CURS 10-11 Nucleul celular. Cromatina i cromozomii.

CUPRINS
CE ESTE NUCLEUL? STRUCTURA NUCLEULUI MEMBRANA NUCLEAR CROMATINA/CROMOZOMII NUCLEOLUL FUNCIILE NUCLEULUI REPLICAREA ADN-ULUI TRANSCRIEREA ADN-ULUI

CE ESTE NUCLEUL?
Prezena nucleului este principala trstur care difereniaz celulele eucariote de cele procariote separ genomul celulei de citoplasm. Nucleul: este cel mai mare organit din celul; conine genomul celulei servind ca depozit al informaiei genetice (ADN); funcioneaz ca centru de control al activitii celulare direcioneaz expresia genelor (ADN ARN proteine)

n nucleu au loc: replicarea ADN-ului (sintez de ADN), precum i o parte din stadiile expresiei genelor: transcrierea (sinteza ARN-ului) i procesarea ARN-ului. Doar stadiul final al expresiei genelor traducerea (sinteza proteinelor) are loc n citoplasm.

STRUCTURA NUCLEULUI
n interfaz, nucleul are trei componente principale: Membrana nuclear; Nucleoplasma (cu cromatina i fluidul sau matricea nuclear) Nucleolul.
Imagine de microscopie electronic structura nucleului.

MEMBRANA NUCLEAR
Membrana nuclear (nveliul nuclear) const din dou membrane intern i extern fuzionate la nivelul porilor nucleari, prin are loc transportul de substane ntre nucleu i citosol. Particulariti: membrana extern are ribozomi ataai i se continu cu membrana RE rugos; spaiul intermembranar se continu cu lumenul RE; straturile duble lipidice ale membranelor intern i extern se continu unul cu cellalt la nivelul porilor nucleari; reea de filamente intermediare pe faa intern lamina nuclear

LAMINA NUCLEAR

Filamentele intermediare confer suport mecanic pentru nveliul nuclear; cele nucleare formeaz o structur de susinere ancorat pe faa intern a membranei nucleare lamina nuclear.

LAMINA NUCLEAR

Fosforilarea laminelor declaneaz dezasamblarea laminei nucleare (la nceputul mitozei) ceea ce duce la fragmentarea membranei nucleare sub form de vezicule. Defosforilarea laminelor duce la reasamblarea membranei nucleare.

PORII NUCLEARI Complexele porilor nucleari sunt canale prin care moleculele polare mici, ionii i macromoleculele sunt transportate ntre nucleu i citoplasm. o structur extrem de mare i complex de 30 ori mrimea unui ribozom. Moleculele mici traverseaz liber difuziune prin por. Macromoleculele sunt transportate printr-un mecanism selectiv, cu consum de energie, prin care: se import proteinele din citoplasm, i se export molecule de ARN din nucleu.

Complexul porului este un ansamblu de opt subuniti anulare ancorate n membran i conectate la dou inele proteice unul pe faa citoplasmatic i unul pe faa nuclear. De inelele porului sunt ataate filamente proteice pe faa nuclear formeaz o structur distinct asemntoare unui co.

Transportul macromoleculelor prin por: Ambidirecional pn la 500 macromolecule/sec Selectiv i, pentru un anumit tip de substan ntr-un singur sens import sau export Importul este mediat de semnale de localizare nuclear (NLS = Nuclear Localization Sequence), Exportul este mediat de semnale nucleare de export (NES = Nuclear Export Signal)

NUCLEOPLASMA
Nucleoplasma conine cromatina i matricea nuclear Cromatina se prezint sub dou aspecte: Heterocromatina cromatina condensat arii intens colorate, adesea asociate cu membrana nuclear Eucromatina, mai dispersat, palid colorat cromatina activ metabolic (implicat n sinteza de ARN).

 Celulele conin dou tipuri de heterocromatin: Heterocromatina constitutiv nu este transcris niciodat Heterocromatina facultativ nu este transcris n celula examinat, dar poate fi transcris n alte celule Exemplu de heterocromatin facultativ cromatina sexual: La sexul feminin doi cromozomi X, unul este inactivat (heterocromatinizat) caracteristici morfologice specifice La sexul masculin un singur cromozom X (pereche cu Y) este dispersat, nu se observ cromatin sexual. Studiul cromatinei sexuale util in diagnosticarea sexului genetic la pacienii cu ambiguitate genital sindromul Klinefelter - XXY

CROMATINA Cromatina este un complex de ADN i proteine nucleoprotein reprezint forma desfurat a cromozomilor. Fiecare cromozom este o singur molecul de ADN lung liniar, asociat cu proteine care mpacheteaz firul subire de ADN ntr-o structur mai compact. Proteinele care se leag pe ADN pentru a forma cromozomii la eucariote, sunt de dou tipuri: histonele cantiti mari masa lor este egal cu a ADN-ului proteine nehistonice.

ORGANIZAREA MOLECULAR A CROMATINEI Majoritatea cromatinei se gsete sub forma unei fibre cu diametrul de 30 nm. Dac aceasta este desfurat apare un aspect de irag de mrgele: firul este reprezentat de ADN mrgelele particula miez a nucleozomului ADN nfurat pe histone. Nucleozomii reprezint primul nivel de mpachetare a ADNului.

Nucleozomul const din: dou tururi complete ale ADN-ului n jurul miezului proteic, plus ADN-ul linker adiacent. Miezul histonic octamer format din cte dou histone H2A, H2B, H3, i H4 Histona H1 se leag de ADN-ul linker i stabilizeaz urmtorul nivel de mpachetare solenoidul (fibra de 30 nm).

