in$eciile cu $a)" %iremic"# a%0nd o contri uie esenial" la *nc'eierea procesului in$ecios. (nticorpii reduc *nc"rc"tura de %irus i diminu" in$ecio)itatea %iral"# consecina $iind sc"derea num"rului de celule in$ectate# uur0nd ast$el sarcina celulelor Ac de a elimina celulele in$ectate. 1n cursul in$eciei secundare# anticorpii se sinteti)ea)" rapid# la titru *nalt. (nticorpii se $olosesc pentru pro$ila/ia i terapia in$eciilor %irale. Imuni)area pasi%" cu ser imun# diminu" riscul in$eciei %irale i se $olosete *n tratamentul in$eciilor sta ili)ate. Protecia mucoaselor4 ,a ni%elul mucoaselor# imunitatea anti%iral" este dependent"# *n primul r0nd de Ig(. <inte)a local" de anticorpi >*n special Ig(? dup" stimularea %iral" este relati% independent" de r"spunsul imun sistemic. (nticorpii sinteti)ai la ni%elul mucoaselor au e$ect protector# *n a sena anticorpilor sistemici. (nticorpii din secreiile mucoaselor *ndeplinesc dou" $uncii ma.ore $a" de agenii patogeni %irali+ e'cluderea imun i neutralizarea infeciozitii virale. E'cluderea imun este un mecanism protector $oarte important la ni%elul mucoasei respiratorii i pare a $i dependent nu numai de imunoglo uline# ci i de stratul de mucus care acoper" epiteliul. ( sena acti%it"ii ciliare este asociat" cu in$ecii se%ere ale tractului superior# suger0nd importana arierei mucoase. sIg( neutrali)ea)" in$ecio)itatea %irionilor# iar secreia mucoas" este *n primul r0nd o arier" mecanic" ce loc'ea)" adsor ia %irionilor pe mem rana celulelor epiteliale. Ig( din secreii are rol esenial *n re)istena la rein$ecia cu %irusurile care se multiplic" e/clusi% *n celulele epiteliale ale mucoaselor digesti%e i respiratorii. Iaccinarea oral" cu %irus polio inacti%at are ca scop stimularea imunit"ii mucoasei. 6ac" au titru crescut# anticorpii serici >IgD? di$u)ea)" *n mucoase. :u se tie *n ce m"sur" anticorpii din secreii sau din s0nge prote.ea)" epiteliul tractului respirator in$erior. #ig4 HB. Mecanismele protectoare ale mucoasei tractului respirator# $a" de in$ecia %iral". 6up" inoculare# particulele %irale sunt neutralizate >1? de anticorpi# care a.ung la supra$aa mucoasei prin transport transepitelial >Ig( polimeric?# prin di$u)ie >Ig7? sau prin administrare arti$icial" >pic"tur" spraG# aerosol?. (lt mecanism este 2 e'cluderea imun3 >2? i se produce c0nd particulele %irale sunt legate de anticorpi# incluse *n mucus i *ndep"rtate prin acti%itate mucociliar". (nticorpii pot di$u)a prin mucus pentru a neutrali)a %irusul progen i particulele care trec prin stratul

de mucus. :eutrali)area %iral" poate s" se produc" intracelular >3?# *n timpul transportului intracelular al Ig( polimeric. ,a supra$aa a)olateral" a celulelor epiteliale in$ectate# Ig7 se poate $i/a speci$ic de proteinele mem ranare codi$icate de %irus i media)" liza celulei >4? dup" $i/area complementului sau prin $enomenul (6CC. Celulele in$ectate de %irus pot $i li)ate su aciunea lim$ocitelor Ac speci$ice. ,i)a celulelor epiteliale uurea)" trecerea e$ectorilor imunitari *n am ele direcii >dup" Helt)in# 1999?. 1n tractul respirator in$erior# *n secreia mucoas"# se g"sesc concentraii mari de Ig( i Ig7. (nticorpii a.ung *n secreii# *n mare parte# prin di$u)ia printre celule sau prin ruperi ale epiteliului. 6ei %accinurile gripale se administrea)" parenteral# este clar c" anticorpii din secreii >sIg(? au rol ma.or *n protecia antiin$ecioas". sIg( con$er" o mai un" protecie *ncruciat" $a" de %ariante antigenice re)ultate prin dri$t antigenic# comparati% cu Ig7 circulant. &entru antigenele %irale e/puse pe supra$aa celulelor in$ectate# studiile in vitro au e%ideniat c" anticorpii anti%irali i complementul se leag" speci$ic i pot s" produc" citoliza. Complementul poate acoperi comple/ul (g-(c# loc0nd e%entualii receptori disponi ili. Comple/ele sunt $agocitate de celule care au receptori pentru C3. Complementul poate li)a %irionii *n%elii. 9etra%irusurile sunt li)ate de complement# c'iar *n a sena anticorpilor. Complementul pare s" ai " rol *n $a)a timpurie a in$eciei# c0nd titrul anticorpilor este $oarte sc")ut i au a$initate mic". &roteinele complementului sunt importante ca mecanism e$ector 'umoral $a" de in$eciile acteriene# dar re)istena celor cu de$icit al complementului# $a" de in$eciile %irale este normal". Imunizarea pasiv a mucoasei respiratorii poate $i $olosit" *n scop pro$ilactic sau terapuetic. (re a%anta.ul c" e$ectul protector este imediat# iar e$ectele colaterale sunt rare. (nticorpii sunt mai e$icieni $a" de in$eciile %irale# c0nd se administrea)" pro$ilactic. (nticorpii administrai prin imunizare pasiv# *n secreiile tractului respirator# pot s" pre%in"# s" diminue)e sau s" %indece in$ecile %irale. Imuni)"rile s-au $"cut *n special cu Ig7 pentru c" este mai uor de o inut. Ig( are a%anta.ul de a $i polimeric i teoretic# are acti%itate aglutinant" superioar" $a" de Ig7 i pentru c" nu $i/ea)" complementul# pro a il nu stimulea)" reaciile in$lamatorii. (re o perioad" de acti%itate mai lung"# deoarece componenta secretoare >C<? *l prote.ea)" de aciunea protea)elor.

1n conclu)ie# imunitatea mediat" 'umoral repre)int" modalitatea tactic# de neutrali)are a %irusurilor *n $a)a e/tracelular". (nticorpii se sinteti)ea)" *n r"spunsul imun primar i secundar anti%iral# dar acti%itatea lor protectoare este neesenial" pentru controlul multor in$ecii primare sau secundare. Copiii cu agamaglo ulinemie *n"scut" de tip 4ruton# nu au sensi ilitate crescut" $a" de in$eciile %irale# cu e/cepia meningitei entero%irale# produs" de ec'o%irusurile 9 sau 11. (nticorpii sunt acti%i $a" de antigenele %irale din umorile organismului# dar nu penetrea)" *n celulele in$ectate. Imunitatea antiviral* mediat* celular 1n ciclul in$ecios al multor %irusuri# antigenele sunt e/puse t0r)iu pe supra$aa celulei. In aceste ca)uri# rolul protector al anticorpilor este secundar. Imunitatea mediat celular >IDC? constituie mecanismul ma.or al ap"r"rii speci$ice anti%irale. 6up" in$ecia primar" sau dup" administrarea %accinului %iral atenuat# se acti%ea)" r"spunsul celulelor Ac# care are acti%itate ma/im" la 7-10 )ile i scade la 2-3 s"pt"m0ni dup" in$ecie. &entru controlul in$eciei %irale# celulele Ac sunt eseniale. ,a pacienii cu sindrom 6i 7eorge >cu apla)ie timic" congenital"?# la pacienii <I6(# la cei leucemici sau la cei supui terapiei imunosupresoare prelungite# $rec%ena i se%eritatea in$eciilor %irale cresc semni$icati%. 9olul IDC *n protecia anti%iral" este eloc%ent *n ca)ul in$eciei cu %irusul ru.eolic. ,a copiii normali# in$ecia produce erupia tegumentar" caracteristic" i ulterior %irusul este eliminat. ,a copiii cu de$icien" a celulelor A# oala este adeseori $atal". Dani$est"rile erupti%e sunt mediate de celulele A i la copiii imunosupresai nu se produc. (pariia erupiei este indicatorul e%oluiei $a%ora ile. ,a copiii agamaglo ulinemici# erupia se produce i e%oluia in$eciei este nealterat" de a sena anticorpilor. <e instalea)" imunitatea de memorie. IDC precede sinte)a anticorpilor *n toate in$eciile %irale# dar *n special *n ca)ul in$eciilor citolitice *n care %irusul se multiplic" rapid. IDC are rol important *n ap"rarea $a" de in$eciile %irale primare# deoarece se acti%ea)" *ntr-un timp scurt i r"spunde ne%oilor de ap"rare rapid" $a" de in$eciile %irale# *nainte de edi$icarea r"spunsului imun mediat 'umoral. In $ocarul in$lamator indus de in$ecia %iral" se acumulea)" celule e$ectoare ale IDC# care ating %aloarea ma/im" la dou" )ile de la *nceputul replic"rii %irale. IDC se acti%ea)" dup" ce %irusul a p"truns *n celul" i aceasta e/pune pe supra$aa ei# antigene %irale. ;$ectul s"u este liza celulelor in$ectate i are rolul de a limita diseminarea %irusului *n mediul e/tracelular. ,i)a celulelelor in$ectate cu %irusuri citocide este protectoare numai dac" se produce rapid# *nainte de asam larea %irionilor

progeni. ,i)a tardi%" are e$ect opus# deoarece $a%ori)ea)" diseminarea %irusului. &entru %irusurile care produc in$ecii persistente# citoli)a timpurie sau tardi%" are e$ect protector.

#ig4 HF. Controlul infeciilor virale citocide i necitocide de c"tre celulele Ac. ,i)a celulei in$ectate poate s" se produc" *n $a)a de eclips"# *nainte de asam larea %irionilor maturi sau *n $a)a de mi.loc# c0nd numai o parte a %irionilor s-a asam lat. In am ele ca)uri# li)a este protectoare $a" de in$ecia cu %irusuri citocide i necitocide. In contrast# li)a relati% t0r)ie *n timpul ciclului de replicare %iral" este protectoare numai $a" de %irusurile necitocide. 6ac" celulele Ac nu produc li)a# celulele in$ectate pot s" supra%ieuiasc" i s" eli ere)e %irioni in$ecioi perioade lungi de timp. In ca)ul in$eciei citocide# li)a tardi%" nu diminu" diseminarea %irusului# deoarece asam larea s-a *nc'eiat i %irionii %or $i eli erai prin citoli)a produs" de e$ectorii imunitar >dup" Lagi# 1996?. IDC constituie modalitatea strategic de protecie anti%iral"# al c"rei e$ect este li)a celulei *nainte de *nc'eierea ciclului de replicare %iral". ;$ectorii imunit"ii mediate celular detectea)" celulele a c"ror supra$a" este modi$icat" din punct de %edere antigenic >celule in$ectate cu %irus# celule trans$ormate malign# celule *m "tr0nite sau celule nonsel$?. @rice protein" structural" a %irionului sau e/istent" numai *n celula in$ectat" >protein" nestructural"? poate $i prelucrat" de celulele in$ectate sau de celulele accesorii ale r"spunsului imun. Doleculele nonsel$ prelucrate sunt asociate cu moleculele CDO I >sau CDO II? i sunt e/puse pe supra$aa celulei. Comple/ele moleculare de%in inte pentru aciunea lim$ocitelor Ac. Celula in$ectat" este li)at" su aciunea $actorilor litici eli erai de lim$ocitul Ac. Celulele Ac recunosc orice protein" %iral"# structural" sau nestructural"# asociat" cu moleculele CDO. ,im$ocitele Ac acti%ate sunt speci$ice $a" de %irusul in$ectant. 6e e/emplu# lim$ocitele Ac sensi ili)ate $a" de %irusul %ariolei# li)ea)" numai celulele in$ectate cu acest %irus. :u li)ea)" celulele normale i nici celule alogenice in$ectate cu %irusul %ariolei. 8incFernagel i 6o'ertG >1974? au demonstrat e/perimental speci$icitatea aciunii lim$ocitelor $a" de antigenele %irale# dar i $enomenul de limitare >restricie? a interaciunilor celulei e$ectoare cu celula int"# de identitatea moleculelor CDO. Celulele care pre)int" antigenul i cele care *l recunosc tre uie s" $ie 'istocompati ile# adic" s" poarte pe supra$aa lor# molecule CDO I i II identice.

1n in$ecia secundar"# r"spunsul celulelor Ac este rapid# mediat de celulele Ac de memorie. Celulele de memorie pot s" persiste *n a sena antigenului speci$ic# pro a il datorit" stimul"rii sporadice nespeci$ice# de citoc'inele eli erate local *n timpul reaciilor $a" de antigenele ne*nrudite. Celulele -. nu au speci$icitate $a" de antigen i nu produc memorie imunitar". Celulele :L se acti%ea)" rapid i la 2-3 )ile dup" in$ecie ating acti%itatea ma/im"# dup" care diminu" rapid. 6e$icienele pentru celulele :L sunt rare# dar sunt *nsoite de in$ecii se%ere cu %irusul %aricela )oster# cu %irusul citomegalic# 'erpes simple/ %irus 1. Decanismul interaciunii celulei :L cu celula in$ectat" nu se cunoate. Celulele :L li)ea)" celulele care au pierdut moleculele CDO i ast$el au de%enit anormale. (cti%itatea celulelor :L este stimulat" de inter$eron. Celulele in$ectate cu %irusuri pot $i li)ate prin fenomenul ADCC >anti odG dependent cell cito/icitG?# prin aciunea lim$ocitelor Ac sau :L. ;le li)ea)" celulele tapetate cu anticorpi. !agocitele mononucleare >monocitul sanguin# macro$agul tisular# celula dendritic"? au rol important pentru eliminarea %irusului dintr-un proces in$ecios. !agocitele mononucleare $agocitea)" %irionii inoculai prin *nep"tur". Dacro$agele au i acti%itate (6CC. Mecanisme prin care celulele infectate evit* efectorii r*spunsului imun 1n mediul e/tern# %irusurile sunt insta ile# datorit" sensi ilit"ii la $actorii de mediu. 6e aceea# pentru a se perpetua *ntr-o populaie de organisme sensi ile# %irusul tre uie s" r"m0n" c0t mai mult *n ga)da in$ectat"# ori s" se transmit" c0t mai e$icient de la o ga)d" la alta. &e de alt" parte# e$ectorii r"spunsului imun 'umoral i celular nu sunt totdeauna e$icieni *n recunoaterea i eliminarea celulelor in$ectate cu %irus# iar %irusul eli erat din celul"# tre uie s" e%ite contactul cu e$ectorii r"spunsului imun. 1n ma.oritatea infeciilor persistente# %irusurile in$ectea)" celulele sistemului imunitar+ %irusul 'epatitei 4# papo%a%irus# 'erpes# %irusul ;pstein-4arr# %irusul citomegalic# ru ela# ru.eola# oreion# in$luen)a# parain$luen)a# OA,I I# II# OII# diminu0nd potenialul reacti% al imunit"ii. @ celul" in$ectat" care e/pune pe supra$aa ei un num"r mic de situsuri antigenice poate s" scape li)ei# deoarece situsurile antigenice distanate nu permit legarea celor dou" situsuri de com inare ale moleculei de anticorp# necesar" acti%"rii complementului. Celulele in$ectate persistent e/prim" o cantitate limitat" de antigene %irale pe supra$aa lor# comparati% cu celulele *n care ciclul de replicare %iral" este litic. (cesta pare a $i mecanismul de

supra%ieuire a celulelor in$ectate cu %irusul coriomeningitei lim$ocitare >,CD?# cu %irusul ru.eolei sau cu %irusul 'epatitei 4. (ntigenele %irusului 'epatitei 4 se sinteti)ea)" *n mare e/ces i se elimin" din 'epatocite# su $orma unor particule $"r" genom. <e consider" c" e/cesul cantitati% de antigene %irale determin" $enomenul de toleran imunitar. Celulele in$ectate persistent mani$est" $enomenul de fluctuaie cantitativ a antigenului %iral# e/pus pe supra$aa lor. Celulele in$ectate cu %irusul ru.eolic trec succesi% prin cicluri de dispariie i reapariie a antigenelor %irale# asociate mem ranei citoplasmatice# *n timp ce moleculele normale ale celulei nu au %ariaii cantitati%e semni$icati%e. !enomenul se numete modulaie antigenic4 (nticorpii necitolitici pot masca antigenele %irale e/puse la supra$aa celulei# de%enind ast$el inaccesi ile celulelor e$ectoare litice >lim$ocite Ac# :L?. 5neori# %irusurile in$ectea)" celule care nu e'prim molecule CM I . :euronii e/prim" puin sau de loc moleculele CDO I i repre)int" un situs pre$erenial al persistenei %irale. Oerpes%irusurile in$ectea)" latent neuronii# iar %irusul ru.eolic# %irusul ,CD i al$a%irusurile pot in$ecta aceste celule. (deno%irusurile codi$ic" o protein" de 19 F6# care se asocia)" cu moleculele CDO I i loc'ea)" transportul lor spre supra$aa celulei i ast$el celula in$ectat" care nu e/prim" molecule CDO I nu este recunoscut" de lim$ocitele A. Iirusul in$luen)a e%it" e$ectul neutrali)ant al anticorpilor speci$ici# prin rata *nalt" de mutaie a (9:-polimera)ei# gener0nd noi %ariante ioc'imice ale 'emaglutininei >O(? i *ntr-o m"sur" limitat"# ale neuraminida)ei >:(?. :oile %ariante antigenice ale O( i :( tre uie s"-i p"stre)e $uncia# adic" %irionul tre uie s" $ie in$ecios# dar scap" detect"rii de anticorpii pree/isteni. !enomenul %ariaiei antigenice limitate se numete drift antigenic. !/iftul antigenic corespunde unei noi %ariante genetice a %irusului in$luen)a i este re)ultatul unei reasort"ri a genomului# care are loc cel mai pro a il la p"s"ri# unde se produce co-in$ecia cu un %irus uman >ce in$ectea)" rareori p"s"rile? i cu o linie de %irus a%iar. Iirusurile contracarea)" aciunea citoc/inelor. Iirusurile sunt at0t inductori ai sinte)ei inter$eronilor >I!:?# c0t i inta principal" a aciunii lor. 5n %irus care induce sinte)a I!: i este $oarte sensi il la aciunea sa in'i itorie nu se poate propaga. ;%oluia a $a%ori)at %irusurile care contracarea)" e$ectele in'i itorii ale I!: asupra ciclului de replicare %iral". Iirusurile cu %irulen" *nalt"# in'i " sinte)a (9: celular i sinte)a proteinelor >e$ect de *ntrerupere?# ceea ce inter$er" cu capacitatea celulei de a produce I!: i de a r"spunde la aciunea lui.

Dulte %irusuri sunt re)istente la aciunea I!:. 5nele de)o/iri o%irusuri codi$ic" proteine ce in'i " c"ile ma.ore de transducere a semnalelor induse de I!:. 6e e/emplu# proteina ;1 a P sau Z. &o/%irusurile codi$ic" ,adeno%irusurilor in'i " semnalul indus de I!: Q sinte)a unor receptori solu ili pentru citoc'ine >pentru A:! i I,-1?# denumii viroc/ine. -IPURI7, D, I&UNI- -, D($3NDI-8 ( D P- -I/8" Oomeosta)ia organismului uman i animal este asigurat" de sisteme comple/e de ap"rare# ale c"ror particularit"i $uncionale au $ost de$inite *n primul r0nd# *n raport cu modul de aciune $a" de agenii in$ecioi. @rganismele dispun de dou" categorii de mecanisme de ap"rare+ - mecanisme de ap"rare specific# repre)entate de sistemul imunitarN - mecanisme de ap"rare nespecific sau nscut# adic" cele care asigur" re)istena sau imunitatea natural". &rin imunitate 2natural"3 sau nscut se *nelege re)istena unui organism $a" de un agent in$ecios sau $a" de un para)it# *n a sena unui r"spuns imun e%ident. Cele dou" sisteme de ap"rare# speci$ic" i nespeci$ic"# se condiionea)" reciproc. :u se poate e%alua gradul *n care mecanismele de re)isten" natural" sunt in$luenate dup" e/punerea la contactul cu agenii in$ecioi# dar r"spunsul imun detecta il sau c'iar su liminal produce modi$ic"ri ale st"rii de acti%itate a sistemului $agocitar mononuclear i a celulelor Filler. Decanismele de ap"rare antiin$ecioas" sunt at0t speci$ice >adaptati%e# do 0ndite? c0t i nespeci$ice >*n"scute?. Imunitatea do"ndit are un caracter speci$ic i se de$inete ca o stare de re)isten" antiin$ecioas"# cu caracter indi%idual# condiionat" de contactul anterior al organismului# *ntr-un proces in$ecios natural# cu agentul in$ecios %irulent# cu to/inele sale nati%e sau cu agentul atenuat i anato/inele sale administrate ca vaccin. Imunitatea do 0ndit"# denumit" i inducti"il9 este relati%"# *n sensul c"# dei *n general este $oarte solid"# poate $i *n%ins" prin agresiunea e/ercitat" de o cantitate mare de ageni in$ecioi sau de in$ecia cu o tulpin" deose it de %irulent". 1n $uncie de originea i modul de instalare# imunitatea do 0ndit" este de dou" tipuri+ do 0ndit" pe cale natural i pe cale artificial. In am ele ca)uri#

imunitatea poate $i do 0ndit" at0t activ# prin r"spunsul imun la stimulul antigenic# c0t i pasiv# prin trans$erul de anticorpi e/ogeni. Imunitatea do"ndit natural activ se instalea)" dup" trecerea organismului printr-o stare de in$ecie aparent" >decela il" clinic? sau inaparent". 6urata st"rii de imunitate este %aria il". Arecerea prin unele in$ecii asigur" o protecie speci$ic" pentru tot restul %ieii >ru.eola# %ariola# %aricela# oreionul?. (lte in$ecii >di$teria# scarlatina# tusea con%ulsi%" etc.? con$er" o protecie mai puin solid"# ast$el *nc0t la o nou" e/punere>dup" c0i%a ani?# organismul poate $ace din nou oala *ntr-o $orm" mai uoar" dec0t prima *m oln"%ire. Imunitatea do"ndit natural pasiv este re)ultatul trans$erului transplacentar i prin secreia lactat"# al anticorpilor de la mam" la $"t. (ceast" $orm" de imunitate este %aria il" din punct de %edere cantitati% i calitati%# *n $uncie de comple/itatea structural" a arierei placentare i di%ersitatea antigenelor la care a $ost e/pus organismul matern. Arecerea imunoglo ulinelor prin $iltrul placentar depinde de structura placentei# adic" de num"rul de straturi celulare ce se interpun *ntre circulaia matern" i cea $etal". Aran)itul anticorpilor este restricti% la speciile de o%ine# ca aline# porcine# canine# care au placent" de tip epiteliocorial# cu 4 straturi tisulare+ endoteliul capilar matern# epiteliul corionic# esutul con.uncti% $etal# endoteliul capilar $etal. :ou-n"scutul este prote.at de imunoglo ulinele din colostru. In primele 24 de ore# aparatul gastrointestinal este imatur din punct de %edere $uncional i digestia proteic" nu are loc. Imunoglo ulinele din colostru r"m0n intacte i sunt transportate *n mediul intern prin celulele epiteliului intestinal. Arans$erul placentar al imunoglo ulinelor este $oarte intens la speciile cu placent" /emocorial >om# maimue# ro)"toare?# la care stratul endoteliului capilar matern lipsete i s0ngele matern scald" esutul placentar $etal. :ou-n"scutul uman primete anticorpi materni i dup" natere# prin colostrul ogat *n imunoglo uline# pro%enite din circulaia matern". Imunitatea do 0ndit" natural i pasi% asigur" noului n"scut o stare de nerecepti%itate $a" de agenii in$ecioi pentru care organismul matern este imun. (ceast" imunitate scade treptat dup" natere# pe m"sura cata olismului anticorpilor de origine matern"# ast$el *nc0t# dup" o perioad" de 3-6 luni copilul de%ine sensi il $a" de agenii in$ecioi. Imunitatea transplacentar" e/plic" raritatea maladiilor in$ecioase la copii# *n primele luni de %ia". Imunitatea do'-ndit* artificial activ Imunitatea do"ndit artificial activ este consecuti%" administr"rii vaccinurilor. 6enumirea de vaccin %ine %ine de la cu%0ntul latin vaca i semni$ic" originea primului preparat pe care ;. Jenner >1798? l-a utili)at pentru controlul %ariolei.
R, C@II I&UNI- R, I1 )I)5