CROMOZOMII Cu excepia gameilor, fiecare celul uman conine dou copii ale fiecrui cromozom una motenit de la mam i una de la tat. Cromozomii materni i paterni dintr-o pereche se numesc cromozomi omologi. Singura pereche cu cromozomi neomologi este perechea cromozomilor sexuali la sexul masculin X motenit de la mam i Y de la tat.

cromozomi omologi

cromozomii sexuali la brbat neomologi

Fiecare celul uman conine 46 de cromozomi: 22 de perechi comune ambelor sexe (autozomi), plus perechea cromozomilor sexuali (XX sau XY)

Cei 46 de cromozomi umani, vizualizai n mitoz alctuiesc CARIOTIPUL

NUCLEOLUL
Nucleolul este cea mai proeminent structur observat n nucleul celulelor eucariote observate la MO. Reprezint locaia biogenezei ribozomilor procesarea ARNr i asamblarea cu proteine. Nu este delimitat de membran, ci este un agregat de macromolecule n principal ARN i proteine. Mrimea nucleolului reflect numrul de ribozomi produi variaz larg n diferite tipuri de celule, chiar n aceeai celul n momente diferite. n celulele foarte active (procese de sintez proteic) ocup ~ 25% din volumul nuclear.

Morfologic, se descriu trei regiuni distincte: Centrul fibrilar (const din cteva bucle de ADN ce conin genele ARNr) Componenta fibrilar dens (sinteza i procesarea pre-ARNr), i Componenta granular (subuniti pre-ribozomale complete).

10

Schema sintezei de ARNr i asamblrii ribozomilor Nucleolul conine: genele pentru ARNr, precursori ARNr, ARNr matur, enzime implicate n procesarea ARNr, proteine ribozomale (importate) i subuniti ribozomale parial asamblate.

FUNCIILE NUCLEULUI
n celulele cretere sau care sufer difereniere, nucleul este activ metabolic. Procesele care au loc sunt n nucleu: Replicarea ADN-ului (sinteza unei copii a ntregului ADN) Transcrierea ADN-ului sinteza i procesarea ARNr, ARNt i ARNm. Transcrierea genelor ce codific proteine ARNm care este apoi tradus n proteine, n citoplasm.

11

 Replicarea ADN-ului const n crearea unei copii a ntregii informaii genetice a celulei. Asigur transmiterea informaiei genetice la descendeni (celulele fiice) n timpul diviziunii celulare.

12

 Deoarece cele dou catene de ADN sunt antiparalele: o caten nou este sintetizat continuu catena cornductoare; cealalt este sintetizat prin alipirea a mici fragmente de ADN (fragmente Okazaki) sintetizate n sensul opus direciei de replicare catena ntrziat. Cauza particularitate a ADN-polimerazei

Catenele parentale de ADN sunt separate de o alt enzim, numit helicaz i servesc ca matri pentru sinteza a dou noi catene complementare la nivelul furculiei de replicare. Polimerizarea rolul ADN-polimerazei sintetizeaz ADN numai n direcia 5-3 prin ataarea de dNTP (dezoxiribonucleotide trifosfat) pe o caten primer preformat din ARN.

13

 Transcrierea ADN-ului este prima etap a procesului prin care celula exprim informaia genetic. Transcrierea reprezint sinteza de ARN ADN-ul din genom nu determin direct sinteza proteinelor, ci folosete ca intermediar o molecul de ARN ARN mesager. n alte cazuri produsul final al expresiei genelor nu este o protein, ci chiar ARN ARNt i ARNr.

Celulele eucariote conin trei ARN-polimeraze nucleare care transcriu genele pentru: ARNm polimeraza II (n nucleu), ARNr polimeraza I (n nucleol) i III (molecula 5S n nucleu) ARNt polimeraza III (n nucleu). ARN polimerazele la eucariote nu se leag direct pe ADN necesit proteine numite factori de transcriere, pentru iniierea transcrierii. Factorii de transcriere se leag de o regiune a genei numit promotor apoi recruteaz ARN polimeraza pe promotor pentru iniierea transcrierii.

14

 Procesarea ARN-ului mesager

La eucariote, n timpul elongrii catenei de ARNm, aceasta sufer trei tipuri de procesare: nlturarea intronilor cel mai important; Adugarea unui cap 5 i a cozii poli-A n regiunea 3.

RECAPITULARE:
Procesele care se desfoar n nucleu sunt replicarea i traducerea. (Adevrat/Fals) R: Fals replicarea i transcrierea Numii componentele nucleului. R: Membrana nuclear, nucleoplasma i nucleolul Lamina nuclear este o reea de filamente intermediare pe faa extern a membranei. (Adevrat/Fals) R: Fals pe faa intern Numii elementele structurale ale nveliului nuclear. R: membrana extern, membrana intern, pori nucleari, lamina nuclear

15

Prin porii nucleari se importa n nucleu proteine i se export ARN. (Adevrat/Fals) R: Adevrat Transportul moleculelor mici prin porii nucleari se face cu consum de energie. (Adevrat/Fals) R: Fals difuziune pasiv Numii tipuri de cromatin. R: eucromatina, heterocromatina constitutiv i facultativ Cromatina conine ADN i proteine, iar cromozomii doar ADN. (Adevrat/Fals) R: Fals i cromatina i cromozomii conin aceeai nucleoprotein (ADN + proteine) difer gradul de condensare

Cum se numesc proteinele pe care se nfoar molecula de ADN? R: histone

Forma cea mai slab condensata (mpachetat) a cromatinei este reprezentat de nucleozom. (Adevrat/Fals) R: Adevrat Funcia nucleolului este sinteza subunitilor ribozomale. (Adevrat/Fals) R: Adevrat Care este enzima care sintetizeaz ADN? R: ADN-polimeraza Care este enzima care sintetizeaz ARN mesager? R: ARN-polimeraza II

16