6e cele mai multe ori# *n special *n procesele in$ecioase# reaciile imunitare au o $inalitate ene$ic"# a%0nd un rol determinant *n eliminarea agenilor patogeni. 5neori# dup" contactul cu antigenele >*n special moleculare?# acti%area $unciei imunitare are rol pre.udiciant# de$a%ora il asupra organismului# deoarece r"spunsul imun se instituie drept cau)" i mecanism pentru producerea di$eritelor maladii >alergii# oli autoimune?. 9eaciile (g-(c in vivo# cu consecine de$a%ora ile pentru organism# $ac o iectul de studiu al unui domeniu ine conturat# denumit Imunopatologie. (cti%area neadec%at" a $unciei imunitare determin" dou" categorii de mani$est"ri clinice+ a? strile de /ipersensi"ilitate ? maladiile autoimune 6iminuarea acti%it"ii sistemului imunitar# generea)" o categorie special" de mani$est"ri clinice# cunoscute su denumirea generic" de imunodeficiene. ;le pot $i nscute >primare? sau do"ndite >secundare?. Imunopatologia studia)" reacti%itatea $unciei imunitare *n strile neoplazice9 reactivitatea consecutiv transplantului de esuturi i organe9 n maladiile infecioase virale9 "acteriene9 fungice i n maladiile parazitare4 01 S-8RI7, (R, C@II7," D, 9IP,RS,NSI$I7I- -, <t"rile de 'ipersensi ilitate sunt reacii teriare# consecuti%e reaciilor (g-(c in vivo. ;le sunt o consecin" a $aptului c" procesul de imuni)are dup" contactul primar cu antigenul i generarea e$ectorilor imunitari >anticorpi i lim$ocite e$ectoare? nu con$er" totdeauna o stare $a%ora il"# de re)isten" a organismului. Contactul primar cu antigenul creea)"# uneori# o stare de sensi"ilizare $a" de antigenul respecti%. <ensi ili)area este o stare $i)iologic" d"un"toare organismului i se mani$est"# *n special dup" contactul organismului cu antigene proteice >din ou# din ser?# cu antigenele din polen i mai rar dup" contactul cu antigenele corpusculare >'ematii de er ec?. ,a contactul secundar cu antigenul sensi ili)ant# organismul r"spunde prin strile patologice de /ipersensi"ilitate. <t"rile de 'ipersensi ilitate sunt consecina unui r"spuns de intensitate prea mare sau a unui r"spuns imun neadec%at# care st" la originea le)iunilor tisulare. ;c'i%alentul termenului de /ipersensi"ilitate# $olosit *n mod curent# este cel de alergie >allos9 ergon B alt" energie?. Aermenul de alergie a $ost introdus de %on &irWuet >1906? i semni$ic" o reacie imunitar" care se e/prim" cu energie diferit de cea normal"# dup" e/punerea secundar" la un antigen. (m ele denumiri se re$er" la o reacti%itate imunitar" de intensitate anormal crescut"# $a" de un antigen. In sens tiini$ic# noiunea de alergie include toate mani$est"rile care decurg din reacti%itatea imunitar"# cu o alt" energie dec0t cea $i)iologic"+ reaciile /iperergice9 /ipoergice i anergice. 1n mod curent# alergia se de$inete ca o stare de 'ipersensi ilitate# ce re)ult" din e/punerea la un alergen i se distinge prin supraproducia componentelor imunitare. Clasificarea st*rilor de hipersensi'ilitate <t"rile de 'ipersensi ilitate au $ost clasi$icate *n raport cu promptitudinea cu care se mani$est"+ - reaciile de /ipersensi"ilitate imediat au o dinamic" rapid". <e declanea)" *n c0te%a secunde sau minute de la contactul secundar cu alergenul i diminu" rapid# *n c0te%a ore# $"r" semne %i)i ile# cu e/cepia celor $oarte gra%e. =esutul suport al reaciei este di$erit de la o specie la alta. (proape totdeauna %a re)ulta distrugerea celulei int". 9eaciile imediate se des$"oar" *n esuturi %asculari)ate i# de o icei# se mani$est" local# dar pot produce i e$ecte sistemice. ipersensi"ilitatea imediat este cea mai r"sp0ndit" de)ordine imunitar" la om. ;ste cea mai $rec%ent" maladie cronic"# ce a$ectea)" circa 25M din populaie *n "rile de)%oltate# cu se%eritate %aria il"# de la o simpl" iritare# p0n" la periclitarea %ieiiN - reaciile de /ipersensi"ilitate su"acut sunt acelea care *ncep s" se mani$este dup" 1-3 ore de la contactul secundar cu antigenul i *ncetea)" dup" 10-15 ore. <unt mediate de Ig7 sau IgDN - reaciile de /ipersensi"ilitate ntrziat se e%idenia)" la 1-2 )ile dup" contactul secundar cu alergenul. &ersist" un inter%al de c0te%a )ile# p0n" la c0te%a s"pt"m0ni. (ceste reacii sunt mediate de lim$ocitele A i de macro$age. :u sunt dependente de $actori 'umorali circulani i de aceea se pot produce i *ntr-un esut ne%asculari)at. <ingura condiie este ca esutul s" $ie situat *n apropiere de sistemul %ascular# pentru ca lim$ocitele i macro$agele s" poat" migra spre locul unde a $ost in.ectat antigenul. 9eaciile de 'ipersensi ilitate imediat" i *nt0r)iat" se deose esc prin urm"toarele tr"s"turi+ - mecanismul inducerii >'umoral sau celular? - dinamica des$"ur"rii *n timp - particularit"ile mani$est"rilor patologice - posi ilitatea com aterii. 7ell i Coom s au de$init 4 tipuri de reacii de 'ipersensi ilitate+

- reacii de tip I+ reaciile de anafila'ie >ana$ila/ia generali)at"# reaciile de ana$ila/ie local"# denumite i st"ri atopice1 + astmul ronic alergic# $e ra de $0n# urticaria# reacia (rt'us# maladia serului?. - reacii de tip II+ reacii de citoto'icitate mediate de anticorpi - reacii de tip III+ reaciile de /ipersensi"ilitate induse de comple'ele imune - reacii de tip II+ reaciile de /ipersensi"ilitate ntrziat # mediate de lim$ocitele A>reacia la tu erculin"# rucelin"# lepromin" etcN dermatitele de contact# reacia de respingere a gre$ei?. 9eaciile de tip I# II i III sunt mediate de anticorpi# iar cele de tip II sunt mediate de celule. 6o%e)i pentru natura imunitar a reaciilor de 'ipersensi iltate+ - reaciile de 'ipersensi ilitate necesit" stimularea preala il" >sensi ili)area? organismului uman sau animal cu antigenul inductor >alergenul?N - *ntre momentul contactului cu do)a sensi ili)ant" i momentul administr"rii do)ei declanatoare este necesar" o perioad" de timp >5-10 )ile?# pentru sinte)a e$ectorilor reaciei >anticorpi? sau pentru e/pansiunea clonelor de lim$ocite. 6up" acest inter%al# organismul de%ine sensi il la declanarea st"rii de 'ipersensi ilitate# numai la contactul cu acelai alergen care a creat starea de sensi ili)are sau cu un antigen *nrudit# care d" reacie serologic" *ncruciat" cu alergenul inductor. Intre antigenul sensi ili)ant# cel declanator i starea de 'ipersensi ilitate este o relaie speci$ic"N - organismele sensi ili)ate pre)int" un r"spuns imun de tip 'umoral sau celular. <tarea de 'ipersensi ilitate este mediat" de e$ectorii r"spunsului imunN - reaciile de 'ipersensi ilitate imediat" se trans$er" prin ser de la un organism 'ipersensi il la unul s"n"tos. &entru ca reacia de 'ipersensi ilitate s" se mani$este# serul tre uie s" se in.ecte)e *ntr-un esut %asculari)at. 9eaciile de 'ipersensi ilitate *nt0r)iat" se trans$er" prin intermediul limfocitelor %ia ile. Reaciile de +i!ersensibilitate imediat de ti! I 9eaciile de 'ipersensi ilitate de tip I# denumite i reacii anafilactice au cea mai mare $rec%en" i se mani$est" $oarte di$erit# at0t *n ceea ce pri%ete intensitatea# c0t i a organului int" al reacti%it"ii.

#ig4 11F. 9epre)entare sc'ematic" a particularit"ilor de e%oluie a celor patru tipuri de reacii de /ipersensi"ilitate.
Declan/atorii (ntigenele care induc mani$est"rile reaciilor ana$ilactice se numesc alergene. ;le se g"sesc *n polenul unor plante# *n pra$ul de cas"# *n %eninul insectelor sau *n produse alimentare. (lergenele sunt un set de antigene# stimulatoare ale sinte)ei de Ig;. :atura lor c'imic" este $oarte 'eterogen". 5n studiu german recent# rele%" c" organismul uman %ine *n contact cu circa 14000 de su stane c'imice+ unele sunt su stane alimentare# altele sunt ingerate odat" cu alimentele# $iind ad"ugate *n procesul industrial al prelucr"rii. @ categorie larg" o $ormea)" su"stanele poluante. 6in punct de %edere c'imic# alergenele sunt glicoproteine i poliza/aride de origine %egetal" sau animal" sau molecule mici# cu rol de /aptene. Oaptenele sunt molecule organice sau anorganice# cu greutate mic"# insu$icient" pentru a $i antigene# dar de%in alergene dup" cuplarea lor cu macromoleculele tisulare. 6e cele mai multe ori# 'aptenele alergice sunt su stane de u) $armaceutic# de 500-1000 6. 6up" legarea co%alent" ire%ersi il" cu proteinele serice# re)ult" un con3ugat /apten&protein# cu speci$icitate antigenic" modi$icat" i adeseori alergic. Aoate medicamentele *n stare nati%"# dar i deri%aii lor de degradare parial" pot s" se comporte ca 'aptene i s" de%in" alergene. Intensitatea reaciilor de 'ipersensi ilitate este dependent" de calea de p"trundere *n organism# de do)"# de $rec%ena e/punerii i de caracteristicile moleculare ale alergenului. Cel mai adesea# alergenele se clasi$ic" *n $uncie de calea de ptrundere *n organism. In raport cu calea de p"trundere a alergenelor# se disting+ - alergene in/alate - alergene ingerate - alergene inoculate Alergenele in/alate sunt glicoproteine din polen# din $ungi# din pra$ul animalelor de cas". 7reutatea molecular" nu dep"ete 50 F6# deoarece moleculele mai mari nu str" at mem ranele mucoase ale tractului respirator. 5n alergen in'alat poate determina simptome respiratorii+ rinit"# astm. Cri)ele se produc numai *n pre)ena alergenului. 5nele alergene sunt se)oniere >polen?# altele sunt perene >pra$ul de cas"?. &olenul este# din punct de %edere cantitati%# cea mai important" surs" de alergene. &lantele din $amiliile 0ramineae9 Compozitae9 %etulaceae9 #agaceae produc polen alergic. Aoate polenurile alergice pro%in de la plante poleni)ate de %0nt >anemo$ile?. ;le produc cantit"i mult mai mari de polen dec0t plantele entomo$ile i *n perioada

*n$loririi *l eli erea)" *n atmos$er". (lergenele din polen sunt glicoproteine *nrudite c'imic i dau reacii *ncruciate. <erul imun de iepure# $a" de un alergen din polen precipit" o di%ersitate de alergene polenice. !porii fungilor se g"sesc *n aer# *n cantitate de circa 5 ori mai mare dec0t granulele de polen# dar produc mai puine st"ri alergice. In regiunile temperate# num"rul sporilor $ungici este ma/im *n timpul %erii i scade *n se)onul rece. (lergiile sunt produse de sporii a peste 80 de genuri de $ungi+ Alternaria# Penicillium9 Aspergillus. <ingura su stan" alergic" de origine $ungic"# i)olat" *n stare pur"# este penicilina.

Cantit"ile de alergene care p"trund pe cale respiratorie# sunt $oarte mici+ su 1 UgTan.
9eaciile alergice la alergenele $ungice apar la 30 de minute de la e/punere# iar cele to/ice# la 6-8 ore dup" ingestie. 9eaciile to/ice nu au su strat imunologic. Dicoto/inele au greutate molecular" mic" >su 1 F6? i pot $i eliminate din e/tractele de alergene $ungice# prin diali)".

Cele mai multe particule in'alate >mai mari de 10 Um?# ca de e/emplu# polenul i sporii mari sunt depo)itate *n na)o$aringe i sunt asociate cu mani$est"ri locale# na)ale iTsau oculare# denumite generic 2$e r" de $0n3. &articulele mai mici de 10 Um >dar *n special cele mai mici de 5 Um? sunt antrenate cu curentul de aer inspirat# *n c"ile in$erioare# unde reaciile alergice tind s" se mani$este su $orm" de astm. <porii $ungici di$er" ca dimensiuni i determin" reacii alergice ale tractului respirator superior i in$erior.
Alergenele ingerate se g"sesc *n compo)iia unor alimente+ *n ou# ciocolat"# c"puni# ciree# uleiul de $icat de pete# *n seminele de 0l7cine ma' >soia?# *n $"ina unor cereale >gr0u# or)?# *n seminele de Arac/7s /7pogea >alun de p"m0nt? etc. ,a copii# laptele de %ac" i soia sunt cau)ele ma.ore ale reaciilor alergice# urmate de cereale# ou" i pete. I0rsta mani$est"rilor este %aria il"+ dup" primele )ile de %ia">$a" de laptele de %ac"?# p0n" la doi ani. ,a 90M din ca)uri# intolerana dispare dup" trei ani. Cele mai comune mani$est"ri sunt %oma# diareea# colicile a dominale# ce apar *ntr-un inter%al %aria il# de la c0te%a minute# p0n" la 1-2 ore dup" ingestie. (lergia la laptele de %ac" i la pete este mai $rec%ent" la populaiile care consum" cantit"i mari ale acestor produse. (lergenele alimentare tra%ersea)" lumenul intestinal# la ni%elul mucoaselor digesti%e. 4ariera mucoasei gastrointestinale este e/pus" la un grup 'eterogen de antigene. ;/perienele cu molecule marcate cu pero/ida)" de 'rean sau cu $eritin"# au e%ideniat c" unele antigene intacte i $ragmente de antigene particulate din tu ul digesti%# do 0ndesc accesul la esuturile lim$oide ale ga)dei# *n special la persoanele cu de$icit al sinte)ei de Ig(. (ntigenele ce a.ung *n contact cu structurile lim$oide ale mucoaselor# stimulea)" r"spunsul imun al ga)dei. &enetrarea antigenelor la ni%elul tractului digesti% se $ace pe dou" c"i+ - prin endocitoz de c"tre celulele intestinale a sor ante# la polul luminal. <e $ormea)" $agosomi# *n interiorul c"rora se produce digestia materialului endocitat# dar cantit"i mici r"m0n nedigerate i sunt e/ocitate *n spaiul e/tracelular# la polul a)al. <t"rile de 'ipo- sau aclor'idrie $a%ori)ea)" tran)itul proteinelor prin mucoasa intestinal". - p"trunderea antigenelor alimentare la ni%elul celulelor epiteliale M# ce acoper" pl"cile &eGer# $oarte numeroase *n regiunea distal" a intestinului su ire. (ceste celule $uncionea)" ca ade%"rate 2sonde de antigen3# adic" au capacitatea de a *nglo a antigenele deri%ate *n special din microorganisme i *ntr-o m"sur" mai mic"# antigene de origine alimentar".

Celulele M repre)int" un sistem de a%erti)are timpurie pentru sistemul imunitar al organismului. ;le sunt acoperite de un strat su ire de mucus# au micro%ili scuri# dar au capacitatea de a endocita antigene luminale# prin mecanismul pinocito)ei. Celulele D sunt di$ereniate# conin li)osomi i nu degradea)" antigenele pe care le pinocitea)"# dar le trans$er" macro$agelor din $oliculii su iaceni. 6ei au e%oluat ca o modalitate strategic" protectoare $a" de antigenele luminale# totui celulele D repre)int" poarta de intrare pentru microorganismele

patogene# care la acest ni%el *i do 0ndesc accesul la esuturile su iacente mucoasei. <tudiile electrono-optice cu molecule marcate cu pero/ida)" de 'rean# au ar"tat c" acestea sunt transportate din lumenul intestinal i a.ung *n spaiul su iacent celulelor D# unde se g"sesc lim$ocite i macro$age. <e stimulea)" ast$el r"spunsul imun local. <tructurile lim$oide asociate mucoaselor constituie prima "arier de protecie $a" de antigenele tractului digesti%. 5neori# cantit"ile relati% mari de antigene de origine acterian" i alimentar"# nu sunt ani'ilate local# de structurile lim$oide ale mucoaselor i trec *n mediul intern# a.ung0nd la cea de a II-a arier" ma.or" de protecie $a" de antigene# care este ficatul. Circa 30M din num"rul total de celule ale $icatului au capacitatea de a $agocita i epurea)" s0ngele adus de %ena port" din teritoriul digesti%. Antigenele inoculate sunt proteine din %eninul de insecte# *n special 7menoptere >al in"# %iespe?# care conine 7-10 antigene. (lergenele din %enin sunt di$erite $orme ale $os$olipa)ei (. Ieninul de al in" conine $os$ata)" acid"# 'ialuronida)"# dopamin" i norepine$rin" i un peptid care produce degranularea mastocitelor. !erurile imune o inute pe di$erite specii de animale >'eteroantiseruri?# dup" in.ectare la om# adeseori acti%ea)" r"spunsul imun al organismului receptor. Duli dia etici tratai cu insulin de origine animal" sau cu insulin" sinteti)at" *n celule reprogramate prin metodele ingineriei genice# sinteti)ea)" anticorpi anti-insulin". Agenii farmacologici# administrai *n scop terapeutic sau diagnostic# pot cau)a o %arietate de de)ordini imunitare# deoarece acionea)" ca 'aptene care se cuplea)" cu di$erite proteine tisulare# con$erindu-le imunogenitate. ,egarea co%alent" a unui medicament ori a unui meta olit reacti% deri%at prin meta oli)area lui# de o macromolecul"# creea)" un con3ugat /apten& macromolecul# inductoare a r"spunsului imun speci$ic. ,egarea co%alent" a celor dou" molecule se numete /aptenare. <e descriu dou" tipuri de 'aptenare+
- /aptenarea direct a celulelor >a moleculelor mem ranare? i a moleculelor e/tracelulare# su aciunea compuilor c'imici cu reacti%itate nati%" >intrinsec"?. 6e e/emplu# penicilinele de semisinte)" > en)il-penicilina# ce$alosporinele?# dar i alte medicamente se cuplea)" cu di$erite proteine serice# $orm0nd con.ugate cu $uncie de alergene. Circa 10M din moleculele de penicilin" in.ectat"# se leag" co%alent prin gruparea E:O 2# de proteine plasmatice sau mem ranare. Celula poate lega mii de 'aptene P-lactamice# *n c0te%a minute dup" tratament.

- /aptenarea indirect a moleculelor mem ranare sau li ere# cu deri%aii re)ultai din cata oli)area parial" a unor molecule# care *n stare nati%" sunt puin reacti%e sau areacti%e. Deta oli)area are loc *n 'epatocite# c'eratinocite >i *n alte celule? i poate crea intermediari reacti%i ce $ormea)" leg"turi co%alente cu molecule carrier.

5neori# cata olismul medicamentelor este concomitent cu sinte)a proteic". <e produce 'aptenarea moleculelor *n cursul sinte)ei >'aptenare intern"? i pot $i e/puse ca antigene pe supra$aa celulei.

a B inel P-lactamic B inel tia)olidinic

6up" $isiunea inelului P-lactamic re)ult" gruparea peniciloil# principalul inductor al reaciilor ana$ilactice la om.
Deta oliii reacti%i pot $i secretai *n spaiul e/tracelular i se leag" cu proteine e/tracelulare. 5nii indi%i)i sunt predispui la reaciile alergice $a" de di%erse medicamente# *n special antiin$ecioase. 6ac" un indi%id mani$est" $enomene alergice $a" de un compus antimicro ian# riscul alergiei $a" de o alt" clas" de compui $armacologici crete de 9 ori. Circa 10M dintre aduli sunt alergici $a" de o clas" de compui i intr" *n categoria celor cu risc crescut $a" de ali compui $armacologici. 9eaciile de 'ipersensi ilitate imediat" de tip 1# induse de medicamente# se mani$est" %ariat+ ana$ila/ie# urticarie# angioedem. 5nele su stane pot produce mai mult de un tip de reacie# la un organism sensi il. 6e e/emplu# penicilina poate cau)a o reacie ana$ilactic" de tip I# o anemie 'emolitic" datorat" reaciei citoto/ice de tip II# de)ordini $uncionale de tip III cu comple/e imune sau o reacie de 'ipersensi ilitate *nt0r)iat". 9eaciile de 'ipersensi ilitate apar# de cele mai multe ori# *n esuturile ogate *n mastocite+ tegument# mucoase# mucoasa lingual"# pl"m0n# tractul gastrointestinal. 6ac" reacia de 'ipersensi ilitate imediat" este locali)at" *n mucoasa na)al" i *n con.uncti%a ocular"# simptomele includ rinoree# l"crimare# str"nut# congestie na)al"# creterea num"rului eo)ino$ilelor *n s0nge. Aitrul Ig; seric poate s" creasc" sau s" r"m0n" sc")ut. 6ac" reacia de 'ipersensi ilitate imediat" este locali)at" *n ron'ii# mani$estarea clinic" este astmul alergic# caracteri)at prin scurtarea i *ngreunarea respiraiei. Mediatorii reaciei de hipersensi'ilitate imediat* de tip I

9eaciile de 'ipersensi ilitate imediat" de tip 1 se datorea)" sinte)ei unor i)otipuri de anticorpi cu propriet"i particulare. 6in punct de %edere $uncional# anticorpii sunt convenionali i citofili. (nticorpii convenionali >Ig (# Ig7# IgD? din ser se detectea)" in vitro# prin reacia de aglutinare# precipitare sau de $i/are a complementului. In vivo# anticorpii con%enionali se com in" cu antigenul i *l neutrali)ea)". 9eaciile de 'ipersensi ilitate de tip 1 se datorea)" sinte)ei anticorpilor cito$ili# cu propriet"i $uncionale particulare. (nticorpii citofili au proprietatea de a se $i/a pe supra$aa unor celule care au receptori pentru regiunea !c i *n primul r0nd pe mastocite# dar i pe a)o$ile#

eo)ino$ile# macro$age. :u produc reacii secundare de aglutinare# precipitare sau de $i/are a complementului. (nticorpii cito$ili declanatori ai reaciilor de 'ipersensi ilitate imediat" se numesc reagine# deoarece produc modi$ic"ri ale reacti%it"ii tisulare+ m"resc permea ilitatea %ascular" prin intermediul 'istaminei# eli erat" din mastocite. ,a om# reaginele ma.ore sunt Ig; i Ig7 4. Ig; este termola il >se inacti%ea)" la 56 o# timp de 30 de minute?# iar Ig7 4 este termosta il. (m ele i)otipuri se sinteti)ea)" dup" imuni)"ri naturale. Ig; nu tra%ersea)" ariera placentar". Aimpul de *n.um"t"ire este de dou" )ile. <inte)a lor se $ace dup" mecanismul clasic+ dup" ce alergenul %ine *n contact cu mucoasele >respiratorie sau digesti%"?# penetrea)" pelicula de mucus i celulele epiteliale# este $agocitat de macro$age# prelucrat i pre)entat *n asociaie cu moleculele CDO II# lim$ocitelor A'. ,im$ocitele A' sinteti)ea)" I,-2 care produce e/pansiunea clonal" a lim$ocitelor 4. <u aciunea stimulatoare a I,-2# lim$ocitele 4 se trans$orm" *n plasmocite ce sinteti)ea)" Ig;. ,a persoanele normale# sinte)a Ig; este supresat" de lim$ocitele As# iar concentraia de Ig; seric %aria)" *ntre 17-450 ngTml# adic" 0#002M din totalul cantit"ii de imunoglo uline serice. ,a indi%i)ii atopici >cu predispo)iie genetic" pentru mani$estarea reaciilor alergice?# dup" contactul cu o do)" mic" de alergen# aproape totdeauna se sinteti)ea)" Ig;# iar titrul seric crete de 1000 de ori. :i%elul seric crescut al Ig; este o modalitate de diagnostic al st"rilor alergice# dar ni%elul normal al Ig; nu e/clude starea alergic". Ig; se sinteti)ea)" local# *n structurile lim$oide# la poarta de intrare a antigenului# *n plasmocitele din corionul mucoasei. ;/cesul de Ig; trece *n circulaie i se de mare a$initate ai a)o$ilelor# neutro$ilelor# leag" pe receptorii pentru !c ai celulelor endoteliului %ascular# ai celulelor epiteliale al%eolare pulmonare. <0ngele transport" Ig; la masocitele tisulare din tot organismul. Ig; $i/at pe celule repre)int" o proporie important" din Ig; total. 6ei Ig; li er >din ser? are timpul de *n.um"t"ire de dou" )ile# Ig; $i/at pe supra$aa celulelor este $oarte sta il. Dastocitele r"m0n sensi ili)ate luni de )ile# datorit" a$init"ii $oarte *nalte a receptorilor lor pentru !c al Ig;. 1n stare legat"# Ig; este prote.at de atacul protea)elor.
Celulele mediatoare ale reaciilor de 'ipersensi ilitate imediat" sunt *n primul r0nd mastocitele i "azofilele4 4a)o$ilele sunt celule circulante# dar pot p"trunde *n $ocarul in$lamator. Dastocitele sunt celule mononucleate i au dou" locali)"ri principale+ - *n esutul con.uncti%# *n special *n .urul %aselor sanguine din $icat# rinic'i# splin"N - *n mucoasele digesti%e i cea respiratorie. 1n creierul uman sunt dou" surse de 'istamin"+ mastocitele i neuronii /istamiergici. Dastocitele se g"sesc *n )onele cele mai %asculari)ate >eminena median"# glanda pineal"# meninge? i controlea)" circulaia s0ngelui i permea ilitatea %aselor <:C. :euronii 'istaminergici sunt limitai e/clusi% la ni%elul nucleului tu"eromamilar din 'ipotalamusul posterior. Colateralele a/onale se proiectea)" *n toate )onele corte/ului. (st$el# sistemul 'istaminergic central controlea)" acti%itatea *ntregului creier.

,ocali)area strategic" a mastocitelor se corelea)" cu alter"rile patologice care se produc la ni%el %ascular gastrointestinal# ronic# cutanat# cere ral# ocular. 1n citoplasma a)o$ilelor i mastocitelor# la microscopul electronic se o ser%" granule electrono-dense# ce repre)int" p0n" la 40M din %olumul celular. ;le conin mediatori pre$ormai# cei mai importani $iind aminele "iogene >'istamina i serotonina?. Dastocitele conin /istamin >amina tisular"?# detectat" iniial *n tegument. In vivo# 'istamina se sinteti)ea)" prin decar o/ilarea 'istidinei# reacie catali)at" de 'istidin-decar o/ila)" >o en)im" citoplasmatic"? i este depo)itat" *n granule. @ celul" uman" conine 2-3 pg de 'istamin". Oistamina este larg distri uit" *n esuturile organismului uman. ,a om# neuronii 'istaminergici ai <:C repre)int" o surs" nemastocitar" de 'istamin". Oistamina acionea)" asupra unei %ariet"i largi de tipuri celulare+ celule musculare netede# neuroni# celule endocrine# e/ocrine# celule sanguine# celulele sistemului imunitar. ;$ectele %ariate se produc prin receptori distinci+ O1# O2# O3. !erotonina >5-'idro/i-triptamina? se $ormea)" prin decar o/ilarea moleculei de tripto$an 'idro/ilat. Dastocitele umane nu conin serotonin". <erotonina s-a i)olat iniial din ser >tonina din ser?# deoarece are e$ect %asoconstrictor. &roduce edem i are rol important *n reaciile ana$ilactice.

Oistidina Oistamina <erotonina >5-'idro/i-triptamina? Mecanismul celular /i molecular al reaciilor de hipersensi'ilitate imediat* de tip I

9eaciile de 'ipersensi ilitate imediat" de tip 1 se des$"oar" *n mai multe stadii. !a)a I a este legarea anticorpilor citofili >Ig;# care s-a sinteti)at dup" contactul primar cu antigenul?# de receptorii pentru !c \ ai mastocitelor locale. (li $actori acti%atori ai mastocitelor sunt+
- alergenul speci$ic sau unul *nrudit cu cel inductor al sinte)ei Ig;N - di$erite lectine - anticorpi anti-Ig;# anticorpi anti-idiotipici# anticorpi anti-receptor !c \N

#ig4 11=. Activarea masto&citelor este mediat" de legarea *ncruciat" a recep-torului !c \. (ceasta poate $i reali)at" de legarea antigenului de Ig; $i/at pe receptorii pentru !c \# de anticorpii i%aleni care recunosc determinanii i)o-tipici ai regiunii !c a Ig;# de anticorpii antiidiotipici ai regiunii !a ai Ig;# de anticorpii anti-receptor care se $i/ea)" direct pe recep-torul pentru !c \# de dimerii i%aleni de Ig; o inui cu ageni c'imici de polime-ri)are sau de lectinele care se leag" de resturile glu-cidice ale Ig;. (ntigenele i anticorpii mono%aleni nu acti%ea)"

mastocitele# deoa-rece nu reali)ea)" legarea *ncruciat" a receptorilor >dup" 9oitt# 1993?. - neuropeptide endogene# $apt care e/plic" alergia determinat" de stimularea sistemului ner%os
- ana$ilato/inele C3a i C5a - peptidele acteriene ce conin $ormil-metionin" - ageni $i)ici >de e/emplu# temperatura sc")ut"? - di$erite medicamente.

1n $a)a a II-a se produce activarea mastocitelor i degranularea lor. (lergenul declanator tre uie s" $ie multi%alent pentru a lega *ncruciat dou" molecule de Ig; $i/ate pe celula e$ectoare. 6up" legarea *ncruciat" a receptorilor pentru !c \# mem rana granulelor $u)ionea)" cu mem rana citoplasmatic" i eli erea)" coninutul. #ig4 11C. (li stimuli activatori ai mastocitelor. (na$ilato/inele C3a# C5a sau su stanele medica-mentoase >iono$orii de Ca2R# codeina# mor$ina# (CAO sintetic? acti%ea)" mastocitele pe o cale direct". Aoate aceste su stane induc p"trun-derea Ca2R *n mastocit# declanatoare a $enome-nelor ioc'imice care duc la degranularea i eli erarea mediatorilor.

;li erarea mediatorilor pre$ormai - 'istamina - tripta)a - acti%ea)" C3 - 'eparina

Doleculele de Ig; pot $i legate *ncruciat de lectine >&O(# Con (?# prin asocierea lor cu resturile glucidice ale regiunii !c. (st$el se e/plic" urticaria produs" de c"puni i ciree# care conin cantit"i mari de lectine.

<timulul acti%ator al mastocitelor este transmis prin receptorii pentru Ig;. (cti%area se datorea)" leg"rii *ncruciate a dou" situsuri !a # printr-o molecul" de alergen. # care leag" Ig7 cu a$initate mult mai Dastocitele au i receptori pentru !c mic". 6egranularea mastocitelor este precedat" de in$lu/ul masi% de Ca2R. 7ranulele pline cu mediatori pre$ormai# migrea)" la peri$eria celulei# $u)ionea)" cu mem rana e/tern" i eli erea)" coninutul+ /istamina9 proteaze neutre>tripta)"# c'ima)"# car o/ipeptida)"?# proteoglicani >'eparina# condroitin-sul$atul?.

#ig4 11>. Inducerea i mecanismele e$ectoare ale /ipersensi"ilitii de tip I. &relucrarea antigenului se $ace la ni%elul mucoaselor. 9ee/punerea la alergen declanea)" degranularea mastocitelor i producerea mediatorilor ce determin" simptome alergice >dup" DiraFian# 1998?.
)riptaza >pre)ent" *n mastocite# dar a sent" *n a)o$ile? produce constricia muc'ilor nete)i ai ron'iilor# iar c/imaza stimulea)" secreia mucoasei ronice. &roteoglicanii din granulele mastocitelor au rol *n *mpac'etarea mediatorilor pre$ormai *n granule. eparina este proteoglicanul predominant *n mastocitele pulmonare umane. Dastocitul este singura surs" endogen" de 'eparin" la om i la ro)"toare. Oeparina are e$ect anticoagulant. Dastocitele conin <@6 i pero/ida)". 6egranularea acti%ea)" o lipaz care mo ili)ea)" acidul arac/idonic din mem rana mastocitului. &rin meta oli)area acestuia se sinteti)ea)" mediatori noi ai reaciei de 'ipersensi ilitate imediat". (st$el# din acidul arac'idonic# pe calea lipoo/igena)ei se sinteti)ea)" leucotriene# iar pe calea cicloo/igena)ei se $ormea)" prostaglandine i trom"o'an. Efectele mediatorilor mastocitari Dani$est"rile reaciilor alergice# inclusi% alergia respiratorie# pot s" se produc" *n dou" $a)e+ L faza timpurie# care se des$"oar" *n c0te%a minute# datorit" eli er"rii mediatorilor pre$ormaiN L faza tardiv se produce la 3-4 ore dup" e/punerea la alergen# datorit" in$iltratului celular# ca r"spuns la mediatorii $a)ei timpurii. :n prima etap# aciunea 'istaminei const" *n contracia muc/ilor netezi ai tractului respirator i digesti%. Oistamina produce constricia celulelor endoteliale i crete permea ilitatea %aselor mici. (celai e$ect *l are serotonina. &rin constricia celulelor endoteliale i creterea permea ilit"ii capilare# se produce edemul tisular. :n etapa a II&a# 'istamina produce dilatarea %aselor peri$erice i re)ultatul este sc"derea rutal" a tensiunii arteriale. `ocul 'ipotensi% este una din mani$est"rile dramatice ale ana$ila/iei generali)ate. (li mediatori ai $a)ei a II-a sunt c/ininele. ;le se $ormea)" din c'ininogenul plasmatic i sunt polipeptide mici+ E metionilc/inina >Det-,Gs-(rg->&ro?2-7lG-&'e-<er-&ro-&'e-(rg? E "radic/inina>(rg->&ro?2-7lG-&'e-<er-&ro-&'e-(rg? E calidina >lisil- radic'inina?+ ,Gs-(rg->&ro?2-7lG-&'e-<er-&ro-&'e-(rg. C'ininogenul este alc"tuit din 11 aminoaci)i i >acid sialic?n# la una sau la am ele e/tremit"i. ;ste o Qglo ulin" >2 mgTml ser?. C'ininele au e$ect vasodilatator i m"resc permea ilitatea capilar"# produc0nd edem. :n faza a III&a se sinteti)ea)" ali mediatori# care *ntrein *n timp di$eritele e$ecte iniiate de mediatorii eli erai din mastocite# prin e$ectul c/imiotactic $a" de celulele sanguine+ ;C! >eo)ino$il-c'emotactic $actor? determin" a$lu/ul de eo)ino$ile :C! >neutro$il-c'emotactic $actor? &(! >$actorul acti%ator al plac'etelor?. ,eucotrienele >,C4# ,64# ,44# ,;4? determin" contracia de durat" a muc'ilor nete)i# edem al mucoaselor i stimularea secreiei lor. E4emple de reacii de hipersensi'ilitate de tip I &rima reacie de 'ipersensi ilitate imediat" a $ost descris" de &rausnit) i Lustner.

9eaciile de 'ipersensi ilitate imediat" pot s" se produc" la orice organism al unei specii i se numesc reacii anafilactice sau se mani$est" numai la anumii indi%i)i predispui genetic i se numesc atopii >st"ri atopice?. *eaciile anafilactice +ana B opusN p/7la'is B protecie? se caracteri)ea)" printr-o dinamic" e/plo)i%" a mani$est"rilor# *n decurs de 3-4 minute. Clinic# termenul de ana$ila/ie semni$ic" sindromul care re)ult" din eli erarea unor mediatori pre$ormai i generai de novo *n mastocite# care determin" o stare opus" celei de protecie. Dani$est"rile clinice ale reaciilor de 'ipersensi ilitate sunt dependente de calea de p"trundere a alergenului i de cantitatea de 'istamin" eli erat". 9eaciile cutanate medii# cu eritem# urticarie# prurit# dureri de cap# sunt asociate cu un ni%el sc")ut al 'istaminei plasmatice >su 1 ngTml?.

6ac" alergenul este in.ectat intravenos# r"spunsul este sistemic# adic" are loc o anafila'ie generalizat# care poate duce la oc vascular /ipotensiv i as$i/ie secundar" prin constricie ronic" i laringian". 6ac" s$0ritul nu este letal# recuperarea $uncional" se poate $ace *ntr-o or". `ocul %ascular se datorea)" ieirii plasmei *n spaiul e/tra%ascular# re)ult0nd sc"derea %olumului sanguin. <c"derea de itului cardiac duce la 'ipo/ie i acidi$ierea mediului intern# antren0nd i insu$iciena respiratorie. 6ac" alergenul este in.ectat *n piele# reacia este limitat" la locul in.eciei i se numete anafila'ie cutanat# *nsoit" de eritem >urticarie?# angioedem# edem laringian# ron'oconstricie# 'ipotensiune# aritmie cardiac". Anafila'ia generalizat >sistemic"? este $orma cea mai gra%" a 'ipersensi ilit"ii imediate. Dult timp s-a considerat c" ana$ila/ia generali)at" este o mani$estare patologic"# indus" numai *n condiii e/perimentale la animalele de la orator. In realitate# at0t la om c0t i la animale se produc am ele tipuri de reacii ana$ilactice# at0t generalizate# c0t i locale. &rima reacie de anafila'ie generalizat a $ost descris" la c0ine. 1n 1902# 9ic'at i &ortier studiau iologia medu)elor i to/icitatea e/tractelor apoase i glicerinate din celenterate# asupra mami$erelor. (dministrate *n do)e mari# e/tractele produc moartea imediat" a c0inelui# datorit" ocului to/ic# dar do)ele mici sunt suportate. @ in.ecie secundar" la c0te%a s"pt"m0ni mai t0r)iu# produce o reacie anafilactic generalizat # cu parali)ia muc'ilor respiratori i ocul $atal. Instalarea st"rii de oc este accelerat" de in.ectarea intra%enoas" a do)ei secundare. ,a autopsie se o ser%" edemul mucoasei intestinale# a esutului pulmonar# congestia $icatului. ,a co ai# ana$ila/ia se induce prin in.ectarea intra%enoas" a unei do)e mici >1mg? de al umin" seric" o%in". ,a 8 )ile dup" in.ectarea dozei sensi"ilizante# animalul de%ine sensi il la ocul ana$ilactic i are sensi ilitate ma/im" la 21 de )ile. 6o)a declanatoare a ocului este mai mare. 9"spunsul ana$ilactic este prompt i mani$est"rile *ncep *n primele )eci de secunde+ piloerecie dorsal"# agitaie motorie# str"nut# tuse )gomotoas"# ciano)area mucoaselor# pierderea re$le/elor de miciune i de$ecaie# loca. respirator# con%ulsie# moarte. Aa loul acestor modi$ic"ri patologice se succede *n c0te%a minute. Duc'ii nete)i ronici ai co aiului sunt $oarte sensi ili la 'istamin" i ron'oconstricia $atal" este caracteristica ana$ila/iei la aceast" specie.

*eaciile anafilactice generalizate la om se mani$est" *n primul r0nd $a" de alimente i se e/teriori)ea)" prin urticarie generalizat. 5rticaria a$ectea)" 15-23M din populaie <uportul mani$est"rilor patologice care *nsoesc aceste reacii# este tegumentul.

(na$ila/ia generali)at" la om# este declanat" i de ali $actori+ penicilin"# aloseruri# 'eteroseruri# %eninul insectelor >al in"# %iespe? i se mani$est" prin urticarie generali)at"# spasmul muc'ilor ronici# edem laringian# dispnee se%er"# ciano)"# oc 'ipotensi%. Intensitatea mani$est"rilor este dependent" de gradul de sensi ilitate. <ensi ilitatea alergic" a pacienilor %aria)" *n limita a circa 1T1000. 9"spunsul sistemic cu reacii tegumentare generali)ate# tul ur"ri gastrointestinale# ta'icardie# aritmie cardiac"# 'ipotensiune medie# este asociat cu creterea concentraiei plasmatice a 'istaminei peste ni%elul de a)". 9eacia ampl" care periclitea)" %iaa# cu 'ipotensiune se%er"# $i rilaie %entricular"# spasmul muc'ilor ronici# stop cardiac i respirator# este asociat" cu ni%elul crescut al 'istaminei# de 12 ngTml. ,a om# 'istamina are e$ect %asodilatator asupra %aselor peri$erice# cu sc"derea presiunii %asculare. Oipersensi ilitatea imediat" la penicilin produce circa 500 deceseTanTglo . 9eacia este declanat" de penicilina nati%" sau de deri%aii re)ultai din degradarea ei >acidul peniciloic# acidul penicilenic?. (nticorpii anti-penicilin" aparin i)otipurilor Ig; i Ig7 4 i se g"sesc c'iar *n serul persoanelor netratate cu penicilin". &ro a il c" sinte)a lor a $ost indus" de penicilina din carne. @riginea penicilinei este *n masa micelian" de la $a ricile de anti iotice# care se adaug" *n 'rana animalelor# ca stimulator al creterii. (lergenele in/alate produc mani$est"ri locale# la poarta de intrare. *eacii atopice4 Aermenul de atopie de$inete st"rile de 'ipersensi ilitate imediat" cu su strat ereditar# limitate la om. <t"rile atopice se mani$est" la 1020M din populaie# su $orme %ariate. 9eaciile atopice au un ta lou clinic mai simplu i se produc atunci c0nd reacia alergenului cu anticorpii speci$ici are loc pe supra$aa unei mucoase sau *n epiteliul tegumentar. *inita alergic sau fe"ra de fn este $orma cea mai simpl" a atopiei i se mani$est" prin secreie a undent" a glandelor epiteliului na)al# iar astmul "ronic# prin contracia muc'ilor c"ilor respiratorii. Cele dou" $orme e/treme de mani$est"ri alergice sunt determinate de alergenele in'alate# care se g"sesc *n polen# *n pra$ul de cas">ce conine alergene de acarieni?# *n p"rul animalelor. !oarte r"sp0ndite sunt alergiile la polenul de Am"rozia# o plant" care r"sp0ndete o cantitate mare de polen >100 FgTplant"Tan?. 7r"uncioarele de polen %in *n contact cu mucoasa na)al" i respiratorie# cu con.uncti%a ocular" i

determin" o stare de sensi ili)are a aparatului respirator. 9ee/punerea la polen *n se)onul urm"tor# declanea)" reacia alergic"# cu urm"toarele mani$est"ri+ eritemul con.uncti%ei oculare# edemul mucoasei na)ale i secreia apoas" a undent"# str"nut.
Intensitatea simptomelor depinde de ni%elul cantitati% al e/punerii la polen# dar i de reacti%itatea organismului. ;/ist" situaii gra%e# ine/plica ile# cu cri)e ample# dup" o e/punere minimal". 6ac" rinita are caracter se)onier sau este dependent" de condiiile de mediu# aproape sigur are caracter alergic. 9inita alergic" peren" se datorea)" contactului cu pra$ul de cas" i de animale. Mecanismul rinitei alergice este di$erit de al altor mani$est"ri alergice. In primul r0nd# e/ist" di$erene $uncionale *ntre mastocitele mucoaselor i ale esutului con.uncti%. Dastocitele mucoasei na)ale>denumite DC A? conin 'istamin" i triptaz9 iar dup" stimularea alergenic"# se degranulea)"# dar concentraia plasmatic" a 'istaminei nu se modi$ic". Dediatorii mastocitari produc o 'iperemie a mucoasei na)ale# edem i transudarea lic'id". In$lamaia na)al" se datorea)" transud"rii# *n care al"umina este un marFer mult mai sta il dec0t mediatorii din categoria citoc'inelor.

#ig4 11H4 Mecanismul rinitei alergice >dup" !ranFland# 1998?.

1n al II-lea r0nd# mani$est"rile rinitei sunt dependente de particularit"ile unice ale %asculari)aiei na)ale# con$erite de esutul venos erectil. Iariaiile %olumului sanguin din esutul %enos erectil reglea)" re)istena tractului na)al la coloana de aer. 5mplerea cu s0nge a acestui esut produce congestia mucoasei. Curgerea s0ngelui este controlat" de $i rele ner%oase %egetati%e. Iner%aia simpatic" este %asoconstrictoare i diminu" $lu/ul sanguin# iar tonusul simpatic are acti%itate ciclic". 6e aceea# mucoasa na)al" are o perioad" de repaus la $iecare 2-4 ore# iar c"ile na)ale se pot o tura alternati%.

!a)a primar" a rinitei >str"nut# rinoree# o strucie na)al"? este dependent" de 'istamina din mastocite# de leucotriene i prostaglandine# iar $a)a tardi%" >o strucie na)al" ampl" prin 'iperreacti%itate i anosmie? este dependent" de a)o$ile. Astmul alergic9 o %ariant" comple/" a reaciilor atopice# este o maladie cronic" in$lamatorie a pl"m0nului# cu o pre%alen" cresc0nd" a mor idit"ii i mortalit"ii *n ultimele dou" decenii. 6ei s-a considerat c" este o oal" a muc'ilor nete)i ai c"ilor respiratorii# *n ultima decad" s-a acceptat c" astmul este# *n primul r0nd# o oal" inflamatorie. <tructural# c"ile aeriene ale astmaticilor se caracteri)ea)" prin inflamaie cronic# cu in$iltrarea intens" a mucoasei ronice# cu lim$ocite# eo)ino$ile i mastocite# cu descuamarea epiteliului# 'iperpla)ia celulelor mucoase# *ngroarea su mucoasei. (ceste modi$ic"ri se asocia)" cu mani$est"rile clinice# care includ o strucia c"ilor aeriene i 'iperreacti%itatea c"ilor aeriene. (stmul ronic alergic are determinism multi$actorial# atopia >predispo)iia genetic" de a sinteti)a Ig; ca r"spuns la aeroalergenele comune? $iind cel mai comun $actor predispo)ant. 6up" e/puneri repetate la do)e mici de alergene# indi%i)ii atopici sinteti)ea)" Ig;. ;/punerea secundar" la alergene iniia)" r"spunsul imun 'umoral. ;%enimentele reaciei alergice# consecuti%e e/punerii la alergen# se des$"oar" *n dou" $a)e+ $a)a timpurie# de ordinul minutelor# const" *n rspunsul "ron/ospastic i $a)a tardiv# de ordinul orelor# ce const" *n rspunsul inflamator.

9"spunsul rapid se caracteri)ea)" prin edemul mucoasei# creterea tonusului muc/ilor netezi i *ngustarea c"ilor respiratorii# asociat" cu degranularea mastocitelor. Dani$est"rile astmatice imediate sunt dependente de eli erarea 'istaminei din mastocite. &acienii cu astm alergic au o concentraie de Ig; de 6 ori mai mare dec0t astmaticii nealergici# ceea ce con$irm" relaia dintre concentraia Ig; i starea patologic". 5nii astmatici alergici de)%olt" r"spunsul de faz tardiv# la 3-6 ore dup" stimularea cu alergenul# care# *n a sena terapiei# poate s" persiste c0te%a )ile. 9"spunsul tardi%# este asociat cu migrarea eo)ino$ilelor# dar i a neutro$ilelor i lim$ocitelor din s0nge# *n parenc'imul pulmonar. ,im$ocitele AC6 4 au rol esenial *n patogene)a astmului. In pl"m0nul astmatic# alergenul este *nglo at# prelucrat i pre)entat de macro$agul al%eolar# de celulele epiteliale ale mucoasei i de celulele dendritice. ,im$ocitele A'-2 secret" I,-4# 5# 6# 9# 10# 13# stimulatoare ale sinte)ei de Ig;. Alergiile la alimente $ormea)" o categorie de st"ri atopice $oarte comune la copii i se mani$est" $a" de alergene din lapte# ou"# ulei de pete# ciocolat"# c"puni# ciree# portocale. Dani$est"rile reaciilor alergice la alimente pot $i locale sau generalizate.
*eaciile alergice locale se caracteri)ea)" prin erupii urticariene >pustule eritematoase? la ni%elul mucoasei ucale# *nsoite uneori de tul ur"ri digesti%e >colici a dominale# diaree?. ,a %0rsta adult"# su iecii %or mani$esta reacii alergice respiratorii.

:u toate urticariile tegumentare sunt determinate de reacii alergice. 5rticaria neimun de contact poate $i declanat" de ageni c/imici >salicilai# sul$ii# acidul en)oic# acidul sor ic# acidul nicotinic i esterii s"i din alimente# din guma de mestecat# din ampoane# din par$um# din unguente? sau de ageni fizici >traumatisme# $rigul?. (cetia stimulea)" eli erarea $actorilor c'imici inductori ai urticariei. Decanismele ei nu se cunosc# dar e$ectele se mani$est" asupra endoteliului %ascular. <imptomele sunt arsura# usturimea# pruritul# edemul i eritemul. 5rticaria este acut sau cronic. Cea cronic" se mani$est" prin apariia )ilnic" sau aproape )ilnic" a le)iunilor tegumentare# pentru un inter%al de cel puin 6 s"pt"m0ni# cau)at" de stimuli $i)ici. 1n toate ca)urile de urticarie# imun" sau neimun"# pe tegument apar le)iuni eritematoase >macule? i edematoase# *nsoite de prurit. 5rticaria implic" dermul super$icial. ,e)iunea cutanat" erupti%" este datorat" creterii permea ilit"ii capilarelor i dilat"rii %enulelor. &lasma p"r"sete patul %ascular i determin" $ormarea pustulei tegumentare pruriginoase# *ncon.urat" de o )on" de culoare roie intens". ,ic'idul %e)iculelor erupti%e este in$iltrat cu lim$ocite i &D::. ;rupia

tegumentar" dispare la 24-48 ore# $"r" urme *n ca)ul reaciilor acute sau persist" mai multe )ile la cele cronice. 1n mani$est"rile cu angioedem# edemul se e/tinde su cutan sau su mucos i le)iunile pustulare sunt mai mari i pot s" dure)e 72 de ore. <e mani$est" la ni%elul u)elor# lim ii# pleoapelor# dar poate $i a$ectat" orice )on" corporal". Pseudoalergii. <imptomele clinice ale alergiilor >urticarie# rinit"# astm# ocul ana$ilactic? apar adeseori din cau)e nealergice. :um"rul lor dep"ete pe acela al alergiilor. Iat" principalele cau)e+ - 'istamina se g"sete *n cantit"i mari *n unele alimente i acti%ea)" mediatorii speci$ici ai reaciilor alergiceN - 'istidina din alimente este precursorul 'istamineiN - tiramina de origine alimentar" determin" dureri de cap pulsatile i 'ipertensiuneN - $eniletilamina produce migren"N rinit"N en)oatul de origine alimentar" i din acidul en)oic produce astm i

- isul$itul de sodiu# io/idul de sul$ i meta isul$iii >conser%ani? produc simptome ale tractului gastrointestinal# distrug %itaminele 4# produc dureri de cap# astmN - glutamatul monosodic >agent de aromati)are? produce astmN
- coloranii alimentari >*n special culoarea gal en"? produc astm i alte reacii alergiceN - aspirina induce astm# urticarie# angioedem >7irard# 1998?. !estarea st*rilor atopice &entru pre%enirea accidentelor pro%ocate de reaciile de 'ipersensi ilitate imediat"# *n clinic"# *nainte de administrarea unor medicamente# se testea)" e%entualele mani$est"ri de 'ipersensi ilitate. @ pro lem" esenial" pentru diagnosticul i tratamentul alergiilor# este gradul *nalt de %aria ilitate ioc'imic" a alergenelor# de la un lot la altul. &reparatele de alergene sunt $oarte 'eterogene# iar cantitatea de alergen speci$ic# din cele mai multe e/tracte comerciale# %aria)" de la c0te%a procente p0n" la 50M din proteina total". ;/tractele sunt amestecuri comple/e# cu cantit"i %aria ile de alergene ma.ore# alergene minore i proteine irele%ante. ;/tractele $ungice conin proteine# glucide# en)ime proteolitice# en)ime glicolitice# *n cantit"i %aria ile. 6e aceea# e$ortul ma.or s-a orientat *n direcia clonrii alergenelor de importan" clinic" ma.or". Da.oritatea alergenelor s-a clonat i unele sunt disponi ile la un ni%el moderat sau c'iar *nalt de puritate. 6isponi ilitatea preparatelor antigenice omogene# cu puritate i acti%itate iologic" de$inite# %a a%ea un impact ma.or asupra diagnosticului i pro a il# asupra terapiei de)ordinilor alergice. Dulte alergene# *n special cele de natur" proteic"# se pre)int" *ntr-o multitudine de i)o$orme naturale. ;le sunt re)ultatul %ariaiei alelice a numeroaselor proteine %egetale i $ungice# $oarte asem"n"toare ca sec%en" a aminoaci)ilor# dar au propriet"i distincte de com inare cu anticorpii sau de acti%are a clonelor de lim$ocite A speci$ice.

;/istena numeroaselor i)o$orme ale aceleiai molecule de alergen# este pro a il# asociat" cu grade di$erite de recunoatere a epitopilor s"i# de c"tre lim$ocitelor A i 4 i# ca o consecin"# cu grade di$erite de sensi ilitate. Ca do%ad"# anticorpii de la di$erii pacieni alergici# leag" numai unele i)o$orme ale alergenului. &reparatele de alergene pentru diagnostic sunt 'eterogene i deri%" din surse naturale care conin ma.oritatea sau toate i)o$ormele de alergen. Inlocuirea acestor alergene cu cele clonate# pentru diagnostic# %a re)ol%a unele pro leme# dar %a crea altele. 5nii cercet"tori aprecia)" c" ma.oritatea indi%i)ilor r"spund la un num"r limitat de epitopi ai oric"rui alergen. 6e aceea se consider" c" un num"r mic de alergene >circa 40? ar putea s" $ie su$iciente pentru a identi$ica ma.oritatea indi%i)ilor alergici. )estele cutanate constau *n in.ectarea su cutan" a alergenelor la di$erite diluii. ,a organismul alergic# reacia de 'ipersensi ilitate se mani$est" *n c0te%a minute# prin apariia la locul in.ect"rii# a unei reacii in$lamatorii pruriginoase# *ncon.urat" de o )on" mai e/tins" de eritem. 9eacia de 'ipersensi ilitate la proteinele sali%ei de 0nar are acelai aspect. (lergenul in.ectat >sau inoculat? se leag" speci$ic de Ig; $i/at pe mastocitele din piele. Dastocitele eli erea)" 'istamina *n c0te%a minute# cau)0nd edemul locali)at# eritem >%asodilataie? i prurit. ,e)iunile locale ale reaciei de 'ipersensi ilitate imediat" se reproduc prin in.ectarea unei cantit"i mici de 'istamin".

6eterminarea cantitati%" a Ig; seric al pacientului# r"m0ne cel mai criteriu de diagnostic. Ig; se do)ea)" prin metoda 9I(+ - alergenul >de e/emplu# penicilina? se $i/ea)" pe suportul inert >de/tran?N

un

- pro a de ser de cercetat se pune *n contact cu alergenul $i/at pe suport. Ig; din ser se $i/ea)" pe alergenul imo ili)atN - se adaug" ser imun de iepure# care conine Ig7 marcat radioacti%# anti-Ig; umanN - se m"soar" indirect cantitatea de Ig; $i/at" pe suport# prin m"surarea cantit"ii de Ig7 radioacti% legat speci$ic. Com"aterea strilor de 'ipersensi ilitate imediat" de tip I se $ace prin e%itarea alergenelor# prin terapie medicamentoas" i prin imunoterapie. D"surile de evitare a alergenelor sunt ideale pentru pre%enirea reaciilor+ e%itarea alimentelor# medicamentelor# controlul pra$ului de cas"# e%itarea contactului cu animalele al c"ror pra$ este alergic# com aterea mucegaiului din *nc"perile locuite. Medicamentele anti/istaminice au e$ect antagonic $a" de 'istamin"# deoarece intr" *n competiie cu receptorii pentru 'istamin" ai celulelor int". (st$el# se poate loca creterea permea ilit"ii %asculare# %asodilataia# contracia muc'ilor ron'iilor i ai mucoasei gastrointestinale. 9inita alergic" necesit" terapie anti'istaminic" local". Cromoglicatul de sodiu prote.ea)" pacienii astmatici. Aeo$ilina>o metil/antin"? rela/ea)" muc'ii nete)i ronici. Imunoterapia sau 'iposensi ili)area const" *n administrarea plani$icat" a alergenului la un pacient pentru a diminua sinte)a Ig;. 9inita alergic"# astmul ronic i ana$ila/ia la %eninul de insecte pot r"spunde la aceast" terapie. (lergenul este in.ectat s"pt"m0nal# *n do)e gradat cresc0nde. 6up" o cretere iniial" a Ig; circulant# se produce declinul. ,ocul Ig; este luat de Ig7 care

$i/ea)" alergenul i-l *mpiedic" s" stimule)e mastocitele# alergic".

loc0nd reacia

1 (topia de$inete o stare de 'ipersensi ilitate imediat" local"# ce se mani$est" la persoane cu predispo)iie ereditar".

I&UN(D,FICI,N@,7, @rganismele imunode$icitare repre)int"# din punct de %edere clinic# ade%"rate 2e/periene ale naturii3# care# al"turi de studiile e/perimentale# au contri uit decisi% la $undamentarea concepiei actuale cu pri%ire la organi)area i $uncionarea sistemului imunitar. (nali)a ca)urilor clinice ale indi%i)ilor imunode$icieni# a e%ideniat $aptul c" cele dou" compartimente celulare ale sistemului lim$oid sunt semiautonome# deoarece *ntre ele e/ist" multiple interdependene $uncionale. Daladiile cu su strat imunitar >imunode$icienele? sunt 'eterogene# at0t *n e/presia lor imunologic"-clinic"# c0t i *n pri%ina mecanismelor celulare i moleculare implicate. Imunode$icienele pot $i nscute >primare? sau do"ndite >secundare? i se datorea)" mai multor cau)e+ - pot $i re)ultatul unor defecte genetice intrinsece ale celulelor lim$oide# care se mani$est" prin erori ale di$eritelor trepte de maturare# care se succed de la celula stem pluripotent"# p0n" la celula A matur" i respecti%# p0n" la plasmocit. 6e$iciena poate $i datorat" lipsei unor en)ime eseniale pentru meta olismul celulei >de e/emplu# meta olismul purinelor?. Consecina este a sena lim$ocitelor din organele lim$oide i din circulaieN - alteori se produc deleii ale genelor care codi$ic" unele i)otipuri de lan greu >O?. (st$el# apar de$icienele selecti%e ale claselor de imunoglo ulineN imunode$icienele se pot datora sla"ei dezvoltrii a mediului necesar diferenierii i matur"rii celulelor lim$oide >timus# 7(,A?N - imunode$icienele pot $i re)ultatul pertur"rii mecanismelor reglatoare ale celulelor A' i As# care controlea)" r"spunsul imun mediat celular i 'umoralN - imunode$icienele pot sur%eni ca re)ultat al cata"olizrii imunoglo"ulinelor cu o rat" e/cesi%"# sau c'iar datorit" pierderii imunoglo ulinelor din s0nge i din secreii# dei celulele lim$oide i imunoglo ulinele sunt normale su aspect numeric i respecti%# cantitati%N Circa 50M din imunode$iciene se datorea)" sinte)ei de$icitare a anticorpilor# 10M sunt imunode$iciene celulare# 20M sunt imunode$iciene

com inate# 18M sunt de$iciene ale $agocitelor i 2M sunt de$iciene ale proteinelor complementului. Imunodeficienele 3nn*scute Imunode$icienele *nn"scute >primare? au $ost descoperite de @. 4ruton >1952?# odat" cu descrierea agamaglo"ulinemiei i /ipogamaglo"ulinemiei in$antile se/-lincat". Daladia a$ectea)" "ieii i se transmite prin cromosomul S. &acienii r"m0n asimptomatici *n primele luni de %ia"# deoarece *n aceast" perioad" imunoglo ulinele materne asigur" protecia antiin$ecioas". 6up" %0rsta de 5-6 luni# pacienii de%in $oarte sensi ili la in$eciile tegumentare cu acterii piogene i la in$ecii ale tractului respirator cu streptococi# meningococi# 4 influenzae. &acienii sunt lipsii de reacti%itatea imunitar" mediat" 'umoral. In esuturile lim$oide lipsesc plasmocitele# iar $oliculii lim$oi)i nu se $ormea)" nici dup" stimularea antigenic" repetat". ,a electro$ore)"# serul pacienilor nu rele%" $racia gamaglo ulinic". Ig7 are concentraia de 1T10 >1 mgTml $a" de 10 mgTml?# iar IgD are concentraia de 1T100 din %alorile normale. ,ipsete Ig(# dar lipsesc i 'emaglutininele Q i P. 1n mod normal lim$ocitele 4 repre)int" 5-18M din totalul lim$ocitelor circulante# dar la aceti pacieni# proporia lor este $oarte mic" >mai puin de 0#1M?. ( sena lim$ocitelor 4 mature se datorea)" de$ectelor de maturare# determinate de tirozin&Ainaza ne$uncional"# codi$icat" de gena mutant". &acienii au reacti%itate normal" a imunit"ii mediate celular+ testul 'ipersensi ilit"ii *nt0r)iate la tu erculin" este po)iti%# resping alogregele# limitea)" in$eciile %irale# cu e/cepia 'epatitei 4 >care e%oluea)" rapid spre ciro)"? i a celor cu entero%irusuri. ,im$ocitele A au %alori numerice normale. Iaccinurile %irale atenuate sunt ine suportate i nu produc in$ecii clinice. 6isgamaglo ulinemiile selecti%e se caracteri)ea)" prin incapacitatea sinte)ei unui anumit i)otip imunoglo ulinic. <e cunosc de$iciene selecti%e ale IgD# Ig( sau ale IgD i Ig(# Ig( i Ig7# IgD i Ig7. 6e$icienele Ig( se asocia)" cu o $rec%en" crescut" a in$eciilor tractului digesti% i respirator# iar de$icienele sinte)ei Ig7 i IgD se *nsoesc cu creterea sensi ilit"ii $a" de in$eciile tegumentare cu acterii piogene+ !treptococcus# !tap/7lococcus. (gama-# 'ipogama- i disgamaglo ulinemiile selecti%e se ameliorea)" net# prin administrarea intra%enoas" a gamaglo ulinelor. <indromul 6i 7eorge este consecina 'ipopla)iei sau agene)iei timice. In cursul %ieii em rionare se produce o pertur are a de)%olt"rii structurilor deri%ate din perec'ile a 3-a i a 4-a de pungi $aringiene. (gene)ia timic" este *nsoit" de a sena paratiroidelor i de aceea# pacienii# iniial# pre)int" alte simptome+ 'ipocalcemie# mal$ormaii cardiace. Aimusul este $oarte redus ca dimensiuni sau c'iar lipsete la 1T3 dintre pacieni. (deseori# timusul e/ist"

su $orma glandelor ectopice. Imunitatea mediat" 'umoral este normal"# re$lectat" *n %alorile normale ale concentaiei imunoglo ulinelor. 6ac" supra%ieuiesc# la c0i%a ani# pacienii mani$est" sensi ilitate *nalt" $a" de in$eciile %irale# $a" de acteriile intracelulare sau $a" de in$ecia $ungic" cu Pneumoc7stis carinii. Imunodeficiena sever com"inat ><CI6? se caracteri)ea)" prin de$icitul am elor compartimente ale imunit"ii# at0t celular# c0t i cel 'umoral. 6e$iciena se datorea)" a senei celulelor stem de origine a lim$ocitelor. ,ipsesc lim$ocitele A# 4 i granulocitele# datorit" 'ipopla)iei generali)ate a esutului reticular /ematopoetic . @rganele lim$oide secundare sunt 'ipopla)ice# iar timusul este a sent. ,ipsesc imunoglo ulinele serice. &entru resta ilirea $unciei imunitare se impune transplantul mduvei osoase. Imunodeficienele do'-ndite Imunode$icienele do 0ndite >secundare? cuprind di%erse maladii# datorate unor cau)e patologice care inter$er" direct sau indirect cu $uncia imunitar". Imunode$icienele do 0ndite pot $i cau)ate de /ipercata"olismul imunoglo ulinelor. Concentraiile serice ale imunoglo ulinelor re$lect" raportul dintre rata sinte)ei i rata cata olismului acestor molecule. Creterea ratei cata olismului poate s" conduc" la o de$icien" selecti%" a unei clase de imunoglo uline# ce se mani$est" prin /ipoproteinemie. Imunode$icienele do 0ndite se pot datora pierderii e'cesive a imunoglo ulinelor# la ni%elul tractului urinar sau gastrointestnal. &ierderea urinar" este consecina de$ectelor renale glomerulare# a unor dis$uncii tu ulare sau unor de$ecte com inate. 6e$icienele glomerulare sunt asociate cu pierderea propriet"ilor de sit" ale endoteliului capilarelor glomerulare. Doleculele imunoglo ulinice mici >Ig7? trec *n urin" cu o rat" superioar" $a" de moleculele mari >IgD?. Aotui# Ig73 i Ig74 r"m0n normale# ceea ce sugerea)" c"# *n a$ara greut"ii moleculare# sunt importani i ali $actori care condiionea)" $uncia $iltrului renal. :i%elul seric al Ig7 scade# proporional cu gradul pertur "rii $unciei de sit" a endoteliului glomerular# iar IgD r"m0ne normal. ( II-a cale ma.or" a pierderii ma.ore a imunoglo ulinelor este tractul gastrointestinal# la ni%elul %aselor lim$atice. Cele mai multe situaii patologice la acest ni%el nu induc 'ipogamaglo ulinemie# cu e/cepia limfangiectaziei intestinale. (ceasta se caracteri)ea)" prin dilatarea e/cesi%" a canalelor lim$atice i este *nsoit" de pierderea masi%" de proteine i c'iar a lim$ocitelor. 6ilatarea %aselor lim$atice este cau)at" de o strucia lim$atic"# datorit" unei in$ecii >de e/emplu# tu erculo)a?# unei malignit"i >lim$om? sau

datorit" creterii presiunii 'idrostatice *n insu$iciena cardiac" se%er" congesti%". 9ata sinte)ei imunoglo ulinelor este normal" sau crescut"# dar turno%er-ul este rapid# datorit" pierderii e/cesi%e a proteinelor la ni%el intestinal. Imunodeficiene datorate micronutrienilor. 6e$iciena fierului creea)" condiii predispo)ante pentru candido)a mucocutanat" cronic". 6e$iciena zincului supresea)" $uncia celulelor A i predispune la in$ecii oportuniste. !eleniul este important pentru $uncia celulelor A. 6e$iciena parial" la copii# predispune la in$ecii. Imunodeficiene induse de medicamente . Cele mai multe medicamente citoto'ice i imunosupresoare# utili)ate *n tratamentul malignit"ilor# al in$lamaiilor i *n imunosupresia pacienilor cu transplant de organe# deprim" $uncia imunitar" celular" i 'umoral"# iar neutropenia predispune la in$ecii cu acterii 7ram negati%e i la in$ecii $ungice. Compuii steroidici utili)ai *n tratamentul maladiei reumatismale# ciclofosfamida i azatioprina# $olosite *n tratamentul neopla)iilor# dup" administrare prelungit"# deprim" imunitatea mediat" celular# dar i ni%elul seric al imunoglo ulinelor. 5nele imunode$iciene sunt consecuti%e altor procese patologice# care inter$er" cu e$ectorii sistemului imunitar+ deficiena renal sau /epatic are ca e$ect acumularea su stanelor to/ice *n organism# cu e$ect supresor asupra reacti%it"ii imunitare. 6e)ec'ili rul endocrin9 cu producerea *n e/ces a corti)onului suprarenalian >*n maladia Cus'ing? este asociat cu imunode$iciena. Corti)onul li)ea)" lim$ocitele A i 4 circulante i diminu" monocitele peri$erice. <t"rile neopla)ice# *n special cele care a$ectea)" sistemul imunocitar# monocitar sau granulocitar induc un de$icit al $unciei imunitare. In maladia OodgFin E neopla)ia liniei monocitare a ganglionilor lim$atici E se instalea)" de$iciena imunit"ii mediate celular# dar imunitatea 'umoral" este normal". In alte malignit"i# e$ectele neopla)iei asupra sistemului imunitar# nu s-au putut disocia de e$ectele pro%ocate de cae/ie. Dielomul multiplu >tumor" plasmocitar" locali)at" *n m"du%a osoas"? este *nsoit de sc"derea cantitati%" se%er" a tuturor claselor de imunoglo uline normale i de aici# de$iciene ample ale imunit"ii 'umorale# dar imunitatea celular" r"m0ne normal". Imunodeficiena consecutiv* infeciei cu HI) Imunode$iciena consecuti%" in$eciei cu %irusul OII este# *n esen"# e/presia incapacit"ii organismului uman de a neutrali)a %irionii# *n timpul $a)ei acute a in$eciei. 6up" contactul primar cu antigenele OII# organismul se ap"r" prin mecanisme imunitare speci$ice. <e sinteti)ea)" anticorpi

speci$ici# la un titru crescut. Aestul ;,I<( pentru diagnosticul in$eciei cu OII se a)ea)" pe detectarea anticorpilor anti-OII. Aitrul ma/im al anticorpilor se corelea)" *n timp# cu ni%elul %iremiei. Imunitatea mediat" celular anti-OII se detectea)" $oarte timpuriu dup" in$ecie i este dominat" de num"rul mare de lim$ocite AC6 8# al c"ror num"r crete de 10-20 de ori $a" de %alorile normale >200-600TZl?. ;le mani$est" acti%itate citoto/ic" speci$ic" anti-OII i li)ea)" lim$ocitele in$ectate# care e/pun pe supra$aa lor# proteinele env ><5 i AD?. ,im$ocitele AC68 diminu" %iremia primar"# at0t prin e$ect citoto'ic direct asupra celulelor *n care %irusul se replic"# c0t i prin e$ect represor asupra replic"rii %irale# mediat de citoc'ine. Celulele :L li)ea)" celulele in$ectate prin mecanismul (6CC. 9"spunsul imun primar# 'umoral i celular represea)" replicarea %iral" dup" in$ecie. 6ei $oarte energic# r"spunsul imun primar nu elimin" complet %irusul i nici celulele in$ectate. @rganismul nu se sterili)ea)" deoarece anticorpii speci$ici anti-OII# produi *n timpul in$eciei primare# nu au acti%itate neutrali)ant" optim". (nticorpii r"spunsului imun primar# *n esen"# nu au efect protector# deoarece r"spunsul imun este neadec%at# $ie cantitati%# $ie calitati%. @ proporie important" a %irionilor nu este neutrali)at"# p"str0ndu-i in$ecio)itatea. 9"m0n de asemenea# multe celule in$ectate cu %irus# *n special *n ganglionii lim$atici# at0t lim$ocite c0t i celule $oliculare dendritice. Anticorpii neutralizani se detectea)" mai t0r)iu# dup" trecerea de la $a)a acut" a in$eciei# la faza cronic. &ro a il c" anticorpii neutrali)ani sunt speci$ici $a" de epitopii care nu sunt e/pui pe %irionii asam lai *n cursul in$eciei primare sau anticorpii r"spunsului imun secundar su$er" $enomenul matur"rii de a$initate i se leag" mai e$icient de epitopi. &e m"sur" ce in$ecia progresea)"# anticorpii neutrali)ani sunt *nlocuii cu anticorpi stimulatori >en'ancing? ai in$eciei. (nticorpii stimulatori $a%ori)ea)" in$ecia celulelor# prin intermediul receptorului pentu C 3 sau pentru !c. Ine$iciena anticorpilor este e/plicat" prin aceea c" una din glicoproteinele de *n%eli al %irionilor este $oarte glico)ilat" >circa 24 de situsuri de glico)ilare?# pe o sec%en" de 481 aminoaci)i. 7rup"rile glucidice masc'ea)" epitopii antigenici i *mpiedic" neutrali)area %irusului. Imunodeficiena grav este consecina direct" a sc"derii dramatice a num"rului de lim$ocite AC64 circulante# de la circa 1000 la 100TZl. 6ac" *n stadiul preclinic# proporia lim$ocitelor produc"toare de %irus este de 1T40# *n stadiile a%ansate# proporia este 1T10. Cau)a principal" a sc"derii num"rului de lim$ocite AC64 este liza consecuti%" in$eciei cu OII. &roteinele %irale sinteti)ate *n celul" au e$ect to/ic. ,egarea OII de mem ran" i penetrarea *n celul"# este asociat" cu creterea %olumului celular. Celula pierde controlul in$lu/ului ionilor i al apei. (ceste modi$ic"ri s-au reprodus in vitro cu glicoproteina 120 de OII. ;$ectul to/ic al

glicoproteinelor %irale este re%ersat de antagonitii canalelor de Ca2R# utili)ai *n clinic" pentru a atenua anomaliile neurologice consecuti%e in$eciei cu OII. ,a pacienii in$ectai cu OII# o proporie semni$icati%" de lim$ocite# dup" stimularea cu antigenele %irale# *n loc s" se acti%e)e i s" se di%id"# se sinucid prin apoptoz # adic" prin acti%area programului genetic al morii. @ alt" cau)" a imunode$icienei o constituie anergia lim$ocitelor. Cele dou" glicoproteine >120 i 41?re)ult" prin cli%a.ul en)imatic al proteinei precursoare 160. Cli%a.ul proteinei 160 este esenial pentru in$ecio)itatea %iral". 7licoproteina 120 asociat" neco%alent cu gp 41pe supra$aa *n%eliului %iral# este uor eli erat" de pe supra$aa celulei i a *n%eliului. 7licoproteina 120 sinteti)at" *n e/ces# se g"sete li er">2solu il"3? *n s0nge i se leag" de receptorul C64# produc0nd pertur "ri ale reacti%it"ii imunitare# prin locarea reacti%it"ii lim$ocitelor. ($initatea interaciunii gp 120 cu C64 este con$erit" de resturile sale glucidice. <tarea de anergie poate $i re%ersat" su aciunea stimulatoare a I,-2. Comple/ele imune gp 120-anti gp 120 s-au identi$icat pe supra$aa lim$ocitelor# la pacienii in$ectai cu OII. OII-1 in$ectea)" lim$ocitele AC64# dar i monocitele# macro$agele# celulele dendritice# celulele ,anger'ans# celulele tro$o lastice placentare# neuronii. <c"derea ampl" a num"rului de lim$ocite AC6 4# detecta il" *n testul trans$orm"rii lastice cu mitogene# anulea)" $uncia lor reglatoare asupra $unciei imunitare. ,im$ocitele %ia ile asigur" persistena in$eciei. 6iminuarea sinte)ei I,-2 *ncetinete proli$erarea i di$erenierea lim$ocitelor Ac. In a sena celulelor Ac acti%ate# multiplicarea %iral" este necontrolat". Consecuti% sc"derii sinte)ei I,-2# diminu" acti%itatea macro$agelor i a celulelor :L. ,a organismele in$ectate cu OII# num"rul lim$ocitelor 4 este normal# iar concentraia imunoglo ulinelor este de circa 10 ori mai mare dec0t la persoanele s"n"toase. ;/plicaia creterii titrului anticorpilor este c"# *n a sena lim$ocitelor AC64# celulele As nu-i *ndeplinesc rolul $i)iologic de a supresa acti%area lim$ocitelor 4# di$erenierea lor i sinte)a Ig. ,im$ocitele 4 se acti%ea)" nespeci$ic# policlonal. <e sinteti)ea)" anticorpi la un titru crescut# dar nu au speci$icitate anti-OII i nu sunt protectori nici $a" de ali ageni patogeni sau potenial patogeni. 6at" $iind speci$icitatea interaciunii gp 120 cu receptorul lim$ocitar C6 4# s-a *ncercat utili)area C64 solu il ca agent imunoterapeutic. Aulpinile %irale de la orator au $ost neutrali)ate e$icient de preparatele C6 4# dar i)olatele primare de OII-1 sunt relati% re)istente. ( sena neutrali)"rii in$ecio)it"ii s-a atri uit mecanismelor comple/e de intrare a %irusului *n celul". C6 4 solu il stimulea)" eli erarea gp 120 din *n%eliul %iral# ceea ce determin" creterea in$ecio)it"ii. 7rupurile cu risc ma.or de *m oln"%ire sunt cele ale 'omose/ualilor i ale consumatorilor de droguri. Iirusul se transmite i pe cale 'eterose/ual"# mai ales la $emei# care transmit in$ecia $"tului.

I&UN(7(6I, -U&(R 78

6up" maligni)are# mem rana citoplasmatic" este cea mai modi$icat" structur" celular". <emnalele reglatoare de control al creterii i multiplic"rii# care acionea)" *n primul r0nd prin intermediul receptorilor mem ranari# nu-i mai g"sesc inta structural". Incapacitatea celulelor de a recepiona semnalele reglatoare ale creterii i di%i)iunii sau de a r"spunde adec%at acestor semnale# este cau)a principal" a comportamentului in%a)i% al celulelor maligne. &ierderea in'i iiei de contact este re$lectarea modi$ic"rilor supra$eei celulare. (deseori# maligni)area este *nsoit" de sinte)a unor molecule noi# locali)ate *n oricare din compartimentele celulei i care se comport" ca antigene tumorale. Jrice structur c/imic a celulei maligne9 a"sent n sau pe celulele normale ale esutului de origine a tumorii9 suscepti"il de a induce o reacie imunitar la gazda primar sau dup in3ectare la o nou gazd9 poate fi considerat ca antigen tumoral4

N-I6,N, -U&(R 7, <e disting urm"toarele categorii de antigene tumorale+ 14 Antigenele tumorale de difereniere # denumite i antigene oncofetale# deoarece se g"sesc at0t pe supra$aa celulelor unor tumori# dar sunt pre)ente i *n timpul unei $a)e de di$ereniere em rionar". ;le lipsesc pe supra$aa celulelor organismului adult sau se g"sesc *n cantit"i $oarte mici# nedecta ile. a? Antigenul carcinoem"rionar >C;(? s-a i)olat din s0ngele unui pacient cu cancer de colon >1965?. ;ste o glicoprotein" de 180-200 F6# locali)at" pe mem rana celulelor normale ale tractului digesti% la $"t# dar se g"sete *n cantit"i $oarte mici la su iecii normali aduli. ,a $"t# C;( este sinteti)at *n celulele mucoasei gastro-intestinale i este concentrat *n glicocali/# pe supra$aa luminal" a acestor celule. In celulele em rionare normale# C;( pare a a%ea rol *n aderena celular"# dar pro a il $a%ori)ea)" metasta)area celor maligne. C;( este un grup $oarte 'eterogen de molecule# cu o cantitate $oarte %aria il" de glucide. 9aportul proteineTglucide %aria)" *ntre 1T1 i 1T5.

Componenta glucidic" este repre)entat"# *n primul r0nd# de acidul sialic. Imunogenitatea moleculei este con$erit" de componenta proteic". ,a adult# C;( se g"sete *n cantit"i mici pe mucoasa colonului# *n pl"m0n# *n esutul mamar# dar reapare *n cantit"i mari pe celulele maligne ale tractului digesti% uman >intestin su ire# pancreas# $icat# stomac# colon# rect?. C;( se g"sete nu numai asociat supra$eei celulelor maligne# dar trece i *n s0ngele a 60-80M dintre pacienii cu cancer de colon. :u se cunoate mecanismul prin care C;( a.unge *n s0nge. 6in s0ngele pacienilor neopla)ici# C;( sinteti)at de celulele maligne# este epurat la ni%elul $icatului. 6e aceea# cele mai mari concentraii de C;( apar la neopla)icii cu insu$icien" 'epatic" >metasta)e 'epatice# ciro)e?. C;( este un antigen nespecific# deoarece poate s" apar"# *n concentraii mici >10 ngTml?# *n s0ngele unor pacieni cu maladii nemaligne+ la cei cu ciro)" alcoolic" a $icatului sau cu insu$icien" renal"# ast$el c" sperana detect"rii cancerului prin depistarea C;( *n s0nge# s-a n"ruit. ,e)iunile de orice natur" ale mucoasei tractului gastrointestinal sunt *nsoite de creterea sinte)ei i secreiei C;(# care trece i *n s0nge+ *n maladia in$lamatorie a intestinului# *n colita ulcerati%"# polipi ai tractului digesti%# tumori ale tractului gastrointestinal. 5nele tumori secret" C;(# mai ales dup" o metasta)are 'epatic" >adenocarcinomul colonului# tumorile de pancreas# $icat# pl"m0n?. :i%elul C;( $oarte crescut# re$lect" o e%oluie rapid" a tumorii. ? Alfafetoproteina +A#P, este o glicoprotein" ma.or" a $"tului timpuriu# o glo ulin" normal" >69 F6?a s0ngelui $etal uman i a celorlalte mami$ere# descoperit" *n 1956. Coninutul glucidic este de 3#5M. 6in punct de %edere structural# (!& este asem"n"toare al uminei. 7enele codi$icatoare ale celor dou" proteine au organi)are similar". (!& se detectea)" *n plasm" la em rionul de 4 s"pt"m0ni i crete rapid *n primul trimestru de sarcin". :i%elul ma/im >2-3 mgTml? se g"sete la $"tul de 14 s"pt"m0ni i scade la %alorile caracteristice adultului# la %0rsta de 6-10 luni. (!& se g"sete nu numai *n plasm"# ci i *n $luidele $etale+ lic'idul amniotic# lic'idul cere rospinal# urin". Cantit"i mici de (!& >500 ngTml? str" at placenta i se g"sesc *n serul $emeilor gra%ide. 1n timpul %ieii $etale# (!& se sinteti)ea)" *n $icat# *n celulele gastrointestinale. ,a adultul normal# concentraia sa este nedetecta il" prin metodele imunoc'imice o inuite# dar crete *n neopla)iile de carcinom /epatic. Circa 70M din cancerele 'epatice primare sunt *nsoite de creterea ni%elului seric al (!&. (!& crete i *n alte neopla)ii+ testiculare# o%ariene. :u toate

'epatoamele i tumorile testiculare produc (!&# dar cele care sinteti)ea)" aceast" glicoprotein"# o produc *n cantit"i $oarte mari. Creterea concentraiei (!& *n s0nge nu este totdeauna asociat" cu malignitatea+ (!& crete *n st"rile patologice de 'epatit" %iral"# 'epatit" cronic"# ciro)"# $apt ce re$lect" regenerarea celular". (!& crete *n maladiile in$lamatorii ale intestinului+ ulcerati%". oala Cro'n# colita

(!& este un marFer util pentru depistarea cancerului 'epatic la populaiile cu risc *nalt >c'ine)i# .apone)i# esc'imoi din (lasFa?# dar este inutil" pentru celelalte populaii# datorit" creterii ni%elului s"u *n a$eciuni nemaligne. 1n lic'idul amniotic# ni%elul crescut al (!& este asociat cu de$ecte ale tu ului neural >spina i$ida?. 54 Antigenele de transplantare a tumorilor >A(A( B tumor associated transplantation antigen?. a? Antigenele specifice de organ se e/prim" la un ni%el *nalt pe celulele tumorale# *n timp ce e/primarea lor pe celulele normale este $oarte sc")ut" sau este limitat" la un anumit stadiu al de)%olt"rii esutului. Antigenul specific prostatei >&<(? este fosfataza acid prostatic# o glicoprotein" cu acti%itate proteolitic" asupra gelului seminal# pe care-l 'idroli)ea)". &<( se g"sete *n esutul prostatic normal# *n adenomul enign i *n carcinomul malign. ;ste produs de celulele acinare ale prostatei. 1n ser# &<( este legat cu Q 1-antic'imiotripsina# ceea ce in$luenea)" %alorile $urni)ate de determinarea sa cantitati%". &<( crete mult *n cancerul prostatic# cel mai comun cancer la %0rsta de peste 75 se ani# dar crete i *n 'ipertro$ia prostatic" enign". Concentraia sa se corelea)" cu %olumul prostatei# cu stadiul cancerului prostatic# cu r"spunsul la terapie. 0licoproteinele mucinoase sunt antigene de supra$a" celular"# cu greutate molecular" mare. <unt $ormate dintr-o a/" polipeptidic"# de care se ataea)" numeroase catene oligo)a'aridice. 7lucidele repre)int" 60-80M din greutatea lor molecular". <inte)a glicoproteinelor mucinoase este consecina pierderii controlului meta olismului celulei neopla)ice. 5neori# celula malign" pierde capacitatea de sinte)" a unor glicoproteine de supra$a"# ca de e/emplu antigenul de grup sanguin ( i sinteti)ea)" molecule a sente *n celulele normale.

7licoproteinele mucinoase se e/prim" pe supra$aa celulelor epiteliale i se detectea)" *n ser# sali%"# ori sunt adsor ite pe eritrocite. ;le s-au identi$icat odat" cu disponi ilitatea anticorpilor monoclonali+ C( 15-3# C( 125# asociate cu cancerele o%ariene# C( 19-9# identi$icat *ntr-o tumor" colorectal" >C( B cancer associated?. Dodi$icarea cantitati%" a glucidelor mem ranare poate modi$ica dramatic malignitatea# in$luen0nd potenialul de metasta)are. DarFerii tumorali imunoglo ulinici se identi$ic" prin electro$ore)a serului sau a urinii. (parin i)otipurilor Ig7# (# D# ; sau sunt catene F sau ^ li ere. (pro/imati%# 1M din aduli au proteine serice M >monoclonale?# iar din acestea 25M au semni$icaie nedeterminat". 50M din totalul proteinelor serice D sunt datorate mielomului multiplu. 6eterminarea proteinelor D *n s0nge sau urin" este util" pentru monitori)area r"spunsului la terapie. ? Antigenele specifice fiecrei tumori sunt antigene individuale >A<A( B tumor speci$ic transplantation antigen?# proprii $iec"rei tumori. <unt e/primate numai *n celulele tumorale i nu sunt niciodat" detecta ile *n esuturile normale. <unt caracteristice tumorilor induse c'imic >,. 7ross# 1953?. C'iar tumorile multiple induse de acelai agent c'imic >metilcolantren?# *n acelai esut >tegument? al unui organism# sunt di$erite *n ceea ce pri%ete speci$icitatea antigenelor de transplantare. (ceasta semni$ic" $aptul c" in$ormaia genetic" declanatoare a maligni)"rii# re)id" *n gene di$erite# care su$er" mutaie su aciunea agentului c'imic. #ig4 161. Aumorile tegumentare induse de un agent c'imic >de e/emplu# metilcolantrenul? posed" antigene tumorale strict individuale. Aoate celulele unei tumori induse de metilcolantren sunt identice din punct de %edere antigenic# $apt demonstrat e/perimental+ oarecele imuni)at cu mo.arat de celule tumorale# respinge ulterior o gre$" de celule %ii ale aceleiai tumori. 6atorit" unicit"ii lor antigenice# $iecare tumor" indus" c'imic# stimulea)" imunitatea $a" de antigenele proprii# iar reaciile *ncruciate sunt a sente totdeauna. (ntigenele tumorale speci$ice de transplantare sunt comple/e glicoproteice sinteti)ate *n celul" i inserate *n mem rana citoplasmatic". Celulele maligne pot s" pre)inte simultan# at0t antigene tumorale comune# c0t i antigene speci$ice. Aumorile care apar *n mod natural sunt sla sau deloc antigenice.

:u se tie dac" antigenele tumorale sunt pre)ente de la *nceput pe toate celulele tumorale sau dac" celula de%ine malign"# $"r" s" do 0ndeasc" marFerii distincti%i de malignitate. (ntigenele tumorilor induse de ageni c'imici pot $i sta ile i se transmit de la o generaie celular" la alta# dar ma.oritatea tumorilor induse de ageni c'imici# tre uie considerate 'eterogene din punct de %edere antigenic# datorit" insta ilit"ii genetice. (ntigenele supra$eei celulelor maligne sunt supuse modi$ic"rilor cantitati%e i calitati%e. ,a om# 90M din tumori sunt induse de ageni c'imici. 3. Antigenele de origine viral sunt comune i se g"sesc la toate tumorile induse de acelai %irus# c'iar la specii di$erite. (ntigenele tumorilor induse de oncodnavirusuri sunt codi$icate de programul timpuriu al in$ormaiei genetice %irale. 6e e/emplu# %irusurile polioma i <I40 induc tumori la animalele de e/perien"# iar %irusul papiloma este implicat *n gene)a tumorilor de cer%i/ uterin uman. Iirusurile oncogene (6: induc sinte)a antigenelor tumorale cu locali)are nuclear" i mem ranar". <unt proteine nestructurale# care se disting de antigenele capsidei %irale. In celulele trans$ormate cu oncodna%irusuri# nu se detectea)" antigene capsidale# deoarece programul tardi% al genomului %iral nu este transcris i %irusul progen nu este asam lat. <I40 codi$ic" sinte)a a dou" proteine %irale >antigene tumorale?# de 94 i respecti% 17 F6# iar %irusul polioma codi$ic" sinte)a a trei antigene# de 100# 55 i respecti% de 22 F6. (ntigenul A de 100 F6 are o locali)are aproape e/clusi% nuclear" i se sinteti)ea)" at0t *n celulele in$ectate producti%# c0t i *n cele trans$ormate. (ntigenul de 55 F6 este o protein" $os$orilat" ce se asocia)" cu oncoproteina !rc# o c'ina)" tiro)in-speci$ic"# codi$icat" de protooncogena c&src. Interaciunea cu antigenul %iral produce o stimulare de circa 50 de ori a acti%it"ii c'ina)ice a oncoproteinei celulare !rc. (ntigenele ) sunt comune i pentru alte %irusuri ale grupului. Aoate tumorile induse de un %irus# au antigene comune# c'iar la specii di$erite. Imuni)area organismului receptor de gre$" de esut tumoral cu celule tumorale iradiate sau cu mo.arat de celule tumorale de acelai tip este protectoare $a" de de)%oltarea tumorii transplantate. (ntigenele A# codi$icate de oncodna%irusuri nu se g"sesc *n structura %irionului >proteine nestructurale?. 6e aceea# %irionii inacti%ai nu imuni)ea)" i nu prote.ea)" organismul $a" de suspensia de celule tumorale omologe >trans$ormate de acelai %irus?.

(ntigenele tumorale codi$icate de oncornavirusuri sunt comune pentru toate tumorile induse de un %irus# indi$erent de speci$icitatea antigenic" a celulei. Da.oritatea sunt antigene proteice %irale structurale# adic" se reg"sesc *n structura %irionului# ceea ce le deose ete net de antigenele codi$icate de oncodna%irusuri. (ntigenele tumorilor induse de oncorna%irusuri sunt codi$icate de gena env i au speci$icitate de grup. Dultiplicarea oncorna%irusurilor nu inter$er" cu capacitatea celulelor de a crete i de a se di%ide. 6eoarece antigenele tumorale sunt proteine structurale ale %irionilor# imuni)area organismului cu o suspensie %iral" inacti%at"# con$er" protecie $a" de celulele trans$ormate de %irusul omolog. <pre deose ire de antigenele induse c'imic# care pot $i tari sau sla e# antigenele codi$icate de %irusurile oncogene sunt $oarte imunogene. ,a om# circa 10M din totalul tumorilor sunt cau)ate de %irusuri+ - carcinomul 'epatocelular >indus de %irusul 'epatitei 4? - cancerul de col uterin >indus de papiloma%irusuri E O&I 16# O&I18? - lim$omul 4urFitt i carcinomul na)o$aringian >induse de %irusul ;pstein4arr? - leucemia celulelor A mature >indus" de OA,I-1?. 4. Antigenele tumorale codificate de protooncogene . Dutaiile puncti$orme ale oncogenelor E genele ce reglea)" creterea normal" i di$erenierea - i mutaiile genelor supresoare ale oncogenelor# ca de e/emplu# p53 i 9 # produc su stituii ale unui singur aminoacid *n catena polipeptidic" codi$icat"# care le trans$orm" *n antigene tumorale# codi$icate de genom. ;le au locali)are nuclear"# citoplasmatic" sau mem ranar". <-au descris peste 10 antioncogene >supresoare ale oncogenelor? i circa 100 de oncogene >de e/emplu# genele ras?# ale c"ror mutaii punctiforme determin" sinte)a unor molecule cu su stituii puncti$orme de aminoaci)i# unice sau multiple i care se deose esc de moleculele normale. (ntioncogena p53 codi$ic" o protein" nuclear"# reglatoare a di%i)iunii celulare. In celulele maligne# p53 se sinteti)ea)" *n e/ces. 6up" locali)are# antigenele tumorale sunt+ - antigene e/puse la supra$aa celulei. <unt cele mai importante# deoarece sunt accesi ile e$ectorilor r"spunsului imun >A<A(# A(A(?N - antigene intracelulare# locali)ate *n nucleu sau *n citoplasm".

(m ele categorii de antigene# se pot eli era $ie din celulele %ii# $ie dup" necro)" i se g"sesc *n circulaie# la distan" de tumor". ;li erarea lor poate stimula r"spunsul imun sau are un e$ect de locare a reacti%it"ii imunitare# prin $enomenul de inundare antigenic. (nticorpii antitumorali se o in prin in.ectarea celulelor tumorale %ia ile# ori a mo.aratului tumoral# la organismele altei linii genetice sau altei specii# care poart" alte molecule CDO. Celulele %or $i respinse ca o gre$" alogenic". (ntiserul conine anticorpi anti-antigene tumorale# dar i anticorpi anti-antigene CDO. 6e aceea# serul imun tre uie a sor it cu antigene tisulare normale. (st$el s-a e%ideniat C;( la pacienii cu tumori de colon i (!& la cei cu 'epatoame. (ntigenul e%ideniat de anticorpi *n serul a sor it poate $i un antigen tumoral sau un antigen normal# e/primat a undent pe celulele tumorale. #ig4 165. Modificri ale suprafeei celulei# asociate cu trans$ormarea malign" >dup" 9oitt# 1997?. Procesul dezvoltrii tumorii are loc n cteva trepte + - trans$ormarea celulei normale *n celul" malign" - creterea e/ponenial" a celulei maligne i constituirea tumorii primare - angiogene)a - in%a)ia esutului *ncon.ur"tor - intra%a)area i eli erarea celulelor tumorale indi%iduale# *n %asele sanguine i lim$atice# unde tre uie s" supra%ieuiasc" - oprirea celulelor tumorale *n di$erite locali)"ri >$icat# pl"m0n etc.? - e/tra%a)area celulelor tumorale i in%a)ia acestor esuturi - creterea tumorii la noile situsuri de metasta)are i angiogene)a. !iecare etap" a de)%olt"rii tumorii este in$luenat" de $actori imunologici i neimunologici. 6e e/emplu# integrinele condiionea)" interaciunile dintre celule. Cu c0t aderena celulelor maligne este mai ine e/primat"# cu at0t tendina ei de metasta)are este mai limitat". Celulele maligne eli erea)" unele componente mem ranare# ca de e/emplu# $i ronectina. &ierderea $i ronectinei pare s" determine sc"derea aderenei ma.orit"ii tipurilor de celule maligne i precede metasta)area. Componentele glicocali/ului sunt eli erate su aciunea protea)elor# pe care le secret" celulele tumorale. &rotea)ele >din categoria metaloprotea)elor? modi$ic" consistena su stanei $undamentale a esutului con.uncti%# degradea)" colagenul i proteoglicanii# uur0nd metasta)area i

in%a)ia. R8SPUNSU7 I&UN N-I-U&(R 7 Creterea anormal" este pre%enit" prin di$erite mecanisme de control+ mecanisme de reparare a (6:# aciunea genelor supresoare ale oncogenelor >antioncogene? sau prin apopto)a celulelor care au su$erit le)iuni ire%ersi ile. 6ac" aceste mecanisme nu mai sunt operati%e# celula continu" s" proli$ere)e. Celula malign" se a$l" *ntr-o interaciune dinamic" cu micromediul# ce determin" supra%ieuirea sau moartea ei. Imunogenitatea tumorilor pentru ga)d" i stimularea timpurie a r"spunsului imun antitumoral a condus la $ormularea conceptului imunosupraveg/erii# *n acord cu care# organismele elimin" celulele potenial canceroase care apar *n cursul %ieii indi%iduale. Con$orm acestui concept# cancerul clinic este consecina sc"p"rii celulelor maligne# de aciunea mecanismelor protectoare. 6e aceea# $actorii care inter$er" cu reacti%itatea imunitar"# predispun la malignitate. In concepia actual"# maligni)area este re)ultatul activrii oncogenelor sau pierderii funciei genelor supresoare ale oncogenelor +antioncogene,4 Aeoria supra%eg'erii imune a$irm" c" sistemul imunitar# monitori)ea)" constant organismul# pentru apariia celulelor tumorale i c" ma.oritatea acestor celule a erante suntdetectate i li)ate de sistemul imunitar# *nainte de a produce tumori clinice. (a se *nt0mpl" cu celulele tumorale intens imunogene. Da.oritatea >sau toate? celulele tumorale care apar spontan# sunt imunogene i r"spunsul imun in'i " creterea tumorii. (rgumentele *n $a%oarea sau contra acestei teorii sunt greu de o inut. ;le sunt e/trapolate din o ser%aii asupra tumorilor clinice. 6ispariia spontan" a tumorilor i recuperarea complet" a pacienilor cu cancer diseminat# este rar"# dar e/ist" i este e/plicat" prin insu$iciena %asculari)aiei# prin procese de di$ereniere a celulelor tumorale# prin mecanisme psi'osomatice. @ e/plicaie imunologic# este c" raportul dintre creterea tumorii i r"spunsul imun antitumoral este *n $a%oarea r"spunsului imun. ;/ist" do%e)i care sugerea)" c" organismul uman r"spunde la pre)ena tumorilor# prin mecanisme imunitare+ - regresia spontan# *n special a meloanoamelor maligne# a carcinoamelor renale# a neuro lastomului i retino lastomului# semnalat" *n peste 100 de ca)uri pu licateN

- unele tumori evolueaz latent# o lung" perioad"# adic" cresc $oarte *ncet sau sunt complet inacti%e i apoi rusc metasta)ea)". ,atena se poate e/plica prin ec'ili rul dintre tumor" i sistemul imunitarN - $rec%ent tumorile sunt infiltrate cu celule mononucleare+ lim$ocite# monocite# puine plasmocite. Celulele A i macro$agele sunt pre)ente a undent *n tumorile umane# suger0nd un r"spuns imun antitumoral. Celulele A acti%ate $a" de tumora autolog"# s-au i)olat din c0te%a tipuri de tumori>melanom malign# carcinom renal# cer%ical?. ;le recunosc peptide asociate cu moleculele CDO I# care sunt represate *n celulele normale sau peptide deri%ate din proteinele mutanteN - carcinoamele asociate cu reacie inflamatorie e%oluea)" mai lent dec0t cele care nu mani$est" un r"spuns in$lamatorN - tumorile sunt mai $rec%ente la organismele $oarte tinere >datorit" imaturit"ii sistemului imunitar? i la cele vrstnice >datorit" senescenei sistemului imunitar?N - anumite categorii de tumori >cancerele de piele cu papiloma %irus# lim$oamele po)iti%e pentru antigenele ;4I? au o inciden" crescut" la pacienii cu transplant# supui imunosupresiei. Imunosupresia prelungit" >20 de ani?# este asociat" cu creterea incidenei tumorilor de origine %iral"# *n timp ce incidena celorlalte categorii de tumori# crete $oarte puin. 6o%e)ile clinice sugerea)" c" r"spunsul imun este orientat predominant $a" de in$ecia cu %irusuri oncogene i neoncogene# iar rata apariiei altor tumori este relati% nemodi$icat". (ceasta arat"# indirect# c" supra%eg'erea antitumoral" este relati% ine$icient". 6atele e/perimentale spri.in" ideia c" supra%eg'erea imun" este orientat"# *n primul r0nd# $a" de %irusuri oncogene (6: i nu $a" de oncorna- sau $a" de tumorile induse de agenii c'imici carcinogeni.N - celulele metastatice sunt comune la pacienii cu cancer# dar $rec%ena implant"rii lor i creterea tumorilor secundare este mic". Efectorii r*spunsului imun antitumoral 6ac" sunt pre)ente# multe antigene tumorale stimulea)" r"spunsul imun la animalele de e/perien" i pot induce o stare de re)isten" antitumoral" $a" de celulele transplantate. 9"spunsul imun antitumoral are o e$icien" $oarte %aria il"# *n $uncie de natura antigenelor. (st$el# antigenele induse de %irusurile oncogene sau ale tumorilor induse de radiaiile 5I# sunt $oarte imunogene i stimulea)" r"spunsul imun protector# iar antigenele de transplantare ale tumorilor induse c'imic sunt sla e. Aumorile care apar spontan la animale i la om sunt puin antigenice i induc un r"spuns imun de mic" intensitate.

(ntigenele asociate celulelor tumorale sunt recunoscute ca nonsel$# de sistemul imunitar al ga)dei# dar tumorile secret" antigene solu"ile# care tind s" produc" $enomenul de inundare antigenic" i parali)ie imunitar". 9"spunsul imun antitumoral este /umoral i celular. (nticorpii speci$ici# de cele mai multe ori# nu au e$icien" antitumoral". Cel mai adesea# celulele tumorale supra%ieuiesc aciunii $actorilor 'umorali i se multiplic". Ine$iciena aciunii lor s-a demonstrat *n e/periene cu celule maligne *nc'ise *n camere poroase# permea ile numai pentru molecule# amplasate *n ca%itatea a dominal" a unor organisme imuni)ate cu mo.arat de esut tumoral. (nticorpii sunt e$ectori e$icieni $a" de celulele maligne de origine lim$oid" >leucemii# lim$oame?. 6up" acti%area complementului# se produce li)a celulei int". ;$ectorii imunit"ii antitumorale sunt celulele. 9olul lor s-a demonstrat cu acelai gen de e/perimente# cu celule maligne plasate *n camere poroase# care permit trecerea celulelor e$ectoare ale r"spunsului imun. 9e)ultatul aciunii celulelor imunitare este li)a celulei int". #ig4 166. Antigenul tumoral poate $i pre)entat celulelor A# pe di$erite c"i+ direct# *n a sena co-stimulilor necesari# re)ultatul $iind anergiaN direct de celula tumoral" care e/prim" molecule co-stimulatoare# re)ult0nd acti%area celulelor AcN direct de celulele tumorale i indirect %ia C&(# produc0nd acti%area lim$ocitelor Ac i A' >dup" 9oitt# 1997?. Imunitatea celular" antitumoral" este mediat" de celule capa ile s" li)e)e celulele int"# prin interaciune speci$ic" sau de celule care nu necesit" procese de recunoatere speci$ic". +olul celulelor 12 Celulele -. sunt cei mai importani e$ectori ai imunit"ii antitumorale. (ciunea lor nu este limitat" de identitatea moleculelor CDO i *i e/ercit" e$ectul prin contact direct. Celulele :L nu necesit" pre)entarea antigenului de c"tre celulele accesorii. Decanismul molecular al interaciunii lor cu celula int" nu este cunoscut. (cti%itatea celulelor :L se modi$ic" cu %0rsta+ are ni%el sc")ut la natere# atinge ma/imum la pu ertate i scade gradat cu %0rsta. (cti%itatea lor $a" de celulele maligne# in vitro# este in%ers proporional" cu ni%elul moleculelor CDO I# e/primate pe supra$aa celulelor maligne. ;/primarea moleculelor CDO I poate duce c'iar la sc"parea celulelor tumorale de a $i recunoscute de celulele :L# in vivo. <e presupune c" celulele :L controlea)" celulele pentru ni%elul e/presiei CDO I. Celulele care au pierdut total sau parial moleculele CDO I# par a $i recunoscute ca inte i li)ate. 6eoarece aciunea celulelor :L nu este restricti%"

*n raport cu moleculele CDO# ele sunt acti%e $a" de celulele tumorale singenice# alogenice i c'iar /enogenice. Importana $uncional" a celulelor :L pentru protecia antitumoral" este argumentat" de $aptul c" liniile de oareci congenital atimici sau cei timectomi)ai neonatal au un num"r mare de celule :L Celulele . interacionea)" cu celula int" prin intermediul receptorilor pentru !c Z. Celula tumoral" tapetat" cu Ig7 este ast$el uor recunoscut" de celulele L. ;le se acti%ea)" i li)ea)" celula int" prin $enomenul (6CC. (cti%itatea celulelor :L i L din s0nge# testat" in vitro# scade odat" cu progresia tumorii. ,a contactul cu celula malign"# direct sau mediat de anticorpi# celula e$ectoare eli erea)" $actori citoto/ici solu ili+ per$orina# protea)e# A:!-Q# lim$oto/ina >A:!-P?. Decanismul eli er"rii $actorilor litici este acelai# descris pentru lim$ocitulAc. Celulele :L# acti%ate in vitro de I!:-Z i de I,-2# se numesc ,(L >celule Ailler acti%ate de lim$oc'ine?. (cti%area celulelor :L i L nu produce memorie imun". :u e/ist" di$erene *ntre r"spunsul imun primar i secundar. Citoto4icitatea mediat* de macrofage Dacro$agul neacti%at >de la indi%i)i normali? e/prim" un ni%el minim de citoto'icitate antitumoral4 Dacro$agul activat distinge celulele tumorale de celulele normale i poate s" omoare selecti%# celulele tumorale. (cti%itatea sa citoto/ic" este independent" de moleculele CDO# dar este dependent" de $actori genetici.Dacro$agul se acti%ea)" *n urm"toarele situaii+ - dup" ce leag" prin receptorul pentru !c# moleculele de imunoglo ulin" $i/ate pe determinanii antigenici ai celulei maligne sau comple/ele Igb(g tumoral solu ilN - su aciunea $actorilor eli erai de celulele A sensi ili)ate >I!: Z? - su aciunea endoto/inelor acteriene - su aciunea antigenelor de M7co"acterium9 (isteria9 )o'oplasma sau dup" in$ecia cu aceste microorganisme intracelulare. (cti%area const" *n amplificarea ratei meta"olice i macro$agul de%ine Filler potenial al celulelor tumorale. Dacro$agul acti%at nu interacionea)" cu

antigenele tumorale speci$ice# dar ca i celulele :L# pare s" disting" *ntre celulele maligne i cele normale# prin mecanisme moleculare necunoscute. Dacro$agele acti%ate secret" di$erite molecule antitumorale+ - en)ime 'idrolitice care degradea)" esutul con.uncti% - I!:-Q# acti%ator al celulelor :L - A:!-Q >caectina? cu e$ect stimulator asupra altor celule care eli erea)" I, - O2@2 i produi de o/idare a gluco)ei# cu e$ect to/ic direct asupra celulei int"# prin pertur "ri mem ranare - o/idul nitric >:@?# to/ic pentru celulele maligne. :@ se $ormea)" prin com inarea o/igenului cu a)otul deri%at din de)aminarea en)imatic" o/idati%" a ,-argininei. 9eacia este catali)at" de nitric-o/id-sinta)". :@ media)" citoto/icitatea macro$agului# dependent" de ,-arginin". 5na din cau)ele primare ale patologiei maligne este metastazarea# adic" eli erarea celulelor din situsul tumorii primare# pentru a iniia la distan"# creterea unei noi tumori. Celulele metasta)ate au aceleai antigene de supra$a"# ca i tumora primar". &rincipalele situsuri de metasta)are sunt ganglionii lim$atici# pl"m0nul# $icatul. 1n studiile e/perimentale# macro$agele acti%ate s-au do%edit a $i $oarte e$iciente *n reducerea incidenei metasta)elor unor tumori. Imunitatea mediat* de celulele ! Imunitatea antitumoral" mediat" de celulele A# ca mecanism# este analog" r"spunsului imun $a" de alte antigene A-dependente >de e/emplu# antigenele CDO?. ;/perienele in vitro au e%ideniat c" antigenele tumorale stimulea)" proli$erarea tuturor su populaiilor de lim$ocite A >A'# As# Ac?. !unciile e$ectoare ale Q?# lim$ocitelor A sunt stimulate de lim$oc'ine i monoc'ine >I,-1 i A:!sinteti)ate i secretate de macro$agele care pre)int" antigenele tumorale solu ile. I,-1 stimulea)" proli$erarea celulelor 4# A i :L. I,-1 produce i r"spunsul $e ril *n reacia in$lamatorie# iar A:!-Q determin" necro)a celulelor tumorale. ,im$ocitele AC64 >i :L? secret" I,-2# cu e$ect stimulator asupra celulelor care o secret".

I!: Z este secretat de celulele AC64 >i :L? i acti%ea)" macro$agele i celulele :L. Inter$eronul are e$ect antitumoral direct# dar este i imunomodulator. ,im$ocitele Ac au rol important *n li)a celulelor tumorale# dac" acestea e/prim" molecule CDO I. Interaciunea lim$ocitului Ac cu celula malign" este speci$ic". ,im$oto/ina produs" de lim$ocitul Ac are e$ect litic direct asupra celulelor tumorale. Celula tumoral" e/pune pe supra$aa ei# antigene asociate cu moleculele CDO I# dar elimin" i molecule solu ile# care sunt preluate de C&( i pre)entate lim$ocitelor A'. (cestea secret" I,-2# acti%atoare pentru toate tipurile de celule cu $uncie imunitar"# speci$ic" sau nespeci$ic". 1n conclu)ie# reacia imun" $a" de celulele tumorale are dou" trepte. In prima etap" sunt acti%ate celulele efectoare nespecifice >macro$age# eo)ino$ile# neutro$ile# celule :L? i se produce o reacie in$lamatorie local". 9eacia nespeci$ic" uurea)" reacia imun specific9 prin diminuarea ratei de cretere a tumorii i creterea ni%elului de pre)entare a antigenelor tumorale de c"tre celulele maligne# prin modularea e/prim"rii moleculelor CDO. In $a)a a II-a# celulele Ac asigur" protecia imun" $a" de creterea tumorii. Celulele e$ectoare ale imunit"ii mediate celular# speci$ic" i nespeci$ic"# sunt e$iciente *n detectarea i li)a celulelor tumorale izolate i transplantate. 6eoarece detectea)" celulele tumorale i)olate# ele sunt e$iciente *n prevenirea metastazelor# dar sunt ine$iciente $a" de celulele care constituie o microtumor". Mecanisme de sc*pare a celulelor tumorale (ntigenele tumorale se g"sesc pe supra$aa celulelor tumorale. ;le sunt antigene A<A(# mai concentrate sau mai diluate. (ntigenele CDO normale nu dispar# dar diminu" cantitati%. Creterea tumorilor# *n condiiile acti%"rii r"spunsului imun# nu este e/plicat" satis$"c"tor. <-au propus mai multe mecanisme prin care celulele tumorale e%it" recunoaterea de c"tre e$ectorii r"spunsului imun. C0nd sistemul imunitar este alertat# esutul tumoral este prea de)%oltat i nu mai poate $i *nl"turat. 6e cele mai multe ori# tumora nu este imunogen. ,ipsa imunogenit"ii nu se datorea)" a senei antigenelor tumorale# ci $aptului c" celulele tumorale nu sunt e$iciente *n pre)entarea antigenului. Cel mai surprin)"tor i cel mai studiat mecanism de e%itare a r"spunsului imun este modularea antigenic4 !enomenul modul"rii antigenice de$inete capacitatea tumorii de a masca sau de pierde antigenele# *n pre)ena e$ectorilor imunitari. 6e e/emplu# celulele leucemice transplantate la oarecele imuni)at cu

mo.aratul celulelor leucemice care conin antigenul A,# au pierdut antigenul A,# dar antigenul reapare dup" transplantul celulelor leucemice la oarecii care nu au anticorpi serici anti-A,. Imunoselecia. (ntigenele e/primate pe supra$aa celulelor tumorale acti%ea)" r"spunsul imun mediat celular# iar antigenele solu ile stimulea)" sinte)a anticorpilor. 5nele celule tumorale# ca re)ultat al insta ilit"ii genetice# pierd antigenele iniiale i ast$el e%it" e$ectorii r"spunsului imun speci$ic. ;le de%in dominante *n masa tumorii. :oile %ariante antigenice induc r"spunsul imun speci$ic# dar $enomenul sc'im "rii speci$icit"ii antigenice se repet". 9"spunsul imun nu induce sc'im area speci$icit"ii antigenice a supra$eei celulei maligne# ci selectea)" celulele care au su$erit modi$icarea antigenic" i ast$el au de%enit re)istente la aciunea e$ectorilor imunitari. Diminuarea reactivitii imunitare pe cale natural" sau arti$icial" este *nsoit" de creterea incidenei neopla)iilor. Imunosupresia natural" este mediat" de lim$ocitele As. (ntigenele tumorale par s" acti%e)e mai uor celulele As dec0t lim$ocitele A'. ,im$ocitele As sunt mai numeroase la pacienii neopla)ici i pot s" represe)e r"spunsul imun p0n" la ine$icien" total". Celulele tumorale secret" citoc/ine cu aciune imunosupresoare# prin e$ectul lor in'i itor asupra interleuc'inelor. Celulele maligne produc I,-10# detectat" *n lic'idul peritoneal i *n serul pacientelor cu cancer o%arian sau cu alte neoplasme intraperitoneale. I,-10 in'i " e/primarea moleculelor CDO II pe supra$aa monocitelor i macro$agelor i diminu" reacti%itatea imunitar" prin e$ectele sale multiple asupra lim$ocitelor# monocitelor# celulelor :L i celulelor dendritice. 9eacti%itatea imunitar" poate s" diminue datorit" mascrii antigenelor tumorale. 6e e/emplu# sialomucina# a undent" pe supra$aa celulelor unor tumori# masc'ea)" antigenele tumorale i le $ace inaccesi ile recunoaterii imunitare i e$ectorilor imunitari. <ialomucina poate $i *ndep"rtat"# in vitro# prin tratamentul celulelor cu neuraminida)" de $i"rio c/olerae i celulele *i do 0desc sensi ilitatea la aciunea litic" a e$ectorilor imunitari. Diminuarea reactivitii imunitare se poate datora inundrii organismului cu antigenele tumorii4 !iind o celul" $oarte acti%" din punct de %edere meta olic# componentele mem ranei sale au un turn-o%er ridicat. (ntigenele eli erate se comple/ea)" cu anticorpii speci$ici sau cu receptorii speci$ici ai lim$ocitelor# $"c0ndu-i ine$icieni *n recunoaterea celulelor maligne. ;$ectul imunosupresor al antigenelor tumorale este proporional cu dimensiunile tumorii i dependent de e/istena metasta)elor. ;$ectul de inundare cu antigenele tumorii este argumentat de e/perienele de transplant tumoral. :um"rul celulelor transplantate este determinant pentru de)%oltarea tumorii. 7re$area unui num"r mic de celule >prin in.ectarea

suspensiei? este urmat" de respingere# iar gre$area unui num"r mare de celule este urmat" totdeauna de creterea tumorii. 6up" ce organismul a respins un num"r mic de celule maligne transplantate# se %a ap"ra $a" de un num"r progresi% cresc0nd de celule de acelai tip. Imunitatea de transplantare $a" de antigenele tumorale poate $i dep"it" de un num"r de 100-10 000 mai mare de celule tumorale# dec0t num"rul de celule necesar gre$ei tumorii la animalele neimuni)ate. Efectul imunosupresor al tumorii. &acienii purt"tori de tumori mari nu r"spund la antigenele tumorale# iar lim$ocitele lor in vitro# au o sla " acti%itate citoto/ic" $a" de celulele tumorale autologe. (ntigenele tumorale e/ercit" un efect imunosupresor *n gradient. ,a un situs *ndep"rtat de tumor"# e$ectul imunosupresor diminu" i inoculul mic de celule tumorale este respins. 6up" ce tumora a do 0ndit dimensiuni importante# e$ectul imunosupresor este sistemic. (ntigenele tumorale circulante se asocia)" cu celulele e$ectoare ale sistemului imunitar# c'iar *n s0ngele circulant# produc0nd parali)ia r"spunsului imun. Creterea tumorii poate $i stimulat" prin $enomenul de en/ancement imunitar. !enomenul de en'ancement# descoperit e/perimental# se de$inete ca un proces de intensi$icare a creterii tumorii# *n pre)ena anticorpilor speci$ici. Aumorile au $ost transplantate la organisme imuni)ate cu mo.arat celular al aceleiai tumori# pentru sinte)a anticorpilor speci$ici. (nticorpii nu numai c" nu resping celulele gre$ate# ci determin" un e$ect in%ers# de stimulare a creterii tumorii# comparati% cu creterea sa la animalele neimuni)ate. (nticorpii cu e$ect de en'ancement sunt Ig7# la titru mic. !enomenul de en'ancement se e/plic" ast$el+ - anticorpii ar putea induce un e$ect imunosupresor# deoarece prin $eedacF in'i " sinte)a anticorpilor potenial citoliticiN - anticorpii de en'ancement sunt cito$ili# adic" se leag" speci$ic pe supra$aa celulelor tumorale# $orm0ndu-se comple/e (g-(c# care loc'ea)" $i)ic ataarea e$ectorilor 'umorali sau celulari. ;%oluia tumorii este condiionat"# *ntr-o oarecare m"sur"# de tipul anticorpilor care se sinteti)ea)". )olerana imunitar este un mecanism e$icient de sc"pare a celulelor tumorale de aciunea e$ectorilor sistemului imunitar. Aolerana se datorea)" lipsei de reacti%itate a lim$ocitelor Ac i 4# care la contactul cu antigenele tumorale nu se sensi ili)ea)" i nu generea)" r"spunsul imun# dei $a" de alte antigene# reacti%itatea imunitar" este normal". Aolerana sur%ine datorit" stimul"rii repetate

cu cantit"i mici de antigene# dar un rol esenial *n inducerea toleranei imunitare pare s" re%in" raportului dintre lim$ocitele A' i As. 6i$erite produse tumorale# altele dec0t antigenele# pot s" inter$ere cu $uncia imunitar" i s" $a%ori)e)e instalarea toleranei imunitare. 6e e/emplu# prostaglandinele diminu" ni%elul e/prim"rii moleculelor CDO II pe supra$aa celulelor pre)entatoare de antigen i pot de asemenea s" suprime acti%itatea celulelor :L. !actorii genetici# neidenti$icai# in$luenea)" e%oluia tumorii. 5nele neopla)ii sunt asociate cu incapacitatea lim$ocitelor A de a acti%a r"spunsul imun# pro a il datorit" incapacit"ii lor de a recunoate antigenul. 1n conclu)ie# micile acumul"ri de celule tumorale# stimulea)" r"spunsul imun. 6ar# c'iar tumorile imunogene continu" s" creasc" la ga)dele imunocompetente# datorit" e$icienei sc")ute a r"spunsului imun antitumoral in vivo. Aumorile e%it" aciunea distructi%" a e$ectorilor imunitari sau loc'ea)" c'iar r"spunsul imun. A'ord*ri terapeutice ale neoplaziilor Aerapia neopla)iilor este a ordat" pe urm"toarele c"i+ c'irurgical"# radioterapia# c'imioterapia i imunoterapia. @ricare ar $i modalitatea de tratament# este necesar" reducerea preala il" a masei tumorale prin re.ecie c'irurgical". Aerapia c/irurgical are ca scop reducerea dimensiunilor tumorilor solide# *n stadiile timpurii ale neoplasmelor de s0n# colon# pl"m0n# prostat" - cele 4 malignit"i ma.ore la om# ce repre)int" peste 50M din totalul tumorilor solide. *adioterapia poate $i primar" sau secundar". Cea primar" se practic" *n cancerele capului# g0tului i *n maladia OodgFin >neopla)ie a ganglionilor lim$atici# din di$erite regiuni ale corpului?. 9adioterapia este mai e$icient" pentru esuturile moi# *n arii adiacente ma/ilarelor i c"ilor na)ale. Iradierea total" se practic" *nainte de transplantul m"du%ei osoase i este $oarte e$icient" pentru anumite leucemii acute# re$ractare la c'imioterapie i pentru tratamentul unor tumori solide >cancer de s0n?# care au re%enit dup" c0i%a ani de remisiune. C/imioterapia const" *n tratamentul cu medicamente citoto/ice# ma.oritatea $iind produse de sinte)" c'imic". <copul c'imioterapiei este de a omor* selecti% celulele maligne# deoarece au o rat" superioar" de cretere i di%i)iune. Cele mai sensi ile la c'imioterapie sunt leucemiile. ;$ectul medicamentelor citoto/ice este dependent de do)". 6o)ele prea mici nu produc e$ect# iar cele mari au e$ecte to/ice asupra organismului# *n special asupra m"du%ei osoase i asupra celulelor cu o rat" mare de di%i)iune. 6o)a se calculea)" la aria de supra$a" corporal"# pre$era il" raport"rii la greutate. Da.oritatea agenilor citoto/ici se

administrea)" intra%enos# calea oral" $iind adec%at" pentru ciclo$os$amid" >i pentru tamo/i$en?. (genii c'imioterapeutici# *n $uncie de mecanismul aciunii lor# aparin mai multor clase. Agenii alc/ilani induc $ormarea leg"turilor trans%ersale sta ile *ntre cele dou" catene ale (:6 >prin legarea de : 7 a guaninei? i in'i " replicarea moleculei de (6:. Interaciunea poate s" se produc" cu una sau cu am ele catene (6:. (lc'ilarea guaninei induce *mperec'erea anormal" cu timina sau depurinarea prin e/ci)ia resturilor de guanin". Consecina este ruperea catenei de (6:. 6ac" leg"tura trans%ersal" se $ace *ntre resturile de guanin" ale celor dou" catene# e/ci)ia reparatorie poate s" rup" molecula de (6: i s" re)ulte o mutaie letal" pentru celul". (genii alc'ilani reacionea)" c'imic cu grup"rile sul$'idril# amino# 'idro/il i $os$at. (ciunea lor nu are speci$icitate de $a)" a ciclului celular# dar celulele sunt mai sensi ile *n $a)a 7 1 i <. ;$ectul se mani$est" prin locarea ciclului celular dup" $a)a 7 2. Decanismul re)istenei do 0ndite la agenii alc'ilani poate s" conste *ntr-o retenie sc")ut" a agentului *n celul"# *n creterea sinte)ei compuilor sul$'idril cu greutate mic" i *n creterea capacit"ii de reparare a le)iunilor (6:. 6ei au mecanisme asem"n"toare de aciune# di$erenele structurii moleculare reduc gradul re)istenei *ncruciate *ntre compuii su claselor ma.ore. ;$ectele secundare sunt gastrointestinale >grea"# %om"? i 'ematologice >mielosupresie?. Ciclofosfamida este cel mai $olosit agent alc'ilant# *n tratamentul malignit"ilor 'ematologice i a tumorilor solide. ;ste con%ertit" la $orma acti%" *n $icat Compuii platinei >cisplatin# car oplatin? nu sunt ageni alc'ilani# dar acionea)" printr-un mecanism similar# adic" se leag" de : 7 al guaninei i reali)ea)" legarea *ncruciat" a catenelor de (6:. <e leag" i cu alte molecule+ adenina# cito)ina# (9:# proteine. Antimeta"oliii >citara ina# $luorouracil# metotre/at# mercaptopurina# 'idro/iureea? sunt analogi ai a)elor a)otate i in'i " sinte)a (6:# (9: sau sinte)a proteinelor. <unt ageni cu speci$icitate de $a)" a ciclului celular. Antagonitii pirimidinelor4 Citara"ina +Ara&C, este un compus cu speci$icitate de $a)" <. ;ste meta oli)at" *n celul" la $orma acti%"# ara-CA&# in'i itor al (6:-polimera)ei i al sinte)ei (6:. (ra-C este *ncorporat" *n (6: i loc'ea)" alungirea catenei# ca i legarea $ragmentelor *n molecula de (6: nou sinteti)at". Antagonitii purinelor. =&mercaptopurina i =&tioguanina sunt con%ertite la $orma nucleotidic" de /ipo/antin-guanin fos$ori o)il trans$era)" >O7&9A?.

Deta oliii lor in'i " unele en)ime ale c"ii purinice. 5nii meta olii ai 6-tioguaninei sunt *ncorporai *n (6: i *n (9:. #ludara"ina este analog al adeninei. 6eri%atul s"u# $ludara in-tri$os$at# acionea)" prin in'i iia (6:-polimera)ei i ri onucleotid-reducta)ei i prin *ncorporarea *n (6: Antagonitii acidului folic >metotre/at# aminopterina? sunt analogi structurali ai acidului $olic. Alcaloizii din plante >%incristina i %in lastina# i)olai din $inca rosea?# produc agregarea tu ulinei i de)organi)area microtu ulilor celulari. $in"lastina este to/ic" pentru m"du%a 'ematopoetic"# iar vincristina are e$ecte to/ice ma.ore asupra terminaiilor ner%oase peri$erice# produc0nd neuropatii sen)oriale >pareste)ie# adic" lipsa sen)aiei de durere? i motorii# *n degete. &entru un num"r mare de categorii de tumori# c'imioterapia determin" o citoreducere important". 6ar# la c0te%a luni sau la c0i%a ani# creterea tumoral" este reluat" i continu" c'iar *n condiiile reinstituirii tratamentului. Creterea re$lect" do 0ndirea rezistenei speci$ice la medicamentele administrate. 1n general# de)%oltarea re)istenei la un medicament este considerat" ca re)ultat al unei rate *nalte a mutaiilor celulelor maligne# consecina $iind apariia unor su populaii 'eterogene# din care unele sunt re)istente la di$erite medicamente. Cea mai important" mutant" este cea cu rezisten medicamentoas multipl# mediat" de glicoproteina P9 o glicoprotein" mem ranar"# care $uncionea)" ca o pomp de eflu'# dependent" de energie. &ompa elimin" acti% din celul"# o %arietate de ageni citoto/ici+ alcaloi)ii din plante# anti ioticele >dactinomicina# do/oru icina# daunoru icina? i unii ageni sintetici >melp'alan?. Celulele maligne mutante# care e/prim" gena codi$icatoare a glicoproteinei &# sunt re)istente la o larg" %arietate de medicamente anticanceroase. Imunoterapia *ncearc" s" distrug" celulele maligne# prin manipul"ri de stimulare a reacti%it"ii a sistemului imunitar. In.ectarea citoc'inelor sau stimularea in vitro9 cu I,-2# a lim$ocitelor autologe# o inute din s0ngele pacientului# are e$ecte stimulatoare asupra r"spunsului imun. 9areori s-a produs remisiunea complet" a neuro lastomului# a carcinomului renal sau a melanomului malign# ceea ce e%idenia)" c" r"spunsul imun $a" de aceste neopla)ii poate $i stimulat. #ig4 16B. Dodelul unei celule maligne care e'prim glico& proteina P# o protein" transmem ranar" care $uncio-nea)" ca o pomp de efluaturale sau artifi&ciale,9 dup care sunt pompate la e'teriorul celulei4 #uncia glico&proteinei P poate

fi in/i"at c'. ;a are situsuri acceptoare la care se leag" di$erite medicamente anti-canceroase >nompetiti% de ageni c'imio-sensi ili)atori ca %erapamil. Cea mai o inuit" $orm" de terapie imun" a neopla)iilor este utili)area anticorpilor monoclonali >(DC? cu speci$icitate tumoral"# cuplai cu to/ine >to/ina di$teric"# to/ina de ricin? sau cuplai cu ageni c'imici >I 131# medicamente citoto/ice?# ce suprim" proli$erarea celular". In ansam lu# terapia cu (DC nu a reuit. Cele mai $rec%ente tumori >de colon# de s0n# de pl"m0n# de prostat"? poart" antigene proteice intracelulare# inaccesi ile (DC. <trategiile c'imioterapeutice au progresat mult i o$er" mai multe anse de reuit"# la un pre de cost in$erior. 1n tratamentul lim$oamelor celulelor 4 se $olosesc (DC anti-idiotipici $a" de imunoglo ulina mem ranar" a lim$omului. !timularea nespecific a esutului lim$oid este o metod" terapeutic" introdus" de 7. Dat'a. ;l a administrat 4C7 pentru terapia leucemiilor lim$o lastice la copii. 9emisiunile se prelungesc ca durat". Celulele de Cor7ne"acterium parvum au e$ecte antitumorale# *n asociere cu c'imioterapia# iar celule de C4 parvum i 4C7 in.ectate direct *n masa tumorii# in'i " creterea tumorii. (ntigenele acteriene stimulea)" imunitatea mediat" celular. Celulele lim$oide sunt atrase *n num"r mare la locul in.ect"rii i aciunea lor este orientat" asupra celulelor tumorale. Dacro$agele se acti%ea)" la contactul cu antigenele acteriene i do 0ndesc propriet"i citoto/ice $a" de celulele tumorale# e%ideniate in vitro. Interferonul G >produs de leucocite? se utili)ea)" *n tratamentul unor leucemii i *n tratamentul lim$oamelor# dar este to/ic# ceea ce impune limitarea do)ei. Da.oritatea pacienilor# dup" administrarea inter$eronului# $ac un 2sindrom al st"rii gripale3+ $e r"# sen)aie de $rig# dureri de cap# dureri musculare. (ceste simptome diminu" pe parcursul terapiei i sunt controlate# parial# cu di$erii ageni $armacologici. Imunoprofila'ia cu vaccinuri# pentru anumite %irusuri# a a%ut succes la animale. 4oala lui DareF# produs" de un 'erpes%irus# este o maladie lim$oproli$erati%" la puii de g"in". Incidena leucemiei $elinelor a sc")ut# ca re)ultat al unui program de %accinare. :u e/ist" %accinuri protectoare $a" de neopla)iile umane.

I&UNI- -, 4N -R NSP7 N-U7 D, @,SU-URI ;I (R6 N,

C'irurgia transplantului a dep"it di$icult"ile de ordin te'nic. 9euita transplantului depinde e/clusi% de reacti%itatea imunitar"# care declanea)" un r"spuns de respingere. Ideia *nlocuirii unui organ le)at# cu unul s"n"tos# a preocupat medicina din timpuri $oarte *ndep"rtate. 1n mitologia greac" se %or ea de organisme /imere# p"strate i ast")i *n repre)ent"rile sculpturale su $orma montrilor $a uloi# a c"ror origine sugerea)" o tripl" 'eterogre$"+ leu-capr"-coad" de dragon sau leucapr"-arpe. Com inaia este interpretat" ca o materiali)are pe plan a stract# a ideii de a asocia organisme $oarte di$erite. <irenele >.um"tate $emeie-.um"tate pete? i minotaurii >.um"tate om# .um"tate taur? e/primau ideia de asociere a acestor organisme $oarte di$erite. &erioada tiini$ic" a transplantului *ncepe cu (le/is Carrel >medic american# care a lucrat *n !rana# autorul lucr"rii 2@mul E $iin" necunoscut"3?# cel care a pus a)ele culti%"rii celulelor i esuturilor. In 1902# Carrel a $"cut gre$e de rinic'i la animale. In 1906# a gre$at pl"m0ni la pisic" i a $"cut primul transplant de inim" la c0ine# leg0nd inima de %asele regiunii cer%icale. (nimalul a tr"it 21 de ore. L. ,andsteiner# unul din promotorii perioadei tiini$ice# a descris grupele sanguine i condiiile de compati ilitate ma.or" *ntre donor i receptor. In 1944# DedaKar a conc'is c" respingerea gre$elor de esuturi i organe are cau)e imunitare# iar cur0nd dup" aceea# 4illing'am# 4rent i DedaKar au descris $enomenul de toleran imunitar. 7. Dat'a >'ematolog $rance)? a creat /imerele "iologice. ;l a pornit de la ideia c" $enomenele de respingere a gre$elor de esuturi i organe sunt datorate stimul"rii acti%it"ii sistemului imunitar. In lucr"rile sale e/perimentale# a recurs la metoda paralizrii reactivitii imunitare. In acest scop# puii nou-n"scui de o olan au $ost supui iradierii totale# cu do)a de 800 de ra)i. 9e)ultatul iradierii este des$iinarea arierelor imunitare# adic" ani'ilarea reacti%it"ii imunitare $a" de gre$". ,a animalele iradiate a inoculat c0te%a milioane de celule din m"du%a osoas" de oarece. (utorul a creat ast$el# /imera "iologic oarece-o olan >o olan cu elemente $igurate sanguine de oarece?. Oimera este sensi il" la in$ecia cu %irusul leucemiei oarecelui i $ace leucemia# *n timp ce o olanii con%enionali sunt re)isteni la in$ecia cu acest %irus. Oimera iologic" este orice organism dotat *n mod arti$icial cu componente celulare# cu esuturi sau organe# care pro%in de la alte organisme. 5lterior# te'nicile de inginerie genetic" au creat molecule de (6: 'imere i c'iar microorganisme 'imere# ce poart" in$ormaie genetic" pro%enit" de la dou" specii di$erite. 1n 1967# C'ristian 4arnard a reali)at primul transplant de cord la om.

6enumirea de gre$"# $olosit" curent pentru esutul implantat *n organismul str"in# %ine de cu%0ntul grecesc grafion# care desemnea)" un instrument de scriere prin gra%ur". 6enumirea a $ost ulterior $olosit" cu *nelesul de altoi la plante. 6enumirea de transplant a $ost $olosit" de &aracelsus i *nseamn" a transfera9 a muta. :oiunea de transplant are un sens mai larg. ;a include $ecundarea o%ulului de c"tre spermato)oid# ca transplant natural. !"tul este o alogre$" natural"# ce poart" in$ormaia genetic" de origine patern"# dar este prote.at prin mecanisme cu aciune placentar"# de $enomenele de respingere. )erminologie4Aerminologia modern" re$eritoare la gre$" are trei origini+ c'irurgical"# imunologic" i genetic". 5ni$ormi)area ei a $ost cerut" de @D<. 9elaia genetic" i antigenic" *ntre organismul donor i receptor Indi%idul este at0t Identitate utogref donor c0t i receptor Jrganisme I)ogre$" identice ale >7re$" unei linii Singref =esut singenic Identitate i)ogen" in red. >Oomogre$" singenic"? >congenic? 7re$" &entru om# i)olog"? gemeni uni%itelini. Allos B altul @rganisme ale aceleiai logref 7re$" 6i$erite =esut alogenic specii dar cu >Oomogre$" alogenic"? 'omolog" %ariante alelice di$erite. !oarte <enogref Oeterogre$" =esut /enogenic 8enos B di$erite str"in 7re$" autolog" =esut autogenic >auto'ton"# autogen"?

Aipul de gre$" >6enumire nou"?

6enumire %ec'e

Aipul de esut

@ ser%aii

>7re$" 'eterolog"?

Indi%)ii aparin unor specii di$erite >c0ine iepure?.

Autogrefele se practic" cu o $rec%en" mare+ *n ca)uri de arsuri# inter%enii c'irurgicale estetice. &ielea dintr-o regiune a corpului este implantat" *ntr-o )on" compromis". (lte denumiri se re$er" la particularit"ile esutului transplantat+ -c gre$ele 'omo%itale se $ac pentru asigurarea %ia ilit"ii esutului transplantat -c gre$ele 'omostatice sunt acelea *n care esutul gre$at are rolul numai de suport structural# pe care se poate de)%olta esutul ga)dei# pentru resta ilirea ar'itecturii iniiale. (st$el de gre$e sunt lipsite de orice urm" de esut antigenic# se practic" pentru a *nlocui un $ragment de %as sau de os. 1n raport cu locul de unde esutul a $ost luat i locul unde se reimplantea)"# se disting gre$e ortotopice >esutul gre$at este ae)at la receptor *n aceiai po)iie? i gre$e /eterotopice >esutul gre$at este implantat *n alt situs anatomic al organismului receptor?. 6up" 1956# primul succes al gre$ei de rinic'i *ntre gemeni uni%itelini# transplantul de organe a de%enit o practic" curent". Interesul pentru transplant sa deplasat de la actul c'irurgical# la aspectele imunologice. Argumente ale rolului reactivit*ii imunitare 3n respingerea grefei 9espingerea gre$ei este re)ultatul acti%"rii mecanismelor imunitare# datorit" di$erenelor antigenice *ntre moleculele CDO I i II ale donorului i receptorului. In $a%oarea acestei a$irmaii argumentea)" mai multe $apte de o ser%aie+ -c autogre$ele i singre$ele sunt acceptate totdeauna# dac" sunt respectate condiiile de asepsieN -c gre$a *ntre indi%i)i di$erii este respins" cu at0t mai rutal# cu c0t di$erenele antigenice> ioc'imice? dintre moleculele CDO ale donorului i receptorului sunt mai mariN

D R

( ---------------- ( ----- @ 7re$a prinde4 4 ---------------- ( ---- 0 7re$a este respins9 pentru c" organismele di$er" prin moleculele CDO. 4 --------------- (/4 ---- @ 7re$a este acceptat4 Capacitatea de a accepta o gre$" depinde de e/istena la organismul receptor# a tuturor genelor de 'istocompati ilitate ale donorului. 6ac" receptorul are un antigen suplimentar# gre$a este acceptat". (/4 ----------- 4 ------ 0 6ac" donorul posed" un antigen suplimentar $a" de receptor# gre$a este respins4 -c din punct de %edere 'istologic# esutul gre$at respins este in$iltrat cu celule e$ectoare ale r"spunsului imun+ lim$ocite# macro$age# plasmociteN -c animalele timetomi)ate au o capacitate sc")ut" de respingere a gre$elor de esuturi i organe# care se resta ilete dup" gre$area timusuluiN -c de utul $enomenelor de respingere este $oarte mult *nt0r)iat# dac" organismului receptor de gre$" i se administrea)" ser antilimfocitar ><(,?N -c $enomenele de respingere sunt mai intense la copii# datorit" a undenei esutului lim$oid# dar sunt mult atenuate la "tr0ni. (rgumente indirecte *n $a%oarea respingerii imunitare+ -c organele gre$ate rapid dup" recoltare sunt suportate mult mai ine dec0t cele care au $ost p"strate o perioad" mai lung" de timp *n a$ara organismului. =esutul transplantat dup" o perioad" de p"strare# conine mai multe celule le)ate i li)ate# din care se eli erea)" molecule nonsel$# care ampli$ic" r"spunsul imunN -c conser%area *n condiii optime m"rete gradul de toleran" $a" de esutul gre$at# iar p"strarea neadec%at" are e$ecte de$a%ora ileN -c organele i esuturile s"n"toase sunt tolerate mai ine dec0t cele care pre)int" o stare de u)ur" iologic".

,/(7U@I

R,SPIN6,RII 6R,F,I D, PI,7,

1n raport cu dinamica des$"ur"rii# se disting trei modalit"i de respingere a gre$ei de piele. *espingerea acut sau /iperacut este $oarte rar *nt0lnit" i se datorea)" incompati ilit"ii totale *ntre donor i receptor# care nu aparin aceluiai grup sanguin *n sistemul (4@. In organismul receptor de gre$"# e/ist" anticorpi ? $a" de antigenele esutuluicirculani pre$ormai >aglutininele Q i transplantat. ,or li se adaug" e$ectele imediate produse de macro$agele i neutro$ilele acti%ate# de ana$ilato/inele eli erate din $i/area complementului. Iasele din organul gre$at se o turea)" prin $ormarea trom ilor de coagulare. 7re$a nu se %asculari)ea)"# r"m0ne al " i *n c0te%a ore este respins". *espingerea dup dinamica rspunsului imun primar sur%ine *n ca)ul *n care# *ntre donor i receptor este o incompati ilitate relati%". 7re$a se %asculari)ea)"# do 0ndete o culoare normal" >ro)"?# dar dup" 10-12 )ile# culoarea se *nc'ide# de%ine purpurie# apar $enomene de respingere i gre$a este eliminat". *espingerea dup dinamica rspunsului imun secundar este de tip accelerat i are loc la organismele la care gre$a s-a repetat dup" o alt" gre$" cu esut de la acelai organism donor sau de la un organism al aceleiai linii in red. 9"spunsul este accelerat# *n sensul c" $enomenele de in$iltraie cu macro$age# neutro$ile i lim$ocite A sensi ili)ate# se produc $oarte repede i *n 3-4 )ile# gre$a este respins". +espingerea grefei de rinichi *espingerea /iperacut se produce $oarte repede dup" ce s-au sta ilit cone/iunile %asculare cu organul gre$at i se datorea)" incompati ilit"ii totale *ntre donor i receptor# care nu aparin aceluiai grup sanguin *n sistemul (4@. In primele ore dup" sta ilirea cone/iunilor %asculare se produce *ncetinirea $lu/ului sanguin# urmat" de o sta)" circulatorie *n organul gre$at. 9inic'iul se *ncarc" cu o cantitate mare de s0nge i do 0ndete culoarea roie# $enomen denumit /epatizare. @prirea circulaiei sanguine iniia)" procesul de coagulare la ni%elul capilarelor sanguine. Cauzele respingerii /iperacute. In s0ngele organismului receptor se g"sesc anticorpi preformai >aglutinine?# speci$ici $a" de antigenele din organul gre$at. (ntigenele de grup sanguin *n sistemul (4@ se g"sesc nu numai pe eritrocite# ci i pe celulele endoteliale ale capilarelor sanguine. Aglutininele G i ale receptorului de gre$" a.ung *n rinic'iul gre$at imediat dup" reali)area anastomo)elor %asculare. <e $ormea)" comple/e antigen-anticorp care iniia)" $i/area complementului. ;ndoteliul capilar su$er" mici le)iuni# su$iciente pentru a determina apariia supra$eelor rugoase# de care ader" &D::. ,a acest ni%el# celulele endoteliale e/prim" selectinele# prin intermediul c"rora leucocitele ader" de endoteliu i p"r"sesc circulaia. ,a ni%elul supra$eei rugoase se acumulea)"

trom ocitele# care se agreg" treptat i *mpreun" cu $actorii plasmatici# $ormea)" trom i care o turea)" lumenul capilar. 1n 48 de ore# arteriolele i capilarele se trom o)ea)". 9espingerea 'iperacut" este o reacie de activare endotelial i gre$a este respins" ca o /enogre$". &entru a elimina anticorpii naturali# se practic" plasma$ere)a s0ngelui receptorului i a sor ia anticorpilor pe coloan". Complementul este eliminat prin administrarea %eninului de co r". *espingerea acut se produce *n dou" %ariante dinamice+ -c respingerea acut" precoce# *n 10-14 )ile de la transplantare -c respingerea acut" tardi%"# *n circa 4 luni. 6up" gre$area esutului# o parte a antigenelor tisulare se eli erea)" din rinic'i i trec *n circulaie# a.ung0nd *n ganglionii lim$atici regionali. Antigenele declan/atoare ale respingerii grefei Doleculele CDO ale esutului gre$at stimulea)" un r"spuns imun intens al organismului receptor# a c"rui $inalitate este respingerea gre$ei. Doleculele CDO I se g"sesc pe toate celulele nucleate# dar au un ni%el %aria il de e/primare. Doleculele CDO II au o distri uie limitat"+ pe macro$age# pe lim$ocitele 4# pe unele celule epiteliale i endoteliale# pe celulele dendritice. :i%elul de e/primare a moleculelor CDO I i A:! Q?. &olimor$ismul e/tensi% ali II este modulat de citoc'ine >I!: moleculelor CDO limitea)" posi ilitatea transplantului numai *ntre parteneri compati ili CDO. C'iar *n aceste condiii# gre$a poate $i respins"# datorit" di$erenelor *ntre antigenele minore ale donorului i receptorului. (ntigenele din gre$" au urm"toarele origini+ -c antigenele li ere >antigene 2solu ile3? pro%in din li)a eritrocitelor i din mem rana a)al"N -c antigenele CDO e/primate pe celulele dendritice e/istente *n esutul gre$atN -c antigene CDO asociate mem ranelor re)ultate din li)a celulelor organului# *n perioada de conser%are. (ntigenele CDO ale donorului pot $i recunoscute pe supra$aa celulelor pre)entatoare >pre)entare direct"? sau ca $ragmente prelucrate i asociate cu moleculele CDO ale receptorului >pre)entare indirect"?.

(ntigenele eli erate din gre$"# a.ung *n ganglionii regionali ai ga)dei i acti%ea)" lim$ocitele A i 4. Cele mai importante antigene aduse de organul gre$at# cu rol esenial *n declanarea con$lictului imun# sunt moleculele CM I i II. 5n rol deose it se atri uie celulelor dendritice din esutul gre$at. ;le e/prim" molecule CDO II la densitate $oarte *nalt"# care determin" stimularea iniial" a lim$ocitelor ga)dei. Doleculele CDO I i II li ere se comport" ca antigene tari# intens imunogene i nu necesit" pre)entarea *n asociaie cu moleculele CDO proprii organismului# pentru a stimula lim$ocitele A# dar sunt mult mai imunogene dac" sunt pre)entate de alte celule# *n special de celulele dendritice i de celulele endoteliale. 9"spunsul imun $a" de esutul gre$at este mediat *n primul r0nd de limfocitele )4 Ca do%ad"# oarecii atimici >nu)i? nu resping gre$ele alogenice de piele i tolerea)" c'iar gre$e /enogenice. ,a e/amenul 'istologic al unei gre$e de piele# *n cursul respingerii# se o ser%" infiltratul cu mononucleare# multe $iind lim$ocite. (cumularea lor *n esutul gre$at precede respingerea# care sur%ine *n c0te%a )ile. In organul gre$at# raportul dintre lim$ocitele AC64 i AC68 este 1T3# adic" predomin" net lim$ocitele Ac# iar *n mod normal# acest raport este 2T1. ,im$ocitele A # acti%ator al stimulate de antigenele CDO sinteti)ea)" inter$eron maco$agelor din $ocarul con$lictului. Dacro$agele de%in citoto/ice $a" de esutul gre$at# ca i lim$ocitele Ac. Dacro$agele secret" I,-1# care produce fe"ra ce *nsoete reacia de respingere a gre$ei. ,im$ocitele p"trunse *n esutul gre$at sunt pasagere. ;le p"r"sesc gre$a# trec *n lim$" i a.ung *n ganglioni# unde *ncepe proli$erarea# eli erea)" citoc'ine# care acti%ea)" lim$ocitele ganglionare. (cestea de%in lim$ocite e$ectoare. Celulele :L nu necesit" acti%area preala il" pentru a li)a di$erite celule tumorale. ;le sunt implicate *n respingerea alogre$elor de organe. Capacitatea de a respinge gre$a poate $i uor trans$erat" prin intermediul lim$ocitelor de la organismul imuni)at prin contactul anterior cu antigenele gre$ei. <urprin)"tor# *n esutul gre$at nu migrea)" lim$ocitele trans$erate# ci migrea)" lim$ocitele organismului ga)d"# acti%ate de I, secretate de lim$ocitele trans$erate. *olul anticorpilor. Ca r"spuns $a" de antigenele esutului gre$at# se sinteti)ea)" anticorpi speci$ici $a" de antigenele de transplantare. (nticorpii au rol secundar *n reacia de respingere a gre$elor de esuturi i organe. (nticorpii au rol $oarte important *n respingerea gre$ei# *n situaiile *n care# anticorpii antiCDO pree/ist" la un titru crescut *n momentul transplant"rii. <inte)a lor este

indus" de sarcinile multiple# de trans$u)ii anterioar". 7re$a este respins" imediat.

repetate

sau

de

gre$"

(nticorpii au rol important *n respingerea gre$elor cu incompati ilitate gra%" *ntre donor i receptor# deoarece $i/ea)" complementul i produc $enomenul de citoliz. 6ac" nu $i/ea)" complementul# anticorpii au rol de opsonine# adic" sensi ili)ea)" celulele gre$ate $a" de aciunea macro$agelor i neutro$ilelor. (nticorpii sinteti)ai *n esutul gre$at# determin" eli erarea mediatorilor reaciei de 'ipersensi ilitate imediat" >de e/emplu# 'istamina?# care produc modi$ic"ri circulatorii *n %asele gre$ei. (nticorpii $a" de antigenele eritrocitare sunt singurii e$ectori imunitari e$icieni *n trans$u)ia incompati il". ;$ectul lor const" *n aglutinarea i li)a eritrocitelor. 6up" gre$area unui organ s"n"tos *ntr-un organism u)at# din punct de %edere $uncional# organul gre$at se alinia)" repede la starea general" de u)ur" a ga)dei. )ransplantarea mduvei osoase se reali)ea)" pentru tratamentul pacienilor cu maladii imunode$icitare# anemie apla)ic" se%er"# leucemie# lim$om# iar mai recent# pentru de)ordinile 'ematopoetice cu su strat genetic. ,a pacienii imunode$icitari# transplantul m"du%ei osoase este destinat s" $urni)e)e celule stem pentru a resta ili sistemul imunitar al receptorului# $"r" s" *nlocuiasc" *n mod necesar compartimentul mieloid. 6atorit" st"rii ne$uncionale a sistemului imunitar# transplantul m"du%ei osoase poate $i $"cut $"r" tratamentul imunosupresor al ga)dei. D"du%a este recoltat" prin aspiraie din crestele iliace anterioare i posterioare# de la donorul aneste)iat. (mestecul de m"du%" osoas" i s0nge este plasat *n mediu de culti%are cu 'eparin"# *ntr-o pung" 'ematologic" i se administrea)" $"r" *nt0r)iere organismului receptor# prin in$u)ie intra%enoas"# *n cantitatea de 2 / 108 - 6 / 108 celule medulareTFg. In$u)ia se $ace la 1-24 ore dup" ultima iradiere total" a corpului sau la 36 de ore dup" ultima do)" de ciclo$os$amid". Celulele stem circul" *n s0nge# *ns"m0nea)" ca%itatea medular" i *ncep s" se di%id". 1n 2-4 s"pt"m0ni# crete populaia celular" a m"du%ei i *n acelai timp crete num"rul celulelor sanguine peri$erice. ,a donor# m"du%a se re$ace repede. &re%enirea respingerii gre$elor de organe este posi il" printr-o *mperec'ere c0t mai adec%at" a donorului i receptorului din punctul de %edere al asem"n"rii moleculelor CDO i# ulterior# prin instituirea tratamentului imunosupresor. 6ar# spre deose ire de alte celule# cele din m"du%a osoas" sunt $oarte antigenice >au o mare densitate a moleculelor CDO I? i din aceast" cau)"# receptorul tre uie s" $ie supus unui tratament radio-c'imioterapeutic intens# p0n" la limita

suporta ilit"ii# pentru ca transplantul de m"du%" s" ai " succes. C'iar ast$el# la pacienii leucemici# respingerea m"du%ei osoase poate s" ai " loc# *n ca)ul unei *mperec'eri antigenice neadec%ate. Aransplantul de m"du%" osoas" ridic" o pro lem" special"+ celulele transplantate $iind imunocompetente# pot s" iniie)e reacia 2gre$" contra ga)d"3# $a" de antigenele receptorului. 9eacia este iniiat" $a" de antigenele tegumentare# ale $icatului i intestinului i este letal" la 10-15M dintre receptorii de m"du%" osoas" cu molecule O,( identice i la 40M dintre receptorii cu molecule O,( neidentice. !este de histocompati'ilitate 1n transplantul de esuturi i organe# esenial" este asem"narea c0t mai accentuat" a moleculelor CDO ale donorului i receptorului. &entru testul gradului de asem"nare# se anali)ea)" comportamentul lim$ocitelor celor doi parteneri# n amestec >reacia de amestec lim$ocitar# 9(,?. Aestul e%idenia)" di$erenele antigenice dintre donor i receptor# *n ceea ce pri%ete moleculele CDO II. &entru reuita gre$ei# este o ligatorie identitatea acestor molecule. &erec'ea donor-receptor care produce cel mai uor r"spuns *n 9(,# o$er" cea mai un" ans" de acceptare a gre$ei. Cel mai adesea se $olosesc lim$ocitele din s0nge. Celulele tre uie s" $ie %ia ile i *n mediu se adaug" ser de %iel >1-10M? i 2-mercaptoetanol. ,im$ocitele donorului se culti%" *n amestec cu lim$ocitele receptorului# *n pre)ena timidinei O3. <e m"soar" ni%elul radioacti%it"ii lim$ocitelor# consecuti% *ncorpor"rii timidinei O3 pentru sinte)a (6:. 9(, re$lect" r"spunsul proli$erati% al celulelor A# cu puine sau $"r" celule 4. Arans$ormarea lastic" nu se produce *n 9(, a gemenilor mono)igoi. Intr-un amestec celular a ' " R a ' c# r"spunsul este "idirecional. Cea mai ampl" reacie are loc *ntre lim$ocitele care se deose esc prin moleculele CDO. Cel mai puternic stimul *n 9(, *l repre)int" aloantigenele CDO II# cu un polimor$ism $oarte *nalt# iar aloantigenele clasa I au un rol stimulator limitat. Doleculele CDO II se g"sesc pe lim$ocitele 4# pe macro$age# pe celulele dendritice# iar pe lim$ocitele A# numai dup" acti%are. <e pare c" r"spunsul *n 9(, nu este orientat $a" de epitopii CDO propriu-)ii# ci $a" de o larg" %arietate de peptide sel$ legate de moleculele CDO# re)ultate pro a il prin degradarea di$eritelor proteine celulare. 6at $iind polimor$ismul deose it al moleculelor CDO# pro a il c" marea ma.oritate a lim$ocitelor A din amestec mani$est" aloreacti%itate $a" de cel puin unul din aloantigenele CDO ale speciei. &entru r"spunsul unidirecional# una din cele dou" populaii celulare >de o icei a donorului? se inacti%ea)" prin tratament cu mitomicin" C >pentru in'i iia sinte)ei (6:? sau se supun iradierii.

Aratamentul inacti%ea)" celulele A# dar nu inter$er" cu imunogenitatea lor. In 9(, se acti%ea)" numai lim$ocitele receptorului de gre$"# ca r"spuns la aloantigenele donorului. 1n ca)ul gre$ei unui organ imunocompetent la o ga)d" imunode$icitar"# *n 9(, se inacti%ea)" lim$ocitele receptorului# pentru a e%alua reacti%itatea lim$ocitelor donorului# care ar putea iniia o reacie gre$" contra ga)d". Compati ilitatea donor-receptor pentru antigenele CDO I se testea)" cu seruri imune anti- CDO I. <e anali)ea)" reacia lim$ocitelor celor doi parteneri# $a" de un num"r c0t mai mare de seruri anti CDO I. In la oratorul de pro$il e/ist" seturi de seruri anti-CDO I# recoltate de la persoane care au o ogat" e/perien" antigenic" O,(+ -c persoane care su$erit trans$u)ii sanguine multiple i ast$el s-au imuni)at $a" de antigenele O,(N -c $emei multipare# care au a%ut sarcini multiple cu parteneri di$erii. <erurile anti-CDO se pun *n contact cu lim$ocitele donorului i cu ale receptorului de gre$". (nticorpii anti-CDO se $i/ea)" pe supra$aa lim$ocitelor i ast$el este iniiat" trans$ormarea lastic". <e determin" un coeficient de reactivitate >coe$icient de trans$ormare lastic"?# pe a)a num"rului de lim$ocite trans$ormate. 6ac" lim$ocitele donorului i receptorului se comport" asem"n"tor $a" de un num"r mare de seruri# conclu)ia este c" cele dou" populaii de lim$ocite sunt asem"n"toare. 6ac" titrul anticorpilor anti-CDO *n ser este crescut# se poate produce nu numai acti%area lim$ocitelor# ci c'iar aglutinarea imun" sau# dup" $i/area complementului# citoli)a. 6enotransplantarea Aermenul semni$ic" transplantul de esuturi i organe *ntre organismele unor specii diferite. Interesul clinic pentru /enotransplantare a $ost determinat de lipsa organelor umane. <uccesul alotransplantului a creat un necesar care dep"ete disponi ilul. In 1963# transplantul de rinic'i de cimpan)eu la om# a prelungit supra%ieuirea cu 9 luni i moartea a sur%enit dup" complicaiile pro%ocate de imunosupresie. In 1984# inima de a uin a $ost transplantat" la om. ( urmat transplantul de $icat de maimu"# transplantul de celule neurale de em rion de porc# la un pacient cu oal" &arFinson# transplantul de m"du%" osoas" de la a uin# la un pacient cu <I6(.

4arierele /enotransplant"rii sunt multiple+ unele organe de la alte specii nu $uncionea)" adec%at *n noul mediu. 9inic'iul de cimpan)eu este $uncional *n organismul uman. &ersoanele transplantate cu rinic'i de porc de%in anemice# pro a il pentru c" eritropoetina nu este acti%"# iar cele cu $icat de a uin au ni%ele mai mici de colesterol >ec'i%alente cu cele de a uin? i ni%ele $oarte sc")ute de acid uric >pentru c" $icatul de a uin nu produce acid uric?. 7re$area celulelor sanguine stem /enogenice este limitat" de a sena $actorului de cretere speci$ic celulelor stem transplantate. Senogre$ele pot $i neconcordante >de la porc? sau concordante >de la cimpan)eu# a uin?. ,a perec'ile neconcordante# titrul anticorpilor preformai este detecta il i /enogre$ele sunt respinse /iperacut >*n c0te%a minute?# prin reacia de activare a endoteliului . &entru respingerea 'iperacut" a gre$elor neconcordante# un alt $actor critic >al"turi de anticorpii pre$ormai? al producerii le)iunilor endoteliale este complementul i proteinele sale reglatoare . In com inaia porc-om# anticorpii pre$ormai se leag" la ni%elul determinanilor antigenici de galactoz G +196,&galactoz ai endoteliului gre$ei# deoarece omul a pierdut gena pentru en)ima al$a-galacto)il-trans$era)" i nu posed" acest epitop. (cti%area complementului se $ace pe calea clasic"# iar *n a sena anticorpilor pre$ormai# pe calea altern". In esen"# respingerea 'iperacut" se datorea)" reaciei endoteliale la acti%area complementului# mediat" de anticorpii pre$ormai >Ig7 anti-Q-gal?. Incompati ilitatea com inaiei porc-om se datorea)" $aptului c" porcul e/prim" un nou antigen de grup sanguin9 G&gal+gal&G 196&gal, >la om# speci$icitatea antigenic" a grupului 0 este con$erit" de (&fucoz# a grupului(# de -&acetil&galactozamin9 galactoz i (&fucoz # iar a grupului 4# de D&galactoz i (&fucoz ?. Q-gal nu este singurul determinant recunoscut de anticorpii naturali umani. (lte 'eteroantigene pot de%eni importante# dup" transplantul organului. (nticorpii /enoreacti%i# speci$ici $a" de epitopii Q 1#3-gal i complementul sunt $actorii ma.ori ai respingerii 'iperacute. =inta respingerii 'iperacute este endoteliul vascular. (cti%area endoteliului produce cele mai e%idente mani$est"ri ale respingerii 'iperacute+ trom o)a intra%ascular"# 'emoragia e/tra%ascular" i edemul. 1n asocierile concordante# titrul anticorpilor pre$ormai nu este detecta il i respinerea este acut# datorit" aceluiai $enomen de activare a endoteliului %ascular. 9espingerea *nt0r)iat" >acut"? a /enogre$elor concordante se $ace *n 2-3 )ile >mult mai repede dec0t a alogre$elor?. 6in punct de %edere 'istologic# respingerea acut" rele%" mai puin" 'emoragie# dar cu trom o)" intra%ascular" semni$icati%"# ca i *n reacia 'iperacut"# deoarece inta este endoteliul %ascular. 9espingerea acut" a /enogre$ei se datorea)" anticorpilor a c"ror sinte)" este

indus" de antigenele /enogre$ei. <e sinteti)ea)" preponderent Ig7 anti-Q-gal# al c"ror titru crete rapid. &rogresul *n /enotransplantare s-a $"cut *n sensul pre%enirii respingerii 'iperacute+ imunosupresia receptorului de gre$" i ingineria genic" a donorului pentru a elimina marile di$erene antigenice dintre /enogre$e i alogre$e. ,a oarece s-a reuit eliminarea genei galacto)il-trans$era)ei prin recom inare 'omolog"# dar te'nologia nu este adec%at" pentru alte specii. ;liminarea antigenului Q-gal# e/pune un nou determinant glucidic# $a" de care omul are un ni%el sc")ut de anticorpi pre$ormai. Imunosupresia Iariantele alelice multiple codi$icatoare ale moleculelor CDO $ac cu totul impro a il" posi ilitatea ca dou" organisme s" $ie identice pentru moleculele CDO# cu e/cepia gemenilor mono)igoi. :atura determinismului genetic al moleculelor CDO nu este $a%ora il" transplantului de esuturi i organe. (mplitudinea procesului de respingere a gre$ei este parial dependent" de gradul de incompati ilitate al antigenelor CDO# dintre donor i receptor. <copul imunosupresiei selecti%e este de a menine $uncionalitatea mecanismelor de ap"rare a organismului# $a" de in$eciile %irale# acteriene# $ungice i $a" de para)ii# de a p"stra capacitatea <!D de a $agocita celulele *m "tr0nite i de a prote.a mecanismele de imunosupra%eg'ere care elimin" celulele maligne. &e de alt" parte# se urm"rete inducerea st"rii de toleran" $a" de antigenele organului gre$at >rinic'i# $icat# inim"?. 1n ca)ul maladiilor autoimune# de)ideratul imunosupesiei este in'i iia selecti%" a reacti%it"ii imunitare autoagresi%e $a" de antigenele retinei >*n u%eit"?sau $a" de antigenele colonului >*n oala Cro'n?. 5n medicament imunosupresor tre uie s" *ntruneasc" urm"toarele criterii+ -c s" in/i"e activarea rspunsului imun i s" $ie e$icient $a" de procesele imunitare *n curs de des$"urareN -c s" ai " aciune selectiv# adic" s" produc" deleia clonal" sau s" inacti%e)e numai anumite su populaii de celule imunocompetenteN -c s" ai " un inde' terapeutic terapeutic" i cea to/ic". un# adic" un raport $a%ora il *ntre do)a

&entru supra%ieuirea gre$ei# trans$u)iile de s0nge cu speci$icitatea antigenic" a donorului sau trans$u)iile nespeci$ice# ca i testele de 'istocompati ilitate sunt importante numai dac" se asocia)" cu imunosupresia# cu scopul diminu"rii reacti%it"ii imunitare. Aerapia imunosupresoare este $oarte

comple/"# pentru c" nici un agent c'imic nu are aciune strict selecti%" asupra esutului lim$oid. Imunosupresia se reali)ea)" prin+ -c iradierea / -c terapia imunosupresoare -c metode imunologice. )erapia imunosupresoare. Dedicamentele imunosupresoare in'i " nespeci$ic reacti%itatea imunitar" i se administrea)" at0t dup" gre$a tisular"# c0t i pacienilor cu maladii reumatice# caracteri)ate prin reacti%itate imunitar" e/cesi%". Imunosupresia s-a reali)at cu o %arietate de ageni terapeutici+ 'ormoni corticosteroi)i# medicamente citoto/ice. Cele mai multe metode con%enionale de imunosupresie *i reali)ea)" e$ectul *n mod neselecti%. Medicamentele citoto'ice au $ost iniial $olosite *n tratamentul neopla)iilor# dar repre)int" o modalitate important" de imunosupresie pentru tratamentul maladiilor autoimune. C'imioterapia administrat" pacienilor neopla)ici produce# uneori# o imunosupresie pro$und". Dedicamentele citoto/ice sunt imunosupresoare deoarece distrug celulele imunocompetente sau loc'ea)" proli$erarea lor. (genii citoto/ici $olosii pentru imunosupresie>dar i *n tratamentul neopla)iilor? sunt+ -c ageni alc'ilani -c antimeta olii+ analogi ai purinelor >6-mercaptopurina i a)atioprina?N analogi pirimidinici >cito)in-ara ino)ida?N -c antagonitii acidului $olic >met'otre/atul?. Ciclofosfamida este compusul prototip al agenilor alc'ilani. (ciunea sa este nespeci$ic"# asupra tuturor su populaiilor de lim$ocite i a celulelor nelim$oide care intr" *n $a)a <. (genii din categoriile menionate# au aciune nespecific9 adic" aciunea lor nu este limitat" la celulele imunocompetente. ;i produc le)iuni asupra tuturor celulelor a$late *n mito)"# inclusi% asupra celulelor 'ematopoetice. 9espingerea gre$ei poate $i locat"# dar aciunea neselecti%" a acestor ageni produce e$ecte secundare to/ice prea se%ere i re)ultatele au $ost considerate ca nesatis$"c"toare.

Ciclosporina este un peptid ciclic lipo$il# i)olat din culturi de microorganisme i acionea)" speci$ic asupra lim$ocitelor# in'i 0nd transcrierea genic" pe o cale dependent" de Ca# adic" loc'ea)" progresia ciclului celular de la 7 0 la 71. ;ste un agent imunosupresor mai selecti%# deoarece acionea)" asupra celulelor A'# $"r" e$ecte nota ile asupra altor su populaii de lim$ocite A# asupra lim$ocitelor 4# granulocitelor sau macro$agelor. ;$ectul ma.or pare a $i in'i iia sinte)ei I,-2. Imunosupresia cu ciclosporin" este o modalitate imuno$armacologic"# datorit" aciunii sale selecti%e $a" de celulele imunocompetente. 1n ultimii ani s-au identi$icat c0i%a compui c'imici naturali# i)olai ca i ciclosporina# din culturi de microorganisme+ tacrolimus# sirolimus >rapamGcin?# mi)ori ine i spergualin. )acrolimus este o lacton" macrociclic" lipo$il"# cu mecanism de aciune asem"n"tor cu al ciclosporinei. !irolimus este un macrolid care in'i " proli$erarea celulelor A# prin locarea trecerii de la $a)a 7 1 la $a)a <. Imunosupresorul ideal %a media inducerea toleranei# *n special *n transplant# adic" %a permite sistemului imunitar s" adopte ca sel$# moleculele CDO speci$ice esutului gre$at. *adiaia ionizant ' i gama produce ioni)area atomilor i generea)" radicali li eri# *n special radicalul @O .# $oarte reacti%# principalul agent ce media)" moartea celulelor iradiate. ;$ectele radiaiilor ioni)ante sunt dependente de do)". Celulele stem i celulele imature sunt $oarte sensi ile. ,im$ocitele A sunt mai re)istente dec0t lim$ocitele 4# iar monocitele i macro$agele sunt relati% re)istente. Corticosteroizii sunt cele mai $olosite medicamente# cu e$ect in'i itor asupra r"spunsului imun# dar i al proceselor in$lamatorii. <-a propus mecanismul lim$oli)ei# dar la om acest e$ect nu se produce. Aimp de 4-6 ore dup" administrare# corticosteroi)ii reduc num"rul de leucocite circulante >lim$ocite# monocite# eo)ino$ile?# dar crete semni$icati% num"rul neutro$ilelor. Ialorile leucocitelor re%in la normal *n 24 de ore. ,im$ocitele A# precum i monocitele p"r"sesc circulaia i migrea)" *n m"du%a osoas"# iar lim$ocitele 4 sunt relati% re)istente la corticosteroi)i. ;o)inopenia# dup" in.ectarea corticosteroi)ilor# e/plic" e$ectele ene$ice ale acestor 'ormoni la persoanele alergice. !erul antilimfocitar ><(,? i glo"ulina antitimocitar se o in prin in.ectarea lim$ocitelor# respecti% a timocitelor# la o specie /enogen". <e $olosesc celulele ductului toracic sau timocitele pentru imuni)area iepurelui sau calului. 6in serul 'eterolog se separ" $racia imunoglo ulinic"# ce se administrea)" intra%enos pentru dep"irea unei st"ri critice dup" gre$are. (nticorpii policlonali din <(, au $ost *nlocuii cu (DC speci$ici $a" de antigene celulare de supra$a"+ (DC anti-receptor de I,-2 i anti C6 4.

6eoarece citoc'inele sunt molecule $oarte importante *n reacia imunitar"# s-a *ncercat neutrali)area lor cu receptori solu ili. 6eleia speci$ic" a populaiilor de lim$ocite este posi il" cu preparatele denumite imunoto'ine. (cestea sunt comple/e ce constau din dou" componente+ un anticorp monoclonal care asigur" recunoaterea speci$ic" a intei celulare i o component" to/ic" >ricina# to/ina di$teric"?.

IN-,R C@IUNI7, SIS-,&U7UI I&UNI- R CU SIS-,&U7 N,UR(,ND(CRIN

<istemele imunitar# ner%os i endocrin sunt interconectate structural >anatomic? i $uncional# ceea ce a condus la conturarea unor noi domenii interdisciplinare# ca neuroimunoendocrinologia9 neuroimuno&modularea i psi/oneuroimunologia. <istemele enumerate au *n comun capacitatea de r"spuns la un num"r de stimuli comuni >'ormoni steroi)i# citoc'ine# neuropeptide?# care $urni)ea)" a)a molecular" a integr"rii idirecionale. <tarea psi'ic" in$luenea)" reacti%itatea imunitar" i intensitatea r"spunsului in$lamator a organismului. ;/ist" do%e)i certe c" anomaliile neuroendocrine au rol important *n inducerea dis$unciilor imunitare# materiali)ate# *n primul r0nd# *n mani$est"rile autoimune. &e de alt" parte# %0rsta# genul i ali $actori genetici reglea)" interaciunile imuno-neuroendocrine. Cele mai pregnante interaciuni neuroendocrinoimunitare se produc *n starea de stress. <tressul este de$init ca o condiie dinamic" *n cursul c"reia 'omeosta)ia normal" >starea de ec'ili ru a mediului intern? este pertur at" sau periclitat". <tarea de de)ec'ili ru este indus" de $actori de stress# $i)ici sau psi'ologici. !actorii de stress# $i)ici sau mentali# declanea)" un r"spuns comple/ adaptati%# denumit rspunsul de stress sau de alarm # menit s" contracare)e e$ectele $actorului de stress. Intensitatea r"spunsului adaptati% este dependent" de %0rst"# gen# starea 'ormonal" i de ali $actori genetici. #ig4 16F. Interaciuni neuro&endocrino&imunitare. <tressul presupune *n primul r0nd# modi$icarea unor componente mentale i comportamentale. Crete rusc acti%itatea sistemului ner%os central ce controlea)" starea de %eg'e# alerta# starea psi'ic"# atenia# concentrarea ateniei i este in'i at" acti%itatea %egetati%" care controlea)" 'r"nirea i reproducerea. In r"spunsul la stress se produc modi$ic"ri $i)ice ale sistemului circulator# care redirecionea)" nutrienii spre organele acti%ate. @ reacti%itate prea mare sau prea mic" la stress poate produce sau poate contri ui indirect la mani$est"ri patologice.

9"spunsul la $actorii de stress este mediat de $actorul >'ormonul? de eli erare a corticotropinei >C9O?# de a'a /ipotalamo&/ipofizo&corticosu&prarenal i de sistemul nervos simpatic. C9O este produs *n primul r0nd *n 'ipotalamus# dar i *n alte arii ale creierului i *n sistemul ner%os peri$eric i are urm"toarele $uncii+ controlea)" starea de %eg'e# starea psi'ic" i integrea)" sistemele de r"spuns la stressN acti%ea)" a/a 'ipo$i)o-corticosuprarenal"# stimul0nd secreia (CAO i a corticosteroi)ilorN acti%ea)" sistemul ner%os simpatic# cu stimularea epine$rinei i norepine$rinei. C9O este acti%atorul st"rii de alarm"# mani$estat" prin creterea glicemiei# a ritmului cardiac# a tensiunii arteriale# dar in'i " $uncia imunitar" i r"spunsul in$lamator. ;$ectul acti%ator al C9O asupra sistemului ner%os simpatic este mediat de locus ceruleus# care *i proiectea)" a/onii *n trunc'iul cere ral i *n 'ipotalamus# ceea ce contri uie direct la eli erarea mediatorilor simpatici >epine$rina i norepine$rina? *n arii $oarte largi ale <:C. (cti%area sistemului ner%os simpatic stimulea)" eli erarea C9O din neuronii nucleilor para%entriculari su aciunea impulsurilor cu originea *n locus ceruleus. <istemul de r"spuns la stress $uncionea)" ca o ucl" $eed acF po)iti%"# idirecional". (cti%area unui component al sistemului# acti%ea)" pe cel"lalt. <erotonina i acetilcolina acti%ea)" r"spunsul la $actorii de stress# iar D<O >'ormonul stimulator al melanocitelor? i acidul gama amino utiric sunt in'i itori. Corticosteroi)ii sunt componentele ma.ore ale sistemului de r"spuns la stress i in'i " cele dou" componente ma.ore ale r"spunsului >secreia C9O i sistemul ner%os %egetati%?# dar i reacti%itatea imunitar" i r"spunsul in$lamator. 9"spunsul acti%ator la stress in$luenea)" a/a 'ipotalamo-'ipo$i)ar" cu componentele ei+ 'ipotalamus-'ipo$i)"-tiroid" >OOA? i respecti%# 'ipotalamo'ipo$i)o-gonadal" >OO7?. C'iar dac" stressul acut stimulea)" secreia 'ipo$i)ar" a 'ormonului de cretere# stressul cronic# prin intermediul C9O# stimulea)" secreia 'ipo$i)ar" a somatostatinei >in'i itor al creterii?. <omatostatina# a c"rei secreie este stimulat" de C9O# in'i " secreia de A<O# iar glucocorticoi)ii in'i " con%ersia tiro/inei# relati% inacti%"# la triiodotiro/in". (ceste r"spunsuri sunt adaptati%e i se corelea)" cu necesitatea limit"rii pierderii energiei. (cti%area r"spunsului la stress in'i " a/a OO7# la mai multe ni%ele. C9O in'i " sinte)a $actorului eli erator al 'ormonului luteini)ant din nucleul arcuat

'ipotalamic# $ie direct# $ie prin intermediul corticosteroi)ilor. Corticosteroi)ii in'i " secreia 'ormonului luteini)ant >,O? 'ipo$i)ar i concomitent# producia 'ormonilor gonadali+ estrogeni# progesterona# testosteronul. Oormonii tiroidieni i se/osteroi)i in$luenea)" acti%itatea a/ei 'ipotalamo'ipo$i)o-corticosuprarenale >OOC?. Oipotiroidismul in'i " a/a OOC. ,a organismele de se/ $eminin >oarece# o olan# om?# a/a OOC este mai acti%" dec0t la masculi# adic" stressul induce un r"spuns mai amplu# m"sura il prin ni%elul mai *nalt al corticosteroi)ilor. @%arectomia diminu" eli erarea corticosteroi)ilor# iar or'iectomia m"rete rata sinte)ei corticosteroi)ilor la stress. 9"spunsul integrat neuro-imuno-endocrin este mediat nu numai de 'ormoni# ci i de interleuc'ine# cele mai cunoscute $iind I,-1 i I,-6. I,-1 acti%ea)" a/a 'ipotalamo-'ipo$i)o-corticosuprarenal"# stimul0nd eli erarea (CAO 'ipo$i)ar# iar sinte)a ei este in'i at" de glucocorticoi)i. ;ndoto/inele stimulea)" producerea I,-1 *n 'ipo$i)" i ast$el secreia (CAO este reglat" local# *n 'ipo$i)". I,-1 este sinteti)at" local# *n arii discrete ale <:C >'ipotalamus# 'ipocamp?. (ceste arii reglea)" r"spunsul la stress. +olul corticosteroizilor 3n reglarea funciei imunitare (sem"narea dintre 'ormoni i imunoglo uline re)ult" din similitudinea structural" i $uncional" a celor dou" categorii de molecule+ am ele conin o regiune de legare la un receptor celular i o sec%en" cu rolul de a transmite semnale speci$ice la un sistem e$ector. ;/ist" do%e)i c" moleculele CDO I# implicate *n pre)entarea antigenelor# au rol de receptor pentru insulin". Corticosteroi)ii reglea)" toate componentele r"spunsului imunitar i in$lamator# c'iar i creterea i di$erenierea timocitelor. :i%elul corticosteroi)ilor crete *ntr-un inter%al de ordinul minutelor# dup" e/punerea la $actorul de stress. 9olul lor este de a limita e/tensia r"spunsului i a procesului in$lamator. (mplitudinea lor prea mare poate s" produc" le)iuni# inclusi% maladii autoimune. (dministrarea corticosteroi)ilor# la ro)"toare# produce moartea apoptotic" a lim$ocitelor timice. ,im$ocitele A mature >peri$erice? umane sunt re)istente la corticosteroi)i# dar cele timice sunt sensi ile. Creterea ni%elului plasmatic al corticosteroi)ilor# produs" de stress# induce apopto)a timocitelor. Corticosteroi)ii par a $i implicai *n selecia timocitelor cu speci$icitate $a" de antigenele nonsel$. Concepia dominant" presupune c" timocitele sunt selectate pentru apopto)" sau supra%ieuire# *n $uncie de capacitatea lor de a se asocia cu

moleculele CDO. Aimocitele cu receptori >9CA? de mare a$initate pentru moleculele CDO# sunt potenial generatoare ale maladiilor autoimune i su$er" moartea apoptotic". Cele cu receptori de mic" a$initate pentru moleculele CDO mor de asemenea prin apopto)"# su aciunea corticosteroi)ilor. <upra%ieuiesc numai timocitele cu receptori de a%iditate medie pentru moleculele CDO. <elecia lim$ocitelor *n timus este controlat" de 'ormonii sinteti)ai local. (st$el# timusul e/prim" acti%it"i neuroendocrine multiple# inclusi% sinte)a C9O i (CAO. C9O stimulea)" secreia (CAO# iar (CAO induce producerea corticosteroi)ilor *n celulele corticosuprarenalelor. <inte)a neuropeptidelor >C9O? *n timus este deose it de interesant"# a%0nd *n %edere re)ultatele care susin c" celulele timice epiteliale conin en)ime steroidogene i sinteti)ea)" corticosteroi)i# *n special *n perioada $etal" i neonatal". (st$el# timusul poate s" sinteti)e)e toi 'ormonii produi prin acti%area a/ei OOC. Corticosteroi)ii reglea)" de)%oltarea su populaiilor A'1 i A'2 de lim$ocite# in'i 0nd sinte)a citoc'inelor A'1 >I,-2# I!: Z?. +olul se4osteroizilor Oormonii steroi)i se/uali in$luenea)" maturarea i di$erenierea timocitelor. Aimusul su$er" modi$ic"ri pro$unde *n timpul sarcinii# dup" gonadectomie sau dup" administrarea e/ogen" a 'ormonilor se/uali. 6up" gonadectomie# masa timusului crete# iar administrarea 'ormonilor se/uali >estrogen# testosteron? are e$ecte in%erse. !actorul 'ipotalamic de eli erare a 'ormonului luteini)ant >9!,O?# reglea)" at0t $uncia de reproducere# c0t i $uncia imunitar". (cest 'ormon se sinteti)ea)" nu numai *n creier# ci i *n gonade# *n glandele mamare# *n placent"# splin" i timus# a%0nd rol integrator al $unciei neuro-endocrine reproduc"toare i al $unciei imunitare. In timus# lim$ocitele A sinteti)ea)" 9!,O i au receptori speci$ici pentru acest 'ormon. de206Nm "tr0nirea sistemului imunitar# la om# *ncepe dup" 30 de ani i se caracteri)ea)" prin creterea produciei de autoanticorpi i diminuarea capacit"ii de a produce anticorpi $a" de antigenele nonsel$. 6iminu" sinte)a I,-2# dar crete rata sinte)ei I,-4# I,-5 i I,-6. (ceste sc'im "ri sugerea)" o cretere numeric" a su populaiei de lim$ocite A'2# *n raport cu su populaia A'1. 6iminu" $uncia citoto/ic". Crete ni%elul plasmatic al I,-6# cu rol reglator al sinte)ei anticorpilor# dar i cu rol *n progresia maladiilor autoimune sau a altor procese patologice# ca osteoporo)a. 5n rol important *n procesul de *m "tr0nire se atri uie de'idroepiandrosteronului >6O;(?# secretat de corticosuprarenale# su controlul (CAO. ;ste un intermediar al iosinte)ei altor 'ormoni >testosteronul i estradiolul?. 6O;( circul" *n $orm" inacti%"# de sul$at. Oormonul se acti%ea)" numai *n esuturile care au 6O;(-sul$ata)"# cu distri uie di$erenial" *n organele

lim$oide. :i%elul plasmatic al sul$ata)ei scade odat" cu *m "tr0nirea sistemului imunitar i scade rusc *n di$erite oli cronice# inclusi% maladiile autoimune. (dministrarea 6O;( la ro)"toare i om# resta ilete $uncia imunitar" la organismele %0rstnice i are e$ect antagonic corticosteroi)ilor# care produc atro$ia timic". #ig4 16=. @rganele i celulele in$luenate de /or&monii steroizi se'uali. (ceti 'ormoni pot aciona *n timpul de)%olt"rii celulelor imunitare# dar i direct asupra celulelor mature e$ectoare. ormonul de cretere9 prolactina i /ormonul tiroidian stimulea)" maturarea i di$erenierea timocitelor. Oipo$i)ectomia sau 'iposecreia acestor 'ormoni 'ipo$i)ari duce la imunode$icien" i 'ipopla)ia timusului. Oormonul de cretere stimulea)" intens proli$erarea celulelor precursoare ale timocitelor *n m"du%a osoas". &rolactina stimulea)" di$erenierea celulelor A cu speci$icitate de antigen *n organele lim$oide peri$erice. Oormonul tiroidian stimulea)" creterea timusului i a splinei. `oarecii 'ipotiroidieni au timus i splin" 'ipopla)ic"# num"r redus de celule AC68. Interaciunile neuro-imuno-endocrine sunt idirecionale. =esuturile i celulele sistemului imunitar sinteti)ea)" un spectru larg de 'ormoni neuroendocrini. !oarte important" este sinte)a C9O# un reglator esenial al r"spunsului la stress# *n timus# splin"# 'ipo$i)a anterioar"# corticosuprarenale# o%ar# testicul# intestin# inim"# pl"m0n. In timus i splin"# C9O este sinteti)at de celulele A# unde e/ercit" e$ecte reglatoare autocrine sau paracrine. C9O este de asemenea sinteti)at local *n $ocarele in$lamatorii acute sau cronice# inclusi% *n lic'idul sino%ial al pacienilor cu artrit" reumatoid". 0actori neuroendocrini favorizani ai maladiilor autoimune umane 6i$erenele $uncionale cu pri%ire la intensitatea r"spunsului a/elor 'ipotalamo-'ipo$i)o-corticosuprarenaliene >OOC? i 'ipotalamo-'ipo$i)ogonadale >OO7? sunt importante pentru *nelegerea mani$est"rilor autoimune. Daladiile autoimune sunt mult mai $rec%ente la $emei dec0t la "r ai. 6e e/emplu# raportul pe se/e al tiroiditei autoimune este de 19T1# al lupusului de 9T1# iar al artritei reumatoide# de 3-4T1. Dai mult# maladiile autoimune tind s" se de)%olte# s" ai " intensitate ma/im" ori s" diminue# *n perioadele de sc'im are a acti%it"ii a/ei OO7 >pu ertate# menstruaie# sarcin"# perioada postpartum# menopau)" sau *n timpul unui stress psi'ologic de amploare?. Aoate aceste perioade sunt asociate cu modi$ic"ri ale secreiei $actorului 'ipotalamic de eli erare a ,O# a ,O 'ipo$i)ar# a 'ormonilor se/uali i a altor 'ormoni. !rec%ena $enomenelor autoimune crete cu %0rsta# corelat" cu sc'im "rile neuroendocrine.

Artrita reumatoid este asociat" cu o insu$icien" a sinte)ei corticosteroi)ilor. :i%elul corticosteroi)ilor plasmatici tinde s" se corele)e cu se%eritatea in$lamaiei# dar pacienii cu a$eciune de intensitate medie au ni%ele in$erioare ale corticosteroi)ilor comparati% cu indi%i)ii normali. :i%elul testosteronului la pacienii cu artrit" reumatoid"# *n special la "r ai# tinde s" ai " %alori sc")ute# iar ni%elul estrogenului este nemodi$icat. Aerapia cu testosteron ameliorea)" maladia. ;strogenii nu par s" produc" o e/acer are a artritei reumatoide# iar contracepti%ele orale *ncetinesc e%oluia maladiei. @dat" cu sc"derea rusc" a ni%elului estrogenilor >perioada postpartum# inter%alul care precede menstruaia# menopau)a?# artrita reumatoid" se intensi$ic". In acelai timp diminu" secreia de corticosteroi)i# deoarece estrogenii in$luenea)" a/a OOC. :i%elul prolactinei la pacienii cu artrit" reumatoid" este %aria il>crescut# normal sau sc")ut?. (rtrita reumatoid" se remite $rec%ent *n timpul sarcinii i se reacti%ea)" sau se declanea)" *n perioada postpartum# *ndeose i la $emeile care al"ptea)". (l"ptarea este *nsoit" cu creterea marcat" a secreiei de prolactin" i cu supresia $unciei a/ei OOC. (upusul sistemic eritematos are o dominan" net" la $emei# ceea ce denot" rolul 'ormonilor se/uali *n declanarea i e%oluia acestei maladii. de206Nn plasma pacienilor s-a rele%at un de)ec'ili ru *ntre ni%elul androgenilor i estrogenilor. 6e)ec'ili rul poate $i primar sau secundar# datorat unei en)ime care con%ertete androgenii la estrogeni. 4"r aii cu lupus sunt pre%alent 'ipoandrogenici. :i%elul sc")ut al androgenilor $a%ori)ea)" imunitatea mediat" 'umoral# iar estrogenii $a%ori)ea)" autoimunitatea# prin stimularea producerii de prolactin"# care are e$ect acti%ator asupra $unciei imunitare. &acienii cu lupus se caracteri)ea)" prin 'iperprolactinemie. In timpul sarcinii# maladia se intensi$ic". )iroidita autoimun se declanea)" $rec%ent *n perioada postpartum# caracteri)at" prin 'ipocortisolemie. &erioada sarcinii se caracteri)ea)" prin supresia imunit"ii mediate celular i meninerea sau c'iar creterea imunit"ii 'umorale. <etul de citoc'ine sinteti)ate de celulele A'1 diminu" >I,-2 i I!: Z?# ceea ce elimin" riscul a%ortului imunitar. 6iminuarea sinte)ei I!: Z este esenial" pentru p"strarea sarcinii# deoarece cantit"ile mari $a%ori)ea)" a%ortul. :i%elul plasmatic al corticosteroi)ilor# estrogenilor i progesteronei crete. <tarea 'ormonal" comple/" *n timpul sarcinii pare s" condiione)e remisia maladiilor autoimune dependente de imunitatea celular"# ca de e/emplu artrita reumatoid" i agra%area maladiilor dependente de procese ale imunit"ii 'umorale# ca de e/emplu# glomerulone$rita *n lupusul eritematos. &ostpartum# starea 'ormonal" se modi$ic" rusc. Corticosteroi)ii# estrogenii i progesterona scad la ni%ele su normale# iar imunitatea mediat" celular se resta ilete# ceea ce permite declanarea sau acti%area unor maladii autoimune# aa cum este artrita reumatoid"# datorit" creterii secreiei de prolactin".

&erioadele de sarcin" i postpartum se caracteri)ea)" prin modi$ic"ri ample ale st"rii 'ormonale i sunt asociate $rec%ent cu declanarea sau acti%area unor maladii autoimune# ceea ce ilustrea)" rolul mecanismelor endocrine *n reglarea $unciei imunitare.

$I$7I(6R FI,

Coninutul acestei c"ri a $ost redactat pe a)a consult"rii unui num"r mare de articole ap"rute *n di$erite periodice i a unor capitole speciale sau volume de Imunologie# pu licate *n tratate de Micro"iologie sau de $irologie. <inte)ele ap"rute *n Annual *evieM of Immunolog7 au constituit o surs" in$ormaional" de o %aloare deose it".

eriodice Annual *evieMs %ioc/emistr7

Annual *evieMs Immunolog7 Annual *evieMs Micro"iolog7 %ulletin dKInstitut Pasteur Cancer Immunolog7 Cell Clinical Micro"iolog7 *evieMs EM%J Iournal Immunolog7 )oda7 Iournal of Immunolog7 Mediators of inflamation Micro"iolog7 and Molecular %iolog7 *evieMs -ature !cientific American !cience C*ri

6el%es &.J#9oittI. D. E Enc7clopedia of Immunolog7# %ol. 1-4# sec. ed.# 1998# (cad. &ress. !ields 4. :.# Lnipe 6. D.# OoKleG &. D. E #ields $irolog7# 3rd edition# ,ippincot 9a%en &u lis'ers# &'iladelp'ia# 1996 Dale 6.# C'ampion 4.# (nne CooF E Advanced Immunolog7# J.4. ,ippincot CompanG# 1987. &atricF <. adn ,arFin D. J. - Immunological and molecular aspects of "acterial virulence# J. HileG d <ons# 1995. 9oitt I. D. E Essential Immunolog7# nint' edition# 1997# 4lacFKell <cience

<amter D# Aalmage 6. H.# !ranF D. D.# (usten L. !.# Claman O. :. E Immunological diseases# %ol. I# II# $ourt' ed.# 4oston# Aoronto. <er'an C. :.# Hard &. (. - Molecular and Celular "asis of Inflamation # 1999# Oumana &ress. <'ee'an Cat'erine E Clinical Immunolog7# Principles and (a"orator7 Diagnosis# sec. edition# 1997# ,ippincot# &'iladelp'ia# :eK VorF AopleG and HilsonCs Principles of %acteriolog79 $irolog7 and Immunit7 # 8t' ;d. D. Aom &arFer# ,esslie O. Collier# 1990 AopleG and HilsonCs Micro"iolog7 and Micro"ial Infections# %ol. II Immunolog7# ;d. ,esslie Collier# (. 4aloKs# D. <ussman# 1998. Heir 6. D.# <teKart J. E Immunolog7 # se%ent' edition# ,ongman 7roup# 5L# 1993. 8arnea 7. E Aratat de Dicro iologie# %ol. II Imuno"iologie# ;d. (cademiei 9om0ne# 1990. 8arnea 7.# Di'"escu 7r. E Imunologie# ;d. 5ni%ersit"ii 4ucureti# 1995. 8Killing 4. <.# ;isenstein A. L. E Macrop/age& Pat/ogen Interactions# 1994# :eK VorF# 4asel# Oong Long.